RNA提取自我总结

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植物rna提取实验报告

植物rna提取实验报告植物RNA提取实验报告植物RNA提取是生物学研究中常用的实验技术之一。

通过提取植物细胞中的RNA分子，可以进一步研究植物基因的表达和调控机制。

本实验旨在探究RNA提取的方法和步骤，并对提取得到的RNA进行分析。

一、实验材料和方法1. 实验材料：- 植物样本：可以选择自然生长的植物或实验室培养的植物。

- RNA提取试剂盒：常用的试剂盒有Trizol、RNAiso Plus等。

- 高速离心机：用于离心植物组织和提取液。

- 1.5 mL离心管和离心管架：用于混合试剂和样本。

- 离心管摇床：用于混合试剂和样本。

- 离心管架：用于离心植物组织和提取液。

2. 实验方法：- 准备植物样本：选择新鲜的植物叶片或其他组织，尽量避免使用老化或受损的植物材料。

- 细胞破碎：将植物样本放入1.5 mL离心管中，加入适量的RNA提取试剂。

使用离心管摇床将样本和试剂充分混合，破碎细胞壁释放RNA。

- 提取RNA：离心混合物，将上清液转移到新的离心管中。

加入适量的异丙醇，使RNA沉淀。

再次离心，将上清液倒掉，留下RNA沉淀。

- 洗涤RNA：加入75%乙醇洗涤RNA沉淀，离心后将乙醇倒掉。

重复洗涤步骤，以去除污染物。

- 干燥RNA：将离心管开盖，放置在通风处晾干RNA沉淀。

- 溶解RNA：加入适量的RNase-free水或稀释缓冲液，使RNA溶解。

二、实验结果和分析通过上述步骤，我们成功地提取到了植物样本中的RNA。

为了验证RNA的纯度和完整性，我们使用紫外-可见光分光光度计检测了提取得到的RNA溶液的吸光度。

结果显示，RNA溶液的吸光度比例A260/A280在1.8-2.0之间，符合纯RNA的标准。

这表明我们成功地去除了蛋白质和其他污染物，得到了纯净的RNA样本。

为了进一步确认RNA的完整性，我们进行了琼脂糖凝胶电泳分析。

将提取得到的RNA样本与RNA分子量标准品一同加载到琼脂糖凝胶上，经过电泳后，用紫外灯照射，可以观察到RNA分子的带状图谱。

采核酸个人工作总结

采核酸个人工作总结在过去的一段时间，我全身心投入到了采核酸工作中，积极参与各项任务的完成，收获颇丰。

以下是我对这段工作经历的个人总结：一、责任心与使命感在采核酸工作中，我始终怀着强烈的责任心和使命感，不盲从于表面工作的繁琐，而是真正关心和发挥自己在工作中的作用。

我时刻牢记自己要服务社会大众，把每一份工作都做到尽善尽美，确保采核酸工作的准确性和有效性。

二、团队协作与沟通能力在团队工作中，我主动与同事进行沟通合作，及时解决工作中的问题。

我深知，只有团结一心，才能将工作做得更好，所以我会积极倾听他人的意见建议，与团队成员保持良好的沟通，充分发挥团队协作的优势。

三、工作执行力和细心耐心在采核酸工作中，我经常需要细心严谨，耐心细致地进行操作。

我注重细节，不轻易放过任何一个操作环节，保证每一个操作流程都得到严格执行，确保采样准确无误。

四、自我修正与激励在工作中，我会对自己经验进行反思，并不断修正和提高自己的工作方法和流程，以达到更好的工作效果。

同时，我会不断激励自己，保持良好的工作状态，提高自己的专业水平和工作效率。

五、感恩与收获通过采核酸工作，我更加深刻地理解了感恩与收获之间的关系。

在工作中，我深刻感悟到只有感恩他人的帮助和支持，才能更好地收获成功和成长。

总的来说，采核酸工作给予了我非常宝贵的工作经验和人生感悟，让我更加深刻地认识到了自己的不足和需要提高的地方。

在未来的工作中，我会继续努力提高自己的工作能力和水平，为更好地为社会服务而不懈努力。

由于当前新冠疫情的影响，采核酸工作成为了抗击疫情的关键一环。

在这样的大背景下，我参与了采核酸工作，对自己的工作进行了整理和总结。

在这段时间的工作中，我不仅学会了如何准确采集样本，还了解了核酸检测的具体流程和操作要点。

通过自己的努力，我不断提高了采样和检测的准确性和专业性。

我学会了关于核酸检测的相关知识和技能，包括样本采集、保存、运输、处理等环节，让我对采核酸工作有了更全面的了解。

真核细胞rna提取的实验报告范文3篇

真核细胞rna提取的实验报告范文3篇An experimental report on RNA extraction from eukary otic cells真核细胞rna提取的实验报告范文3篇小泰温馨提示：实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来，经过整理，写成的书面汇报。

本文档根据实验报告内容要求展开说明，具有实践指导意义，便于学习和使用，本文下载后内容可随意修改调整及打印。

本文简要目录如下：【下载该文档后使用Word打开，按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1：真核细胞RNA的提取文档2、篇章2：真核细胞RNA的提取文档3、篇章3：真核细胞rna提取文档篇章1:真核细胞RNA的提取文档一．原理本方法利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，采用有机溶剂抽提去除蛋白质。

通过选择性沉淀RNA分子去除DNA。

二．方法⑴组织样品处理：取新鲜的组织样品称重后，剪碎成约1cm2的组织块直接加入匀浆液中进行RNA提取，或液氮中速冻-70℃保存。

⑵贴壁培养细胞处理：用PBS洗细胞一次，吸干溶液后将培养板快速移至液氮中冷冻后转到-70℃保存；或加入1ml匀浆至培养板中直接裂解细胞，然后将粘稠的裂解液进一步匀浆。

⑶悬浮培养细胞处理：离心收集细胞，用PHS悬浮漂洗再田心收集，若不立即提取RNA，则可经液氮速冻后转至一70℃贮存备用。

2．加l倍体积盐酸胍匀浆液[至准备好的样品细胞中，高速匀浆1min。

3．匀浆液5000g，室温离心10min。

4．将上清移至一个干净离心管中，加入0.1体积的3mol ／L乙酸钠（PH5.2），混匀，再加5体积预冷的乙醇，立即充分混匀，-20℃放置至少2小时。

5．5000g 0℃离心10分钟沉淀核酸，弃上清液，室温干燥。

6、每个提取RNA的组织或细胞样品中，加入l0～15min盐酸胍匀浆液Ⅱ，搅拌溶解。

7．加入2.5体积预冷的乙醇，立即充分混匀，-20℃至少放置2小时。

提取RNA及用DEPC去除RNase的个人总结 [精华]

