分子生物学问题汇总

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分子生物学简答题全

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简答题1.为什么利用RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底。

答:RNAi是外源或内源性的双链RNA 进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后,在Dicer作用下,分解为21-22bp的SiRNA.SiRNA结合相关酶,形成RNA介导的沉默复合物RISC.RISC在ATP作用下,将双链SiRNA变成单链SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合,导致其断裂,进而导致其彻底降解。

反义RNA是与靶mRNA互补的RNA,它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达,反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以,mRNA不一定完全被抑制。

2.简述真核基因表达的调控机制。

答:(1)DNA和染色质结构对转录的调控:①DNA甲基化,②组蛋白对基因表达的抑制,③染色质结构对基因表达的调控作用,④基因重排,⑤染色质的丢失,⑥基因扩增;(2)转录起始调控:①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节),②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控;(3)转录后调控:①5’端加帽和3’端多核苷酸化调控,②选择剪接调控,③mRNA运输调控,④mRNA稳定性调控;(4)翻译起始的调控:①阻遏蛋白的调控,②对翻译因子的调控,③对AUG的调控,④mRNA 5’端非编码区的调控,⑤小分子RNA;(5)翻译后加工调控:①新生肽链的水解,②肽链中氨基酸的共价修饰,③信号肽调控。

3.简述mRNA加工过程。

答:(1)5′端加帽(由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸,形成帽子结构m7GpppmNP-)。

(2)3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白的成熟mRNA无需加polyA尾;B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列;C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助)。

(3)mRNA前体的剪接(剪接加工以除去内含子序列,并将外显子序列连接成为成熟的有功能的mRNA分子。

分子生物学习题库与参考答案

分子生物学习题库与参考答案

分子生物学习题库与参考答案一、单选题(共49题,每题1分,共49分)1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案:D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案:B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案:D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案:B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案:A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案:A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案:B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案:B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案:A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案:A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案:B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案:B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案:C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案:B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案:B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案:D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案:C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案:D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案:C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案:C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案:C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案:B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案:B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案:D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案:C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案:A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案:C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案:C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案:D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案:D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案:C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案:C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案:C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案:A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案:C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案:B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案:B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案:B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案:D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案:C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案:D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案:D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案:A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案:B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案:A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案:D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案:C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案:D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案:B二、多选题(共35题,每题1分,共35分)1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案:BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案:G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案:BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案:EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案:B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案:G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案:AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案:G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案:G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案:B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案:G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案:CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案:B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案:ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案:G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案:G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案:D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案:AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案:BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案:G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案:G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案:F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案:C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案:CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案:G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案:B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案:E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案:D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案:ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案:ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案:AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案:F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案:CG三、判断题(共38题,每题1分,共38分)1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。

分子生物学问题汇总

分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。

Section C 核酸的性质1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些?A 发生在闭环双链DNA分子上B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。

自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。

2.简述核酸的性质。

A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的而使核酸变性。

E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。

F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收H 减色性,热变性,复性。

思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质?质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。

Sectio C 课前提问1.在 1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。

问(1):试管中的DNA浓度是多少?问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题?(1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml(2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。

2.解释以下两幅图(native:非变性的;denatured:变性的)图一表示dsDNA和RNA的热变性,中间的Tm值表示解链温度。

分子生物学问答题

分子生物学问答题

1.何为增强子?减数增强子增强转录的特点?答:增强子:远距离调节启动子以增强子转录速率的DNA序列,其增强作用与序列的方向无关,与其在基因上下游位置无关,强烈的细胞类型依赖性。

特点:1.具有远距离效应;常在上游-200bp处,即使相距几十kb也能发挥作用;2.无方向性;无论在基因上游,下游或内部都可发挥增强作用;3.顺式调节;只调节处于同一染色体上的靶基因,对其他染色体的基因无作用;4,无物种和基因特异;对同源或异源基因都有效;5,具有组织特异性;在不同的组织细胞中,相同的增强子可以呈现不同作用强度;6有相位性;增强子的活性与其在DNA双链结构中的空间方向性有关;7,有得增强子含有许多可与转录因子结合的基序,可以不同的组合方式调控基因表达,它们是基因差别表达的主要原因。

2.何为弱化作用?以trp操纵子为例子说明转录弱化作用的基本特点答:弱化作用:RNApd在DNA模板的前导肽编码序列处停顿,依赖于转录和翻译的紧密偶联,使翻译可以在mRNA边转录边进行。

trp操纵子启动子下游有一段140bp的引导序列,终止信号位子100--140bp之间,可形成发夹结构,但取决于RNA pol与茎环之间的相对位置,引导序列50-60bp有两个trp密码子,当细胞中,trp水平较低时,核糖体会在这里停留,拉开与RNA pol之间的距离,阻止终止信号形成发夹结构,转录正常;当细胞中足够多的trp存在时,核糖体紧跟RNA pol,在转录达迈140bp位置时,终止信号形成发夹结构,pol脱离模板,转录停止。

3.DNA损伤修复类型有什么?1直接修复:E coli细胞中有光修复系统,可见光能激活细胞中的光复活酶,分解因紫外线照射而产生的胸腺嘧啶二聚体。

2.烷基转移酶:直接从突变的O6-烷基鸟嘌呤上去除烷基转移到自身,该蛋白失活。

3.切除修复:通过切除损伤部位,剩下的空隙由DNA-pol I催化dNTP聚合而填补,最后由DNA连接酶结合裂隙。

分子生物学专题训练(含答案)

分子生物学专题训练(含答案)

