几种影响提取东北红豆杉鲜枝叶中紫杉醇含量的干燥方法比较
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不同部位及生长限云南红豆杉中紫杉醇含量测定 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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不同部位及生长年限云南红豆杉中紫杉醇含量测定 【摘要】：目的研究云南红豆杉不同部位中紫杉醇的含量以及不同生长年限对云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量的影响。
方法采用HPLC法,Hypersil ODS2色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水(20∶30∶50),柱温30 ℃,检测波长227 nm,比较云南红豆杉的树皮、针叶、小枝和树根中紫杉醇的含量,以及不同生长年限对云南红豆杉枝叶中紫杉醇含量的影响。
结果云南红豆杉树皮中紫杉醇的含量最高,根中最少,小枝、针叶中含量较高;随着生长年限的增加,云南红豆杉枝叶中紫杉醇的含量逐渐增加。
结论云南红豆杉枝叶的采摘以5年生以上为佳。
【关键词】云南红豆杉紫杉醇高效液相色谱法 Abstract：Objective To study the content of taxol in different parts of Taxus Yunnanensis and the effects of different growth time on taxol content. Method A HPLC method was developed for the detetmination of taxol content in bark, needle, twig, root from Taxus Yunnanensi, and the effects of different growth time. Results Taxol content in bark was the highest, that in root was the lowest and that in needle and twig were higher. Taxol content was higher with the growth time in needle and twig of Taxus Yunnanensi. Conclution It was significant to take taxol from needle and twig of Taxus Yunnanensis which is more than five years growth time. Key words：Taxus Yunnanensis;taxol;HPLC 紫杉醇是从红豆杉树皮中分离的一种二萜类化合物,能有效地治疗晚期乳腺癌、卵巢癌等,被认为是癌症治疗的重大进展之一。
东北红豆杉中紫杉醇的含量分析
２２ 最佳检 测 波长的选择 ．２ ．
进样 ２ 浓度为 １ ｇ Ｌ的紫杉醇标准品，色谱条件 ：Ｃ ８ ０ ．ｍ／ ０ ￣ １ ， ４６×２０ ｍ ． ５ ｍ色谱柱，流速为 １ Ｕ ｉ，检测波长分别为 ２５ ５ ，２５ ０ ｍ ． ｍ ｍｎ ０ ２ ，２４ ７ ，３０ｎ ，柱温为室温，以甲醇 ： ： 水 乙腈 ＝ ５ ３ ：０ ４ ： ５ ２ 为流 动相， 根据不同波长下的峰面积检测结果选择 ２５ ｍ作为分析紫杉醇的检测波长， ２ ｎ 此时峰面积最大 ， 灵敏 度高。 ２ ． 线性 关系的确定 ．３ ２
・
７ ０・
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
２ｌ ０Ｏ年
２１ 提取方 法的建立 ． 目 ，紫杉醇的提取方法多采用有机溶剂提取法。通常以氯仿为溶剂 ，但因氯仿有毒 ， 前 且易挥发 ， 增
加了实验的危险性 ，为改善上述缺点，采用水提取法 。因紫杉醇易溶于热水 ，且在加热过程中又使易于分 解的化合物分解 ，降低其它成分的含量 ，即提高提取纯度 ， 又节约了溶剂 ， 并减少了环境污染 ，同时简化 提纯工艺及提高提取率 ，所以水煮提取法代替有机溶剂萃取的方法是可行的。
