实验报告设计-叶绿体中色素的提取和分离
《叶绿体色素的提取和分离》 实验报告
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。
实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。
2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。
3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。
5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。
7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。
实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。
实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。
通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。
叶绿素的提取和分离实验报告
陕西师范大学远程教育学院
生物学实验报告
报告题目叶绿素的提取和分离
姓名刘伟
学号
专业生物科学
批次/层次
指导教师
学习中心
叶绿素的提取和分离
一、实验目的
1. 学习叶绿体色素的提取、分离方法。
2. 通过叶绿体色素提取、分离方法的学习了解叶绿体色素的相关理化性质。
3. 为进一步研究各叶绿体色素性质、功能等奠定基础。
二、原理
叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同，所以它们的物化性质（如极性、吸收光谱）和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物，都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇、丙醇等有机溶剂提取。提取液可用色谱分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各种成分在两相（固定相和流动相）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开。
三、材料、仪器设备和试剂
1. 绿色植物如菠菜等的叶片。
2. 研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、康维皿、圆形滤纸（直径11cm）。
3. 试剂：95%乙醇，石英砂，碳酸钙粉，推动剂:按石油醚:丙酮:苯=10:2:1比例配制（v/v）
四、试验步骤
1. 叶绿体色素的提取
（1）取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片（4g左右），洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研钵中。
（2）研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2-3ml 95%乙醇，研磨至糊状，再加10ml
95%乙醇，然后以漏斗过滤之，残渣用10ml 95%乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。
绿叶中色素的提取和分离实验报告
绿叶中色素的提取和分离实验报告
实验报告：绿叶中色素的提取和分离
一、实验目的：
1.了解植物绿叶中色素的类型和组成；
2.掌握绿叶中色素的提取和分离方法；
3.学习使用色谱技术进行色素的定性和定量分析。
二、实验原理：
1.植物绿叶中主要含有叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等色素；
2.色素的提取可采用溶剂浸提法，利用极性溶剂可溶解色素并使其析出；
3.色素的分离可采用色谱技术，利用相互溶解度差异进行分离。
三、实验步骤：
1.将新鲜的绿叶放入研钵中，加入适量的酒精，用搅拌棒搅拌植物材料，使其溶解均匀；
2.将混合溶液过滤，收集过滤液；
3.将收集的过滤液分成两部分，分别用超离心机分离沉淀和上清液；
4.取上清液，利用色谱技术进行分离和定性分析。
四、实验结果：
1.在溶剂浸提法下，绿叶中的色素溶解于酒精中，并分为沉淀和上清
液两部分；
2.通过超离心机的处理，将色素沉淀进行分离；
3.使用色谱技术后，可得到单一的色素组分，通过比色计测定其最大
吸收波长。
五、实验讨论：
1.色素的提取效果可能受到植物材料浸提时间和酒精浓度的影响；
2.色素的相互溶解度差异是进行色谱分离的关键；
3.使用色谱技术可对色素进行定性和定量分析，使实验结果更加准确
可靠。
六、实验总结：
本实验通过溶剂浸提法和色谱技术，成功提取和分离了绿叶中的色素。通过实验，我们了解到了植物绿叶中色素的类型和组成，并学习了色素的
提取和分离方法。同时，通过色谱技术的应用，我们还能对色素进行定性
和定量分析。这些实验技巧和方法对于进一步研究和应用植物色素具有重
要意义。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《《叶绿体中色素的提取和别离》》
一、实验目的
1. 学会提取和别离叶绿体中色素的方法。
2. 比拟、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
二、实验原理
光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂
中。故要提取色素，要破坏细胞构造，破坏叶绿体膜，使基粒片层构造直接与有机溶剂接
触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，
因此随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具
取新颖的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程〔见书Ｐ54〕
1.提取色素：
2.制备滤纸条：
3.色素别离，纸层析法。〔不要让滤液细线触及层析液〕
4.观察：
层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论
1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？
2．提取和别离叶绿体中色素的关键是什么？
【生物实验报告《《叶绿体中色素的提取和别离》》】
实验报告设计 叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离
一、实验目标
1、知识方面
（1）探究叶绿体中含有几种种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
（2）了解纸层析法的原理.
