流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义
T细胞亚群进展及临床意义
极大多态性 60-70% 外周淋巴组织 100%
极少多态性 5-15% 黏膜上皮
100%
CD4+CD8- 60-65%
20-50%
CD4-CD8+ 30-35%
20-50%
CD4-CD8识别抗原 MHC限制 辅助细胞 杀伤细胞
<5% 8-17aa 经典MHC分子 Th细胞 Tc细胞
≥50% 简单多肽、HSP、脂类、多糖
STAT1
IFN-γ
T-bet IFN-γ STAT4
NFKB GADD45 p3B
T-bet
IFN-γ+++
STAT4
TCCR/ WSX-1
IL-12Rβ1
IL-12Rβ1
β2
β2
IL-12Rβ1
如果IL-2敲7 除IL-12基因细胞免疫功能下降80%
Pathogen
IL-12
IL-12
IL-23
Balb/C
Th 2 response Death
Th 1 response Recovery
BL/6
Signaling of IL-12 Receptor
p40
p35
1
2
Expression
1: Expressed on Th1, Th2, N.K., and B cells
2: Expressed on activated Naïve T, Th1, and N.K. cells
×
IL-4 inhibits TGF-β-induced Foxp3+ T cells IL-4 actively inhibits the induction of Foxp3 in the presence of TGF-β. The inhibition of Foxp3 expression by IL-4 is mediated through the IL-4-STAT6 pathway. The Foxp3 can directly interact with GATA-3 and this association inhibits GATA-3 mediated transactivation of IL-5, which is one of its target genes.
甲型H1N1流感患者中T细胞亚群检测的意义
意 义 ( P>0 0 ) H1 均 . 5 ; N1普通 组 C +、 m+、 D D C C +
1 2 主 要 试 剂 与 仪 器 .
水平 均 明显高 于 H1 重症 组 ( N1 均P<0 0 ) . 1 。但 从
( N1重症 组 ) 1 例 为普 通 患 者 ( N1普 通 组 ) 外 周 静 脉 血 的 T 细 胞 亚 群 ( D c 、 D 水 平 , 与 4 HI ,6 HI ] c 、 D C ) 并 3例 正 常 对 照组 检 测 结 果 进 行 对 照 分 析 。结 果 H1 重 症 组 C +、 D C +水 平 均低 于正 常对 照 组 ( N1 D C +、 D 均P< 0 0 ) .1 ,
1 例, l 年龄 1 ~ 7 7 6岁 。8例 为 重症 患 者 ( N1 HI 重
2 结 果 各 组 C 、 D C 水 平 的 比 较 见 表 1 D c 、 D 。由
表 1 显示 , N1 H1 重症 组 C +、 D 、 m D C 4 C +水平 均低 + 于正常 对 照组 ( P< 0 0 ) HI 均 . 1 , N1普 通 组 C 、 D
C 4C 8 C 。 D / D / D 荧光 抗 体 、 aiRI e d C l TE B a s试 B
剂盒 ( 国 B 公 司 ) 美 D 。Trc u OuNT 绝 对 计 数 管 、
收 稿 日期 : O O 8 5 2 1 —O 一O
均值 看 , 常对 照组最 高 , N1 症组最 低 , N1 正 H1 重 H1
[] 3
Io , i y , s , ta . n vt o a d i i o c a a t r t h Y Sh n a K Kio M e 1 I i n n v v h r c e - r
T淋巴细胞及其亚群检测的临床意义
CD4+/CD8+的比值
• 评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失 调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态 ,此外,这一比值还可用来监测骨髓移植 病人以免受到急性GVHD的攻击 • CD4/CD8 升高:自身免疫性疾病,如类风 湿性关节炎、SLE。 • CD4/CD8 降低:病毒感染、恶性肿瘤、再 生障碍性贫血等。
辅助体液免疫 抗寄生虫感染
抑制性T细胞(Ts) 主要表面标志:CD8+CD28 功能:对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性T 细胞功能的异常,常与T自身免疫性疾病、第I型 超敏反应等疾病发生有关。 调节性T细胞(Treg) 主要表面标记:CD4+CD25+ 功能:抑制免疫应答 可能的机制有: 直接接触; 分泌抑制性CKs; 此外,抑制CKs分泌,抑制APC等。
(自身抗原肽-MHC分子)
高亲和力结合 不结合或低亲和力结合 凋亡删除 存活
结果:成熟的SP、获得自身(中枢)免疫耐受。
2、T细胞在外周淋巴器官中的分化发育