过滤得水提液 ， 重复 ４ 次并合并提取液 ， 用闪式浓缩器浓缩后 ， 分别用 乙酸乙酯萃取并浓缩 ， 先后用 ０ ｏ ．ｍ 帆 ５
Ｈｓ ２０ｍ缩得 乙酸 乙酯 浸膏 ，再 用去 离子水 混悬后 以正 己
第 ２ 卷第 ４ １ ６ １ ２ １ 年 ７月 ００
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｑｈ ｒ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｉａ ｖ ｒ ｉ ｏ Ｑｉ Ｕｎ ｙ
不同层积处理方法对东北红豆杉种子后熟过程中贮藏物质的影响
园林花卉 ・ 植 物
北 方 园艺 ２ ０ １ ３ （ １ ４ ） ： ８ ２ ￣ － ． ８ ５
不 同层 积 处 理 方 法对 东北 红 豆杉种 子 后 熟过 程 中贮 藏 物 质 的 影 响
杨 国 会 ，孙 立 梅。 ，邢 力。 ，张 宏 硕
（ １ ． 吉林农 业 科技 学 院 教 务处 ， 吉 林 吉林 １ ３ ２ １ ０ １ ； ２ ． 吉林农 业 科技 学 院 生物 工 程学 院 ， 吉林 吉 林 １ ３ ２ １ ０ １ ）
加、 脂肪含量下降、 可溶性蛋 白质含 量下降， ＧＡ ￣ ２ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ处理结合变温层积效 果最好 ， 说 明赤霉
素处理结合 变温层积能有效促进 东北红豆杉 种子后 熟过程 中贮藏物 质转化 ， 为胚发 育提供 养分
和能量。
关键词 ： 东北红豆杉 ； 种子 ； 层积处理 ； 赤霉素 ； 贮藏物质 中圈分 类号 ： Ｓ ６ ８ ７ ． １ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ －０ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ｌ ４ 一ｏ ０ ８ ２ 一Ｏ ４
摘
要： 以东北红豆杉种子为试材 ， 研 究了不 同浓度 赤霉素 （ Ｇ ） 及 不 同温度层 积处理对 东
北红豆杉种子后熟过程 中种子 贮藏物 质的 影响 ， 以探 讨打破 东北红豆 杉种子休 眠 的有效 途径 。 结果表 明： 结合 Ｇ 处理进行不 同温度层 积处理 ， 与对照相 比 ， 东北红豆杉种 子可溶性糖 含量 增
东北红豆杉资源非常稀 缺 ， 已成 为中国甚 至世 界的珍稀
濒危植物［ ２ ］ 。很 多学 者为 了探讨红 豆 杉属植 物种 子 的
１ ２ 个处 理 组合 ： Ａ １ Ｂ １ 、 Ａ １ Ｂ ２ 、 Ａ１ Ｂ ３ 、 Ａｌ Ｂ ４ 、 Ａ ２ Ｂ １ 、 Ａ ２ Ｂ ２ 、
高效液相色谱法测定红豆杉枝叶中紫杉醇的含量
高效液相色谱法测定红豆杉枝叶中紫杉醇的含量【摘要】目的研究红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定方法，并对人工种植的云南红豆杉中紫杉醇的含量进行调查研究。
方法采用甲醇和二氯甲烷超声提取样品，HPLC梯度洗脱。
结果紫杉醇的理论塔板数为5628，分离度为1.42，拖尾因子为1.01。
回归方程为Y=4×107X+39 942，r=0.999 7，在0.004 2～0.020 1/ml之间的线性关系良好。
日内和日间精密度的RSD均小于2.0%，重复性实验的RSD为0.3%（n=5)，最低检测限为1.0μg/ml，加样回收率为85.19%，84.95%，82.37%，RSD（n=5)分别为3.7%，4.87%，3.6%。
人工种植的云南红豆杉中紫杉醇的平均含量达140mg/kg。
结论该方法缩减了红豆杉药材的前处理步骤，节约了实验时间，适用于红豆杉枝叶中紫杉醇含量测定；同时也证明中国思茅地区人工种植的红豆杉具备提取紫杉醇的价值，有较高的开发利用价值。