分子生物学专题训练(含答案)分子生物学是研究生物体内分子结构、组成和功能的学科。

以下是一些分子生物学的专题训练题目及其答案。

1. DNA复制问题:DNA复制是指什么?在细胞中是如何进行的?答案:DNA复制是指在细胞分裂过程中,将一个DNA分子复制成两个完全相同的DNA分子的过程。

在细胞中,DNA复制通过酶的作用,在DNA双链上建立一个新的互补链,生成两个完全相同的DNA分子。

2. 基因转录问题:基因转录是什么过程?主要酶有哪些?简要描述转录的过程。

答案:基因转录是指将DNA中的基因信息转录成mRNA的过程。

主要酶有RNA聚合酶和辅助因子。

转录的过程分为三个阶段:起始、延伸和终止。

起始阶段是RNA聚合酶与DNA结合,形成转录起始复合物;延伸阶段是RNA聚合酶沿DNA模板链合成mRNA链;终止阶段是mRNA链与RNA聚合酶和DNA分离,形成终止转录复合物。

3. 翻译过程问题:翻译是指什么过程?主要的遗传密码是什么?简要描述翻译的过程。

答案:翻译是指将mRNA中的核酸序列转译成蛋白质的过程。

主要的遗传密码是以三个核苷酸为一个密码子,共有64种可能的密码子,编码了20种氨基酸和一个终止信号。

翻译的过程分为起始、延伸和终止三个阶段。

起始阶段是在起始密码子AUG的指导下,启动翻译过程;延伸阶段是tRNA带着相应的氨基酸与mRNA上的密码子互补配对,合成蛋白质链;终止阶段是遇到终止密码子时,翻译终止,释放蛋白质。

4. DNA重组问题:DNA重组是指什么过程?主要的DNA重组方式有哪些?简要描述DNA重组的过程。

答案:DNA重组是指在细胞中不同DNA分子之间交换DNA片段的过程。

主要的DNA重组方式有两个:同源重组和非同源重组。

同源重组是指两个同源染色体或同一个染色体上的两个同源DNA片段之间的重组;非同源重组是指不同染色体或同一染色体上的非同源DNA片段之间的重组。

DNA重组的过程包括DNA切割、DNA片段交换和DNA连接三个步骤。

分子生物学1000题绝对经典

分子生物学1000题绝对经典

〔绝对经典强烈推荐〕分子生物学1000题!分子生物学试题1. 证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。

这两个实验中主要的论点证据是:( ) ---(选择题)2. 1953年Watson和Crick提出:(DNA双螺旋结构模型 ) ---(选择题)3. 双链DNA中的碱基对有:( ) ---(选择题)4. DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。

以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述:( ) ---(选择题)5. DNA的变性:( ) ---(选择题)6. 在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成:( ) ---(选择题)7. DNA分子中的超螺旋:( ) ---(选择题)8. DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)? (7 ) ---(选择题)9. DNA在30nm纤丝中压缩多少倍?(42 ) ---(选择题)10. DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?( 8400) ---(选择题)11. DNA在中期染色体中压缩多少倍?( ) ---(选择题)12. 组蛋白的净电荷是:( ) ---(选择题)13. 核小体的电性是:( ) ---(选择题)14. 当新的核小体在体外形成时,会出现以下哪些过程?( ) ---(选择题)15. 1953年Watson和Crick提出:( ) (e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 ---(选择题)16. 当一个基因具有活性时:( ) ---(问答题)17. 在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性,这一过程可看作是一个复性(退火)反应. ---(判断题)18. 在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。

发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹,呈十字结构。

---(判断题)19. B型双螺旋是DNA的普遍构型,而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。

精编分子生物学实验的常见问题与解决方案资料

精编分子生物学实验的常见问题与解决方案资料

分子生物学实验的常见问题与解决方案-1一、Southern杂交问题1:电泳后发现凝胶中DNA扩散,导致结果难以确定,如何解决这一问题?解决方案:(1)在操作上:电泳时隔孔上样,电泳后要对凝胶及时处理使凝胶干燥;(2)琼脂糖的质量应该较好,尤其是不应含有内切酶,否则有时将使低拷贝数基因的杂交结果难以解释。

问题2:传统方法中转膜不完全的问题如何克服?解决方案:经典的向上转移法会使凝胶短时间内变薄,此时即使延长转移时间至24小时以上,也不能使大分子DNA良好地转移出去,因此,转膜不完全。

向下转膜法由于不需在吸水纸上增加重量,凝胶基本不变形;加之吸水纸的吸力与水受到的重力方向一致,故可以良好地完成DNA的转移,它不需要特殊的仪器,转移速度较快,转移效率高。

利用地高辛标记探针进行 Southern 杂交时,对于大于15kb的 DNA片断,转膜之前用盐酸进行脱嘌呤可以促进转膜效率, 但脱嘌呤过度可导致分子量相对较小的 DNA 被打断成过小的片段而难以和尼龙膜结合。

如果实验转膜过程中同时含有大于 15kb的DNA(通常为基因组)和小片段DNA(通常是基因组酶切产物),那么在转移的过程中倾斜容器,仅使凝胶上半部分浸泡于盐酸,这样既可以提高大片断 DNA 的转移效率,又不会打碎小片段DNA。

另外,等采用琼指糖凝胶直接杂交的方法,来解决这一难题:以转基因鼠的检测为例,实验步骤如下:1.转基因鼠的建立:以鼠乳清酸蛋白(WAP)基因5’调控区指导人G-CSF基因为构件,建立转基因小鼠。

转基因小鼠的检测采用剪取鼠尾DNA做Southern进行鉴定。

2.琼脂糖凝胶直接杂交:(l)用BanHI(150U)对由假孕鼠产生的仔鼠剪尾提取基因组DNA10μg酶切过液,取少量电泳检查酶切完全后,上样电泳8小时,(2)将电泳槽板连同凝胶置50℃放置3小时,用镊子轻轻揭起凝胶,放于变性液(0.5MNaOH,0.5MNaCl)20分钟,转置中和液(0.5MTrisHCl,0.15MNaCl)20分钟,将胶放于玻璃板上沥干液体,室温放置30分钟。