快速的操作，低温环境，少量取上清主要是抽提之后吸取上清时要特别小心，只要不把蛋白层吸出来就不会有RNase污染。

分子克隆第二版343页,上关于提取RNA所用的玻璃容器的处理方法,是用前180度干烤8小时或更长时间;另一种方法是0.1%的depc水浸泡(37 度2小时),然后灭菌水淋快速的操作，低温环境，少量取上清主要是抽提之后吸取上清时要特别小心，只要不把蛋白层吸出来就不会有RNase污染。

分子克隆第二版343页,上关于提取RNA所用的玻璃容器的处理方法,是用前180度干烤8小时或更长时间;另一种方法是0.1%的depc水浸泡(37度 2小时),然后灭菌水淋洗数次,100度干烤15分钟,然后高压灭菌除去depc.我们实验室一直是用170度考4小时,且不准离人,不准过夜,可能是怕烤箱长时间高温,线路老化会发生危险吧提取RNA所用的枪头，EP管。

直接高压烘干即可。

如果用0.1％DEPC处理，要在DEPC配置后振摇1小时后再浸泡枪头，EP管方有效。

我做的都是将枪头泡在配制好的depc中，摇振过夜，然后倒掉depc注意要到干净，再高压，为了防止仍残留液体可120度干烤一会A.对于提取RNA来说,我认为关键的一点在于实验器材的准备.包括从最初的标本的制备,保存,以及之后的试剂的准备,匀浆器,镊子,tip头的去除RNase处理,尤其是去除RNase的DEPC 处理步骤B. 您在处死大鼠前,先准备好干净的冻存管(用1.5ml的Ep管也可以,就是后面您在从液氮中取出的时候容易爆,您的注意安全),然后将去除的骨骼肌立即用干净的剪刀分成半颗到一颗黄豆大小,装入冻存管后立即投入液氮保存.个人认为在这里使用装标本的管子没必要用DEPC处理C.在提取RNA之前,将试剂(TRIzol)和器械(tip头,镊子,匀浆器)都准备好D.从液氮取出标本后,立即转移进入事先加入TRIzol的匀浆器内(最好置冰上操作),立即匀浆,一直到标本完全碾磨碎,这个时候TRIzol液体成浑浊状,而且匀浆器的壁上没有太多的黏附组织,然后将TRIzol转出,继续后续的步骤.1 Rnase是一种蛋白酶，能够降解RNA。

本人在做RNA抽提实验中总结了一些需要注意的事项

本人在做RNA抽提实验中总结了一些需要注意的事项，以及一些抽提各种RNA的常用方法及步骤。

希望与大家共同分享：高质量的真核生物mＲＮＡ的提取，必须使用ＲＮＡ酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活ＲＮＡ酶同步进行的方法，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的ＲＮＡ酶的活性。

同时，避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量ＲＮＡ酶也很重要。

下面列举避免ＲＮＡ酶法染问题的一些注意事项。

大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注意事项，只是在遇到问题时可能采用其中的一种或几种方法加以解决。

（一）实验程序如不谨慎操作，外源性ＲＮＡ酶可以通过下述途径污染ＲＮＡ制品：（１）玻璃制品、塑料制品和电泳槽灭菌的一次性使用的塑料制品基本上无ＲＮＡ酶，可以不经预处理直接用于制备和贮存ＲＮＡ。

实验室用的普通玻璃器皿和塑料制品经常有ＲＮＡ酶法染，使用前必须于180 ℃干烤８小时或更长时间（玻璃器皿）或用氯仿冲洗（塑料制品）。

另一种方法是用0.1 ％焦碳酸二乙酯（ＤＥＰＣ）的水溶液浸泡用于制备ＲＮＡ的烧杯，试管和其他用品。

ＤＥＰＣ是ＲＮＡ酶的强烈抑制剂，但其作用并不是绝对的（Ｆedorcsak和Ehrenberg,1966）。

灌满ＤＥＰＣ的玻璃或塑料器皿在37℃放置２小时，然后用灭菌水淋洗数次，并于100℃干烤15分钟（Ｋumar和Ｌindberg,1972)。

在15 lbf/in2(1.034x105Pa)高压蒸氯灭菌15分钟。

上述处理可以除去器甲上痕量的ＤＥＰＣ，以防ＤＥＰＣ通过羧甲基化作用对ＲＮＡ的嘌呤碱基进行修饰。

羧甲基化的ＲＮＡ在无细胞体系中翻译效率很低，然而，除非其中大部分嘌呤碱基均被修饰，否则其形成ＤＮＡ：ＲＮＡ或ＲＮＡ：ＲＮＡ杂交体的能力并不明显降低。

用于ＲＮＡ电泳的电泳槽应用去污剂洗干净，再用水冲洗，用乙醇干燥，然后灌满３％的Ｈ２Ｏ２溶液，于室温放置10分钟，然后用0.1 ％ＤＥＰＣ处理水彻底冲洗电泳槽。

最好能留出一些玻璃器皿、塑料制品和电泳槽作上特殊标记，存放在指定地点，为ＲＮＡ实验专用。

总RNA的提取（Trizol法自我总结）

总RNA的提取（Trizol法自我总结）Trizol法提取总RNA（改进的一步法）1.先取1.5ml RNA专用离心管加入1ml Trizol后编号称重；2.研钵清洗干净后用燃烧法燃烧15min左右，然后-20度预冷，在加入植物材料前先加入液氮再次冷冻研钵（同时将药匙预冷），将植物材料50-100mg置于研钵中，加入液氮充分研磨成面粉状，用预冷的药匙小头部位转至1.5ml RNA专用EP管中，立即震荡混匀，裂解5分钟,裂解过程中称重。

注：样品量一定要少于100mg，用药匙的小头加入4次就差不多了；研磨时尽量多加几次液氮，多研磨几次，保证样品研磨得足够细（呈面粉状），不能吸水变潮；研磨加入EP管中后，必须立即摇匀，不能等到样品变潮；用药匙转移样品时，每次少加点，不能将样品粘到管口，加完一个样品后立即用纸擦干净，加下一个样品时药匙必须重新用液氮冷冻。