【关键词】红豆杉紫杉醇高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo develop a method for measurement of paclitaxel in the taxus from Yunnan Province. MethodsThe medicinal plants was extracted with ethanol and dichloromethane. ResultsThe theoretical plate number of paclitaxel was 5628， the resolution was 1.42 and the tailing factor was 1. 01. The calibration curve was linear in the range of 0.004 2～0.020 1 mg/ml，Y= 4×107 X+39 942， R=0.9997. The intra-day and inter-day precision (RSD) were all less than 2.0%， the recurrence (RSD) was 0.3% (n= 5). The limit of detection was 1.0 μg/ml，the recovery rate was 85.19%，84.95%，82.37% and RSD was 3.7%，4.87%，3.6% (n=5) respectively for paclitaxel. ConclusionOur developed method can shorten the time used for pretreatment， and is a simple and reliable method to determine the content of paclitaxel in taxus. The results also prove that the quality of yew in Yunnan Province is relatively good.Key words：Taxus; Paclitaxel; High-performance liquid chromatography红豆杉属(Taxus spp)植物起源古老，属第三纪孓遗植物，在地球上已生存繁衍250万年，且地理分布区域广泛［1］。
东北红豆杉细胞培养生产紫杉醇的调控研究Ⅱ—交互作用对东北红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响分析
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ｃｓ ｉａｅ． １ ｆ ｖ ｓ ｏ ｏ ｉ ｍ ｃ ｔｔ ｕｐｄ ｔ ． ｈｅ ｅ ｅ ｔ ｆｓ ｄ ｕ ａ ｅ ａｅ× ｓ ｄｕ ｐ ｒ ｖ ｔ Ｓ × ＣＣＣ ．ｓ ｄｕ ａ ｅ ａｅ × Ｓ ｏ ｉｍ ｙ ｕ ａｅ． Ａ ｏ ｉｍ ｃ ｔｔ Ａ． ￣ ｉ ｍ ｃ ｔｔ ｘｔ ｕ ａ ｅ ｅ× ａ ＣＣ Ｃ， ＧＡ，× ＣＣＣ ＂ｅ ｔｄ ｅ ｎ ｄ ｔｉｓ Ｔ ｅ ｒｓ ｌｓｓ ｏ ｄ． ｓ ｂ ｔｎ ｉ／ ｈｆｉ ｏ ｉ ｒ ｓ ｉｄ ｉ ｅ ｌ ． ｈ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｑｅ ｕ ａ ｕ ｓａ ｔ ｎ ｉ ｔ ｎ ｗ ｉｅ ｉ ｂ ｅ ｗ ｅ ｈ ｏ ． ａ ，ｉ ｎ ｖｔ ｌ ｈ ｎ ｔ ｅ ｃ ｎ ａ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ｆｔ ｅ ａ ｄｔｖ ｓ ｉ ｈ ｎ ｅａ ｔｏ ｒ ｅ ｏ ｄ ａ ｃ ｒａｎ ｌｖ １ ｅ ｔａｉ ｓｏ ｈ ｄ ｉ ｅ ｎ ｔ ｅ ｉｔｒｅｉｎ ｗｅ ｂ ｙ ｎ ｅ ｔｉ ｅ ｅ ． ｏ ｉ ｅ Ｋ ｅ ｒ ｓ：ａ ｏ ；ｃ ｌ ｓ ｓ ｅ ｓｏ ｙ ｗｏ ｄ ｔｘ ｌ ｅｌ ｕ ｐ ｎ ｉｎ； ｓｎ ｌ－ａ ｔｒｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｎｅ ａ ｔ ｎ ｉｇ ｅｆ ｃｏ ｘ ｅ ｉ ｎ ；ｉ ｔｒ ｃｉ ｏ
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从红豆杉中分离得到的紫杉醇
从红豆杉中分离得到的紫杉醇深度探讨红豆杉中的紫杉醇1. 紫杉醇的来源及功效红豆杉，作为一种常见的中药材，其树皮和树叶中含有丰富的紫杉醇成分。
紫杉醇是一种有效的抗癌药物，常被用于治疗乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等多种癌症。
其独特的化学结构和抗肿瘤活性使其成为医学界广泛关注的研究对象。
2. 紫杉醇的提取工艺为了从红豆杉中分离得到紫杉醇，需要经过一系列复杂的工艺流程。
