链球菌属检验

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微生物检验学之病原性球菌及检验

病原性球菌及检验

一、葡萄球菌属

（一）生物学特性

1.形态与结构本属菌革兰染色阳性，呈圆球形，直径0.5～1.5μm，不规则成堆排列，形似葡萄串状，在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列。无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求不高，通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。

在普通琼脂平板上经35℃24～48h培养，可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

在血琼脂平板上，几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

在液体培养基（普通肉浸液）中生长迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应本属菌触酶试验阳性，对糖的发酵反应不规则，多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。

4.抗原葡萄球菌水解后，用沉淀法可获得两种抗原，即蛋白抗原和多糖抗原。

（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类

（1）《伯杰系统细菌学手册》（1986）据DNA相关性表型特征等将葡萄球菌分为19个种。继之，各国学者又相继从人和动物中检出数种凝固酶阴性葡萄球菌新种，共27种。

（2）古典分类法：根据其在固体培养基上产生的不同色素分为金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌。

实验三_葡萄球菌属和链球

6.杆菌肽敏感试验
原理 A群化脓性链球菌对
杆菌肽几乎100%敏感，而其他链球菌对杆菌肽通常耐药。
7.CAMP试验
无乳链球菌能产生CAMP因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用，在两菌(B群链球菌和金葡）)的交界处溶血力增加，出现矢形的溶血区。
本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验
葡萄球菌属、链球菌属和肠球菌属的培养和鉴定
一、目的要求
掌握葡萄球菌、链球菌和肠球菌的菌落特点、菌体形态及染色性。
掌握葡萄球菌、链球菌和肠球菌的分离培养、鉴定方法和常用鉴定实验。
二、器材和试剂
1.菌种：金葡、表葡、腐生，化脓链、无乳链 2.培养基：MH平板、血平板、甘露醇发酵管、
胆汁七叶苷斜面培养基。 3.试剂：革兰染色液、3%H2O2、新鲜血浆。 4.其他：新生霉素、杆菌肽、Optochin纸片、
无芽胞和荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛
球菌相关的鉴定试验
1.触酶试验
原理：具有过氧化氢酶的细
菌能分解过氧化氢生成水，并释放出初生态氧，因生成氧分子而出现气泡。
2.凝固酶试验
原理：
Sau能产生结合型血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝集颗粒；游离型的血浆凝固酶则可使试管中血浆发生凝固。

链球菌属检验

编写：常晓林2011-09-0

9 审核：文佳琼2011-11-01 批准：牛华2011-11-01

1．概述

链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群（A、B、C、D、F、G等18个群），或根据溶血现象（β溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）进行分类。化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌，属A群、β溶血的链球菌。

2. 标本类型

血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3. 鉴定

3.1 形态与染色革兰阳性球菌，固体培养基上呈单个或成双排列，较少呈链状排列，肉汤培养基中呈长链状排列，肺炎链球菌呈矛头状，成双或链状排列。

3.2 培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应：α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环；β溶血周围有明显较大的完全透明环；γ溶血（不溶血性）无异常变化。肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平，周围有草绿色α溶血环。

3.3 生化反应触酶试验阴性，对各种碳水化合物的分解因菌种而异，链球菌不被胆汁溶解。肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性，Optochin试验敏感（抑菌环＞14mm）。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。