分子生物学问答题

分子生物学问答题
15、什么是RNA编辑?其生物意义是什么?
答:RNA编辑是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息的改变,因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。(介导RNA编辑的机制有两种:位点特异性脱氨基作用和引导RNA指导的尿嘧啶插入或删除)
答:pribnow box是原核生物中中央大约位于转录起始位点上游10bp处的TATA区,所以又称作-10区。它的保守序列是TATAAT。
13、简述mRNA常以多顺反子的形式存在。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在;2,原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作;3,原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时。真核生物mRNA的半寿期较长,如胚胎中的mRNA可达数日;4,原核与真核生物mRNA的结构特点也不同,原核生物的mRNA的5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短的poly A结构。
分子生物学问答题
1、请定义DNA重组技术和基因工程技术
答:DNA重组技术:目的是将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。基因工程技术:是除了包含DNA重组技术外还包括其他可能是生物细胞基因结构得到改造的体系,基因工程是指技术重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
答:1,DNA的一级结构,就是指4种核苷酸的连接及排列顺序,表示了该DNA分子的化学成分;2,DNA的二级结构是指两条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构;3,DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。

分子生物学问答题

分子生物学问答题

1.什么是转座 ?转座因子在一个DNA分子内部或者两个DNA之间不同位置间的移动。

2.病毒基因组有哪些特点 ?答:不同病毒基因组大小相差较大;不同病毒基因组可以是不同结构的核酸;除逆转录病毒外,为单倍体基因组;病毒基因组有的是连续的,有的分节段;有的基因有内含子;病毒基因组大部分为编码序列;功能相关基因转录为多顺反子 mRNAt基因重叠现象。

3.原核生物基因组有哪些特点?答:基因组由一条环状双链DNA fi 成;只有一个复制起始点;大多数结构基因组成操纵子结构;结构基因无重叠现象;无内含子,转录后不需要剪接;基因组中编码区大于非编码区;重复基因少,结构基因一般为单拷贝;有编码同工酶的等基因;基因组中存在可移动的DNA序列;非编码区主要是调控序列。

4.真核生物基因组有哪些特点?答:每一种真核生物都有一定的染色体数目;远大于原核基因组,结构复杂,基因数庞大;真核生物基因转录为单顺反子;有大量重复序列;真核基因为断裂基因;非编码序列多于编码序列;功能相关基因构成各种基因家族。

5.基因重叠有什么意义?答:利用有限的核酸储存更多的遗传信息,提高自身在进化过程中的适应能力。

6.质粒有哪些特性?答:在宿主细胞内可自主复制;细胞分裂时恒定地传给子代;所携带的遗传信息能赋予宿主特定的遗传性状;质粒可以转移。

7.什么是顺式作用元件?答:基因中能影响基因表达,但不编码 RNA 和蛋白质的DNA序列。

顺式作用元件主要包括启动子、增强子、负调控元件等。

8.简述原核基因表达的特点。

答:⑴只有一种RNA聚合酶。

⑵原核生物的基因表达以操纵子为基本单位。

(3) 转录和翻译是偶联进行的。

(4)mR NA翻译起始部位有特殊的碱基序列-SD序列。

(5)原核生物基因表达的调控主要在转录水平,即对RNA合成的调控。

9.简述c因子在原核基因表达调控中的意义。

答:(1)6因子含有识别启动区的结构域调控 RNA聚合酶与.DNA吉合,确保RNA聚合酶与特异启动区而不是其他位点的稳定结合(2)6因子使得RNA聚合酶选择一套特定启动区起始转录。

分子生物学习题及问题详解

分子生物学习题及问题详解

核酸一、填空题1. 碱基互变异构是指碱基的酮式与烯醇式或氨基式与亚氨基式异构体发生互变的现象,如果这种现象在DNA 复制的时候发生,如此可以导致碱基错配。

然而,在生理pH 下,碱基主要以酮式或氨基式形式存在。

2.DNA 双螺旋中只存在 2 种不同碱基对。

A 总是与_T___配对,G 总是与 C 配对,此规如此称为Chargaff 法如此。

但在RNA 双螺旋中,还含有第三种碱基配对,它是GU 。

3.X 线衍射证明,核苷中碱基与核糖环平面相互垂直。

4.一个双链RNA 分子与一个双链DNA 分子的差异有分别含U 与T 、核糖与脱氧核糖和A 型与 B 型双螺旋。

5.核酸在260 nm 附近有强吸收,这是由于碱基环上的共轭双键。

6.给动物食用3H 标记的胸苷,可使DNA 带有放射性,而RNA 不带放射性。

如果要让RNA 带有放射性,应该给动物食用3H 标记的尿苷。

7.Tm 是指DNA 热变性时候的熔链温度,双链DNA 中假设GC 含量多,如此其Tm 值高。

DNA 样品的均一性愈高,其熔解过程的温度X围愈窄。

DNA 所处溶液的离子强度越低,其熔解过程的温度X围越宽,熔解温度越低,所以DNA 应保存在较高浓度的盐溶液中。

8.双链DNA 热变性曲线通常呈S 形,这种曲线说明DNA 的变性具有协同效应;在DNA 发生热变性后,在pH 2以下,或pH 12 以上时,其A260 增加,同样条件下,单链DNA 的A260 不变。

9.核酸分子中的糖苷键均为β-N-糖苷键型,但假尿苷中的糖苷键为β-C-糖苷键。

核苷酸之间通过3,5-磷酸二酯键连接形成多聚物。

10. 细胞内总含有T 的RNA 是tRNA ,它是通过U 的后加工形成的。

11. DNA 双螺旋的构型可以有三种,它们分别为 B 型,A 型,Z 型。

B-DNA 的螺距为3.4 nm,每圈螺旋的碱基对数为10 ,细胞里的B-DNA 每圈螺旋的实际碱基对数为10.4 。

分子生物学问答题

分子生物学问答题

分子生物学问答题1、什么是端粒?端粒的结构?端粒的主要功能是什么?端粒是如何合成?端粒是一种短串联重复序列,人端粒新生链(后随链)重复单位是CCCTAA,模板链重复单位是TTAGGG。