通过溶剂萃取或超声波提取等技术，从红豆杉的树皮和树叶中提取出含有紫杉醇的原料。
随后，经过结晶、析出、过滤等步骤，最终得到纯度较高的紫杉醇产品。
3. 紫杉醇的药理作用及应用紫杉醇通过与微管蛋白结合，阻断了肿瘤细胞有丝分裂的过程，从而抑制了肿瘤的生长和扩散。
紫杉醇还对某些肿瘤细胞具有诱导凋亡的作用，进一步增强了其抗肿瘤效果。
紫杉醇被广泛应用于临床治疗，为患者带来了希望。
4. 紫杉醇的研究进展及展望随着科学技术的不断进步，对于紫杉醇的研究也在不断深入。
科学家们通过改进提取工艺、合成新的衍生物、探索新的抗肿瘤机制等手段，致力于提高紫杉醇的药效和减少其不良反应。
未来，紫杉醇有望成为更多癌症患者的救命药物。
总结与回顾本文围绕红豆杉中分离得到的紫杉醇展开深入探讨，首先介绍了紫杉醇的来源及其功效，随后从提取工艺、药理作用和应用等角度进行了详细阐述。
对紫杉醇的研究进展和展望进行了展望。
通过全面深入的分析，使我更加全面、深刻和灵活地理解了红豆杉中的紫杉醇。
个人观点与理解作为文章写手，我对红豆杉中的紫杉醇有着浓厚的兴趣。
紫杉醇作为一种天然的抗肿瘤药物，在临床应用中取得了显著的疗效，对于抗癌事业具有重要意义。
我坚信随着科学的不断进步，对于红豆杉中的紫杉醇的研究会取得更多突破，为医学领域带来更多惊喜。
希望通过我对这一主题的深入探讨，能够为您带来新的启发和理解。
紫杉醇作为红豆杉中的主要活性成分，具有广泛的抗肿瘤活性，被广泛用于治疗乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等多种癌症。
野生东北红豆杉不同部位和不同生长季节叶中紫杉醇含量测定
源的大量破坏。枝条和叶虽然紫杉醇的 含量比根和皮少， 但由于它们是可再生 资源， 且资源量大， 可通过适量采集枝条 和叶来提取紫杉醇， 达到了保护植物的 目的， 而且还可永续利用。 ２．２ 野生 东 北 红 豆 杉 不 同 生 长 季 节 叶 中 紫杉醇含量分析 东北红豆杉在从每年 的 ３ 月 到 １０ 月 期 间 ， 其 针 叶 中 的 紫 杉 醇 含量并不是一尘不变的， 它受不同生长 季节的影响， 紫杉醇在针叶中积累变化 也 较 大 。从 ３ 月 份 气 温 回 升 ， 植 物 开 始 萌 动生长， 东北红豆杉中紫杉醇的含量降 低， 随着植物光合能力的增强， 紫杉醇的 含量也增加， ７ 月份的紫杉醇在叶中积 累 量 最 大 ， 达 到 ０．０２３８４％。 之 后 东 北 红 豆杉叶中的紫杉醇含量降低趋势， 尽管 在随后的几个月内紫杉醇含量又逐渐增 加， 但增加量还是很有限。 ２．３ 结 论 与 讨 论 目 前 ， 获 得 紫 杉 醇 的 可能途径主要有 ３ 个渠道： ①从红豆杉 树皮及其它部位提取； ②化学合成： 半合 成 、全 合 成 ； ③生 物 技 术 ： 组 织 培 养 、基 因 工 程 、微 生 物 生 产［６］。这 几 个 方 面 都 获 得 了不同程度的进展， 但目前市场上紫杉 醇的主要来源还是主要通过红豆杉原植 物提取而获得。通过原植物提取的原料 主要是树皮。由于红豆杉是世界濒危级 植物， 资源极度短缺， 加上巨额商业利润 的驱使， 以牺牲资源为代价的掠夺式的 砍伐和粗放经营， 使红豆杉的资源濒于 灭绝。
东 北 红 豆 杉 （Ｔａｘｕｓ ｃｕｓｐｉｄａｔａ） 又 称 紫 杉 、赤 柏 松 ， 是 红 豆 杉 科 红 豆 杉 属 （Ｔａｘｕｓ） 植物， 是我国东北分布的珍贵第三纪孑 遗树种、国家 Ｉ 级重点保护的野生濒危 植 物 种 类 。６０ 年 代 美 国 学 者 Ｗａｎｉ 报 道 从 红 豆 杉 属 植 物 太 平 洋 紫 杉 （ Ｔａｘｕｓ ｂｒｅ－ ｖｉｆｏｌｉａ Ｎｕｔｔ） 的 树 皮 中 得 到 抗 癌 活 性 物 质 紫 杉 醇 （ Ｔａｘｏｌ） ［１］， １９７１ 年 紫 杉 醇 的 抗 癌 机理被确定。紫杉醇具有促进微管蛋白 聚 合 、抑 制 微 管 解 聚 的 作 用 ， 抑 制 癌 细 胞
提高红豆杉中紫杉醇含量的方法[发明专利]
![提高红豆杉中紫杉醇含量的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ce7a04f1227916888586d789.png)
专利名称：提高红豆杉中紫杉醇含量的方法专利类型：发明专利
发明人：董学会,李召虎,段留生,张明才,何钟佩申请号：CN200510011455.4
申请日：20050321