• 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区 • T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后,最终分化为 具有不同效应功能的T细胞亚群,效应T细胞和记 忆T细胞。
CD4/CD8比值与肿瘤
• 恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。 • 当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免 疫功能更低,预后更差。 • 肿瘤终未期患者CD4/CD8比值异常,可预测 患者存活期。
2、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞
• • • • • • • TCRγδT细胞 数量少,占5% 多为CD4―CD8―(DN细胞);少数为CD8+ 分布于皮肤、粘膜参与固有免疫,是抗感染的第一线细胞 TCRαβT细胞 数量多,CD4+或CD8+(SP细胞) TCR识别谱广,是参与免疫应答的主要细胞群
简述t细胞的亚群及功能
简述t细胞的亚群及功能
T细胞是机体免疫系统中的重要细胞,它可以调节有效地抵制外源感染物的侵害,保护机体免受病原体的入侵。
T细胞可以分为CD4+T 细胞和CD8+T细胞两类,它们在机体免疫系统中扮演着不同的角色。
CD4+T细胞被称为辅助性T细胞,它们能够抑制或促进免疫反应,参与和协调完成机体免疫对抗。
此外,CD4+T细胞还通过分泌细胞因子来促进B细胞和巨噬细胞的增殖和活化,从而发挥促进溶血和凝血的作用,产生特异性抗体。
CD8+T细胞是细胞毒性T细胞,它们主要通过分泌各种细胞因子、抗原相关物质和肽素来增强T细胞的免疫力,从而抑制机体感染病原体的活动,保护机体免受病毒传播的损伤。
另外,CD8+T细胞还可以参与增强巨噬细胞和B细胞的活化及其在抗体识别过程中的作用。
- 1 -。
2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群测定及意义
2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群测定及意义1. 背景糖尿病是一种常见的代谢性疾病,2型糖尿病是其中最常见的类型。
2型糖尿病患者的免疫系统功能可能有所改变,这种改变可能与疾病的发展和治疗有关。
T 淋巴细胞是免疫系统中的一部分,具有多种亚群。
测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以帮助我们更好地了解其免疫系统功能的情况。
2. T淋巴细胞亚群及其意义T淋巴细胞是免疫系统中的一种白细胞,可分为多种亚群。
常见的T细胞亚群有CD4+ T细胞和CD8+ T细胞。
CD4+ T细胞是主要的免疫调节细胞,可以调节其他免疫细胞的功能,包括B淋巴细胞、巨噬细胞和其他T淋巴细胞。
CD8+ T细胞是杀伤病原体感染的细胞,它们可以通过产生毒素来杀死感染病原体的细胞。
2型糖尿病患者的T淋巴细胞亚群可能会发生改变。
例如,2型糖尿病患者的CD4+ T细胞数量可能会减少,导致免疫调节功能下降;CD8+ T细胞数量可能会增加,导致对胰岛细胞的杀伤作用增强,从而进一步损害胰岛功能。
因此,测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以帮助我们更好地了解其免疫系统功能的情况,为糖尿病的防治提供指导意义。
3. 测定方法测定2型糖尿病患者T淋巴细胞亚群可以使用多种方法。
目前常用的方法有流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)。
3.1 流式细胞术流式细胞术是一种能够对细胞进行快速和准确分析的方法。
它可以同时测定多个表面标志物,包括T细胞亚群标志物。
通过识别细胞表面的标志物,可以将T 细胞区分为不同的亚群。
流式细胞术具有高灵敏度、高分辨率、低样本量的优点,广泛应用于生物科学领域。
3.2 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法(ELISA)是一种基于抗体与抗原结合的方法。
通过在试剂盒中加入特定的抗体,可以将T细胞亚群分离出来,并且通过添加染色剂来检测分离出的T细胞亚群的量。
ELISA具有操作简单、成本低的优点,在一定程度上可以取代流式细胞术。
但是,它的灵敏度和准确性可能会受到影响。
t淋巴细胞亚群临床意义
t淋巴细胞亚群临床意义t淋巴细胞是免疫系统中的一类重要细胞,它们在维护机体免疫平衡和抵抗外界病原体方面起着重要作用。
t淋巴细胞根据表面抗原的不同可以分为多个亚群,每个亚群在免疫反应中发挥着不同的作用。
因此,对于t淋巴细胞亚群的临床意义的研究对于诊断和治疗一些疾病具有重要价值。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于辅助诊断某些疾病。
例如,在艾滋病的诊断中,t淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的测定是非常重要的指标。
艾滋病病毒(HIV)可以攻击和破坏CD4+ T细胞,导致机体免疫功能受损。
因此,通过检测CD4+ T细胞的数量,可以判断艾滋病的病情和预测疾病的进展程度。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于评估免疫功能状态。
免疫功能的衰退会导致机体对感染和肿瘤的抵抗力下降。
通过检测t淋巴细胞亚群的比例和数量,可以评估机体免疫功能的状态。
例如,CD4+/CD8+比值的改变可以反映免疫功能的紊乱,提示机体免疫功能受损。
t淋巴细胞亚群的检测还可以用于监测免疫治疗的效果。
对于一些免疫性疾病和恶性肿瘤,免疫治疗已经成为重要的治疗手段。
通过监测t淋巴细胞亚群的变化,可以评估免疫治疗的效果。
例如,在免疫抑制剂治疗过程中,CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的数量和比例的变化可以反映治疗的效果和安全性。
t淋巴细胞亚群的研究还可以为新药的研发和临床应用提供指导。
不同亚群的t淋巴细胞在免疫反应中的作用不同,对于某些疾病的治疗可能具有潜在的作用。
因此,研究t淋巴细胞亚群的功能和相互作用,可以为新药的研发和临床应用提供重要的理论依据。
t淋巴细胞亚群的临床意义非常重要。
通过对t淋巴细胞亚群的检测和研究,可以辅助诊断疾病、评估免疫功能状态、监测治疗效果,并为新药的研发和临床应用提供指导。
随着技术的不断进步和对t 淋巴细胞亚群功能的深入了解,相信其在临床应用中的价值将会越来越大。
希望未来能有更多的研究能够深入探讨t淋巴细胞亚群的临床意义,为人类健康做出更大的贡献。
流式细胞术检测T细胞亚群
4,实验步骤
①
混匀抗凝全血,加100ul全血于试管中,分别加入抗人 CD4-FITC,CD8-PE单克隆荧光抗体各10ul,用振荡器混匀, 避光放置15~30min(室温200C~250C) 加入溶血素2ml溶解红细胞,与振荡器上混匀,室温避 光放置10min,1000rpm离心10min,弃上清液。
三,流式细胞术的基本原理及应用
一) 流式细胞术(FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构
进行快速测量的新型分析技术和分选技术。
1,其基本原理是将悬浮分散的单细胞悬液,经特 异荧光染料染色后,放入样品管。
2,在气体压力的作用下,悬浮在样品中的单细胞悬液形成 样品流垂直进入流式细胞仪的流动室,沿流动室的轴心向 下流动,流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕 细胞悬液的鞘液流,鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆 柱流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直 相交相交点称为测量区。
现代的FCM数据采集和分析技术是从组织化学发 源的,其开拓者是Kamentsky。1965年,他在组织 化学的基础上提出了两个新设想 1)细胞的组分是可以用光光度学来定量测定的, 即分光光度术可以定量地获得有关细胞组织化学 的重要信息。
2)细胞的不同组分可以同时进行多参数测量,从 而可以对细胞进行分类。换句话说,对同一细胞 可以同时获得有关不同组分的多方面的信息,用 作鉴别细胞的依据。
②
③
加入PBS缓冲液(有0.1%的NaN3)1ml洗细胞,1000rpm 离心10min,倾去上清液,加入固定液300ul重悬细胞, BD-FACBCalibur流式细胞仪检测。 细胞的吸入,将装有细胞的FACS测定管放置到机器吸 管孔处,先预检测样品,然后进行实际检测。课根据细 胞的浓度选择测定的速度(低,中或高)。所有的数据 将自动存入微机。
血液透析患者血清T细胞亚群检测及临床意义
将T细胞亚群标记上荧光染料,以便在流 式细胞仪中识别和计数。
抗体特异性识别
利用特异性抗体与T细胞亚群结合,提高 检测的特异性和敏感性。
检测步骤
抗体标记
将特异性抗体与T细胞亚 群结合,并标记上荧光染 料。
样本采集
采集血液透析患者的血清 样本,确保样本无污染。
流式细胞仪检测
将标记好的样本通过流式 细胞仪进行检测,获取T 细胞亚群的计数和比例。
通过监测T细胞亚群的变化,可以评估疾病的发展和预后。
T细胞亚群参与疾病进程
02
T细胞在多种疾病中发挥重要作用,如感染、肿瘤和自身免疫性
疾病。
T细胞亚群可作为治疗靶点
03
针对T细胞亚群的免疫治疗策略正在研究中,可能为疾病治疗提
供新的途径。
04
血液透析患者血清T细胞亚群检测的临床 意义
对疾病诊断的价值
预后判断
根据T细胞亚群的变化情况,可以评 估患者的预后和康复情况,为制定个 体化治疗方案提供依据。
对治疗方案选择的指导意义
免疫调节
了解血液透析患者血清T细胞亚群分布,有助于制定针对性的免疫调节治疗方 案,改善患者的免疫功能。
感染预防
通过检测T细胞亚群,可评估患者的感染风险,为预防性使用抗菌药物或免疫调 节剂提供依据,降低感染发生率。
血液透析患者血清T细胞亚群检 测及临床意义
CONTENTS
• 引言 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测方法 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测结果分析 • 血液透析患者血清T细胞亚群检
测的临床意义 • 结论
01
引言
研究背景
血液透析是治疗肾功能衰竭的重要手 段之一,但长期透析可能导致液透析患者血清T细胞亚 群,可以辅助医生判断患者是否存在 免疫功能异常或感染等情况,有助于 早期发现潜在疾病。
流式细胞术检测T细胞亚群
注意染色后避光,保障细胞免疫荧光的稳定。样品制备好 后如果不能立即上机检测,须置于40C 冰箱避光保存
9,问题与思考 ① FCM的基本原理是什么?
②
如何使用FCM技术来检测一肿瘤患者的PBMC中 的T细胞组成变化? 在操作FACS时,有哪些注意事项? FCM在免疫学中,有哪些具体的运用?请举三 例说明 细胞亚群的检测有何意义?请举例说明
实验原理(2)
T淋巴细胞表面的CD分子与相应荧光素直接标记的抗人CD 分子McAb结合后,细胞表面形成带有荧光色素的抗原抗体 复合物。经激光激发后发出与荧光素相对应的特定波长的 荧光,其荧光强度与被测CD分子表达密度成正比例关系, 由此通过流式细胞仪课检测结合含有相应荧光素标记抗体 的阳性细胞百分率。
③ ④
⑤
Thank you
流式细胞术在细胞化学中的应用的先驱者是Van Dilla 和美国的Los Alamos小组。他们在1967年研制出流液束、 照明光轴、检测系统光轴三者相互正交的流式细胞计的基 础上,首次用荧光Feulgen反应对DNA染色显示出DNA的活 性与荧光之间存在着线性关系,并在DNA的直方图上清楚 地显示出细胞周期的各个时相。Gohde 和Dittrich接着把这 项技术推向实用,他们用流式细胞术测定细胞周期借以研 究细胞药代动力学问题。FCM用于免疫组织化学中的关键 是对细胞进行免疫荧光染色,其它和在细胞化学的应用并 没有多大差异。 流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计 数技术,以及数据的采集和分析技术等。
流式细胞术检测T细胞亚群
组 长: 杜建呈 田 呈(讲解) 小组成员: 李 姚
罗光珍
范成芬 钱洪珍
实 验
一
1 了解流式细胞术的基本发展过程
细胞因子T细胞亚群临床意义讲解
细胞因子T细胞亚群临床意义讲解细胞因子T细胞亚群是一类免疫细胞,可以根据它们所表达的不同细胞因子和功能分为多个亚群。
这些亚群在免疫应答中发挥着不同的作用,并对多种疾病的发展和治疗产生重要影响。
以下将对几个重要的T细胞亚群及其临床意义进行讲解。
1.T辅助细胞(Th)T辅助细胞是最常见的T细胞亚群之一,可以分为Th1、Th2、Th17和Th9等亚群。
各个亚群通过分泌特定的细胞因子,调节和协调其他免疫细胞的活动。
Th1细胞主要分泌IFN-γ等细胞因子,参与清除细胞内病原体感染;Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5和IL-13等细胞因子,调节过敏反应和寄生虫感染;Th17细胞主要分泌IL-17等细胞因子,参与自身免疫炎症反应;Th9细胞主要分泌IL-9等细胞因子,调节免疫细胞增殖和分化。
研究发现,这些T细胞亚群的异常活化、增多或减少与多种疾病的发展密切相关,如病毒感染、自身免疫疾病、过敏性疾病等。
2. 调节性T细胞(Treg)调节性T细胞是免疫系统中一类重要的抑制性细胞,主要通过分泌IL-10和TGF-β等细胞因子来抑制其他免疫细胞的活动,从而维持免疫平衡和自身耐受。
调节性T细胞在减轻免疫性疾病、自身免疫疾病和移植排斥等方面起到了积极的作用。
研究发现,调节性T细胞数量的下降和功能异常与多种疾病的发生和发展相关,如免疫性疾病、肿瘤等。
3.记忆性T细胞记忆性T细胞是经历过免疫应答的T细胞,具有较长的寿命和更快的应答速度。
它们可以快速识别并攻击再次遇到的相同抗原,从而起到保护机体免受再次感染的作用。
记忆性T细胞在疫苗接种和免疫治疗中起到重要作用。
研究发现,不同的记忆性T细胞亚群具有不同的免疫功能和临床意义,比如CD4+记忆性T细胞和CD8+记忆性T细胞在抗肿瘤免疫中具有重要作用。
细胞因子T细胞亚群的研究为临床诊断和治疗提供了新的思路和方法。
通过研究不同亚群的分布和功能,可以识别新的免疫标志物,评估疾病的发展和预后。
cd4t细胞亚群流式分选
cd4t细胞亚群流式分选
CD4+T细胞亚群是人体免疫系统中的重要组成部分,它们在维持免疫平衡和抵御疾病方面发挥着关键作用。
流式分选技术是一种高效、精确的方法,用于分离和鉴定这类细胞。
在流式分选中,首先需要收集所需的细胞样本,通常是外周血或淋巴结穿刺液。
样本经过适当的处理后,会被标记上荧光抗体,这些抗体能够特异结合CD4+T细胞表面的抗原。
抗体标记的细胞通过流式细胞仪进行检测和分析,该仪器能够快速分析大量细胞,并根据荧光信号将它们分成不同的亚群。
流式分选的关键在于抗体标记的选择,以及流式细胞仪的参数设置。
针对CD4+T细胞的不同亚群,需要选择相应的特异性抗体,以便准确地区分不同的细胞类型。
此外,还需要调整流式细胞仪的参数,包括激光波长、滤片、电压等,以确保最佳的检测效果。
通过流式分选,我们可以获得高纯度的CD4+T细胞亚群,这对于研究免疫细胞的生理和病理功能、开发新的治疗方法具有重要的意义。
例如,某些疾病如艾滋病、风湿性关节炎等与CD4+T细胞的功能异常有关,通过流式分选可以深入了解这些疾病的发病机制。
此外,流式分选技术还可以用于监测疾病的进展和治疗反应。
例如,在艾滋病治疗中,通过监测CD4+T细胞亚群的动态变化,可以评估治疗效果和调整治疗方案。
总之,CD4+T细胞亚群的流式分选技术是一种强大的工具,有助于我
们深入了解免疫系统的功能和疾病的发生发展机制。
随着技术的不断进步和应用领域的拓展,流式分选将在未来的医学研究中发挥更加重要的作用。
t细胞亚群的临床意义
t细胞亚群的临床意义T淋巴细胞为细胞免疫的重要指标,B淋巴细胞为体液免疫的重要指标,而NK细胞介导某些肿瘤和病毒感染细胞的细胞毒性反应。
淋巴细胞免疫标志包括T淋巴细胞:CD3、CD4、CD8;B淋巴细胞:CD19;NK细胞:CD16、CD56。
外周血淋巴细胞分类淋巴细胞亚群分析的临床意义:1.CD3:是外周血成熟T淋巴细胞的标志。
对于评价免疫缺陷病(T淋巴细胞缺乏症)、白血病、淋巴瘤的分型诊断有重要意义。
2.CD4:辅助性T淋巴细胞。
是T淋巴细胞的重要标志之一,用于机体免疫功能检测、白血病、淋巴瘤的免疫分型诊断及免疫抑制疗法的评价,同时也是公认的诊断AIDS的指标之一。
CD4淋巴细胞减少见于巨细胞病毒感染、慢性活动性肝炎、恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者,CD4绝对值的变化可用于艾滋病的免疫状态分析、疗效观察及预后判断。
3.CD8:是杀伤性T淋巴细胞,抑制性T淋巴细胞,迟发型超敏反应T淋巴细胞的共同标志。
CD8升高:见于传染性单核细胞增多症、自身免疫病,如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
降低见于:类风湿性关节炎,胰岛素依赖型糖尿病,膜型肾小球肾炎等。
4.CD4/CD8:降低见于:AIDS、恶性肿瘤进行期和复发期、SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、也见于部分感染性疾病。
升高见于:类风湿关节炎活动期、I型糖尿病、肺腺癌、SLE、多发性硬化症、重症肌无力,膜型肾小球肾炎及器官移植排斥反应等。
5.CD19:是外周血成熟B淋巴细胞的标志。
B淋巴细胞参与机体体液免疫应答,CD19+B细胞升高见于自身免疫性疾病,提示机体体液免疫功能增强,见于临床各种细菌性感,B细胞增高也见于B细胞白血病。
CD19+B细胞降低见于传染性单核细胞增多症,见于原发性或继发性免疫功能低下,临床可出现反复发作的呼吸道及消化感染,严重病毒感染,生命垂危时可呈现极度减少。
T淋巴细胞亚群检测临床意义
T淋巴细胞亚群检测临床意义展开全文一、淋巴细胞亚群分析检测淋巴细胞亚群可以了解患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。
某种细胞亚群所占百分比过高或过低,都提示存在免疫功能的紊乱。
主要用于了解恶性肿瘤、遗传性缺陷病、重症病毒感染、自身免疫性疾病患者机体的免疫功能。
二、 HLA-B27检测HLA-B27是HLA-B位点上的一个重要等位原因,它与许多疾病呈强相关,尤其是强直性脊柱炎,是一种多发于青壮年男性(男女比例约3:1)并以中轴关节慢性炎症为主的原因不明的自身免疫性疾病。
临床表现以腰部疼痛、僵直不适为最常见症状。
利用流式细胞仪HLA-B27/CD3双标记来检测T 细胞上HLA-B27表达情况。
三、T细胞绝对值计数及T细胞亚群检测1.总T细胞(CD3 细胞)(1)增高:提示体内的T细胞免疫功能增强,见于临床某些自身免疫性疾病(如SLE)、重症肌无力、慢性活动性肝炎、甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、器官移植排斥反应、T细胞白血病等。
(2)降低:提示体内的T细胞免疫功能减低,见于某些白血病菌、应用免疫抑制药、放疗过程中、先天性细胞免疫缺陷、艾滋病、多发性骨髓瘤、传染性单核细胞增多症,以及过劳等造成机体免疫功能处于相对较低的其他一些情况。
2、T辅助细胞(CD3 CD4 细胞)(1)增高:主要见于临床各种细菌性感染性疾病(2)降低:主要见于临床各种病毒性感染性疾病,以HIV感染时减少最为明显。
也见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、严重创伤、大手术等。
3、T抑制细胞(CD3 CD8 细胞)(1)增高:提示体内存在病毒或胞内寄生菌感染,主要见于HBV、CMV、EB等病毒及结核杆菌感染等。
(2)降低:见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、糖尿病等。
4、CD3 CD4 /CD3 CD8 细胞比值(1)增高:见于某些自身免疫性疾病,如SLE、多发性硬化、器官移植排斥反应等。
(2)降低:见于AIDS、再障、某些白血病、传单、免疫缺陷综合征、某些病毒感染、恶性肿瘤、结核病等。
T淋巴细胞及其亚群检测的临床意义ppt课件
T细胞表面CD分子表达不同
• 1、根据CD4 和CD8 分子表达, 可将成熟T 细胞分为CD4+CD8或CD4-CD8+ 细胞; • 2、根据CD4+细胞所表达CD45 分子异构体,可分为CD45RA+ 和CD45RO+T细胞,两者分别 是初始T 细胞(naive T cell, Tn) 和记忆性T 细胞(memory T cell, Tm)的重要表型。
• 通过T淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情 况下体内免疫功能状态,辅助临床疾病的 诊断,探索疾病的发病机理、病程、预后 ,监测、指导临床治疗方案。
目前主要可以做以下项目的检测
1)T淋巴细胞(CD3+) 2)CD4+细胞 3)CD8+细胞 4)CD4+/CD8+的比值
• 总T淋巴细胞可以结合总B淋巴细胞来判断某些免 疫缺陷和自身免疫性疾病。 • CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病 (如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分 率相对降低,而CD8+群体的百分率相对升高), 自身免疫性疾病(如在SLE病人中,CD8+淋巴细胞 的相对百分比往往会降低,但当使用类固醇药物 治疗时,也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中 ,CD8+淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范 围之外)
1.4-2.5
请各位批评指正
CD3+CD4-CD8+SP CD3单阳性细胞(SP)、获得自身MHC限制性。
T细胞发育过程中的阴性选择 (negative selection)
部位:胸腺皮髓质交界处及髓质区。 过程: SP细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞
T细胞亚群检测对传染性单核细胞增多症的临床意义
T细胞亚群检测对传染性单核细胞增多症的临床意义目的探讨T细胞亚群检测对传染性单核细胞增多症(IM)的临床意义。
方法采用流式细胞术检测IM患儿急性期、恢复期(更昔洛韦治疗后2周)、随访期(治疗后4周)以及正常对照组外周血淋巴细胞亚群,并对结果进行比较。
结果IM患儿急性期以及恢复期较对照组外周血中CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值均明显下降(P 0.05)。
结论外周血T细胞亚群的检测对评估IM患儿的细胞免疫功能状况、辅助诊断和指导治疗具有临床意义。
[Abstract] Objective To study the clinical significance of T lymphocytes in children with infectious mononucleosis (IM). Methods Used flow cytometric analysis to detect IM peripheral blood lymphocyte subtype of 42 patients and 39 cases in normal control group,and then compared with each other. Results Compared with control group,CD8+ T cells increased significantly (P 0.05). Conclusion The variation of T lymphocytes can bring obvious clinical significance to IM patients for evaluation of cellular immune function condition,auxiliary diagnosis and guide therapy.[Key words] Epstein-Barr virus;Infectious mononucleosis;T lymphocytes subtypes;Immune function传染性单核细胞增多症(IM)是一种由EBV感染所致的急性感染性疾病,其主要临床表现为不规则发热、淋巴结炎、咽峡炎并且伴有肝脾肿大及血液中大量异常淋巴细胞的出现等,以儿童较常见[1]。
科研t细胞亚群流式分类 -回复
科研t细胞亚群流式分类-回复科研中,T细胞亚群的流式分类是一个重要的研究内容。
T细胞是免疫系统中的重要细胞群体,对于维持机体的免疫功能和抵御病原体具有至关重要的作用。
在这篇文章中,我们将一步一步回答“T细胞亚群流式分类”的相关问题。
第一步:解读T细胞亚群T细胞是一类重要的淋巴细胞,主要分为两大类:CD4+和CD8+。
在这两大类T细胞中,又存在各种亚群,如Th1、Th2、Th17、Treg等。
这些亚群在免疫应答和疾病发展中具有不同的功能和调控作用。
第二步:流式细胞术基础流式细胞术是一种常用的检测和分析细胞亚群的方法。
它通过标记细胞表面或内部的特定分子,利用流式细胞仪分析细胞的大小、形状和荧光信号,从而获得不同细胞亚群的数量和比例。
第三步:选择适当的标记物在流式细胞术中,选择适当的标记物是非常重要的。
在T细胞亚群的分类中,常用的标记物有CD4、CD8、CD25、Foxp3、IFN-γ等。
通过选择合适的标记物,我们能够准确地鉴定和区分不同的T细胞亚群。
第四步:制备样本和染色为了进行流式细胞术分析,我们需要准备样本和进行染色。
样本可以是外周血、脾脏、淋巴结等组织。
染色过程中,将标记物与样本细胞一起孵育,使得标记物与特定的细胞表面或内部分子结合。
第五步:流式细胞仪的设置和数据采集流式细胞仪是一种专门用于检测和分析细胞的仪器。
在使用流式细胞仪之前,我们需要设置合适的参数,如激发波长、荧光通道、门限等。
在数据采集过程中,流式细胞仪会对染色后的样本进行扫描,获得细胞的荧光信号和数量数据。
第六步:数据分析和图表绘制通过流式细胞仪采集到的数据,我们可以利用计算机软件进行进一步的数据分析和图表绘制。
常见的软件有FlowJo、FCS Express等。
利用这些软件,我们可以计算不同细胞亚群的比例、分布和表达水平,并生成相应的图表和图像。
第七步:结果解读和讨论最后,根据数据分析和图表绘制的结果,我们可以对T细胞亚群进行分类和解读。
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析流式细胞技术(FCM)是70年代发展起来得一种快速对单细胞定量分析的新技术,它借鉴了荧光显微镜技术,同时利用与荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机技术的发展,将荧光显微镜的激发光源改为激光,使之具有更好的单色性与激发效率,因而大大提高了检测灵敏度,同时将固定的标本台改为流动的单细胞悬液,用计算机进行数据处理,因而大大提高了检测速度与统计精确性,而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数,为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段.目前,该技术已经广泛用于基础研究与临床应用,在免疫学,遗传学,血液学,肿瘤学等领域内发挥前重要的作用.本文着重介绍流式细胞仪基本原理及其在临床上的应用.基本原理:流式细胞仪(flow cytometer)是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置,由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物,因此,用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪(fluorescence activated cell sorter,FACS),是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。
其原理是在一组混合的细胞群中,加入特异的针对特定靶细胞表面分子的荧光标记单克隆抗体,这种特异单克隆抗体与其对应的抗原靶分子结合,结合后的荧光标记抗体停留在特定细胞的表面,称为荧光抗体标记的靶细胞;将含有被标记细胞的混合细胞群混悬在一定容积的上样缓冲液中,再通过FACS的进样吸管孔,仪器就会将细胞悬液制成以单细胞排列的微细流束。
当每一个细胞通过仪器的激光束照射时,带在细胞上的荧光就会被相应的激光束激活并发出对应的荧光,通过敏感的光电倍增管即可检测到从细胞表面发出的荧光。
根据测得的散射光(scattered light )可得到细胞大小及颗粒状态的信息;而从荧光的发射强度(fluorescence emissions)则提供了结合在细胞上的抗体信息,进而也被反映了该细胞表面相应分子的表达情况。
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CD4+/CD45RO+
T辅助细胞诱导亚群
检测辅助/诱导记忆T细胞亚群,CD45RO阳性,识别记忆性T细胞;某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量增加,当接受抗病毒治疗后其数量又会下降。
%
CD4+/CD45RA+
抑制细胞诱导亚群
用于检测纯真(Nave)细胞亚群,也叫抑制细胞诱导亚群,CD62L阳性,当某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量下降,而当接受抗病毒治疗后其数量又会增加。在后一种情况下,它有助于区分病人在经抗病毒治疗后,免疫细胞(如CD4)数量增加是由于外周血中现有淋巴细胞亚群扩增而产生的纯真细胞,还是胸腺增生和正直的免疫重建。
④抗HIV药物疗效的重要判断指标。
414-1123 cells/μl
CD3+/CD8+/CD38+(%)
活化CD8细胞
CD38+细胞亚群是一群激活亚群,当HIV感染时高度扩增,对疾病的进程有重要的预后意义。这个细胞亚群对于在HAART中的儿童的60个变量参数中是个强大的指示器,具有极重要的驱势指示作用。
CD3+/HLA-DR+(%)
活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关,可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫,有助于防止感染。
(ห้องสมุดไป่ตู้)
静止总T细胞
项目名称
项目说明
临床意义
绝对数
造血干细胞
流式细胞仪的应用为鉴定和计数造血干细胞提供了一个快速、定量、重复性好的方法。并且实现了造血干细胞的快速,准确的绝对计数。
最近,有人研究在此基础上加上CD38抗体,可以使造血干细胞的富集提高近十倍。
的检测
胞内细胞因子(IFN-γ,IL-4)
Th亚群细胞因子的平衡对于人体正常生理功能的维持发挥着极其重要的作用,细胞因子分泌的失调会导致各种疾病的发生,是很多疾病发生的根源和恶化的动力,将细胞因子调节到平衡状态是治疗这些疾病的重要手段。
1.CD4淋巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
2.CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫病,如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
3.CD4/CD8比值异常:艾滋病患者比值显着降低,多在0.5以下。比值降低的还有:SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。比值增高见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。此外还可用于监测器官移植的排斥反应,若移植后CD4/CD8较移植前明显增加,则可能发生排异反应。
CD8+/CD28+(%)
细胞毒T细胞
检测细胞毒/抑制性T细胞,CD8+/CD28+为细胞毒T细胞,CD8+/CD28-为抑制性T细胞;可作为一些自身免疫性疾病、爱滋病及免疫缺陷的免疫检测指标。CD28亚群随HIV病程发展时数量降低。急性乙肝患者外周血CD8+CD28+细胞呈现明显的升高。
(%)
抑制性T细胞
50-84%
CD3/CD4(%)
T辅助细胞
27-51%
CD3/CD8(%)
T抑制毒细胞
15-44%
CD3-/CD19(%)
总B细胞
5-18%
CD3-/CD16+56(%)
NK细胞
7-40%
CD4绝对数(个/μl)
T辅助细胞绝对计数
CD4+T淋巴细胞记数测定的主要意义:
①用于HIV感染者的疾病分期:凡CD4+T淋巴细胞<200/μl或CD4+T淋巴细胞的百分比<14%的HIV感染者可归入艾滋病。
②判断HIV感染者的临床合并症(各种机会性感染与CD4+T淋巴细胞的相关性),如CD4+T淋巴细胞<200/μl时,很容易发生卡氏肺囊虫肺炎;而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于CD4+T淋巴细胞<50/μl的病人,极少见于CD4+T淋巴细胞>100/μl的病人。
③帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症,例如,当CD4+T淋巴细胞<200/μl时,应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。
流式临床检测项目之T细胞亚群及其意义
淋巴细胞亚群分析项目及其临床意义:
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3
总T细胞
淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标,它可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等),分析发病机制,观察疗效及监测预后有重要意义;
自身免疫病:Th1↑
过敏性哮喘、过敏性皮炎:Th2↑
细胞外感染:Th2↑;细胞内感染:Th1↑
恶性肿瘤:Th2↑
器官移植:急排:Th1↑;
耐受:Th2↑
Th1:±
Th2:±
正常值范围
CD4+/CD25+(%)
调节性T细胞
CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞是维持机体免疫耐受的重要因素之一,它由胸腺产生后输出至外周,并通过主动调节(dominant regulation)的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖,从而调节机体的免疫力,如防止自身免疫性疾病的发生。CD4+C25+Tr细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生。