2、能力方面
掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
3、情感态度与价值观方面
认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度
二、实验原理
1、色素提取的原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中，故可用丙酮和无水乙醇提取色素。
2、色素分离的原理：叶绿体中的各种色素在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素,在滤纸上随层析液的扩散速度慢。
三、实验准备
实验材料:新鲜的绿叶（如新鲜菠菜叶片）。
实验仪器及用具：定性滤纸，研钵，玻璃滤斗，脱脂棉，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺,量筒（10mL），天平，试管，试管架，滴管，培养皿，三角瓶，烧杯
试验试剂:无水乙醇(或丙酮），层析液(CCl4），石英砂（SiO2）和碳酸钙（CaCO3）
四、实验步骤
1、叶绿体色素的提取
（1）取菠菜新鲜叶片5g，洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中加入少许碳酸钙和二氧化硅，再加10mL无水乙醇，进行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分,碳酸钙可防止研磨中色素被破坏）.
(3)将研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严.
2、制备滤纸条
用预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长10 cm、宽1cm的滤纸条，在滤纸条的一端剪去两角（防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快），并在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》_实验报告_
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
一、实验目的
1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
二、实验原理
光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂
中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接
触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，
因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书P54）
1.提取色素：
2.制备滤纸条：
3.色素分离，纸层析法。（不要让滤液细线触及层析液）
4.观察：
层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。您正浏览的文章由(第一·范·文网)整理，版权归原作者、原出处所有。
五、讨论
1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？
2.提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？
植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定
植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和
叶绿素含量的测定
引言：
叶绿体是植物细胞中的一个重要细胞器，其中主要存在着叶绿素等色素，它们在光合作用中起着重要的作用。研究叶绿体色素的提取、分离、
理化性质和叶绿素含量的测定，对于了解光合作用的机理以及研究植物生
理生化过程具有重要意义。本实验旨在通过实验手段提取叶绿体色素，进
行色素的分离、理化性质的研究和叶绿素含量的测定。
材料与方法：
材料：菠菜叶片、研钵、磨杵、丙酮、乙醇、石油醚、叶绿素提取液、测色皿、高锰酸钾溶液、浓硫酸。
方法：
1.取适量菠菜叶片放入研钵中，加入适量丙酮，用磨杵捣碎成糊状。
2.将捣碎的菠菜糊状物转移到玻璃漏斗中，用石油醚冲洗3次，使叶
绿体附着物进一步析出。
3.将漏斗中的上清液收集，并加入适量乙醇，振摇混合，使叶绿素慢
慢析出。
4.将释放出的叶绿体颗粒通过离心机离心沉淀10分钟，收集沉淀。
5.取收集到的叶绿体沉淀，加入适量叶绿素提取液，用乳钙酸钠解离
剂进行叶绿素含量的测定。
6.将其中一部分叶绿体溶液加入高锰酸钾溶液，观察颜色变化。
7.将其余叶绿体溶液与浓硫酸混合，观察颜色变化。
结果与讨论：
通过上述方法，我们成功地提取并分离出菠菜叶片中的叶绿体色素。加入石油醚可以去除一部分杂质，使叶绿体进一步纯化。加入乙醇可以使叶绿素从叶绿体中溶出。通过离心沉淀，我们收集到了叶绿体的沉淀物。
叶绿体的提取液与高锰酸钾溶液反应后呈现蓝色或紫色，这是由于高锰酸钾通过氧化反应将一些具有现菌酮结构的物质氧化为合成叶绿素的前体物质所引起的。这种反应也证实了叶绿体的存在。
叶绿体色素的提取分离和理化性质实验报告
叶绿体色素的提取分离和理化性质实验报告
生物学导论实验报告
叶绿体色素的提取分离和理化性质
一、提取与分离
1、实验目的
学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法。
2、实验原理
提取：叶绿体色素为有机酯类化合物，根据相似相容原理，常用有机溶剂提取。如酒精、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等。
分离：薄层层析法是将吸附剂均匀的涂抹在玻璃板上形成一薄层，将此吸附剂薄层作为固定相，把待测分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂作流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂中。流动相通过毛细管作用由下而上逐渐浸润薄层板，并带动样品在板上也向上移动，样品中各组成分在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附、脱吸附、再吸附……的过程。由于吸附剂对不同物质的吸附能力大小不同，吸附能力强的物质相对移动慢一些，儿媳妇能力弱的物质相对移动快一些，从而使各组分有不同移动速度而彼此分开。