公开号：CN1685832A
公开日：
20051026
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提高红豆杉中紫杉醇含量的方法属于植物生长调节剂应用技术领域。
该方法是向红豆杉幼树的茎叶上喷施浓度为0.05－0.1mg/L冠菌素。
使用本发明的方法可以调节红豆杉的次生代谢系统，使红豆杉的茎叶紫杉醇含量提高1.6－2.9倍，大幅度提高紫杉醇产量，降低生产成本，提高经济效益。
本发明的方法可产生积极的生态效益：红豆杉属第四纪冰川后残遗物种，天然分布地域狭窄、零散，加之人为偷盗、野蛮采种，使天然红豆杉生存处于濒危边缘，药用取其嫩小枝、叶、根做提取紫杉醇的原料，本发明可以大幅度提高栽培红豆杉的紫杉醇产量，减轻紫杉醇生产的巨额利润所带来环境压力，从根本上保护野生资源。
所以本发明的方法值得推广、普及。
申请人：中国农业大学
地址：100094 北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学农学与生物技术学院
国籍：CN
代理机构：北京路浩知识产权代理有限公司
代理人：向华
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一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法[发明专利]
![一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/504c6e00551810a6f4248629.png)
专利名称：一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法专利类型：发明专利
发明人：丁玉琴,宋国
申请号：CN201510676334.5
申请日：20151019
公开号：CN105153077A
公开日：
20151216
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法，属于植物提取物的分离纯化领域。
本发明针对目前红豆杉枝叶提取过程中，含有大量的色素、蜡质油脂及相似物质等杂质，在分离提取过程中操作复杂，使用大量的有机溶剂，造成环境污染，且提取效率低，提取纯度未达到要用标准，本发明提供了一种从红豆杉叶中提取紫杉醇的方法，本发明首先收集红豆杉主根周围土壤，通过使用水解络蛋白等物质对土壤内的微生物进行培养，再使用红豆杉落叶做营养物，对土壤内的微生物进行筛选，最后与新鲜红豆杉叶进行发酵，再进行甲醇稀释，提纯等步骤得到纯度在99.6％的紫杉醇。
通过实例证明本发明制作成本与传统方法相比，降低了10～20％，易于操作。
申请人：丁玉琴
地址：213164 江苏省常州市新北区百丈工业园环保一路(范群干燥设备有限公司)
国籍：CN
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不同方法测定红豆杉中紫杉醇含量
不同方法测定红豆杉中紫杉醇含量王绪英;杨雨雪;左经会【摘要】采用紫外可见光光度法和高效液相色谱法对红豆杉根、茎、叶的紫杉醇含量进行测定.结果表明:紫外可见光光度法测定的结果偏高;野生红豆杉根的紫杉醇含量最高,茎次之,叶最少.【期刊名称】《六盘水师范学院学报》【年(卷),期】2018(030)006【总页数】6页(P7-12)【关键词】红豆杉;紫杉醇含量测定;高效液相色谱;紫外可见光光度法【作者】王绪英;杨雨雪;左经会【作者单位】六盘水师范学院生物科学与技术学院,贵州六盘水553001;习水县地方税务局,贵州习水564600;六盘水师范学院生物科学与技术学院,贵州六盘水553001【正文语种】中文【中图分类】R284.1红豆杉（Taxuschinensis）是红豆杉属（Taxus）植物，国家I级重点保护野生植物，产于甘肃南部、陕西南部、四川、云南东北部及东南部、贵州西部及东南部、湖北西部、湖南东北部、广西北部和安徽南部（黄山），生于海拔1 000～1 200 m以上的高山上部［1］；在贵州六盘水境内均有分布。
红豆杉全株药用，具有抗癌功能，主治卵巢癌、乳腺癌等［2］。
紫杉醇是从红豆杉树皮中分离得到的一种三环二萜类，性质不稳定，因为分离效率低导致生产成本较高，使得有限的红豆杉资源难以达到有效的利用［3］。
紫杉醇的抗癌机理比较独特，它与微管蛋白聚合，并抑制微管的解聚，从而抑制了细胞的有丝分裂，阻止癌细胞的增殖，最终导致癌细胞死亡［4-5］。
