紫外-可见分光光度法测定有色溶液 (2)

紫外-可见分光光度法测有色溶液最大吸收波波长

一、实验目的

1.学习紫外-可见分光光度法的原理；

2.掌握紫外-可见分光光度法测定的实验技术；

3.了解掌握U-3010型紫外-可见分光光度仪的构造及使用方法。

二、实验原理

1.紫外-可见吸收光谱法(称紫外-可见分光光度法)以溶液中物质的分子或离

子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析法。根据最大吸收波长可做定性分析；根据朗伯-比尔定律（标准曲线法和标准加入法）可做定量分析。紫外-可见分光光度法定性分析原理：根据吸收曲线中吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状进行定性分析。

2.紫外-可见分光光度法定量分析原理，根据朗伯－比耳定律：A=εbc，当入

射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。

3.仪器由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示记录装

置。

三、仪器与试剂

日立U-3010型紫外-可见分光光度仪；吸量管；乙醇；待测溶液；烧杯等。

四、实验步骤

1.接通电源，启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器，预

热半小时。

2.在工作接口上选择测量项目为光谱扫描，设置扫描参数（起点：650nm，终

点：250nm，速度：中，间隔：1.0nm，单次扫描）

3.将两个均装有无水乙醇的1cm石英比色皿放入测量池中，进行基线扫描。

4.基线做好后，按下面的顺序进行操作：做Baseline→换样（换上待测样品置

于Sample池）→进入Analysis Method对相关的参数进行设定→Sample命名→Ready→Measure进行测量，寻找待测溶液的最大吸收波长，再在最大吸收波长处分别测定待测溶液的吸光度。

五、数据记录与处理

下面是几种待测溶液的A-λ图，图1的最大吸收波长为258nm。图2为几种不同浓度的待测溶液叠加一起的A-λ图。

六、实验注意事项

1.在使用比色皿时不可接触光面，应拿毛玻璃面。

2.装入比色皿的液面不能超过比色皿体积的三分之二，每一次进行测量之前，

都要将比色皿周围用滤纸吸干。

3.测量前两个比色皿都要装空白溶液置于盛放池中作基线。

4.实验结束后，要先关软件系统，再关电脑，拔掉电源，关好水电门窗然后离

开。