3、实验材料与试剂
（1）新鲜的菠菜叶；
（2）体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末、展开剂
（3）钵体、漏斗、三角瓶、剪刀、点样本、毛细管、层析缸、硅胶预制板、滤纸。
4、实验步骤
（1）色素提取液的制备
取叶4~5片新鲜叶片，洗净，擦干叶表面，去中脉剪碎，放入钵体中。加入少量碳酸钙，加2~3ml体积分数为95%的乙醇，研磨至糊状，再加入10ml乙醇，上清液过滤，残渣再用10ml乙醇冲洗过滤。
（2）叶绿体色素的分离
取硅胶预制板一个，用点样毛细管取上述提取液，平行于硅胶板
的短边，距下边缘1cm处用毛细管划线，风干，重复操作3~4次；
在干燥的层析缸中加入适量展开剂，高度0.5cm，将硅胶预制板带有色素一端放入，使其下端浸入展开剂中；
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的
1. 掌握叶绿体色素的提取和分离方法；
2. 了解叶绿体色素的成分和结构特点；
3. 通过实验观察，加深对叶绿体结构和功能的理解。
实验原理
叶绿体是植物细胞中的一种独特细胞器，因为其含有叶绿素而呈现绿色。叶绿体是光合能量的主要场所，能够将光能转化为化学能，进而为生物体提供能量。
叶绿体中含有多种色素，如叶绿素、类胡萝卜素等。其中，叶绿素是最重要的色素，其分子结构由一个类胡萝卜素环（porphyrin环）和一个酰基侧链（phytyl侧链）组成。叶绿素在光合作用中起着重要的作用，它能够吸收光线，将光能转化为化学能，进而提供生物体所需的营养。
叶绿体中的色素可以通过酒精沉淀的方法进行提取和分离。酒精沉淀方法是根据不同色素在不同酒精浓度下的溶解度差异来进行色素分离的。在实验操作中，首先要将植物组织用液氮或手动研磨方法研磨成细碎的粉末，然后将其置于离心管中，加入一定比例的酒精，并放置在温水浴中摇匀，使颜料完全溶解。接着，将混合液离心，待沉淀出现后将上层液体倒出，待沉淀干燥后即可得到色素提取物。
实验步骤
1. 准备材料。首先准备好新鲜的菠菜叶片、冰醋酸和95%酒精；
2. 研磨植物组织。将菠菜叶片用液氮或手动研磨器研磨成细碎的粉末；
3. 加入酸性试剂。将研磨后的菠菜叶片粉末加入1ml冰醋酸，使其均匀分散；
4. 加入酒精。向组织粉末中缓慢加入5ml 95%酒精，搅拌均匀；
5. 离心。将混合液置于离心管中，进行离心30分钟；
6. 取上层液体。取离心后上层液体，避免沉淀、残渣的干扰；
生物《叶绿体中色素的提取和分离》的实验报告
一、实验目的
1. 学会提取和别离叶绿体中色素的方法。
2. 比拟、观察叶绿体中四种色素：理解它们的'特点及与光合作用的关系
二、实验原理
光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂
中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接
触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度
不同，
因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程〔见书Ｐ54〕
1.提取色素：
2.制备滤纸条：
3.色素别离，纸层析法。〔不要让滤液细线触及层析液〕
4.观察：
层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论
1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？
2．提取和别离叶绿体中色素的关键是什么？
叶绿体色素的提取实验报告
叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定
生命科学学院09生科基朱文杰实验目的：掌握提取和分离叶绿体色素的方法；掌握测定叶绿体色素含量的方法；熟悉叶绿体色素的理化性质及吸光特性；了解植物叶绿体色素组成及其与生境的相关性。
实验原理：叶绿体色素是吸收光能的重要物质，包括叶绿素和类胡萝卜。利用不同色素的极性不同可以用色谱分离法将其分离。不同的色素对光的吸收范围不同，因此我们也可以测量不同色素在不同波长光下的吸光值，即可用公式计算出其中各色素的含量。光对叶绿体色素有破坏作用，将叶绿体色素暴露于强光下，可以发现叶绿素被破坏，溶液颜色变化。。叶绿体色素分子吸收光后变为激发态，如能量不被光合作用利用，激发态变回到基态，放出波长较长的红光。叶绿素分子中卟啉环上的Mg处于不稳定的状态，可被H、Cu、Zn离子取代。叶绿素不溶于水，能溶于有机溶剂，且各色素的脂溶性不同，故可利用乙醇或丙酮提取，用不同的有机溶剂萃取或用色谱法进行分离。
实验步骤：分别选取2g左右新鲜菠菜和0.2g左右玉米幼株的叶片剪碎放入研钵中。在研钵中加入5ml丙酮以及少量的石英砂和氯化钙，充分研磨至无纤维装组织。过滤并转移动至量筒中，再用3ml丙酮冲洗研钵，最后加入丙酮定容至10ml 作为备用提取液。
实验一：吸光值测定：取0.1 ml色素提取液，用80％丙酮稀释到3 ml ，测定663、645 nm 处的吸光值，根据公式计算叶绿素a、叶绿素b的含量。Chla（μg /ml）=12.7 OD663－2.69OD645，Chlb（μg /ml）=22.9 OD645－4.68 OD663。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验
报告
实验目的：
1. 学习叶绿体色素的提取和分离方法。
2. 了解叶绿体中色素的组成和结构。
实验原理：
叶绿体是植物和藻类细胞中含有叶绿素的细胞器。叶绿体中有多种不同类型的色素，
包括叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。这些色素通过吸收太阳光能量进行光合作用。
提取叶绿体中的色素可以使用酒精提取法。酒精可以溶解叶绿体膜，使色素溶解到酒
精中。然后，使用色谱技术可以将不同类型的色素分离出来。
实验材料：
1. 鲜叶样品
2. 酒精
3. 氯仿
4. 丙酮
实验步骤：
1. 将鲜叶样品切碎并置于研钵中。
2. 加入足够量的酒精，用研钵研磨混合，直到叶碎细胞完全破裂。
3. 使用滤纸过滤混合物，得到澄清的叶绿体提取物。
4. 将叶绿体提取物转移到试管中，加入少量氯仿。
5. 等待一段时间，观察到叶绿体提取物分为两个层次：上层为酒精层，下层为氯仿层。
6. 使用滴管将上层的酒精取出，置于干燥的容器中保存。
7. 将下层的氯仿层转移至另一个试管中。
8. 加入适量的丙酮，轻轻摇匀，观察色素在丙酮中溶解。
9. 使用滤纸过滤丙酮溶液，得到单一色素溶液。
实验结果：