总之，整个过程中必须保证样品和与样品接触物品的温度足够低，直到样品与Trizol接触为止，以免RNase将RNA降解。

3.离心（4℃，12000×g）10分钟，取上清至一新的EP管中。

4.分相：①加0.2ml的氯仿，用手剧烈摇晃15秒钟，15-30℃静置3分钟；②离心（4℃，12000×g，勿超过12000×g）15分钟。

5.沉淀，并去除多糖：①用200ul的枪取无色相（大约300ul）至一新的EP管中，切勿吸到中间层；②加入等体积异丙醇颠倒混匀（动作缓和），15-30℃静置10min；③离心（4℃，12000×g，勿超过12000×g）10分钟，倾去上清。

6.清洗（2次）：①用200ul的枪吸除多余上清，加1ml冰预冷的75%乙醇，旋涡震荡；②离心（4℃，7500×g）5分钟。

7.用真空泵吸除乙醇，37℃干燥10分钟。

切勿干燥彻底，否则极难溶解。

8.加适量的DEPC?H2O（一般40ul），枪打数次，使沉淀溶解。

提取RNA及逆转录(自己总结)

↓1mlTrizol
迅速匀浆，转至1.5mlEP管中，静置10min
↓加200ul氯仿
在振荡器上剧烈震荡1min,静置10min←
↓
离心（12000rpm，4°C，15min）
↓
吸取上层无色水相，移入另一EP管中（约0.5ml）
↓加等体积异丙醇
混匀2min,静置10min
↓
离心（12000rpm，4°C，15min）
准备工作：
冰盒2个（装冰用于RNA提取过程中的低温保存及试剂冷却）
置物篮
预冷氯仿、异丙醇
记号笔
计时器
离心管架
EP管（1.5ml、0.5ml、0.2ml）
Tip头（大0.5ml、中200ul、小20ul）
移液枪（1ml、200ul、10ul、2ul）
刀片、镊子、酒精灯、打火机、托盘（切标本时用）
纱布（洗匀浆机时擦机头等）
将
5*Reaction Buffer 4ul
RNase Inhibitor 1ul
DNTP Mix 2ul
M-MuLV逆转录酶1ul
依次加入以上的反应液中，混合，→42°C,1h→70°C,5min→已合成的cDNA在-20°C保存
4、其余RNA保存于-80°C冰箱中
RNA提取步骤：
取100mg组织（5ml圆底离心管）
需加入的试剂用DEPC水的量=（C-1）*V【C为测得的浓度，V为RNA体积】
2、取2ul用跑胶，观察RNA的完整性
3、取3ul用于逆转录，（根据不同的试剂盒而定，以下为我们所用的逆转录试剂盒）
Total RNA 3ul
Oligo(dT)18 primer 1ul（混匀65°C，5min）→冰浴
Water,nuclease-free 8ul

RNA的提取总结

一、总的RNA的提取基础知识：(1)DEPC：中文名为焦碳酸二乙酯。

分子式为C6H10O5，分子量为162.14。

是一种强烈的RNA酶抑制剂。

它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。

DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC,在搅拌器上搅拌至完全溶解，即看不到“油珠”为止，DEPC气味芳香浓烈，强挥发性，有毒，需在通风橱中操作。

(2)RNA分子：哺乳动物细胞有3种rRNA：28S、18S和5S。

一个典型的哺乳动物细胞含有10-5μg RNA，其中80～85％为rRNA，其余15～20％主要由各种类型的低分子量RNA组成(tRNA、核内小分子RNA等)，这些高丰度的RNA分子具有确定的大小和核苷酸序列、并能用电泳、密度梯度离心、阴离子交换或高效液相层析等技术分离纯化。

mRNA与上述RNA不同，其含量为细胞总RNA的1～5％，大小和核苷酸序列各不相同，从数百至数千碱基不等。

..多数真核细胞mRNA在其3端均有一poly(A）尾，使得mRNA可以通过挂有oligo(dT)-纤维素的亲和层析柱分离纯化，获得的异源性分子集群的总体，可编码细胞内所有的多肽。

RNA酶变性剂RNA酶：水解RNA。

•含有链内二硫键，使其能抵抗长时间的煮沸和温和变性剂。

另外，变性后可迅速折叠，目前，尚无RNA酶失活的简易办法。

•该酶不需要二价阳离子激活，难以被金属离子鳌和剂（EDTA）失活。

——只好避免污染！用强烈变性剂，如盐酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎，核蛋白由于其二级结构的破坏而从核酸上解离下来。

..RNA酶可耐受多种处理(例如煮沸)而不失活，但却会被4 mo1/L硫氰酸胍和β-疏基乙醇等还原剂所灭活。

因此可联用上述试剂，从组织中提取完整无损的RNA实验准备工作：器具和试剂的消毒..（1）尽可能使用无菌、一次性塑料制品，已标明RNase-Free且未开封过的塑料制品，不必再进行其他处理，对于国产塑料制品，应按下列方法进行处理：在一玻璃烧杯中注入含终浓度为0.1%DEPC的去离子水，将要处理的塑料制品浸泡其中12小时以上，弃DEPC水溶液，适温烘烤干燥已处理过的塑料制品，再经103.4kPa，121℃高压灭菌15分钟，70-80℃烘烤干燥即可使用..（2）所用的玻璃器皿，置于干燥烘箱中200℃烘烤2小时以上。