复制后端粒的后随链模板长出,所以形成3’端突出结构。

其主要功能是:①保护染色体完整性。

②细胞分裂计时器。

③端粒的长度反应端粒酶活性。

端粒合成分为三步:①端粒酶结合于端粒后随链模板的3’端,以端粒酶RNA为模板,催化合成端粒后随链模板的一个重复单位。

②端粒酶前移一个重复单位。

③重复合成、前移。

端粒合成到一定长度之后,端粒酶脱离,端粒后随链模板末端可能回折,引导合成新生链填补短缺,由DNA聚合酶催化。

2、单基因遗传病有哪些类型?DNA损伤的类型有哪些?细胞内DNA修复的类型有哪些?详细阐述大肠杆菌中的核苷酸切除修复机制的修复过程?单基因遗传病一共分为五类。

①常染色体显性遗传病②常染色体隐性遗传病③X连锁显性遗传病④X连锁隐形遗传病⑤Y连锁遗传病DNA损伤类型一共分为六种。

①错配②插入与缺失③重排④共价交联⑤碱基丢失⑥主链断裂DNA修复从大类上分为五种:(1)错配修复(2)直接修复(3)切除修复(4)重组修复(5)易错修复切除修复又分为:①核苷酸切除修复②碱基切除修复大肠杆菌核苷酸切除修复机制:① UvrA2B2扫描损伤位点,UvrA脱离,UvrB募集UvrC水解损伤位点两侧特定的磷酸二酯键,形成两个切口。

② UvrD(MutU,又称DNA解旋酶Ⅱ)协助释放损伤片段,形成缺口。

③ DNA聚合酶Ⅰ以互补链为模板,催化合成DNA片段,填补缺口,由DNA连接酶连接切口。

分子生物学简答题汇总

分子生物学简答题汇总

分子生物学简答题汇总1. DNA和RNA的区别是什么?DNA和RNA是两种不同的核酸分子,它们在结构和功能上存在一些显著的区别。

- 结构:DNA是由脱氧核糖与磷酸酯键连接而成,包含四种碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳗糖胺)。

RNA也是由核糖与磷酸酯键连接而成,但是它只包含三种碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和尿嘧啶)。

- 功能:DNA是负责存储和传递遗传信息的分子,它存在于细胞核中。

RNA在基因表达过程中起着重要的作用,包括转录DNA 成为mRNA(信使RNA)、将mRNA翻译成蛋白质等。

2. DNA复制的过程是怎样的?DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA分子通过复制产生两个完全相同的拷贝分子的过程。

该过程包括以下步骤:- 解旋:DNA双链被酶解缠绕,形成两条单链模板。

- 复制起点的识别:DNA复制起始位点被复制启动子识别并结合。

- 克隆合成:DNA聚合酶沿着模板链在5'到3'的方向上合成新的互补链。

这个过程是半连续的,其中一个链是连续合成的(主链),另一个链是不连续合成的(Okazaki片段)。

- 连接:Okazaki片段与主链被DNA连接酶连接在一起,形成连续的双链DNA。

- 非编码链复制:复制过程还涉及到非编码链的复制,它也以3'到5'方向进行。

3. RNA转录的过程是怎样的?RNA转录是指在细胞中通过DNA模板合成RNA的过程,它是基因表达的第一步。

该过程包括以下步骤:- 解旋:DNA双链解开,形成开放的转录起始区域。

- 初始化:RNA聚合酶结合到DNA上的启动子区域,开始合成RNA。

- 延伸:RNA聚合酶沿着DNA模板链的3'到5'方向移动,合成RNA。

RNA的合成序列与DNA的编码链相对应,但U代替了T成对于A。

- 终止:RNA聚合酶到达终止信号,RNA链与DNA模板分离,产生完成的RNA分子。

4. DNA和RNA有哪些主要功能?DNA和RNA在细胞中具有不同的功能。

分子生物学简答题汇总

分子生物学简答题汇总

分子生物学简答题汇总
本文档汇总了一些分子生物学的简答题,旨在帮助读者更好地理解和复分子生物学的基础知识。

以下是一些常见的问题及其简洁的答案:
1. DNA是什么?DNA是什么?
DNA(脱氧核糖核酸)是一种双链螺旋结构的分子,它携带了细胞内遗传信息的蓝图。

2. DNA的组成单位是什么?DNA的组成单位是什么?
DNA的组成单位是核苷酸,每个核苷酸由一个磷酸、一个脱氧核糖和一个氮碱基组成。

3. DNA复制是什么过程?DNA复制是什么过程?
DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA双链被解开,然后通过配对规则合成两个全新的DNA分子的过程。

4. 什么是基因?什么是基因?
基因是DNA上的一段特定序列,它携带了编码特定蛋白质的信息。

5. 什么是转录?什么是转录?
转录是指在细胞中,DNA的信息被转录成RNA的过程。

RNA 分子可以携带基因的信息进入细胞质。

6. 什么是翻译?什么是翻译?
翻译是指在细胞中,RNA的信息被翻译成蛋白质的过程。

蛋白质是细胞中许多生化反应和功能的关键组成部分。

7. RNA和DNA有什么区别?RNA和DNA有什么区别?
DNA是双链螺旋结构,而RNA是单链结构。

此外,DNA中的碱基酸配对规则是A对T,C对G,而RNA中是A对U,C对G。

8. 什么是突变?什么是突变?
突变是指DNA序列的改变,可能会导致基因表达的变化或功能异常。

以上是一些分子生物学的简洁答案,希望对您的学习和复习有所帮助。

如果您有更多问题或需要深入了解,请随时告诉我。

分子生物学简答题全

分子生物学简答题全

分子生物学简答题全————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:简答题6.为什么利用RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底。

答:RNAi是外源或内源性的双链RNAﻩ进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后,在Dicer作用下,分解为21-22bp的SiRNA.SiRNA结合相关酶,形成RNA介导的沉默复合物RISC.RISC在ATP作用下,将双链SiRNA变成单链SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合,导致其断裂,进而导致其彻底降解。