从叶绿体提取物中分离出不同类型的色素，如叶绿素a、叶绿素b等。通过色素的溶
解性质和色谱技术，可以将这些色素分离出来。
实验总结：
通过本次实验，我们学习了叶绿体中色素的提取和分离方法。了解了叶绿体中的色素
组成和结构。同时，也掌握了使用色谱技术进行色素分离的基本步骤。这对于进一步
研究叶绿体的功能和光合作用具有重要意义。
生物《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
一、实验目的
1. 学会提取和别离叶绿体中色素的`方法。
2. 比拟、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
二、实验原理
光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程(见书P54)
1.提取色素：
2.制备滤纸条：
3.色素别离，纸层析法。(不要让滤液细线触及层析液)
4.观察：
层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论
1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液
2.提取和别离叶绿体中色素的关键是什么
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
实验八叶绿体中色素的提取和分离
教学目的
1．初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2．探索叶绿体中有几种色素。
实验原理
1．叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙
酮可提取叶绿体中色素。
2．色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶
解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
实验程序
1）称取5g绿色叶片并剪碎提取色素
2）加入少量sio2、caco3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口
1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时
到达滤液细线）
制滤纸条
2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线
1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线
滤液划线
2）干燥后重复划2-3次
1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）
纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中
3）用培养皿盖盖上烧杯
观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）
最宽：叶绿素a；
最窄：叶绿素b；
相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；
相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。
实验关键
1．选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2．画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进
行，重复2-3次。
3．层析时不要让滤液细线触及层析液。
注意事项
1．因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
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一、实验目的
1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
二、实验原理
光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂
中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接
触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，
因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书Ｐ54）
1.提取色素：
2.制备滤纸条：
3.色素分离，纸层析法。（不要让滤液细线触及层析液）
4.观察：
层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。您正浏览的文章由(第一·范·文网)整理，版权归原作者、原出处所有。
五、讨论
1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？
2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？
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叶绿体色素的提取分离及理化性质检测实验报告
叶绿体色素的提取分离及理化性质检测
实验报告
一、实验目的：
1. 学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法。
2. 了解叶绿素的组成、性质和测定叶绿素有助于理解光合作用的本质。
二、实验原理：
叶绿体是进行光合作用的细胞器。叶绿体中的叶绿素a，叶绿素b，胡萝卜素和叶黄素与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。提取液可用薄层色谱法加以分离和鉴别。
薄层层析色谱法是将吸附剂均匀地涂在玻璃板上成一薄层，将此吸
附剂薄层作为固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用
一定量的溶剂作流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂当中。由于吸附
剂对不同物质的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，
而吸附力弱的物质则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度