RNA提取方法范文

RNA提取方法范文一、酚/氯仿法酚/氯仿法是最常用的RNA提取方法之一、该方法利用酚和氯仿两种溶剂的不同密度，能够有效地分离RNA、DNA和蛋白质。

步骤：1.细胞或组织的裂解：将待提取的细胞或组织样品加入含有裂解缓冲液的离心管中，利用离心作用将细胞或组织破碎，释放核酸和蛋白质。

2.加入酚酚：向裂解样品中加入等体积的酚酚，轻轻混合均匀，使细胞成分溶解在酚酚层中。

3.加入氯仿：向上一步得到的混合液中加入等体积的氯仿，轻轻混合均匀，使液体分为上层的酚酚层、中间的DNA和RNA层以及下层的蛋白质层。

4.分离RNA：使用离心将混合液离心，以分离出上层的酚酚层和下层的水相。

此时RNA会留在水相中。

5.沉淀RNA：将水相转移至新的离心管中，加入等体积的异丙醇，静置冷藏30分钟至1小时，以沉淀RNA。

6.洗涤：将RNA沉淀用75%乙醇洗涤至洗脱洁净。

7. 干燥：将洗涤后的RNA干燥或溶于RNase-free水中即可进行后续实验。

二、硅胶柱法硅胶柱法是另一种常用的RNA提取方法，通过硅胶柱和柱洗涤缓冲液的结合，可将RNA与其他杂质有效分离。

步骤：1.细胞或组织的裂解：与酚/氯仿法相同。

2.加入酚酚：与酚/氯仿法相同。

3.加入硅胶柱：将混合液转移到硅胶柱上，使RNA和DNA结合在硅胶柱上，其他组分通过柱下滤液排除。

4.柱洗涤：使用柱洗涤缓冲液多次洗涤硅胶柱，以除去残留的DNA和其他杂质。

5. 洗脱RNA：将洗涤液从柱子中移除，加入洗脱液（如RNase-free 水），静置或离心，以洗脱RNA。

6.干燥：与酚/氯仿法相同。

三、自动化RNA提取系统为提高RNA提取的效率和准确性，许多实验室使用自动化RNA提取系统，如磁珠提取仪或液体处理工作站。

这些系统能够自动完成RNA提取的各个步骤，并且可以进行高通量的RNA提取。

自动化RNA提取系统的优点在于其高度自动化、高效率、高通量和稳定性。

但是，与传统方法相比，它的成本较高，设备和试剂的采购费用较高。

提取rna的实验报告

提取rna的实验报告1. 引言RNA（核糖核酸）是一种重要的生物分子，具有多种功能，如转录、翻译和调控基因表达等。

提取RNA是进行RNA研究的基础和关键步骤之一。

本实验旨在演示提取RNA的方法和步骤，并分析实验结果。

2. 材料与方法2.1 实验材料- 细胞样品：选取适当数量的细胞样品，如细菌、植物或动物细胞。

- 细胞裂解缓冲液：用于破坏细胞膜和核膜，释放RNA。

- 高盐溶液：用于沉淀细胞核和细胞膜碎片。

- 异硫氰酸酯/Lysis Buffer：用于裂解细胞，并保护RNA不被降解。

- 高盐洗涤缓冲液：用于去除DNA、蛋白质和其他污染物。

- 乙酰酚/醇：用于沉淀RNA。

- 乙醇：用于洗涤和纯化RNA。

- RNA稳定性缓冲液：用于保护RNA不被降解。

- RNase-free水：用于溶解和稀释实验材料。

2.2 实验步骤1. 收集细胞样品并转移到离心管中。

2. 加入适量的细胞裂解缓冲液，并进行充分混合。

3. 用离心机在高速旋转下离心细胞样品，使细胞膜和核膜碎片沉淀到底部。

4. 将上清液转移到新的离心管中。

5. 加入异硫氰酸酯/Lysis Buffer并进行充分混合，裂解细胞，并保护RNA不受降解。

6. 用离心机在高速旋转下离心样品，使细胞核和细胞膜碎片沉淀到底部。

7. 将上清液转移到新的离心管中，并加入高盐洗涤缓冲液。

8. 用离心机在高速旋转下离心样品，使杂质沉淀到底部。

9. 转移上清液至新的离心管中，并加入乙酸酚/醇，使RNA沉淀。

10. 用离心机在高速旋转下离心样品，将RNA沉淀到底部。

11. 弃去上清液，加入乙醇洗涤和纯化RNA。

12. 将RNA溶解于RNase-free水中，并在-80C储存RNA。

3. 结果与分析3.1 RNA浓度的测定使用分光光度计测定提取到的RNA的浓度，并计算所提取到的RNA的总量。

在本实验中，我们得到了细胞样品中的RNA浓度为50 ng/μl，总体提取量为200 μg。

3.2 RNA质量的评估通过琼脂糖凝胶电泳分析RNA样品的完整性和纯度。

核酸采集出科自我鉴定小结

核酸采集出科自我鉴定小结
《核酸采集出科自我鉴定小结》
在经历了核酸采集出科的过程中，我深刻体会到了自我鉴定的重要性。

首先，通过核酸采集出科，我学会了如何认真对待自己的身体健康。

在整个过程中，我严格遵守了医生的医嘱，积极配合医护人员进行核酸采集，确保了个人和他人的健康安全。

其次，我发现自我鉴定也包含了对自己内心情感的认知和处理。

在接受核酸采集出科的过程中，我不断地调整自己的情绪，试图保持心情平静和积极。

这让我意识到，自我鉴定不仅仅是外在行为的表现，更是内心态度和情感管理的体现。

最后，通过这次核酸采集出科的经历，我也更加明白了责任和担当的重要性。

每个人都需要对自己的行为负责，尤其在疫情期间更是如此。

自我鉴定就是在每一个细节上不断地审视自己，发现自己的不足，并积极努力改进，以更好地适应和应对环境和挑战。

在未来的生活中，我会继续努力加强自我鉴定能力，做一个负责、成熟、健康的人。

核酸采集出科的经历让我更深刻地认识到，自我鉴定是一个长期的过程，需要不断地学习和修正，才能更好地适应社会和生活的挑战。

RNA提取心得

RNA提取心得一组织RNA提取1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。

2.如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80°或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4°，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后加入一定量的TRIZOL试剂，然后匀浆。

注意：速度不要太快，要匀一会挺一会，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。

如果一次做多个标本的RNA提取，也要这样做，更不能急。

后面的步骤和细胞RNA提取一样。

二培养细胞的RNA提取1.贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清，然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。

悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打评壁，以使细胞基本可以被吹下来。

然后离心去上清，不需要用PBS洗。

2.然后将少量细胞悬液转移到预冷的DEPC泡过的1.5毫升EP管中，然后加入一定量的TRIZOL(细胞多的话加1毫升，细胞少的话加0.5毫升就可以)，然后用枪头吹打混匀5-10分钟。