反义RNA是与靶mRNA互补的RNA,它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达,反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以,mRNA不一定完全被抑制。

8.简述真核基因表达的调控机制。

答:(1)DNA和染色质结构对转录的调控:①DNA甲基化,②组蛋白对基因表达的抑制,③染色质结构对基因表达的调控作用,④基因重排,⑤染色质的丢失,⑥基因扩增;(2)转录起始调控:ﻩ①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节),②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控;(3)转录后调控:①5’端加帽和3’端多核苷酸化调控,②选择剪接调控,③mRNA运输调控,④mRNA稳定性调控;(4)翻译起始的调控:①阻遏蛋白的调控,②对翻译因子的调控,③对AUG的调控,④mRNA 5’端非编码区的调控,⑤小分子RNA;(5)翻译后加工调控:①新生肽链的水解,②肽链中氨基酸的共价修饰,③信号肽调控。

9.简述mRNA加工过程。

答:(1)5′端加帽(由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸,形成帽子结构m7GpppmNP-)。

(2)3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白的成熟mRNA无需加polyA尾;B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列;C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助)。

分子生物学题库(附参考答案)

分子生物学题库(附参考答案)

分子生物学题库(附参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案:E2.在 pH 为下述何种范围时,Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案:A3.关于SYBR Green Ⅰ 的描述,不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案:D4.PCR 反应过程中,退火温度通常比引物的Tm 值A、低5℃B、低15℃C、高5℃D、高15℃E、相等正确答案:A5.以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案:B6.关于真菌,以下描述正确的是A、真菌种类繁多,其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性,对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案:B7.标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、变性B、探针C、杂交D、复性E、复杂性正确答案:B8.不符合分子诊断特点的是A、灵敏度高B、特异性强C、样品获取便利D、检测对象为自体基因E、易于早期诊断正确答案:D9.在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、基因结构变化未知B、点突变C、基因片段缺失D、表达异常E、基因片段插入正确答案:A10.关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因C、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案:A11.变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案:E12.DNA 自动化测序技术中,不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案:B13.PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案:E14.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、变性B、复杂性C、探针D、复性E、杂交正确答案:E15.珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、血红蛋白破坏加速D、出现异常血红蛋白 SE、铁代谢异常正确答案:A16.众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、肺癌B、肝癌C、乳腺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案:D17.为封闭非特异性杂交位点,可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案:A18.不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、有 FraX 体格或性格阳性征象者B、发育迟缓或自闭症的患者C、没有 FraX 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、未诊断的 MR 家族史正确答案:C19.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案:C20.Alu家族属于A、可变数目串联重复序列B、短串联重复序列C、长散在核原件D、短散在核原件E、DNA 转座子正确答案:D21.检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案:D22.母亲血浆中的胎儿 DNAA、占母亲血浆总 DNA 的 50%以上B、可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体 DNA 突变C、确定RhD 阳性孕妇所怀胎儿的RhD 情况D、确定胎儿是否从母亲遗传了X 连锁的基因突变E、血友病 A 的产前诊断正确答案:C23.关于人工合成的寡核苷酸探针,下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案:E24.以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案:E25.5’-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4 多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pol ⅠE、DNA pol正确答案:A26.第三代测序技术测定人全基因组的目标:A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格E、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格正确答案:D27.GeneXpert 全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、乙胺丁醇B、利福平C、链霉素D、异烟肼E、吡嗪酰胺正确答案:B28.不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案:D29.下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA ( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案:D30.关于 TaqMan 探针技术的描述,不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远,淬灭不彻底,本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析,减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案:C31.下列属于抑癌基因的是 ( )A、sisB、rasC、c-erb-2D、mycE、p53正确答案:E32.荧光定量 PCR 反应中,Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要,以 DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案:C33.有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案:B34.K-ras 基因最常见的激活方式是A、插入突变B、点突变C、缺失突变D、基因扩增E、染色体重排正确答案:B35.下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案:C36.下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案:A37.绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致,下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案:D38.多基因家族的特点描述错误的是 ( )A、由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因B、通常由于突变而失活C、假基因与有功能的基因是同源的D、所有成员均产生有功能的基因产物E、可以位于同一条染色体上正确答案:D39.关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是:A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案:E40.下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案:D41.下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性:A、随机扩增DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案:B42.下列不是目前用于 O157:H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案:E43.未知突变的检测,下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案:D44.任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案:A45.巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案:E46.下列不是细菌感染性疾病分子生物学检验技术的是A、PCR-SSCPB、real-time PCRC、ELISAD、PFGEE、PAPD正确答案:C47.通过酶联级联反应检测每次核苷酸聚合所产生的ppi 的测序方法是A、化学降解法B、寡连测序C、焦磷酸测序D、边合成边测序E、双脱氧终止法正确答案:C48.以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案:D49.STR 法医鉴定的基础是A、基因多态性B、碱基配对原则C、蛋白质空间结构D、孟德尔遗传定律E、基因扩增技术正确答案:D50.关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案:E51.Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案:C52.描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是:A、分型时间短B、技术简便C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案:D53.单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、携带者诊断D、症状前诊断E、耐药基因检测正确答案:A54.结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案:B55.下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案:E56.最早应用于 HLA 基因分型的方法是A、RFLP 分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO 技术E、PCR-SSP 技术正确答案:A57.编码 HIV 衣壳蛋白的是A、gag 基因B、vif 基因C、pol 基因D、tat 基因E、env 基因正确答案:A58.关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案:E59.下列关于引物设计的原则中,错误的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、5’端可加修饰基团正确答案:A60.多重 PCR 的描述中正确的是:A、同一个模板,多种不同的引物B、相同的引物,多种不同的模板C、多个模板,多种引物D、引物的Tm 值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近正确答案:A61.PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案:B62.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案:A63.mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案:D64.硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、本底低B、高结合力C、共价键结合D、非共价键结合E、脆性大正确答案:A65.要制订一个能够简洁准确的 DNA 测序方案,首先应考虑A、DNA 片段大小B、测序方法C、实验条件D、测序目的E、测序时间正确答案:E66.寡核苷酸探针的最大的优势是A、易分解B、易标记C、杂化分子稳定D、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列E、易合成正确答案:D67.关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案:D68.下列几种 DNA 分子的碱基组成比例,哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案:A69.PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案:E70.Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:A71.关于非放射性探针标记,下列描述不正确的是A、对人体危害小B、可长时间使用C、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶D、灵敏度不如放射性探针E、目前应用的非放射性标志物都是抗原正确答案:E72.作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理,其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案:A73.检测靶序列是 DNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案:A74.目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案:D75.在人类基因组 DNA 序列中,DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案:D76.有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域,通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案:D77.关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案:E78.以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界,是细胞生长必不可少的B、在进化过程中,基因序列呈高度保守性C、通过表达产物 DNA 来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害,而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案:C79.PCR-ASO 描述错误的是A、需要寡核苷酸探针B、检测点突变的技术C、PCR 产物必须电泳分离D、需正常和异常两种探针E、需严格控制杂交条件正确答案:C80.下列不是片段性突变引起原因的是A、基因重排B、碱基插入C、碱基缺失D、碱基扩增E、转录异常正确答案:E81.在核酸检测体系中加入内质控,其作用不是监控的是A、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性B、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性C、样本吸取错误所致的假阴性D、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性E、核酸提取效率太低所致的假阴性正确答案:C82.第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案:A83.目前测序读长最大的测序反应:A、边合成边测序B、化学裂解法C、双脱氧终止法D、连接测序E、焦磷酸测序正确答案:C84.以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基正确答案:A85.转录依赖扩增系统与其他 PCR 技术的区别是A、模板是 RNAB、模板是 DNAC、引物是 RNAD、模板和产物都是 RNAE、需要热循环正确答案:D86.HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案:A87.HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAE、-ssRNA正确答案:A88.第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案:A89.硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案:A90.关于梅毒螺旋体的实验室检测,下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、镜检法简便,特异性高,但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断C、诊断梅毒的传统方法是体外培养D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查,对早期梅毒诊断敏感E、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染正确答案:A91.纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8,可使比值降低的是 ( ) :B、牛血清白蛋白C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案:A92.能发出γ-射线的放射性核素是A、3HB、14CC、32PD、35SE、125I正确答案:E93.定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得:A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案:A94.在人类基因组中,编码序列占的比例为A、3%B、21%C、5%D、23%E、1.5%正确答案:E95.当标本核酸量非常低难以扩增时,可采用的 PCR 技术是A、逆转录 PCRB、转录介导扩增C、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案:D96.聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案:C97.下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案:C98.唯一一个在结肠上皮增殖过程中起看门作用的基因是A、MCC 基因B、DCC 基因C、APC 基因D、p53 基因E、HNPCC 基因正确答案:C99.线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ,相互影响,相互协调正确答案:A100.下列属于抑癌基因的是 ( )A、rasB、mycC、c-erb-2D、sisE、Rb正确答案:E。