目前被用来治疗晚期卵巢癌、乳腺癌、睾丸胚胎癌、食管癌、非小细胞肺癌等多种癌症，且有重要疗效［6］。
国内对紫杉醇的研究，主要集中在以下方面：林楠利用高速逆流色谱仪分离得到纯度为97.6%的紫杉醇［7］；许素文确定了超声波提取紫杉醇的最佳条件［8］；黎乔采用离子液体提取紫杉醇［9］；李乃伟筛选出曼地亚红豆杉枝叶粗提紫杉醇的最佳方法［10］；王丽霞等发现红豆杉中紫杉醇的含量随着部位和季节的不同而不同［11］。
高效液相色谱法测定红豆杉中紫杉醇及多烯紫杉醇的含量
高效液相色谱法测定红豆杉中紫杉醇及多烯紫杉醇的含量
周斌;周美;王道平;杨小生;王俊杰
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2017(053)007
【摘要】红豆杉（Taxus）是国家一级保护野生珍稀抗癌植物，其主要含有芳香
烃类、二环紫杉烷类、木脂素类及黄酮类等化学成分，其中紫杉醇由于具有较好的抗癌活性而成为研究热点。
红豆杉的树皮、枝叶、根部，甚至种子均可提取紫杉醇，多烯紫杉醇是在对紫杉醇结构改造过程中合成出来的紫杉醇衍生物，主要用于乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌等多种实体肿瘤的治疗，疗效显著，是继紫杉醇后又一种新型抗微管药物。
【总页数】3页(P811-813)
【作者】周斌;周美;王道平;杨小生;王俊杰
【作者单位】贵州健康职业学院,铜仁554300;铜仁市食品药品检验所,铜仁554300;贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵阳550002;贵州省中国科
学院天然产物化学重点实验室,贵阳550002;贵州省中国科学院天然产物化学重点
实验室,贵阳550002;毕节医学高等专科学校,毕节551700
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
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1.高效液相色谱法测定南方红豆杉中紫杉醇的含量
2.高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量
3.高效液相色谱法测定曼地亚红豆杉中紫杉醇的含量
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5.高效液相色谱法测定红豆杉枝叶中紫杉醇的含量
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从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究
从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究
金洪顺;楼惠琴;蒋世春;白骅
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2014(042)010
【摘要】紫杉醇(Taxol)是从红豆杉树皮中分离得到的一种二萜化合物,具有独特疗效的抗癌物,现已被多个国家批准应用于临床治疗卵巢癌和乳腺癌等疾病.由于红豆杉中的紫杉醇含量非常低(仅为0.010％～0.013％),而且大量结构类似的紫杉烷类物质存在,使得紫杉醇的分离纯化非常困难.本文通过对比5种不同提取方法(液液萃取、固相萃取、硅胶层析、氧化铝层析、薄层层析),提出一种新的以氧化铝层析结合固相萃取工艺,具有紫杉醇高回收率的特点.
【总页数】4页(P88-91)
【作者】金洪顺;楼惠琴;蒋世春;白骅
【作者单位】浙江海正药业股份有限公司,浙江台州 318000;浙江海正药业股份有限公司,浙江台州 318000;浙江海正药业股份有限公司,浙江台州 318000;浙江海正药业股份有限公司,浙江台州 318000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ914.1
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1.CO2超临界萃取法提取南方红豆杉中紫杉醇的工艺研究 [J], 卢立琼;戴纯辉
2.东北红豆杉枝叶中紫杉醇提取工艺研究 [J], 李华