3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。

A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。

B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。

C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。

链球属和肠球菌属

四注意事项
1.链球菌的鉴定仅靠生化反应只能得出Fra Baidu bibliotek测性的鉴定。
2.接种微量生化管时接种量不宜过多。
准备：
1.菌种甲、乙、丙链、肺链和肠球菌（各种血平板
20块，乙链种液体培养基4管）
2.试剂革兰染色液（4套/室）、胆汁七叶苷和 6.5%氯化钠（1管/组）、 3%过氧化氢。 3.其他生理盐水（1管/组）、载玻片（6片/人）。
（二）鉴定相关试验
1.触酶试验
2. 65g/LNaCL生长试验
方法：将肠球菌接种于高盐肉汤培养基中，孵育18-24h。结果：有细菌生长为阳性，不生长为阴性。
3. 胆汁七叶苷水解实验
原理：有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸盐酸铁的二价铁离子反应，生成黑色的化合物，使培养基呈黑色。
方法：待测菌接种胆汁-七叶苷琼脂培养基，35℃孵育 18-24h。结果：细菌生长，培养基变黑色为阳性，不变色为阴性。应用：主要用于D群链球菌与其它链球菌的鉴别，前者为阳性，后者为阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。
4. Optochin敏感试验（示教）
原理： Optochin可抑制肺炎链球菌的生长。结果判定：抑菌圈直径≥14mm为阳性，反之阴性。
实验四链球菌属和肠球菌属的培养和鉴定
临床病原生物学教研室

链球菌属的特性及其检验

目的：总结链球菌属的特性及其检验技术，结合临床经验，进一步提高细菌分离及鉴定水平。方法：采用显微镜检查、分离培养、细菌生化反应、血清学试验等进行分离和鉴定。结果：根据菌体形态、菌落形态、溶血特征将链球菌分为甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌；按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A、B、C、D等20个群。结论：链球菌是临床常见的致病菌，正确掌握检验方法，科学地分离和鉴定，有助于临床做出合理的诊治决策。

标签：链球菌属；特性；分离培养；生化反应；血清学试验

链球菌属细菌广泛分布于自然界、人及动物肠道和鼻咽部，大多数不致病。其中A、B群及肺炎链球菌是本属的3种重要致病菌，可引起各种化脓性炎症、医源性伤口感染、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风湿热、肾小球肾炎等超敏反应性疾病[1]。另外草绿色链球菌为条件致病菌。因此，本属细菌的鉴定、药敏试验是微生物检验工作的重要内容之一，临床上常见的标本包括咽拭子、痰液、分泌物、穿刺液、尿液、脑脊液和血液。现将本属的特性及其检验总结如下：

1 资料与方法

1.1一般资料

本院微生物实验室2009年共接收咽拭子样本299例、痰液样本1 319例、分泌物817例、穿刺液239例、尿液704例、脑脊液54例和血液培养815例，合计4 247例。其中门诊患者样本239例，住院患者样本4 008例。细菌培养阳性结果1 475例，阳性率为34.73%。其中链球菌属阳性83例，占5.63%。

1.2 检验方法

根据不同疾病采集不同标本。

1.2.1 显微镜检查咽拭子、痰液、脓液、穿刺液、脑脊液等标本可直接涂片革兰染色，镜检见链状排列革兰阳性球菌可初步报告，及时供临床参考。

链球菌检验作业指导书(副本)