(完整版)[医学]分子生物学习题集

(完整版)[医学]分子生物学习题集

(完整版)[医学]分子生物学习题集分子生物学学习题集分子生物学是研究生物分子结构、功能和互作关系的学科领域。

它涉及到DNA、RNA、蛋白质等生物大分子的结构与功能,以及其在细胞机制和生物过程中的作用。

下面是一些关于分子生物学的学习题集,希望能对你的学习有所帮助。

1. DNA是什么?它有什么样的结构?2. RNA有哪些类型?它们在生物中起到什么作用?3. 什么是转录?转录的过程是如何进行的?4. 在DNA复制的过程中,酶有哪些作用?请解释它们在复制中的具体功能。

5. 编写一个简短的DNA序列,并标识出其中的碱基对。

6. 什么是启动子序列?它在基因调控中起什么作用?7. 蛋白质是由什么组成的?它们在细胞中扮演什么样的角色?8. 如何在实验室中检测蛋白质的表达?9. 请解释DNA突变是如何发生的,以及它可能对细胞和生物产生的影响。

10. 什么是PCR技术?它在科学研究和医学诊断中有何应用?11. 请简要解释RNA干扰技术及其在基因沉默中的作用。

12. 请简要描述克隆技术的原理和应用。

13. DNA测序是如何进行的?请解释测序的主要原理。

14. 什么是基因组学?它在生物学研究中有何重要性?15. 在基因表达调控中,转录因子起到什么作用?请举例说明。

16. 如何用分子生物学技术鉴定和研究疾病的遗传基础?17. 解释细胞凋亡及其在生物发育和疾病中的作用。

18. 请解释基因突变在遗传病中的作用,并举例说明。

19. 什么是免疫反应?请解释它在免疫系统中的作用。

20. 病毒是如何感染细胞的?请解释感染的机制。

以上是一些关于分子生物学的学习题集。

希望通过回答这些问题,你能更好地理解分子生物学的基本概念和原理,为今后的学习和研究打下坚实基础。

祝你学习顺利!。

分子生物学问答题汇总

分子生物学问答题汇总

第2部分重要问答题总结1.细胞学说的内容有哪些? The content of the cell theory have?①一切动植物都由细胞发育而来,即生物是由细胞和细胞产物所组成。

②所有细胞在结构和组成上基本相似。

③生物体是通过其细胞的活动反映其功能的。

④新细胞由已存在的细胞分裂而来;⑤生物的疾病是因为其细胞机能失常导致的。

2.早期主要有哪些试验证实了DNA是遗传物质?1944,Avery 肺炎球菌转化小鼠试验;1952,Hershey噬菌体侵染细菌实验。

4.通常所说的分子生物学的三条基本原则是什么?举例说明之。

Usually say of molecular biology of three basic principles is what? The examples.①构成生物体的各类有机大分子的单体在不同的生物中都是相同的。