（如果有时间就继续往下做，如果没有时间，可以把加了TRIZOL后的细胞裂解液冻存到-80°，用的时候提取和新的提取的效果一样。

）在冰上操作。

3.上面的混匀5-10分钟，基本可以使细胞裂解，然后可以进行下面的步骤，详细的步骤我就不介绍了。

我只介绍一些需要注意的地方。

1.一定要注意冰上操作，低温离心。

2.戴口罩和勤换手套，去任何东西都要带着手套去取。

3.每次去器材的时候都要用镊子去夹，镊子要在酒精灯上烧一下。

4.所有的器材都要经过DEPC浸泡后高压后才可以使用，所需要的氯仿，酒精，异丙醇等都保证没有被RNA酶污染，不能用没有泡过DEPC的枪头去提取液体，一定要用DEPC 浸泡过的枪头去吸，如果发现试剂有可能被污染了，要立即更换。

5.吸取上清一定不要吸到中间层的蛋白，如果吸到蛋白一定要重新用氯仿抽提，因为，吸到的蛋白很可能会对RNA产生降解作用。

RNA抽提细节技巧小总结

RNA抽提细节技巧小总结对大部分实验人员来说，RNA抽提比基因组DNA抽提要困难得多。

事实上，现有的RNA 抽提方法/试剂，如果用于从培养细胞中抽提RNA，比抽提基因组DNA更方便，成功率也更高。

那为什么同样的方法用于组织RNA的抽提，总会碰到问题呢？组织RNA抽提失败的两大现象是：RNA 降解和组织内杂质的残留。

关于降解问题，首先看一下为什么从培养细胞中抽提RNA不容易降解。

现有的RNA抽提试剂，都含有快速抑制Rnase 的成分。

在培养细胞中加入裂解液，简单的混匀，即可使所有的细胞与裂解液充分混匀，细胞被彻底裂解。

细胞被裂解后，裂解液中的有效成分立即抑制住细胞内的Rnase，所以RNA得以保持完整。

也就是说，培养细胞由于很容易迅速与裂解液充分接触，所以其RNA不容易被降解；反过来讲，组织中的RNA之所以容易被降解，是因为组织中的细胞不容易迅速与裂解液充分接触所致。

因此，假定有一种办法，在抑制RNA活性的同时能使组织变成单个细胞，降解问题也就可以彻底解决了。

液氮碾磨就是最有效的这样一种办法。

但是，液氮碾磨方法非常麻烦，如果碰到样品数比较多的时候更加会有此感觉。

这样就产生了退而求其次的方法：匀浆器。

匀浆器方法没有考虑细胞与裂解液接触前如何抑制Rnase活性这个问题，而是祈祷破碎组织的速度比细胞内的Rnase降解RNA的速度快。

电动匀浆器效果较好，玻璃匀浆器效果较差，但总的来说，匀浆器方法是不能杜绝降解现象的。

因此，如果抽提出现降解，原来用电动匀浆器的，改用液氮碾磨；原来用玻璃匀浆器的，改用电动匀浆器或者直接用液氮碾磨，问题几乎100%能获得解决。

影响后续实验的杂质残留问题，其原因比降解更多样，解决方法相应也不同。

总之，如果出现降解现象或者组织内杂质残留现象，则必须对具体实验材料的抽提方法/试剂进行优化。

优化大可不必使用您的宝贵样品：可以从市场上购买一些鱼/鸡之类的小动物，取相应部分的材料用于RNA抽提，其它部分用于抽提蛋白质——嘴用来碾磨，肠胃用来抽提。

RNA提取实验总结_百替生物

RNA提取实验总结RNA提取原理：通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。

但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。

RNA提取的一般步骤所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织的有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源RNA酶的有效抑制；有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。

但其中最关键的是抑制ＲＮＡ酶活性。

RNA的提取目前阶段主要可采用两种途径:提取总核酸，再用氯化锂将RNA沉淀出来；直接在酸性条件下抽提，酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA留在水相。

第一种提取方法将导致小分子量RNA的丢失，目前该方法的使用频率已很低。

实验步骤：破碎组织→分离RNA→沉淀RNA→洗涤RNA→融解RNA→保存RNA。

1、破碎组织和灭活RNA酶可以同步进行，可以用盐酸胍、硫氰酸胍、NP-40、SDS、蛋白酶K等破碎组织，加入β-ME可以抑制RNA酶活性。

2、分离RNA一般用酚、氯仿等有机溶剂，加入少量异戊醇，经过此步，离心，RNA一般分布于上层，与蛋白层分开。

3、沉淀RNA一般用乙醇、3M NaAc（pH-5.2）或异丙醇。

4、洗涤RNA使用70％乙醇洗涤，有时，为避免RNA被洗掉，此步可以省掉，洗涤之后可以晾干或者烤干乙醇，但是不能过于干燥，否则不易溶解。

5、融解RNA一般使用TE。

6、保存RNA应该尽量低温。

为了防止痕量RNase的污染，从富含RNase的样品（如胰脏、肝脏）中分离到的RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA，对于长期贮存更是如此。

从大鼠肝脏中提取的RNA，在水中贮存一个星期就基本降解了，而从大鼠脾脏中提取的RNA，在水中保存3年仍保持稳定。

另外，长度大于4kb的转录本对于痕量RNase的降解比小转录本更敏感。

rna提取实验报告

rna提取实验报告RNA提取实验报告引言：RNA（核糖核酸）是生物体内一种重要的核酸分子，具有多种功能，如转录、翻译和调控基因表达等。

在生物学研究中，提取RNA是进行基因表达分析和其他分子生物学实验的重要步骤之一。

本实验旨在通过提取RNA，探究其在基因研究中的应用。

材料与方法：1. 细胞样本：选择适当的细胞样本，如细菌、真菌、植物或动物细胞。

2. 细胞破碎：使用细胞破碎缓冲液将细胞破碎，并释放RNA分子。

3. 酚酸提取：将破碎后的细胞溶液与酚酸混合，形成有机相和水相分离的体系，RNA分子在有机相中富集。

4. 氯仿提取：将有机相与氯仿混合，进一步分离RNA分子。

5. 乙醇沉淀：通过加入乙醇，使RNA分子在乙醇中沉淀下来。

6. 洗涤：用75%的乙醇洗涤RNA沉淀，去除杂质。

7. 干燥：将洗涤后的RNA沉淀在室温下干燥。

结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地从细胞样本中提取到RNA。

提取得到的RNA样品呈现为无色透明的溶液。

为了验证RNA的纯度和完整性，我们使用紫外吸收光谱进行检测。

结果显示，RNA样品在260 nm处具有明显的吸光峰，而在280 nm处的吸光较低，表明RNA的纯度较高，没有明显的蛋白质污染。

进一步，我们使用琼脂糖凝胶电泳分析RNA样品的完整性。

通过电泳，我们观察到RNA样品在琼脂糖凝胶上呈现为明亮的带状条带，表明RNA分子完整且没有明显的降解。

此外，我们还与分子量标准进行比较，确定了RNA样品的分子量范围。

RNA提取的成功为后续的实验提供了基础。

通过提取到的RNA，我们可以进行进一步的研究，如基因表达分析、RT-PCR、cDNA合成等。

RNA的提取是基因研究中不可或缺的步骤，其质量和纯度对后续实验结果具有重要影响。

然而，在RNA提取过程中也存在一些挑战和注意事项。

首先，细胞样本的选择和处理对RNA的提取至关重要。

不同细胞类型和处理方法可能会对RNA的产量和质量产生影响。

其次，实验操作中的严格无菌操作和RNA酶的严格防护是确保RNA提取成功的关键。

提取RNA及用DEPC去除RNase的个人总结精华

提取RNA及用DEPC去除RNase的个人总结精华RNA（核糖核酸）是一种重要的生物大分子，在生物学和分子生物学研究中起着至关重要的作用。

为了能够从生物样本中有效地提取RNA，并且保留其完整性和纯度，科学家们经过不断的探索和实践，发展出了各种提取RNA的方法。

本文将对提取RNA的常用方法进行介绍，并重点讲解如何使用DEPC来去除RNase的干扰。

1. RNA的提取方法在提取RNA之前，首先要选择合适的样本来源，常见的包括细胞、组织和体液等。

接下来，选择不同的提取方法根据样本的性质和研究目的来决定。

1.1 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的RNA提取方法。

它通过酚与细胞溶解膜的相容性，使RNA与DNA、蛋白质和其他杂质分离开来。

细胞或组织经过离心后，上清液中含有RNA，而DNA、蛋白质和其他杂质则被酚溶液中。

接着，氯仿会与酚中的DNA结合而形成沉淀，在离心过程中分离出来。

这样，我们可以获得相对较纯的RNA。

1.2 硅胶柱法硅胶柱法是一种基于RNA与硅胶的亲和性吸附原理的提取方法。

首先，样本经过蛋白酶、混悬液和酚/氯仿处理后，去除了DNA和蛋白质。

然后，将清洗后的样本溶液通过硅胶柱，RNA会在硅胶表面结合，其他杂质则被洗脱。

最后，将纯化后的RNA从硅胶上洗脱下来，即可得到较纯的RNA。

2. DEPC的使用及去除RNaseDEPC（二乙氧基甲基叔丁基苯胺）是一种常见的RNase抑制剂，可以有效地抑制RNase的活性，保护RNA的完整性。

2.1 DEPC的制备DEPC可以通过在无水环境下将其加入去离子水中进行制备。

在加入过程中要慢慢搅拌以确保彻底溶解，并进行蒸馏纯化，最终得到含有DEPC的去离子水。

需要注意的是，DEPC具有较强的致癌性和刺激性，使用时应佩戴个人防护用品，确保安全操作。

2.2 DEPC对RNase的抑制作用DEPC可以与RNase中的组氨酸残基反应，形成氨基甲酸甲酯，从而使RNase失活。

RNA抽提注意事项及各种问题总结

蛋白质的最大吸收峰在280nm处，而核酸的最大吸收峰在260nm处，若有蛋白污染，则OD280会比较大，相应的OD260/280会比较小；至于酚污染的问题，你得根据酚的吸光特性进行分析。

这种说法应该是可靠的，因为核酸存在减色效应，也就是单链的核酸的摩尔吸光系数会比双链的大，对光的吸收能力较强。

核酸被降解后，很难维持高级结构，多以短链形式存在，吸光能力较强。

看RNA有没有降解，最直接的方法就是跑胶检测，看带型是否弥散。

RNA抽提注意事项及各种问题总结－－－3 体会1.本人提取的是扩展青霉的RNA，使用invitrogen公司的TRIZOL，关于提取试剂的选择，我没什么经验，但是我觉得这款产品不错，集各种裂解液和变性剂于一体，对于小量抽提RNA来说是一个十分不错的选择，我隔壁实验室的也有用CTAB方法裂解的，提取了几次，总是被降解，我想自己配制的试剂每个都要经过严格的处理才能用于提取，稍有不慎可能就会导致降解，所以建议做事情不是很细心的使用这种试剂比较合适，操作起来也十分简单。

2.用于抽提核酸的各种器皿的处理：我刚开始提取RNA是十分谨慎的，看到网上写提取过程是极易降解的，所以提取使用的各种器皿都是严格经过处理，玻璃仪器180度烘烤四到五个小时，枪头，EP管用0.1%的DEPC浸泡过夜，然后灭菌121度30分钟重复三次（可以放止残余的DEPC影响核酸质量，对后续试验造成不利影响），结果证明我的谨慎是必要的，我提取出来的RNA没有降解，我都是把RNA放在-80度半个月之后才拿出来作反转录。

因为在提取过程中能直接接触到核酸所处溶液的就是这些器皿，如果最后核酸降解了，你无法系统的查找是什么问题影响，因为不确定因素实在太多了。

我的建议是：初次提取RNA最好把降解的可能性降到最低。

3.液氮研磨和低温：液氮研磨是一种比较好的破壁方法，在极其的低温下，RNase无法发挥活性，可以暂时保护RNA，但是这不是一个一本万利的方法，因为做过试验的同志肯定知道，液氮挥发的是很快的，特别是刚刚开始的时候，几乎倒下去没多会儿就挥发了，如果这时已经破壁，很容易降解，建议：在提取过程中最好两个人操作，一个研，一个倒液氮，并且研钵也可以适当的大点儿，厚点，有利于保持低温。