链球菌检验作业指导书

1主题内容与适用范围

本作业指导书规定了链球菌的检验方法。

本作业指导书适用于患者的生物样品（如：尿液、脓液、脑脊液、痰等）及医院物体表面涂抹样本及使用中消毒剂链球菌的检验。

2引用标准

GB/T 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

全国临床检验操作规程（第三版）

临床微生物学诊断与图解（第二版）周庭银编著

3 设备和材料

3.1 无菌棉拭子。

3.2 无菌5cm×5cm规格板。

3.3 温箱：36±1℃，42℃。

3.4 显微镜。

3.5 灭菌广口瓶：500mL。

3.6 灭菌三角烧瓶：500mL，250mL。

3.7 灭菌吸管：10mL、1mL。

3.8 天菌平皿：90mm×15mm。

3.9 灭菌小试管：内径3mm，长5cm。

3.10 灭菌毛细管。

3.11 无菌注射器：5mL、10mL

3.12 橡皮乳头。

3.13 载玻片。

3.14 酒精灯。

3.15 灭菌金属匙或玻璃棒。

3.16 接种棒、镍铬丝。

3.17 试管架、试管篓。

4 培养基和试剂

4.1 1%葡萄糖肉汤：按GB/T 4789.28中4.1规定。

4.2 血琼脂平板：按GB 4789.28中4.6规定。

4.3 SCDLP液体培养基：按卫生部《消毒技术规范》附录A.23中规定。

4.4 麦康凯琼脂：按GB 4789.24中4.4规定。

4,5 6.5%氯化钠肉汤：见附录A1。

4.6 马尿酸钠培养基：按GB/T 4789.28中3.9规定。

4.7 过氧化氢酶试验：按GB 4789.28中3.21规定。

4.8 蛋白胨水、靛基质试剂：按GB 4789.28中3.13规定。

链球菌属及其检验「微生物检验」

链球菌属(Streptococcus)细菌，呈链状排列的革兰阳性球菌，个别种成双排列。广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部，大多数不致病，致病菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风湿热、肾小球肾炎等超敏反应性疾病。下面是yjbys店铺为大家带来的关于链球菌属细菌的知识，欢迎阅读。

⒈分类

链球菌的分类方法尚未统一。常用下列两种方法。

⑴根据溶血现象：分为3类。

①甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus)：菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，该类菌又称草绿色链球菌，为条件致病菌。

②乙型溶血性链球菌(β-hemolytic streptococcus)：菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血，该类菌又称溶血性链球菌，致病性强，常引起人和动物多种疾病。

③丙型链球菌(γ-streptococcus)：菌落周围无溶血环，因而又称不溶血性链球菌，一般不致病。

⑵根据抗原结构：按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A、B、

C、D …等20个群。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同又分若干型。如A群根据其M抗原不同，可分成约100个型;B群分4个型。对人致病的链球菌菌株，主要是 A群，多数呈现乙型溶血。

⒉细菌特性

⑴链球菌

① 形态染色球形或椭圆形，直径0.5～1.0μm，链状排列，链的长短与细菌的种类和生长环境有关，在液体培养基中形成的链较长。无芽胞，无鞭毛。多数菌株在培养早期(2～4h)形成透明质酸的荚膜。革兰染色阳性。

链球菌及其检验

第二节链球菌及其检验

目的要求：了解链球菌属生物学特性，掌握其检验程序

重点难点：致病性链球菌的检验程序

课时安排：2

教学过程：

链球菌系指一大类呈链状排列的球菌。本菌广泛分布于自然界，一般存在于水、乳、粪便以及人和动物的病灶内。健康人和动物的皮肤和粘膜上，呼吸道和消化道内往往带菌。有些可引起各种化脓性炎症，猩红热，丹毒，脑膜炎，产褥热以及链球菌变态反应性疾病等，还有马腺疫链球菌，肺炎、乳腺炎、败血症等。

本菌在血液琼脂上培养时，按其对红细胞的落解现象，将其分为三类：；

（1）甲型溶血(又称为α溶血)，菌落周围呈现弱溶血，并有绿色环，放冰箱一夜后，绿色环周围呈现溶血环，

（2）亚甲型溶血(又称为α溶血)在菌落周围无明显溶血境界，溶血环狭小；镜检时，可见部分残留红细胞。

（3）乙型溶血(又称β溶血)菌落周围红细胞完全溶解，并有明显的溶血境界，出现完全透明的溶直环．本型包括大部分对人畜致病的链球菌。

此外，还有的链球菌无任何溶血现象。

链球菌的检验工作不仅在临床和流行病学上具有重要意义，在食品卫生工作上也具有十分重要的意义，一方面根据食品卫生要求，对食品中(如牛乳及乳制品)的致病性链球菌进行检验；另一方面，在可疑为链球菌引起食物中毒暴发时，应通过检验证实该菌与食物中毒的关系。

链球菌在自然界分布广泛，是食物污染的重要原因。文献报导，许多由食物引起的脓毒性咽喉痛和猩红热，是由A群链球菌引起，近年来，由链球菌引起的食物中毒已逐渐为人们所注意。