而彼此分开。
植物活性成分的分离常用薄层层析法和柱层析法，其中柱层析适
用于大量制备。本实验采用薄层层析色谱法，其中固定相用硅胶预制板。
三、实验材料与试剂：
1. 新鲜的菠菜叶片。
2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂〈石油醚：丙
酮：苯=75：1，体积比>。
3.研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸。
四、实验步骤：
(一) 色素提取液的制备
1. 取新鲜叶片4“5片，洗净，擦干叶表面，去除中脉剪碎，
放入研钵中。
2. 向研钵中加入少量CaCO₃**,再加2*3ml体积分数为 95%
的乙醇,充分研磨至糊状，再加10°15ml体积分数为95%的乙
醇，上清液用漏斗过滤出。残渣再用10ml体积分数为95%的乙
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叶绿体中色素的提取和分离
一、实验目标
1、知识方面
（1）探究叶绿体中含有几种种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
（2）了解纸层析法的原理。
2、能力方面
掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
3、情感态度与价值观方面
认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度
二、实验原理
1、色素提取的原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中，故可用丙酮和无水乙醇提取色素。
2、色素分离的原理：叶绿体中的各种色素在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度慢。三、实验准备
实验材料：新鲜的绿叶（如新鲜菠菜叶片）。
实验仪器及用具：定性滤纸，研钵，玻璃滤斗，脱脂棉，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平，试管，试管架，滴管，培养皿，三角瓶，烧杯
试验试剂：无水乙醇（或丙酮），层析液（CCl4），石英砂（SiO2）和碳酸钙（CaCO3）
四、实验步骤
1、叶绿体色素的提取
（1）取菠菜新鲜叶片5g，洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中加入少许碳酸钙和二氧化硅，再加10mL无水乙醇，进行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏）。
（3）将研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
2、制备滤纸条
用预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长10 cm、宽1cm的滤纸条，在滤纸条的一端剪去两角（防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快），并在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
3、画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液干后，再画二三次。
4、分离叶绿体中的色素
将3 mL层析液到入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微斜靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧坏。注意，不能让滤液细线触及层析液。
5、观察与记录
观察滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下来。
五、结果分析
1、色素在滤纸条上的分布如下图：
2、叶绿体中的色素是有机化合物，不溶于水，能够溶解在有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇可以将存在于叶绿体类囊体膜上的色素溶解，从而提取色素。经过提取、过滤得到的色素滤液为绿色，叶绿体色素见光易分解，应将色素滤液避光保存。
3、层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的在滤纸上扩散得慢，所以用层析法来分离这四种色素。
六、注意事项
1、各种试剂用途总结：
丙酮的用途是提取（溶解）叶绿体中的色素，
层析液的的用途是分离叶绿体中的色素；
石英砂的作用是为了研磨充分，
碳酸钙的作用是防止研磨时叶绿体中的色素受到破坏；
2、提取色素
（1）注意选材：应选择新鲜、浓绿、柔软的叶片（色素含量多）。
（2）研磨要充分、迅速，用纸盖住研钵口，试管口要加塞。叶绿素不稳定，已被细胞中的叶绿素酶水解，迅速研磨可以尽量使叶绿素不被水解；充分研磨可以使叶绿体完全破裂，便于提取较多的色素。
（3）丙酮等有机溶剂的用量不宜过多，过多会影响色素的浓度，过少则不易过滤。（4）用尼龙布过滤，不能使用滤纸。（滤纸会吸附色素）
3、滤纸条
（1）干燥，有利于色素扩散。
（2）双手尽量不接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。
（3）剪角：边缘扩散快，剪角可使边加长，保证色素水平扩散。
（4）滤纸条的高度要尽量高出烧杯，高出部分直角弯折，最好将其固定在培养皿盖上。
4、画滤液细线（细、直、齐；干燥后再重复画线，否则细线过粗，色素不易分开；重复：增加色素量，使实验效果明显）
5、分离色素
（1）层析液不能没及滤液细线，否则色素将溶解在层析液中。
（2）滤纸条尖端向下，斜靠壁。（贴壁会影响层析）
（3）加盖。（层析液易挥发，且有毒）
6、色素的位置和功能
叶绿体中的色素存在于叶绿体类囊体薄膜上。
叶绿素a 和叶绿素b 主要吸收红光和蓝紫光； 胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光及保护叶绿素免受强光伤害的作用。 Mg 是构成叶绿素分子必需的元素。
七、结论
八、思考讨论 1、为什么要选取新鲜的颜色较深的叶片做实验材料？
2、提取和分离叶绿体中色素的关键有哪些？
3、“没有光不能合成叶绿素”与“避光保存叶绿体色素滤液”是否矛盾？为什么？ 叶绿素a （蓝绿色） 叶绿素b （黄绿色）
叶绿素 胡萝卜素（橙黄色）
叶黄素（黄色） 类胡萝卜素 吸收红光和蓝紫光 吸收蓝紫光
叶绿体色素