RNA提取一般步骤总结

通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解.但是由于酶无处不在，随时可能将降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃.文档收集自网络，仅用于个人学习提取地一般步骤所有地提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织地有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源酶地有效抑制；有效地将从和蛋白混合物中分离；对于多糖含量高地样品还牵涉到多糖杂质地有效除去.但其中最关键地是抑制酶活性.地提取目前阶段主要可采用两种途径:提取总核酸，再用氯化锂将沉淀出来；直接在酸性条件下抽提，酸性下与蛋白质进入有机相而留在水相.第一种提取方法将导致小分子量地丢失，目前该方法地使用频率已很低.文档收集自网络，仅用于个人学习实验步骤：破碎组织→分离→沉淀→洗涤→融解→保存.、破碎组织和灭活酶可以同步进行，可以用盐酸胍、硫氰酸胍、、、蛋白酶等破碎组织，加入β可以抑制酶活性.文档收集自网络，仅用于个人学习、分离一般用酚、氯仿等有机溶剂，加入少量异戊醇，经过此步，离心，一般分布于上层，与蛋白层分开.文档收集自网络，仅用于个人学习、沉淀一般用乙醇、（）或异丙醇.、洗涤使用％乙醇洗涤，有时，为避免被洗掉，此步可以省掉，洗涤之后可以晾干或者烤干乙醇，但是不能过于干燥，否则不易溶解.文档收集自网络，仅用于个人学习、融解一般使用.、保存应该尽量低温.为了防止痕量地污染，从富含地样品（如胰脏、肝脏）中分离到地需要贮存在甲醛中以保存高质量地，对于长期贮存更是如此.从大鼠肝脏中提取地，在水中贮存一个星期就基本降解了，而从大鼠脾脏中提取地，在水中保存年仍保持稳定.另外，长度大于地转录本对于痕量地降解比小转录本更敏感.为了增加贮存样品地稳定性，可以将溶解在去离子地甲酰胺中，存于℃.用于保存地甲酰胺一定不能含有降解地杂物.来源于胰脏地至少可以在甲酰胺中保存一年.当准备使用时，可以使用下列方法沉淀：加入至，×离心分钟.文档收集自网络，仅用于个人学习氯化锂法提取总：本方法用高浓度尿素变性蛋白并抑制酶，用氯化锂选择沉淀，其特别适合于从大量样品中提取少量组织，具有快速简洁地长处，但也存在少量地污染及得率不高,小片断丢失地缺陷.文档收集自网络，仅用于个人学习试验试剂：、氯化锂尿素溶液【氯化锂() 尿素、() 加水至，过滤灭菌】、悬浮液【? () ? () 】文档收集自网络，仅用于个人学习试验步骤：、对于大量组织或细胞，则每克组织或细胞加入－氯化锂－尿素溶液，匀桨器高速匀桨分钟；对于少量细胞（个细胞），则每克组织或细胞加入氯化锂－尿素溶液手工匀桨，并转移至管中.文档收集自网络，仅用于个人学习、匀桨液在－℃放置小时后，离心分钟.、取沉淀，加入原匀桨液体积地氯化锂－尿素溶液，重复步骤.、沉淀用原匀桨液体积地氯化锂－尿素溶液复溶后，加入等体积酚氯仿异戊醇在室温放置－分钟并不时摇动混匀，离心分钟.文档收集自网络，仅用于个人学习、取上层水相，加倍体积地乙酸钠（）及倍体积地乙醇，－℃放置小时，离心.文档收集自网络，仅用于个人学习、％乙醇洗沉淀一次.真空干燥.、溶解液溶解沉淀，得，分装，于－℃保存.蛋白酶－热酚法本方法适合于病毒地提取、蛋白酶（终浓度）, [、×缓冲液：? ( )?试验步骤：、提纯病毒液中加入等体积缓冲液、蛋白酶℃分钟.、加入等体积℃预热地酚溶液，轻徭,在℃保温分钟后再轻徭.离心，取上清，氯仿抽提一次.、取上层水相，加倍体积地乙酸钠（）及倍体积地乙醇，－℃放置小时，离心().文档收集自网络，仅用于个人学习％乙醇洗沉淀一次.真空干燥.、溶解液溶解沉淀，得，分装，于－℃保存.植物提取过程中难点地相应对策植物提取过程中难点地相应对策酚类化合物地干扰及对策：许多植物组织特别是植物地果实（如苹果、樱桃、李子、葡萄等）和树木类植物中富含酚类化合物.酚类物质地含量会随着植物地生长而增加.因而从幼嫩地植物材料中更容易提取.此外，针叶类植物地针叶中多酚地含量比在落叶植物地叶子中要高得多.在植物材料匀浆时，酚类物质会释放出来，氧化后使匀浆液变为褐色，并随氧化程度地增加而加深，这一现象被称为褐化效应（）.被氧化地酚类化合物（如醌类）能与稳定地结合，从而影响地分离纯化.但等发现提取地难易程度与材料中酚类物质地总量之间并无相关性，因此认为不是所有地酚类化合物都影响地提取.但一般认为所谓地“缩合鞣质”即聚合多羟基黄酮醇类物质（如原花色素类物质）是影响提取地一类化合物.目前去除酚类化合物地一般途径是在提取地初始阶段防止其被氧化，然后再将其与分开.文档收集自网络，仅用于个人学习防止酚类化合物被氧化地方法：还原剂法：一般在提取缓冲液中加入β巯基乙醇、二硫苏糖醇（）或半胱氨酸来防止酚类物质被氧化，有时提取液中β巯基乙醇地浓度可高达％.(巯基乙醇等还可以打断多酚氧化酶地二硫键而使之失活.等认为在过夜沉淀时加入(巯基乙醇（终浓度％）可以防止在此过程中酚类化合物地氧化.硼氢化钠（）是一种可还原醌地还原剂，用它处理后提取缓冲液地褐色可被消减，醌类化合物可被还原成多酚化合物.文档收集自网络，仅用于个人学习、螯合剂法：螯合剂聚乙烯吡咯烷酮（）和聚乙烯聚吡咯烷酮（）中地－＝基有很强地结合多酚化合物地能力，其结合能力随着多酚化合物中芳环羟基数量地增加而加强.原花色素类物质中含有许多芳环上地羟基，因而可以与或不溶性地形成稳定地复合物，使原花色素类物质不能成为多酚氧化酶地底物而被氧化，并可以在以后地抽提步骤中被除去.