3.曼地亚红豆杉叶中紫杉醇提取工艺研究 [J], 黄庆柏;韩凌;周雪梅
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5.红豆杉中紫杉醇的提取和纯化工艺研究 [J], 许素文;胡佳丽;郭军;胡传跃;申湘忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
红豆杉里紫杉醇的提取分离及分析1
红豆杉里紫杉醇的提取分离及分析1.实验材料与仪器1.1 实验材料新鲜红豆杉枝叶（树枝、树叶和树皮）。
1.2 实验试剂主要试剂：试剂名称厂家乙酸乙酯（分析纯）北京化工厂丙酮（分析纯）北京化工厂甲醇（分析纯）北京化工厂石油醚（分析纯）北京化工厂三氯甲烷（分析纯）北京化工厂二氯甲烷（分析纯）北京化工厂乙酸铵缓冲液（分析纯）北京化工厂乙腈（分析纯）北京化工厂去离子水（自制）北京化工厂紫杉醇标准品（纯度≧97%）中国生物药监所1.3 实验仪器主要仪器：仪器名称厂家XZ-6A 旋转蒸发器北京科龙仪器公司CFSJ-8A粉碎机江苏瑰宝JA 3003A电子天平上海精天电子仪器有限公司岛津LC-6A高效液相色谱仪CQ-500超声波振荡器常压层析系统Pharmacia公司2.实验试液制备2.1 标准品溶液制备准确称取紫杉醇（Taxol）标准品（纯度≧97%）5.00mg于50mL 容量瓶，加入甲醇定容摇匀，配制成0.10mg/mL的标准溶液。
用HPLC 检测。
2.2 样品试液制备采集新鲜红豆杉枝叶，清水洗净，于60℃烘箱内干燥至恒重，用粉碎机粉碎，过14目筛。
准确称取过筛后的样品5.00g于50mL广口具塞三角瓶内，加入50mL乙酸乙酯-丙酮混合液（体积比1:1，下同），超声萃取30min，取上清液。
沉淀再加50mL乙酸乙酯-丙酮混合液超声萃取30min，取上清液，合并两次上清液，将提取液离心15min，转速4000r/min。
离心后取上清液加入5%活性炭粉，充分搅拌，待色素吸附完后进行真空抽滤，滤液用旋转蒸发器在40℃下蒸发至剩余少量液体。
加入石油醚（体积比1:1）充分振荡30min，静置5min，脱脂。
萃取余液用三氯甲烷（体积比2：1）充分振荡30min，萃取滤液在30℃下减压浓缩蒸干，然后用15mL甲醇溶解，制备液经0.45μm过滤器过滤，得浸膏滤液，HPLC外标法测定紫杉醇含量，均分5等份，作好标识，备用。
3.实验方法3.1 分离方法3.1.1 液-液萃取取浸膏滤液，加入二氯甲烷（浸膏/二氯甲烷的重量比为1:50），充分溶解，再加入与二氯甲烷等量的水。
紫杉醇提取实验方案
紫杉醇提取实验方案实验名称:紫杉醇的提取实验探究条件:1、原材料:红豆杉树枝、红豆杉树皮、红豆沙树叶、三者混合;2、烘干时的温度:40?、60?、80?;3、粉碎状态:完全不粉碎、粉碎至40目、粉碎至60目、粉碎至80目、粉碎至100目; 4、有机溶剂选取:95%甲醇、95%乙醇、乙酸乙酯:丙酮=1:1;5、层析介质选取:硅胶、氧化铝、C18、苯基柱、树脂。
实验器材:实验仪器:实验原料:实验过程1、红豆杉枝叶、树皮、树枝:采集新鲜的红豆杉树枝、树皮、叶，用清水洗净;2、干燥与粉碎:于60?烘箱内干燥至恒重，用粉碎机粉碎至100目，分别准确称取过后的各种样品2g，置50mL磨口具塞三角瓶中; 筛3、有机溶剂提取:加入95%乙醇20mL，超声萃取30min，留上清液，沉淀复加20mL 95%乙醇，重复操作;4、浓缩:浓缩温度控制在45?5?，真空度控制在-0.07?00.1Mpa，浸提液浓缩至比重达到0.95~1.05时，将浓缩液放出到专用的储罐中;5、萃取:将计量后的浸提浓缩液注入萃取罐，加入醋酸乙酯(按物料:醋酸乙酯=1:1)，萃取三次，将醋酸乙酯层重液排入指定贮罐，将贮罐内的醋酸乙酯液抽入浓缩锅进行初浓缩预处理，温度控制在45?5?，待浓缩液比重达到1.40?0.05时，将浓缩后的醋酸乙酯液排入指定贮罐中。
6、浸膏:合并上清液，过滤除渣，滤液于30?减压蒸干，得浸膏;下层清液作为10-DAB的原材料保存好，详细步骤见最后;7、固液萃取:浸膏用20mL甲醇溶解，加入石油醚(60,90?)(体积比1?1)，振荡30min，脱脂;8、液液萃取:萃取余液用三氯甲烷(体积比2?1)振荡30min，褪色，若褪色不彻底应反复进行;9、沉淀:由于紫杉醇有在正己烷中沉淀这一特性，所以向液液萃取后得到的紫杉醇乙酸乙酯溶液中加入体积比为10:1的正己烷溶剂，将紫杉醇沉淀下来。