链球菌性食物中毒，经常由乳、肉类食品所引起，多为α溶血型。β溶血型链球菌引起食物中毒较少。

《链球菌属》

整理课件
链球菌溶素O
对氧敏感、抗原性强，刺激机体产生抗O抗体，抗O试验可用于风湿热等链球菌感染所致超敏反应性疾病的辅助诊断
整理课件
临床意义－－A群链球菌
所致疾病化脓性感染：扁桃体炎、丹毒、蜂窝织炎、淋巴管炎、败血症等猩红热风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎
整理课件
临床意义－－其他链球菌
B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。变异链球菌：与龋齿有密切关系
整理课件
链球菌常规检验
整理课件
标本采集
根据临床标本不同采集不同标本
整理课件
细菌鉴定的基本程序
标本
直接涂片革兰染色镜检
整理课件
分类－－根据抗原构造分类
群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，可将链球菌分为20群（A、B、C、 D、E、D、E等），引起人类感染的链球菌90％为A群。型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四种，根据M 抗原不同，可将A群分为100型。
整理课件
生化反应
触酶试验（－） A群链球菌：杆菌肽敏感试验（+） B群链球菌：CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+） D群链球菌：胆汁七叶苷试验（+）

医院微生物室链球菌属鉴定标准操作规程

XXXX医院

微生物室链球菌属鉴定标准操作规程

1 目的

2 适用范围

3 工作职责

4 检验步骤

4.1 培养特性

4.2 形态与染色

4.3 生化反应

5 药物敏感实验

6 结果报告

7 注意事项

1 目的

规范链球菌属鉴定标准操作规程，确保检验结果准确可靠。

2 适用范围

各类痰、尿、粪、脓液、血、拭子、分泌物、静脉导管、气管穿刺抽取的痰液等标本。

3 工作职责

检验人员严格执行本程序。

4 检验步骤

4.1 培养特性

在血琼脂平板上菌落呈灰暗色、扁平、干燥、边缘不整齐，可出现β-溶血、α-溶血或不溶血，根据上述特征，可初步推测链球菌的种类。

4.2形态与染色

选择平板上的可疑菌落涂片、革兰染色、镜检，观察细菌的形态和染色性，并估计标本中大致的含菌量。镜下可见革兰染色阳性细菌，菌体形态圆或卵圆形，成链状或不规则排列。

4.3 生化反应

生化试验主要包括触酶试验、杆菌肽、CAMP、PYR、6.5% NaCl生长试验、胆汁七叶苷、胆汁溶菌试验、奥普托新敏感试验和多种糖类发酵试验等。可用VITEK自动微生物鉴定系统鉴定链球菌。

5 药物敏感实验

采用K-B法，用血琼脂药敏平板，抗生素选用参考CLSI的标准。

6 结果报告

所有的标本如分离出链球菌，应尽可能鉴定至种，报告“XX菌生长”。

7 注意事项

7.1 操作人员在工作过程中要注意生物安全防护，要戴口罩和手套。

7.2 所有报告结果后的标本及污染物，必须经高压灭菌、焚烧或浸泡杀菌剂中。

链球菌属(Streptococcus)

①急性肾小球肾炎（acute glomerulonephritis）
在咽炎或脓皮病后均可发生，多见于儿童和青少年。发病机理：Ⅲ型超敏反应； Ⅱ型超敏反应；
②风湿热（rheumatism，or rheumatosis）
主要在咽炎后有可能发生，临床表现以关节炎、心肌炎为主。
发病机理：尚未完全清楚，但本病不是链球菌直接侵袭所致。 Ⅲ型超敏反应； Ⅱ型超敏反应。
用SLO检测血清中的ASO，常用于风湿热或肾小球肾炎的辅助诊断，一般ASO效价在1：500以上时有意义。
防治原则
化脓性链球菌感染的一般防治与葡萄球菌相同。对急性咽炎和扁桃体炎患者，尤其是儿童，要彻底治疗，以防止发生急性肾炎和风湿热。青霉素G为防治化脓性链球菌感染的首选药物。用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定的效果。其他抗菌药物，包括头孢唑林钠 (先锋霉素Ⅴ)、头孢拉定(先锋霉素Ⅵ)和头孢哌酮钠 (先锋必)可酌情选用。
第二节
（一）甲型溶血性链球菌
其他链球菌
也称草绿色链球菌（Streptococcus viridans）。
因无多糖抗原，故不属于 Lancefield 血清学分类的任何族。包括多个种，条件致病性，引起下列两种疾病:
1．龋齿（dental caries）常由变形链球菌引起。 2 . 亚急性细菌性心内膜炎 ( subacute bacterial endocarditis) 由此菌引起的亚急性心内膜炎占全部病例50%。

链球菌的检验

注：本方法源自奶牛乳房炎防治技术指南(试行)（农医发[20l0]29号）

引起临床型乳房炎或者亚临床型乳房炎的链球菌常见的有无乳链球菌、停乳链球菌以及乳房链球菌。

1主要试剂和试验方法

CAMP试验：在血琼脂平板上用金黄色葡萄球菌培育物划一条直线，然后将链球菌培育物划一条线，与金黄色葡萄球菌培育物的划线相互垂直，但不要接触，二者相距3-5mm，各链球菌分别菌划线间距l0～20mm。置37℃温箱内培育24h后观看结果。在两划线交界处消失箭头样的溶血区为阳性。

2乳样的采集

选取消失临床症状（或者怀疑为亚临床型乳房炎）乳房炎奶牛，先用温水，再用0.2％新洁尔灭擦洗乳房，最终用70％的酒精擦拭乳头。采样者同时进行手指擦拭消毒。每个乳室先挤去头2～3把奶，以排解污染的杂菌，每头奶牛取乳样5mL于无菌乳样杯中，待检。

3病原菌的分别培育

初步诊断：将少量乳汁涂片、革兰氏染色、镜检。如发觉圆球形革兰氏阳性细菌可怀疑为链球菌。

分别培育：将乳样摇匀，分别取适量接种于养分肉汤（10％血清）、鲜血琼脂、麦康凯琼脂培育基（平板）后，置于37℃温箱

培育24～48h。观看每个平板中细菌生长的状况，记录菌落生长表现。

一般琼脂平板上，37℃，24～72h培育后，未见到菌落。

鲜血琼脂平板上长有灰白色、半透亮表面光滑圆形隆起的小菌落，消失溶血现象，假如是溶血则疑为无乳链球菌，假如为溶血，疑为停乳链球菌或者乳房链球菌，如为溶血，则疑为乳房链球菌。

血清肉汤中生长初呈匀称浑浊，管底消失絮状沉淀，上清变得透亮。

挑取典型菌落涂片、染色、镜检，镜检如呈球状，短链状或者长链状排列，无芽胞、荚膜，革兰氏染色阳性则疑为链球菌。

常见致病菌检验—溶血性链球菌检验

设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a) 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃； b) 冰箱：2 ℃～5 ℃、7 ℃～10 ℃； c) 恒温水浴箱：36 ℃±1 ℃； d) 均质器或无菌乳钵； e) 天平：感量 0.1 g； f) 无菌试管：18 mm×180 mm、15 mm×100 mm； g) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头； h) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL、1000 mL； i) 无菌培养皿：直径 90 mm； j) 全自动微生物生化鉴定系统； k) 无菌手术剪、镊子。
S为小分子多肽，相对分子质量较小，故无抗原性。 S 对氧稳定，对热和酸敏感。
血平板所见透明溶血是由“S”所引起，能破坏白细胞和血小板，给动物静注可迅速致死。注射小鼠腹腔，引起肾小管坏死。
二、生物学特性
（四）致病性链球菌可产生的毒素和酶 2、致热外毒素：曾称红疹毒素(Erythrotoxin)或猩红热毒素
致病因素
• 细菌胞壁成分—脂磷壁酸、M蛋白等 • 外毒素—链球菌溶素、致热外毒素等 • 胞外侵袭性酶—透明质酸酶、链激酶、链道酶
1. 致病物质（1）细菌胞壁成分
脂磷壁酸（Lipoteichoic acid, LTA）
F蛋白（Protein F）黏附素，有利于细菌在宿主体内定植和繁殖

链球菌属检验

编写：常晓林2011-09-0

9 审核：文佳琼2011-11-01 批准：牛华2011-11-01

1．概述

2. 标本类型

血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3. 鉴定

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，单个、成双或链状排列，菌落较小，可出现β溶血、α溶血或不溶血，触酶试验阴性。

3.4.2 根据溶血及关键性试验，对链球菌进行推测性鉴定分群。

A群链球菌（化脓性链球菌）：β溶血，杆菌肽敏感。

B群链球菌（无乳链球菌）：β溶血，CAMP试验阳性，马尿酸钠试验阳性。

C群链球菌（似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等）：马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性，血清学分型、杆菌肽耐药（抑菌试验阴性）。

微生物—病原性球菌的分类鉴定(革兰氏阳性球菌的分类鉴定)

病原性球菌的分类鉴定（革兰氏阳性球菌的分类鉴定）
在自然界中存在着各种各样、形形色色的细菌，这些细菌大小不一、形态各异、数量庞大、种类繁多，但根据
其基本形态，我们可以把细菌分成三大类，即
球菌的种类很多，根据革兰氏染色的不同，可将其分为革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性球菌两大类。
革兰氏阳性球菌主要有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、微球菌等；
链球菌科小菌落多无色素
高链状、成双、
四联状 +/— —
需氧球菌
（微球菌科、链球菌科）
触酶
+
—
微球菌科
链球菌科
一、微球菌科的分类鉴定
微球菌科细菌包括四个属，即微球菌属、葡萄球菌属、动性球菌属和口腔球菌属。其中微球菌属和葡萄球菌属可引起人类各系统的化脓性感染，而动性球菌属和口腔球菌属一般不引起人类疾病。
表皮、腐生、溶血、中间型、猪
1、凝聚因子阳性菌群的鉴定
凝聚因子（阳性）
金葡、施氏、里昂、中间型
鸟氨酸
+
—
里昂葡萄球菌
金葡、施氏、中间型
游离凝固酶
+
—
金葡菌、中间型
施氏葡萄球菌
V—P
+
—
金黄色葡萄球菌
中间型葡萄球菌
2、凝聚因子阴性菌群的鉴定
凝聚因子阴性菌群

链球菌属 Streptococcus的检验

链球菌属Streptococcus的检验

链球菌(Streptococcus)是化脓性球菌的另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部，引起各种化脓性炎症、猩红热、丹毒、败血症、脑膜炎、产褥热以及链球菌变态反应性疾病等。

（一）生物学性状

1、形态与染色

革兰氏阳性；球形或卵圆形，直径0.6～1.0μm。链状排列，短者4-8个细菌，长者有20～30个细菌。菌链的长短与菌种及生长环境有关:

（1）致病菌株较长，非致病菌株较短；

（2）固体培养基多为短链，液体培养基常为长链；

（3）病料多呈长链，但败血症猪体分离的多为成双或短链。

A、B、C、D群中，多数菌株在血液或血清培养基上的

幼龄培养菌或病料中的菌体常见荚膜。除D群一些菌株外，无芽胞, 无鞭毛。

2、培养特性

需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高。普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。最适温度37℃，最适pH7.4-7.6，血琼脂平板上形成细小露滴状、灰白色、圆而微凸、表面光滑、边缘整齐的菌落；不同菌株有不同溶血现象：马腺疫链球菌明显β溶血、化脓链球菌和兽疫链球菌强β溶血、无乳链球菌弱β或α溶血、乳房炎链球菌α或γ溶血、停乳链球菌和肺炎链球菌α溶血。

血清肉汤培养后，有粘稠或絮状沉淀，上液清朗。3、生化反应

发酵简单的糖类，产酸不产气。

对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。

一般不分解菊糖，不被胆盐或1%去氧胆酸钠所溶解。

这两种特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎球菌。能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶。

乙型（β-）溶血链球菌对杆菌肽敏感。