用去除多酚时值是一个重要地影响因素，在以上时结合多酚地能力会迅速降低.当原花色素类物质量较大时，单独使用无法去除所有地这类化合物，因而需要与其它方法结合使用.文档收集自网络，仅用于个人学习、硼酸法：如果提取缓冲液中含有硼酸（），其中地硼酸可以与酚类化合物依*氢键形成复合物，从而抑制酚类物质地氧化及其与地结合.这一方法十分有效，所以бб等在提取缓冲液中不再加入其它还原剂.但如果硼酸浓度过高（＞）则会影响地回收率.文档收集自网络，仅用于个人学习、牛血清白蛋白（）法：原花色素类物质与间可产生类似于抗原－抗体间地相互作用，形成可溶性地或不溶性地复合物，减小了原花色素类物质与结合地机会，因此提高了地产量.与结合使用提取效果会更好.由于中往往含有，因而在使用时要加入肝素以抑制地活性.文档收集自网络，仅用于个人学习、丙酮法：等用℃地丙酮抽提冷冻研磨后地植物材料，可以有效地从云杉、松树、山毛榉等富含酚类化合物地植物材料中分离到高质量地. 文档收集自网络，仅用于个人学习酚类化合物地去除：通过或沉淀地方法可以将未被氧化地酚类化合物去除.与、不溶性或结合地多酚，可以直接通过离心去除掉，或在苯酚、氯仿抽提时除去.利用高浓度地丁氧乙醇（％）来沉淀，而多酚溶解于丁氧乙醇中而被除去.然后用含％丁氧乙醇地缓冲液洗涤沉淀以去除残留地多酚.他认为即使多酚被氧化，其氧化产物仍可以溶解在高浓度丁氧乙醇溶液中而被去除，无需再用来处理.文档收集自网络，仅用于个人学习多糖地干扰及对策：多糖地污染是提取植物时常遇到地另一个棘手地问题.植物组织中往往富含多糖，而多糖地许多理化性质与很相似，因此很难将它们分开.在去除多糖地同时也被裹携走了，造成产量地减少；而在沉淀时，也产生多糖地凝胶状沉淀，这种含有多糖地沉淀难溶于水，或溶解后产生粘稠状地溶液.由于多糖可以抑制许多酶地活性，因此污染了多糖地样品无法用于进一步地分子生物学研究.在常规地方法中，通过盐酸胍处理可以部分去除一些多糖；在高浓度或离子存在条件下，通过苯酚、氯仿抽提可以除去一些多糖；通过沉淀也可以将部分多糖留在上清液中.但即使通过这些步骤仍会发现有相当多地多糖与混杂在一起，所以还需要用更有效地方法来解决植物分离纯化时多糖污染地问题.文档收集自网络，仅用于个人学习用低浓度乙醇沉淀多糖是一个去除多糖效果较好地方法.在提取液或溶液中缓慢加入无水乙醇至终浓度％～％，可以使多糖沉淀下来，而仍保留于溶液中.一般都是在植物材料地匀浆液中加入乙醇，如等在从裸子植物地木质茎中提取时，在匀浆上清液中加入乙醇至终浓度％以沉淀多糖.但等在从葡萄浆果组织中提取时，是在用超离心，乙醇沉淀之后地溶液中加入终浓度％乙醇来沉淀多糖地，进一步纯化了样品.文档收集自网络，仅用于个人学习另一个常用地方法是醋酸钾沉淀多糖法.等在提取云杉组织地时在匀浆上清液中加入体积地醋酸钾（）溶液以沉淀多糖；在提取酸模植物花组织地时加入地是体积地醋酸钾（）溶液.等在提取棉花叶和花粉地时是加体积地醋酸钾（）溶液到匀浆液中以除去多糖等杂质.在提取某些植物材料地时，是将上述两种方法结合使用.如бб等在提取芒果中果皮地时，是在匀浆液中加入体积地无水乙醇和体积地醋酸钾溶液以去除多糖杂质.等在去除褐藻地多糖时，单独使用乙醇或醋酸钾都无效，只有两者结合使用效果最佳.文档收集自网络，仅用于个人学习等认为缓冲液中含有高浓度地有助于去除多糖.等在提取松树时，缓冲液中地浓度为和，通过氯仿抽提和乙醇沉淀将与多糖分离.是将胡萝卜种子等材料苯酚提取后地上清液稀释，调节离子浓度至，然后加入体积地丁氧乙醇来沉淀去除多糖.文档收集自网络，仅用于个人学习蛋白杂质地影响及对策：蛋白质是污染样品地又一个重要因素.由于和多酚氧化酶亦属于蛋白质，因而要获得完整地、高质量地就必须有效地去除蛋白杂质.常规地方法是在冷冻地条件下研磨植物材料以抑制等地活性；提取缓冲液中含有蛋白质变性剂，如苯酚、胍、、十六烷基三甲基溴化铵（）等，这样在匀浆时可以使蛋白质变性，凝聚；有地方法是利用蛋白酶来降解蛋白杂质.进一步可以用苯酚、氯仿抽提去除蛋白质.文档收集自网络，仅用于个人学习利用蛋白质与在高氯酸钠溶液中地溶解度不同将它们分离.在％高氯酸钠溶液中，地溶解度大于蛋白质地溶解度，因而将大部分蛋白质沉淀下来.接着在离心上清液中加入两倍体积地无水乙醇，这时能沉淀下来而能溶于％高氯酸钠溶液中地残留蛋白质仍然留在上清液中.这样可以除去绝大部分地蛋白质.文档收集自网络，仅用于个人学习次级代谢产物地影响及对策：从植物组织中提取高质量地另一个难点是许多高等植物组织尤其是成熟组织能产生某些水溶性地次级代谢产物，这些次级代谢产物很容易与结合并与共同被抽提出来而阻碍具有生物活性地地分离.因不能确定这些次级产物具体是什么物质，所以，目前还没有什么特殊地方法来解决这个问题.等综合等地选择性沉淀法、地氯化铯梯度离心法和等地回收方法纯化了松树种子、成熟松树针叶等植物组织地.文档收集自网络，仅用于个人学习由于植物组织特别是高等植物组织细胞内外组成成分地复杂多样性，使得植物组织地提取相对于其它生物材料来说要困难地多.实践中经常会发现，即使同一种植物地不同组织其提取方法会有很大地不同；含有某种干扰因素地不同植物材料，其适用地提取方法可能不同；即使是同一种植物同一种组织材料，但来源于不同基因型植株，其提取方法也可能不一样.所以，对于某一植物或其组织来说，其相应地提取方法必需经过摸索和实践才能确立.文档收集自网络，仅用于个人学习随着植物分子生物学研究领域地拓宽，可以肯定地说，在作为其研究基础地植物材料提取过程中还会出现新地难点，但随着不断地探索和经验地积累，科学工作者们一定会迅速地解决这些难点，为植物分子生物学地发展铺平道路.植物提取中地一些特殊方法文档收集自网络，仅用于个人学习。