分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子

简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。

Section C 核酸的性质

1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些？

A 发生在闭环双链DNA分子上

B DNA双链轴线高卷曲，与简单的环状相比，连接数发生变化

C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时，DNA变得紧绷，为正超螺旋，反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的，因为能量最低。

2.简述核酸的性质。

A 核酸的稳定性：由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定

B 酸效应：在强酸和高温条件下，核酸完全水解，而在稀酸条件下，DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸

C 碱效应：当PH超出生理范围时（7-8），碱基的互变异构态发生变化

D 化学变性：一些化学物质如尿素，甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的

而使核酸变性。

E 粘性：DNA的粘性是由其形态决定的，DNA分子细长，称为高轴比，可被机械力和超声波剪切而粘性下降。

F 浮力密度：1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析

G 紫外线吸收：核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收

H 减色性，热变性，复性。

思考题：提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质？

质粒是抗性基因，，在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。

Sectio C 课前提问

1.在1.5mL的离心管中有500μL，取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测，测得A260=0.15。

问（1）：试管中的DNA浓度是多少？

问（2）：如果测得A280=0.078, .A260/A280=？说明什么问题？

(1)稀释前的浓度：0.15/20=0.0075

稀释后的浓度：0.0075/100=0.75ug/ml

（2）0.15/0.078=1.92〉1.8，说明DNA中混有RNA样品。

2.解释以下两幅图

（native:非变性的；denatured:变性的）图一表示dsDNA和RNA的热变性，中间的Tm值表示解链温度。随着温度的升高,DNA和RNA逐渐变性形成单链，因此光吸收率逐渐增大，然而随着温度的升高RNA中双链部分的碱基堆积逐渐减少，其光吸收率不规则地增大。较短的碱基配对区域具有更高的热力学活性，比较长的区域变性快。图二表示的是快速慢速降温下的DNA复性，在温度缓慢下降时，DNA可以经碱基配对逐渐形成双链，但在快速降温时，DNA只形成局部区域的dsDNA，经碱基配对或者在DNA内部或者DNA之间短的互补区域的退火而形成，因此A260的下降很小。

Sectio E 提问

大肠杆菌的DNA聚合酶主要有哪几种？它们有哪些特点？

DNA聚合酶I：切除引物，修复

DNA聚合酶II：修复

DNA聚合酶III：复制

Section E DNA复制

1.细胞周期(The cell cycle)

（1）什么是细胞周期？

细胞周期包括DNA复制后的细胞分裂，即从一个母细胞产生两个子细胞。（2）细胞分裂是有序的还是无序的？为什么？

细胞周期是一个有序的过程，受细胞周期机制的控制。

2.检验点及其调控(Checkpoints and their regulation)

（1）细胞如何从G0进入G1？

G0期是指非增殖的休眠状态，称为沉默期。G1期有一限制点（R点）细胞会对环境进行评估，然后决定是否进入另一个分裂周期。细胞在到达R点之前具有胞外生长分子-促细胞分裂原即可使细胞从G0进入G1期。

（2）限制点（R点）

G1期，细胞会对环境进行评估，然后决定是否进入另一个分裂周期，G1期的

这一点称为限制点。

Section F DNA损伤、修复与重组

思考题

（1）5’-GTATCTTCTGATGGCTCGTGTACAAACACG-3’

3’-CATAGAAGACTACCGAGCACATGXXXGTGC-5’

根据Holliday 模型在什么时候可以被修复？

该损伤的DNA链“XXX”部分本为“TTT”，修复时与另一个正常的DNA 分子同源重组，“XXX”段将通过重组被正常的姐妹链上相应区域的“TTT”替代修复，而正常链上因此产生的缺口会被个填平。因为它的对面没有损伤，可通过正常的切除去掉，这样子就修复了。

（2）设计实验以区别细菌遗传转化转移中的转化、转导和结合的过程。下面列出可使用的工具：（1）合适的突变菌株及其培养基。（2）DNA酶。（3）两种滤板，一种滤板能让游离的DNA通过，不可让细菌和病毒通过；另一种滤板只能持留细菌。（4）一种是插入滤板使其分隔成两个空间的玻璃容器（如U型管）。请写出实验设计并预期3种遗传转移过程的结果。

Section K

ω亚基：ω亚基的功能尚不清楚,也有人认为ω亚基对于RNA聚合酶的结构和功能没有太大的影响。问题：

（1）什么是启动子？上游？下游？转录起点？

启动子：RNA聚合酶结合到待转录序列上游的特定起始位点，长约40bp

转录起始点：CGT/CAT,G比A更常见，被称为+1位点。

（2）原核生物δ70 启动子有哪些特点？

大肠杆菌最常见的δ因子，由40-60bp的序列组成。，含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列。转录起始位点为+1位点，CGT/CAT，-10序列为TATAAT,也叫pribnow框，-35序列为TTGACA，也叫sextama框。

（3）原核生物的转录是如何终止的？

基因3’端自身互补的序列会在RNA中形成发夹结构作为终止子。发夹的茎部通常（G/C）含量较高，使其稳定性强，从而使聚合酶从此停顿。发夹之后通常是4个或更多的U碱基，导致RNA与反义DNA的弱结合。有利于RNA链解离，从而终止转录。

分析题

以下是一段原核生物的DNA序列，请找出以下功能位点，并说明理由：

(1) 一个启动子；（2）一个转录起始位点；（3）一个转录起始密码子；（4）一个转录终止密码子；（5）一个转录终止子。GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACA AGGGGCTCCTATAAT AGGTGCAT TTGT AGGAGGT GTGGCCAC ATG ATA GCG （-35序列）（-10序列）启动子/+1起始位点（SD 序列）（起始密码子）

+1 CGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGCATGCTGCAG CGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAGAATATCA AATAGCCATCCACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTAC