S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

合集下载

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有:试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白(抗人IgG)、标注笔等。

2.确保实验室实验台面整洁干净,并消毒工作区。

3.检查试剂有效期,避免使用过期试剂。

4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。

二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中,用离心机离心10分钟,以获得澄清的血浆。

2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置,每个孔位加1mL。

3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟,以充分吸附不特异抗体。

4.加入2mL盐水,搅拌均匀,离心5分钟,去除清液。

5.加入4mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

6.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

8.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

10.重复步骤9,使红细胞悬浮,在离心后去除清液。

三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况,判断是否存在凝集现象。

2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。

四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜,保证操作者和实验样品的安全。

2.在操作前检查仪器和试剂的完好性,并遵循试剂的保存和使用说明。

3.严禁口饮、抽烟和进食,确保操作环境清洁。

4.实验后及时清洗仪器和工作区域,妥善处理废弃物。

5.确保实验室通风良好,防止有害气体和防护物质的浓度超标。

6.在实验操作过程中,严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。

以上是交叉配血试验的操作规程,包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。

按照规程进行操作,可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应,使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集解散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能解散,以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管,1支标明“主侧”;另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴;“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

盐水介质法交叉配血试验操作规程

盐水介质法交叉配血试验操作规程

盐水介质法交叉配血试验操作规程一.【原理】红细胞上携带有ABO抗原,当和相应的抗体结合(如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清)之后,就会产生肉眼可见的凝集。

所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediate spin,IS)配血试验。

用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。

二.【器材】0.9%生理盐水,离心机,塑料小试管三.【操作】1.用生理盐水将受血者红细胞制备2%~5%盐水悬液。

(如取分离血清后受血者底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5%受血者盐水悬液)2.从供血者血液保存袋上的辫子中获取少量血样,分离血清,生理盐水三洗红细胞(取红细胞以后,往红细胞内加入无菌生理盐水混匀,离心去除残余白细胞,反复洗涤3次,去除上面的血浆和其他细胞,但是使用生理盐水洗涤红细胞时,不能用力摇晃试管,以免引起红细胞破裂,导致溶血等情况,溶血会影响红细胞的使用。

),并用生理盐将供血者红细胞制备2%-5%盐水悬液。

(如取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与生理盐水1mL 配成5%供血者盐水悬液)3.取洁净塑料小试管2支,1支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或主侧:另1支标明供血者血清(Ds)+受血者细胞(PC)或“次侧”。

4.按标记“主侧”管加受血者血清2滴(100uL),加供血者红细胞悬液1滴(50uL)。

“次侧”管放供血者血清2滴(100uL),加受血者红细胞悬液1滴(50uL)。

混匀,离心机离心1分钟,轻轻晃动试管,肉眼观察结果。

四.【结果判定】1.肉眼观察,如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血,则判读为阳性,无凝集为阴性。

2.对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应,可通过显微镜进一步判读,镜下有红细胞凝集的为阳性反应,无凝集的为阴性。

3.如果试验在室温进行,若有凝集产生,可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开,以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

落石出交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法; 三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;3、批准文号:国药准字H20050061;4、包装规格:500ml/瓶;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起二年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;3、取洁净小试管(10mmx60mm)2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法,通过将两个不同的个体进行交叉配对,以获得具有理想遗传特征的后代。

下面是一份交叉配血操作规程,详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。

一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体,分别为雄性和雌性个体。

2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定,确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。

3.确定交叉配血的时间和地点,保持环境整洁,避免外部因素对实验造成干扰。

4.准备必要的实验器材和试剂,包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。

二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别:使用显微镜或基因鉴定方法,确认选定个体的性别。

2.打开个体体腔:以手术刀或麻醉剂等方法,在个体体腔中打开一个小孔,以便于之后的操作。

3.收集个体血液:用匀浆器缓慢吸取个体血液,将其置于培养皿中。

4.检查血液凝固情况:观察个体血液是否凝固,若已凝固则将其舍弃,重新收集血液。

5.将雄性血液与雌性血液混合:将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合,保持培养皿中的血液充分混合。

6.观察交配反应:观察混合后的血液是否发生凝集或聚集,若出现凝集或聚集现象,说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。

7.鉴定交配结果:使用显微镜或试纸等方法,对交配结果进行鉴定和记录。

8.存储交配后的血液:若需要保存交配后的血液供后续研究使用,将其分装于合适的容器中,并存放于低温环境中。

9.清理实验现场:将使用过的器材和材料进行清理和消毒,保持实验现场整洁。

三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行,以避免外部微生物对实验的污染。

2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中,以免造成血液的凝固或氧化。

3.操作过程中要注意个体的安全,减少对个体的伤害。

4.需要保持操作的准确性和规范性,避免实验中出现误差。

5.实验后要对结果进行及时记录和分析,以便下一步的研究。

6.学习和了解相关法规和伦理要求,确保在动物实验中符合相关规定。

盐水法交叉配血试验标准操作规程

盐水法交叉配血试验标准操作规程

盐水法交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作,确保鉴定结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。

2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。

3、职责:输血科技术人员负责本实验的技术操作。

4、试验方法及原理:4.1试验方法:盐水介质配血法4.2原理:天然类血型抗体与对应红细胞抗原相遇,在室温下的盐水介质中出现凝集反应。

通过离心,观察受血者血清与供血者红细胞以及受血者红细胞与供血者清之间有无凝集现象,判断供血、受血者之间有无ABO血型不合的情况。

5、样本采集及处理血样本为血浆(EDTA-K2抗凝)。

抽取受血者静脉血3~4ml,3000转/分离心2分钟,分离出血浆,并将红细胞配成2%盐水悬液。

将供血者血样以同样方法分离血清(血浆),并配制2%红细胞悬液。

配血所用受血者血样必需是输血前3天内的。

6、操作步骤:6.1 取洁净小试管2支,1支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明供血清(DS)+受血者细胞(PC)。

6.2 按标记主侧管放受血者血清1滴,加供血者红细胞悬液1滴。

次侧管放供血者血清1滴,加受血者红细胞悬液1滴,混匀,以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结果。

6.3观察结果:先观察试管上层液有无溶血,再斜持试管轻轻侧动或轻轻弹动,观察管底反应物有无凝集(必要时用显微镜观察)。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起的凝集反应。

7、结果判断:ABO同型配血,主侧和次侧均无溶血、无凝集表示无输血禁忌,可以输血。

异型配血时,主测无凝集,次测凝集,无溶血,可以输给少量。

输异型血时,如次测不凝集,不可以输血,应重新复查血型或追查其原因。

8、质量控制:每天常规实验前先做室内质控(具体执行《输血科室内质量控制的标准操作规程》),结果在控后方可将常规检查的报告发出。

9、注意事项:9.1季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起的凝集反应。

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改,请根据实际需要进行调整和使用,谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!一、实验背景交叉配血盐水介质法是用来研究细菌耐受性和交叉耐药性的一种常用实验方法。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程交叉配血操作规程交叉配血是一项重要的医学检验技术,用于确保输血的安全和有效性。

以下是交叉配血操作的规程,以确保正确而高效的操作过程。

1.准备工作:(1)确保操作室内环境整洁、无菌,并保持适宜的温度和湿度。

(2)检查所需仪器和试剂的完整性和有效期,并进行必要的校准和验证。

(3)配备所需的个人防护装备,包括手套、口罩、护目镜和无菌衣物。

2.确定受试者和供者的身份:(1)核对受试者和供者的身份信息,包括姓名、年龄、性别和住院号等。

(2)核对受试者和供者的血样标本标签与申请单上的信息是否一致。

3.采集血样:(1)选择适当的采血方式,如肘窝采血或掌指采血。

(2)使用无菌操作的方法,采集受试者和供者的血样,遵循正确的采血顺序和技术要求。

4.制备试验材料:(1)准备所需的试剂和试管,并检查其完整性和有效期。

(2)按照操作要求,将试剂重新悬浮或稀释至规定的浓度,并确保无菌操作。

(3)标记试管上的信息以及反应区域。

5.进行试验操作:(1)取适量的受试者和供者的血液样本,加入相应试管中,并进行试管的混匀。

(2)将试管置于恒温水浴中进行适当的孵育和反应时间,注意控制温度和时间。

(3)根据试管的反应结果,判断受试者和供者的血型是否相符,即是否适宜进行输血。

6.记录和报告结果:(1)将试验结果准确记录在相应的记录表中,包括受试者和供者的血型信息和交叉配血结果。

(2)及时向临床医生报告交叉配血结果,并协助其进行输血决策和操作。

7.清理消毒:(1)完成试验后,及时清理试验台面和使用的试剂和试管。

(2)将用过的试剂和试管进行正确的分类,处理或清洗消毒。

(3)将工作台面进行清洁消毒,保持操作室内的卫生和无菌状态。

8.质量控制和评估:(1)建立严格的质量控制和质量评估制度,对交叉配血操作过程进行监控和评估。

(2)定期检查和校准操作所使用的仪器和试剂,确保其准确性和可靠性。

(3)进行内部和外部质量控制试验,并根据结果进行必要的改进和调整。

交叉配血试验方法盐水介质配血酶介质配血菠萝酶

交叉配血试验方法盐水介质配血酶介质配血菠萝酶

凝 集
不 凝 集
交叉配血的目的

交叉配血试验是输血前必要的步骤,主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要
目的是为了防止输血后产生溶血性反应。

尽可能确保对人和一个病人来说,输了供血者的血 不会引起有害反应,并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
交叉配血试验方法

盐水介质配血 酶介质配血

菠萝酶,无花果酶,木瓜酶

抗球蛋白介质配血

经典方法,加LISS(低离子介质溶液)的方法


聚凝胺介质配血
凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患 者 主 侧
献 血 者 侧
阳 性
离心 次 看结果
阴 性
抗球蛋白配血方法
患 者 主 侧 献 血 者 次 侧
37 ℃

37℃ 水浴30分钟
三洗
抗球蛋白方法配血方法
加 抗 球 蛋 白
阳 性
离心 看结果
阴 性
酶介质配血方法
患 者 主 侧 献 血 者 次 侧 主次侧 均加酶
酶介质配血方法
37 ℃

阳 性 离心 看结果
37℃ 水浴30分钟
阴 性
二、Rh定型 1、使用盐水介质试剂 用LIM配制的红细胞悬液,可以代替 由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质 试剂中进行Rh定型,两者定型方法和效果 均相同。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
患 者 主 侧 献 血 者 次 侧

室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳 性 离 心 主次侧均 加重悬液 看结果
聚凝胺引起 红细胞非特 异性凝集

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法;三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:(一、)主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;(二、)次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、0.9%氯化钠注射液(四川科伦药业股份有限公司)批准文号:国药准字H51021158;有效期:自生产日期之日起三年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA-K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。

2、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

3、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液3% RBC悬液配制:1滴压积RBC + 1.6 ml(40滴)生理盐水3、取一次性试管2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。

次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。

混匀,以1000r/min离心2min,轻轻侧动试管,观察结果。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

盐水法配血操作规程

盐水法配血操作规程

盐水法配血操作规程盐水法配血是一种常用的配血方法,通过在供者血样与受者红细胞悬液中加入不同浓度的盐水溶液来观察凝集反应,判断供者与受者血型是否相容。

下面是盐水法配血的操作规程。

一、实验前准备1. 准备好所需试剂和仪器设备,如盐水溶液、试管、试管架、洗瓶、一次性手套、试管盒等。

2. 校对血型试剂,确保其有效期内,并按照说明书稀释好。

二、操作步骤1. 标记试管用玻璃笔或细标签标记试管,并分别写上供者和受者的信息。

2. 制备供者血样取一滴供者的血液于洗净的试管内,加入一滴净化水,用试管尾轻轻混匀。

3. 制备受者红细胞悬液取一滴受者的血液于洗净的试管内,加入适量的盐水溶液,用试管尾轻轻混匀。

4. 加盐水溶液以1:2、1:4、1:8的比例分别将0.9%的盐水溶液加入供者和受者的试管中,使总体积约为1ml。

轻轻摇动试管,使溶液充分混合。

5. 静置观察把试管放入试管架上,静置5分钟,观察凝集情况。

6. 结果判定观察供者与受者试管中是否出现凝集现象,根据凝集的程度判断血型的相容性。

- 无凝集:相容,可进行输血。

- 片状凝集:相容,可进行输血,但需留意可能存在特殊抗体。

- 线状凝集:不相容,不可进行输血。

7. 清理试管将用过的试管放入洗瓶中,用水冲洗干净,清理试管架。

8. 记录结果根据观察结果,将配血结果记录在相关数据表格中,包括供者和受者的血型信息、凝集情况以及对应的相容性。

三、注意事项1. 操作时要严格按照标准操作规程进行,避免操作失误。

2. 手套和试管架等工具要彻底清洁干净,确保实验的准确性和结果可靠性。

3. 配血试验要进行双重确认,避免操作失误和结果错误。

4. 注意个人防护,避免接触到供者的血液,以避免传染病的传播。

5. 根据实际需要,可进行不同浓度溶液的稀释和配制,以满足不同试验的要求。

通过盐水法配血操作规程,可以判断供者与受者的血型相容性,为临床输血提供可靠的依据,确保输血安全性和有效性。

盐水凝聚胺介质交叉配血试验

盐水凝聚胺介质交叉配血试验

盐水凝聚胺介质交叉配血试验This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020一盐水介质交叉配血试验1. 原理盐水介质配血法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO不配合性。

本试验主要用以检测受血者(献血者)血清(浆)中有无破坏献血者(受血者)红细胞的抗体。

如存在相应的抗体,则交叉管中将发生凝集或溶血现象,此即为交叉不合,反之则交叉相合。

2. 操作(单位:滴)混匀,1000~2000rpm×1~2分钟离心,观察结果。

3.结果观察主、次、混合管均无凝集,无溶血现象,示无配血禁忌,继续下一步进行聚凝胺法或抗人球蛋白法。

主、次、混合管均有凝集和/或溶血现象,示有配血禁忌,需进一步核查,寻找原因。

主、混合管有凝集和/或溶血现象,示有配血禁忌,需进一步检查,寻找原因。

次、混合管有凝集和/或溶血现象,示有部分配血禁忌,需进一步检查,寻找原因。

4.注意事项结果观察时,除肉眼观察外,均需显微镜观察。

要注意真、假凝集的鉴别。

二凝聚胺试验1.原理:凝聚胺(Polybrene)是一种多价阳离子溴化己二甲胺多聚物,具有中和肝素作用:又称肝素灵,溶解后产生许多正电荷,能中和红细胞表面唾液酸所带的负电荷,使红细胞的Zeta电位降低,诱发红细胞产生可逆的非特异性凝聚。

在此过程中,若有IgG分子已直接与红细胞搭桥,当非特异性的红细胞凝聚消散后,只有由抗原抗体引起的搭桥的特异性凝集仍存在。

反应分三个步骤:.红细胞致敏阶段:红细胞在低离子培育基中与相应抗体致敏。

.凝聚阶段:聚凝胺使红细胞非特异性地紧密接近,诱发凝聚现象,因而允许抗体与相应抗原形成桥连。

.再悬阶段:再悬液具有中和聚凝胺的作用,使聚凝胺诱发的非特异性凝聚散开,留下抗原抗体反应所致的特异性凝集不能散开,凝集的强度与抗体的浓度、抗原的浓度及反应的导热特性有关。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。

如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管,离心机,显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后,有效期为:二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。

③复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清:含抗D 血清,氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主,次及对照测试:主测管:加入病人血清(浆)2 滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴,次测管:加入供血者血清(浆)2 滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴,对照管:加入2 滴*4 阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法).docS013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)1. 引言本文档旨在提供交叉配血试验(盐水法)的标准化操作规程,确保试验的准确性和一致性,保障患者输血安全。

2. 目的规范交叉配血试验的操作方法。

确保试验结果的准确性和可靠性。

为临床输血提供科学依据。

3. 适用范围本规程适用于医疗机构中进行交叉配血试验的所有工作人员。

4. 术语和定义交叉配血试验:指在输血前,对献血者和受血者的血液进行相容性测试的过程。

盐水法:一种常用的交叉配血试验方法,通过盐水介质检测红细胞凝集反应。

5. 试验原理简述盐水法交叉配血试验的基本原理,包括红细胞凝集反应和抗体检测等。

6. 试验材料和设备6.1 试验材料新鲜抗凝血(EDTA或肝素)生理盐水标准血清学试剂6.2 试验设备离心机显微镜试管和试管架移液器和吸头7. 操作步骤7.1 样本准备收集献血者和受血者的血液样本。

离心分离血浆和红细胞。

7.2 盐水介质制备按照标准比例制备生理盐水介质。

7.3 主侧试验将受血者血清与献血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.4 次侧试验将献血者血清与受血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.5 结果判断根据凝集反应的有无和强度判断试验结果。

8. 结果记录和报告详细记录试验过程和结果。

按照规定格式编写试验报告。

9. 安全和质量控制9.1 安全措施遵守实验室安全规程。

采取必要的个人防护措施。

9.2 质量控制定期进行试验方法的验证和评估。

记录和分析试验误差。

10. 附录10.1 试验操作流程图提供交叉配血试验操作的流程图。

10.2 试验记录表格提供试验记录的示例表格。

10.3 试验报告模板提供试验报告的示例模板。

11. 结论本规程为交叉配血试验(盐水法)提供了一套标准化的操作流程,有助于提高试验的准确性和一致性,确保患者输血安全。

医院交叉配血试验标准操作规程

医院交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2、适用范围适用于医疗机构输血科(血库)进行交叉配血试验。

3、职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责交叉配血试验。

4、原理使受血者血清(血浆)和红细胞分别与献血者红细胞和血清(血浆)反应,采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应,判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

5、所需设备和试剂5.1设备普通离心机,血型血清学专用离心机,电热恒温水浴箱,普通显微镜。

5.2试剂凝聚胺试剂盒,抗球蛋白试剂。

6、检测环境条件6.1室温应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。

7、步骤与方法7.1受血者、献血者血标本处理7.1.1将受血者血标本离心分离血清(血浆)及红细胞,取2支试管,分别标记受血者的唯一性标识,吸取离心后血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定,执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定,执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。

7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分,剪取献血者血袋上一段留样管,取1支试管标记献血者唯一性标识,将剪下的血标本盛入标识的试管中,离心分离血清(血浆)及红细胞;另取2支试管分别标记献血者唯一性标识,吸取献血者血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.5复检献血者ABO和RhD血型。

7.2盐水介质法交叉配血试验7.2.1取试管2支,分别标记为“主侧”、“次侧”,主侧加受血者血清(血浆)2滴、献血者3%红细胞悬液1滴,混匀;次侧加献血者血清(血浆)2。

盐水介质交叉配血SOP

盐水介质交叉配血SOP

杭州余杭邦尔医院检验科血库标准操作规程盐水介质配血法标准操作规程1(1)首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记。

(2)取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、AC、BC、OC、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管。

对患者血样进行ABO血型(正反定性)和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴;次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO血型复查,以1000g离心15秒,观察结果2.结果判断ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象。

为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法(具体方法见聚凝胺法)或抗人球蛋白法配血。

3.附注3.1冬季室温较低,应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应。

3.2献血者血型因初复检已确定,可只做正定型,但务必要做。

3.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时,要放置到37℃水浴箱中15分钟,然后再离心。

以防未完全析出的纤维蛋白影响判断结果。

3.4 交叉配血试验中发现不配合时,首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误,必要时进行抗体筛选,注意有无特异性同种抗体。

或者病人的血清在室温,37℃或抗人球蛋白血清中凝集所有的其它红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步作有关试验进行鉴定。

3.5 在每次输血之后,受血者和献血者样本应在2℃~6℃保存10天。

如果病人在输血中发生不良反应或在输血后数天内发生迟发性溶血性反应时,保存的病人和献血员的血样就有可能要重新或追加试验,必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前病人血样同时检查以资比较。

7.6 各医院前来配血时,要有输血申请单方可配血。

4.相关文件《中国输血技术操作规程》编制人王渊审核人钟剑版本号第二版颁布日期2018年1月1日文件编号YHBE/SOP-XK-02 页码第 1 页。

交叉配血盐水法的步骤

交叉配血盐水法的步骤

交叉配血盐水法的步骤
嘿,咱今儿就来讲讲这交叉配血盐水法的步骤哈。

你说这交叉配血就好比是给血液找个最合适的“伙伴”,可不能马虎呢!
先呢,得准备好咱要用的东西,就像战士上战场得拿好武器一样。

然后呢,取两支干净的试管,一支标上主侧,一支标上次侧。

这可别标错了呀,不然不就乱套啦!
接下来,在主侧试管里加入受血者的血清和供血者的红细胞悬液,在次侧试管里加入供血者的血清和受血者的红细胞悬液。

这就像是给它们安排座位一样,得放对地方。

然后呀,轻轻混匀这些试管,让它们好好地融合一下。

就好像跳舞一样,得让大家都活动起来,才能知道配合得好不好嘛。

再之后呢,把这些试管放在室温下静置一段时间,这时候可别去打扰它们,让它们自己好好相处相处。

过了一会儿,就该观察结果啦。

要是没有凝集,那就太棒啦,说明这血液“伙伴”找得不错哟!但要是有凝集,那可就得小心啦,得好好再研究研究。

你想想啊,这血液要是没配好,那后果得多严重呀!就好比你穿错了鞋子,那走起来能舒服吗?能不别扭吗?所以说呀,这交叉配血盐水法的步骤每一步都得认真对待,不能有丝毫马虎。

咱平时做事不也得这样嘛,一步一个脚印,踏踏实实地来。

可不能马马虎虎,随随便便的。

这交叉配血盐水法虽然看起来不复杂,但每一个小细节都很关键呢!就像盖房子,一块砖没放好,可能整座房子都不牢固啦。

大家可都得记住这些步骤呀,这可是关乎生命的大事呢!咱可不能掉以轻心,得把好关,让每一次的交叉配血都能准确无误,让需要输血的人能得到最安全的保障。

这多重要呀,是不是?所以呀,可得认真学,认真做,别不当回事儿哟!。

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

落石出交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法;三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;3、批准文号:国药准字H20050061;4、包装规格:500ml/瓶;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起二年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;3、取洁净小试管(10mmx60mm)2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

交叉配血试验标准操作规程(sop)

交叉配血试验标准操作规程(sop)

交叉配血试验标准操作规程一、目的为规范交叉配血实验的技术操作,保证临床输血安全。

二、适用范围日常的交叉配血工作。

三、原理使受血者血清(血浆)和红细胞分别与献血者红细胞和血清(血浆)反应,采用盐水介质法、凝聚胺法,抗球蛋白法检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原-抗体反应,判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

四、步骤和方法1、受血者ABO和RhD血型鉴定,执行《血型鉴定操作规程》。

2、根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择与其ABO和RhD相容血液成分,并复检献血者ABO和RhD血型。

3、分别吸取受血者和献血者30微升压积红细胞到已标示试管内,再分别加入生理盐水1毫升制成3%的红细胞悬液。

4、盐水介质法交叉配血(1) 取试管2支,分别标记为主侧和次侧,主侧加受血者血清(血浆)2滴,献血者3%红细胞悬液1滴,次侧加献血者血清(血浆)2滴,受血者3%红细胞悬液1滴,混匀。

(2) 用血型血清学专用离心机以120g离心1min后取出判断结果。

(3) 结果判断:先观察有无溶血,再轻轻转动试管观察有无凝集。

如无溶血、无凝集,继续进行凝聚胺法交叉配血试验。

若盐水介质法试验有凝集或者溶血时,应复检受血者和献血者ABO和RhD血型。

5、凝聚胺法交叉配血盐水介质法交叉配血试验完成后转做凝聚胺法交叉配血试验【方法原理】利用低离子介质(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(浆)中的抗体结合。

加入凝聚胺可使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后,加入悬浮液,具有中和凝聚胺的作用,使正常红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性;但红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,试验结果为阳性。

【标本采集和处理】1.标本采集:常规静脉采血于分离胶/促凝剂管(血清)、或静脉采血3ml于EDTA.K2(血浆),一般采用血清进行抗体检查。

2.血清标本的采取时间:要求受检者血样一定要在输血前3天内采集,血样必须是新近的。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

落石出
交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)
一、目的
为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法
采用盐水介质试管法;
三、原理
交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;
次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;
自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围
适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备
普通离心机;血型专用离心机;
六、试剂
1、试剂名称:0.9%氯化钠注射液
2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;
3、批准文号:国药准字H2005006143020455;
4、包装规格:500ml/瓶;
5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起二年;
七、检测样本要求
1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤
1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;
2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;
3、取洁净小试管(10mmx60mm)2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。

次侧
管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴。

混匀,以1000r/min 离心1min,轻轻侧动试管,观察结果。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

5、结果判断:
ABO同型配血,主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。

反之不能。

九、质量控制
1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格;
2、每日做室内质量控制,且要求在控。

3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,必要时应镜下观察红细胞形态。

4、交叉配血标本应在2~8℃保存留一周,以备复查。

十、生物参考区间
相合;不相合。

十一、注意事项与干扰因素
1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血,必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血。

2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态;
3、交叉配血试验血样,要求是输血前3天内的血样(预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则
抗体)。

4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天;
5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效;
6、患者使用的药物影响的处理:如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤;如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结;
7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察。

8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的同种抗体存在。

9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。

10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例;
11、血清或血浆中如含有溶血性抗体,则相应红细胞被溶解而不凝集,交叉配血结果阳性,如排除标本中补体干扰因素的影响,可来活后重新试验。

12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体,应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。

十二、参考文献
1、胡丽华主编,临床输血检验,第1版。

中国医药科技出版社,2004;
2、叶应妩,等主编,全国临床检验操作规程,第3版。

东南大学出版社,2006,11;。

相关文档
最新文档