②生物体内一切有机大分子的建成都遵循共同的规则。

③某一生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。

5.现代分子生物学的主要研究领域有哪些?列举不少于三条。

Modern molecular biology major research fields have? List of not less than three.① DNA重组技术②基因表达调控研究③生物大分子的结构和功能④基因组、功能基因组与生物信息学研究6.简述DNA的化学组成。

This chemical composition of DNA.DNA由单体核苷酸首尾相接,以3′,5′-磷酸二酯键链接而成。

每个核苷酸由脱氧核苷和磷酸组成,而脱氧核苷由脱氧核糖和碱基ATCG组成。

7.染色体具有哪些作为遗传物质载体的特征?Chromosome, which have the characteristics of genetic material as a carrier?DNA分子结构应具有多样性和相对稳定性并能准确地自我复制。

分子生物学问题

分子生物学问题

1.分子生物学的定义。

2.简述分子生物学的主要研究内容广义:是研究蛋白质及核酸等生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。

从分子水平阐明生命现象和生物学规律。

狭义:主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程分子生物学的主要研究内容生物大分子本质:一切生物体中的各类有机大分子都是由完全相同的单体,如蛋白质分子中的20种氨基酸、DNA及RNA中的8种碱基所组合而成的。

生物大分子结构功能(结构分子生物学)DNA重组技术(基因工程)基因表达调控(核酸生物学)基因组学•2章DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。

•1953DNA的双螺旋结构有哪几种不同形式,各有何特点?细胞内最常见的是哪一类构象?•B-DNA构象:相对湿度为92%时,DNA钠盐纤维为B-DNA构象。

在天然情况下,绝大多数DNA 以B构象存在。

最常见•A-DNA构象:当相对湿度改变(75%以下)或由钠盐变为钾盐、铯盐,DNA的结构可成为A构象。

它是B-DNA螺旋拧得更紧的状态。

DNA-RNA杂交分子、RNA-RNA双链分子均采取A构象。

•Z-DNA构象:在一定的条件下(如高盐浓度),DNA可能出现Z构象。

Z-DNA是左手双螺旋,磷酸核糖骨架呈Z字性走向。

不存在大沟,小沟窄而深,并具有更多的负电荷密度。

Z-DNA的存在与基因的表达调控有关第四节DNA的变性和复性简述DNA的C-值、C-值矛盾(C Value paradox);核小体、断裂基因C-值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量•C-值矛盾(C-value paradox):形态学的复杂程度(物种的生物复杂性)与C-值大小的不一致,称为C值矛盾(C-值悖理)核小体(nucleosome)定义:用于包装染色质的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核心构成的简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰的种类及其生物学意义组蛋白:H1 H2A H2B H3 H4如甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化及ADP核糖基化等。

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Section A 细胞与大分子简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。

Section C 核酸的性质1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些?A 发生在闭环双链DNA分子上B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。

自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。

2.简述核酸的性质。

A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的而使核酸变性。

E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。

F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收H 减色性,热变性,复性。

思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质?质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。

Sectio C 课前提问1.在1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。

问(1):试管中的DNA浓度是多少?问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题?(1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml(2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。

2.解释以下两幅图(native:非变性的;denatured:变性的)图一表示dsDNA和RNA的热变性,中间的Tm值表示解链温度。

随着温度的升高,DNA和RNA逐渐变性形成单链,因此光吸收率逐渐增大,然而随着温度的升高RNA中双链部分的碱基堆积逐渐减少,其光吸收率不规则地增大。

较短的碱基配对区域具有更高的热力学活性,比较长的区域变性快。

图二表示的是快速慢速降温下的DNA复性,在温度缓慢下降时,DNA可以经碱基配对逐渐形成双链,但在快速降温时,DNA只形成局部区域的dsDNA,经碱基配对或者在DNA内部或者DNA之间短的互补区域的退火而形成,因此A260的下降很小。

Sectio E 提问大肠杆菌的DNA聚合酶主要有哪几种?它们有哪些特点?DNA聚合酶I:切除引物,修复DNA聚合酶II:修复DNA聚合酶III:复制Section E DNA复制1.细胞周期(The cell cycle)(1)什么是细胞周期?细胞周期包括DNA复制后的细胞分裂,即从一个母细胞产生两个子细胞。

(2)细胞分裂是有序的还是无序的?为什么?细胞周期是一个有序的过程,受细胞周期机制的控制。

2.检验点及其调控(Checkpoints and their regulation)(1)细胞如何从G0进入G1?G0期是指非增殖的休眠状态,称为沉默期。

G1期有一限制点(R点)细胞会对环境进行评估,然后决定是否进入另一个分裂周期。

细胞在到达R点之前具有胞外生长分子-促细胞分裂原即可使细胞从G0进入G1期。

(2)限制点(R点)G1期,细胞会对环境进行评估,然后决定是否进入另一个分裂周期,G1期的这一点称为限制点。

Section F DNA损伤、修复与重组思考题(1)5’-GTATCTTCTGATGGCTCGTGTACAAACACG-3’3’-CATAGAAGACTACCGAGCACATGXXXGTGC-5’根据Holliday 模型在什么时候可以被修复?该损伤的DNA链“XXX”部分本为“TTT”,修复时与另一个正常的DNA 分子同源重组,“XXX”段将通过重组被正常的姐妹链上相应区域的“TTT”替代修复,而正常链上因此产生的缺口会被个填平。

因为它的对面没有损伤,可通过正常的切除去掉,这样子就修复了。

(2)设计实验以区别细菌遗传转化转移中的转化、转导和结合的过程。

下面列出可使用的工具:(1)合适的突变菌株及其培养基。

(2)DNA酶。

(3)两种滤板,一种滤板能让游离的DNA通过,不可让细菌和病毒通过;另一种滤板只能持留细菌。

(4)一种是插入滤板使其分隔成两个空间的玻璃容器(如U型管)。

请写出实验设计并预期3种遗传转移过程的结果。

Section Kω亚基:ω亚基的功能尚不清楚,也有人认为ω亚基对于RNA聚合酶的结构和功能没有太大的影响。

问题:(1)什么是启动子?上游?下游?转录起点?启动子:RNA聚合酶结合到待转录序列上游的特定起始位点,长约40bp转录起始点:CGT/CAT,G比A更常见,被称为+1位点。

(2)原核生物δ70 启动子有哪些特点?大肠杆菌最常见的δ因子,由40-60bp的序列组成。

,含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列。

转录起始位点为+1位点,CGT/CAT,-10序列为TATAAT,也叫pribnow框,-35序列为TTGACA,也叫sextama框。

(3)原核生物的转录是如何终止的?基因3’端自身互补的序列会在RNA中形成发夹结构作为终止子。

发夹的茎部通常(G/C)含量较高,使其稳定性强,从而使聚合酶从此停顿。

发夹之后通常是4个或更多的U碱基,导致RNA与反义DNA的弱结合。

有利于RNA链解离,从而终止转录。

分析题以下是一段原核生物的DNA序列,请找出以下功能位点,并说明理由:(1) 一个启动子;(2)一个转录起始位点;(3)一个转录起始密码子;(4)一个转录终止密码子;(5)一个转录终止子。

GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACA AGGGGCTCCTATAAT AGGTGCAT TTGT AGGAGGT GTGGCCAC ATG ATA GCG (-35序列)(-10序列)启动子/+1起始位点(SD 序列)(起始密码子)+1 CGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGCATGCTGCAG CGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAGAATATCA AATAGCCATCCACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTACCAAA TAATAA AGTTGATAA TTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATG TGAA TTTTTAGAATT C (终止密码子)(转录终止子)Section L 原核生物的转录调控分析题含中性碳源(例如甘油)的液体基本培养基培养E.col i不能诱导lacZ操纵子。

如果一个小时后在培养基中加入乳糖,然后再隔一段时间加入过量的葡萄糖,那么对lacZ操纵子的表达会有什么影响?答:在最初的一小时内没有诱导物(乳糖)的存在,所以lac操纵子不能表达。

加入乳糖后,E.col i本身含有的低量的透性酶使其可以吸收乳糖,β-半乳糖苷酶催化一些乳糖成为异乳糖,异乳糖作为诱导物结合到乳糖阻抑物上,引起阻抑物构象变化失活,lac操纵子经诱导表达,一段时间后加入的大量葡萄糖导致分解代谢阻遏,乳糖操纵子不能被CRP激活,使lac操纵子不能表达。

思考题:1.原核生物基因表达调控的特点是什么?原核生物基因表达的单元是操纵子,包括结构基因,调控基因和调控元件。

原核基因的编码区是连续的,没有内含子和外显子,所以转录后不用加工,长度与编码区相等,转录和翻译都在细胞质,且边转录边翻译。

2.简述色氨酸操纵子的阻遏系统和弱化系统。

阻遏系统:色氨酸阻抑物是含有两个亚基的二聚体,当色氨酸与阻抑物结合形成复合物后与色氨酸操纵子的操纵基因位点特异性相互作用,通过终产物抑制自身的合成,将转录的起始抑制大约70倍。

弱化系统:RNA聚合酶在DNA模板的前导肽编码序列末端处停顿。

核糖体起始前导肽翻译时,聚合酶继续转录RNA。

如果核糖体在色氨酸密码子上停顿(如当色氨酸含量低时),它减少了用于碱基配对的互补前导序列的供应,形成替代了弱化子发夹结构的另一个DNA 发夹结构。

最终转录不终止。

如果核糖体不在色氨酸密码子上停顿(如当色氨酸含量很高时),弱化子发夹就能形成,转录将提前结束。

3.什么是葡萄糖效应?简述cAMP-CAP的作用。

葡萄糖效应:在葡萄糖没有被利用完之前,乳糖操纵子就一直被阻遏,乳糖不能被利用,这是因为葡萄糖的分解物引起细胞内cAMP含量降低,启动子不能释放cAMP-CAP蛋白,RNA聚合酶不能与乳糖的启动基因结合,以至转录不能发生,直到葡萄糖被利用完后,乳糖操纵子才进行转录,形成利用乳糖的酶,这种现象称葡萄糖效应。

cAMP-CAP作用:当葡萄糖缺乏时,细胞内cAMP水平上升,CAP结合到cAMP上。

cAMP-CAP复合物可结合到RNA聚合酶结合位点上游的乳糖操纵子的启动子P lac上,引起DNA900的弯曲,增强了RNA与启动子的结合,使转录效率提高50倍。

下面哪些物质是乳糖操纵子的诱导物?(选择题)1)乳糖2)密二糖3)O-硝基苯酚-β-半乳糖苷(ONPG)4)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) 5)异乳糖答:1),4),5)分析题现分离了一DNA片段,可能含有编码多肽的基因的前几个密码子。

该片段的序列组成如下:5‘-CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG-3’3’-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5’(1)哪一条链作为模版链;3‘-5‘(2)mRNA的顺序是什么?5‘CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG-3’(3)此mRNA能形成二级结构吗?能,有碱基配对(4)翻译从哪里开始?朝哪个方向进行?AUG开始,AUGUCCUGU延伸(5)此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离(SD序列:AGGA) ?原核生物有SD序列Section M 真核生物的转录1.真核生物的聚合酶有哪几种?用什么方法把它们区分开来?它们的性质和功能是什么?RNA聚合酶I,II,III。

用真菌毒素——a-鹅膏蕈碱区分。

(1)负责大多数rRNA 前体的合成;(2)负责mRNA前体和一些小核RNA的合成;(3)负责5srRNA 前体,tRNA前体。

一些sRNA以及细胞质RNA前体的合成。

2.真核生物的聚合酶和原核生物的聚合酶有何异同点?都不需要引物。

只需要前体核苷酸A,U,G,C。

沿5‘-3’方向合成RNA。

与细菌聚合酶不同,真核生物在与DNA结合是需要辅助因子。

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