(较少时，紫杉醇不能完全沉淀;较多时，不但没有提高杂质去除量，还会造成正己烷使用量过大，溶剂浪费。
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重 的 时 间最 长 （ ５ｄ ，烘箱 干燥 的时 间则 随着温 近 ）
度 的增加而缩短，１ ０ ２ ℃的所用时间最少 ，为 ４ ３ ｍｉ，ｌ０ ｎ ｌ ℃的为 ５ ｎ表 １，但结合图 ２ ２ｍｉ（ ） 来看 ，
此 时 的紫 杉 醇含 量 并 不 是最 高 。据 此 认 为 ，用烘 箱 干燥 时 以 ９ ～ ０ ℃烘 干 为最 佳 。 ０ １０
收 稿 ２ ０ — ２ ２ 修定 ２ ０ — ８ １ ０ ５０ —８ ０ ５０ —６ 资 助 黑龙江 省 自然科 学基 金项 目（ Ｎ０ — ３ 。 ＺＪ ４ ０ ） ｝ 通讯作者（ — ｉ：ｚ ｇ ｒ＠ｐ ｂｉ．ｒｈ ．ａ ｅ ．０ ５ 一 Ｅ ｍａｌ ｙ ｏ ｌ ｕ ｌｃｈ ．１ ，Ｔ １ ４ ｃ ｌ
中火 解冻
低火
图 ３ 微波干燥对紫杉醇含 量的影响
图 ２烘 干温 度对 紫杉醇含量的影响 表 １ 自然 干燥 、烘干 和微 波干燥所用 的时间
干燥方式 干燥时间 ／ ｎ ｍｉ
厘
譬 蝼
图 ４ 不同干燥方式所用 时间及对紫杉醇 含量 的影响
参考文献
１ Ｋｉ ｓｏｎ ＤＧ，Ｓａ ｒ ｎ ｙ ｋ ｎｇ ｔ ｍａ ａ ａ ａ ｅ Ｇ，Ｉ ｅ ｖ ｙ ＣＡ． ｅｃ ｅ ｉｔｙ ｏ Ｔｈ ｈ ｍ ｓｒ ｆ
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４ ４ ３ ３ ２
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印
６８ ５
植物 生理 学通 讯 第 ４ 卷 第 ５期 ，２ ０ １ ０ ５年 １ ０月
而高温 ｌ ０ １０ ｌ 和 ２ ℃虽 比自然风干的高，但 已下 降 ，且趋 于平 稳（ ２；２ 自然风 干 的材 料达 到恒 图 ） （）
２ 微波干燥对紫杉醇含量的影响 由图 ３及 图 ４可知 ，微 波 干燥 的东 北红 豆杉 枝叶中紫杉醇含量显著高于 自然风干 的，以高火 档 的最 高， 中火档 的次之 ，解 冻档最低 。另外，
由表 １可 知 ，在 微 波 干 燥 中 高 火 档 所 用 时 间 最 短 ，为 ６ ｍｉ ，低 火 档 最 长 ， 为 ４ ｎ ｎ ８ ｍｉ ：而 从 温 度 来 说 ，高火 档 瞬 间温 度最 高 为 ７ ℃ ，低火 档 ８ 温 度 最低 为 ３ ℃ 。据 此 认 为 ， 以微 波 干燥 东北 红 ５
提要 自 然风干使 东北红豆杉鲜枝叶 中紫杉醇含量降低 ，烘箱温度 ９ 一Ｏ Ｃ和微 波 高火档干燥使其提 高，后二者 比 自 ０ ＩＯ 然
风干的 紫杉醇含量提 高近 ０ ２ 。 ．倍 ４
关键词 紫 ；东 杉醇 北红豆杉鲜枝叶；微波干燥
紫杉醇（ ｘ１ 红豆杉 中含有 的一种 生物碱ｎ， ｔ ｏ） ａ 是 】 有 促微 管 聚合 作 用 的独 特 抗癌 特 性 ， 主 要存 在 于 红 豆 杉 的树 皮 和 枝 叶 中 【３ 尤 以树 皮 中 含 量 较 】 ｌ， 品分 别加 ８ ０ 乙醇匀 浆 萃取 １５ｍｉ ，匀 ０ｍＬ ８ ％ ． ｎ 浆 液 以 ３５ ０ ｇ离 心 ２ｍｉ ，上 清 液 保 留， 沉 淀 ０ ｘ ｎ 中加入 ５ ０ 乙醇 后 超 声（ 率 １ ０Ｗ ，频 ０ｍＬ ８ ％ 功 ０ 率 ２ Ｈｚ提取 １ ｎ ４ｋ ） ５ ｍｉ ，再 离 心 ，保 留上 清 液 ， 沉 淀 同上 再 重 复超 声 提 取 ５次 。将 ６次所 得 到 的 上 清液 同匀浆 上清 液 合 并 ，于 ６ ℃下 减 压浓 缩 至 ０ 干 ，精 细 吸取 ５ ｍＬ 甲醇 定 容 ， 加 入 等 体积 的流 动相【 乙腈 一 ４ ５ ）混匀 ， 以 １ ０ ｘ 水（７： ３］ ０ ｇ离 心 ８ Ｏ ｍｉ ，上 清 液 保 留 ，再 加 等 体积 的 流 动相 ， 重 复 ｎ 上 述操作 ２次 。所 得上 清液 置 ４Ｃ 箱 中过夜 ，再 ￣冰 以 １０ｘ ０ ｇ离心 ８ｍｉ，过 ０４ ｍ 滤膜 。 Ｏ ｎ ．５ 色 谱 条件 ：色谱 柱 为 ＨＩ ｉ Ｖ（． ｍｍ￣ Ｑｓｌ １ ４６ Ｃ ８ ２ ０ｍｍ） 流 动相 为 乙腈 一 （７： ３； 速 为 １ ５ ； 水 ４ ５ ）流 ． ０ ｍ ｍｉ～ Ｌ． ｎ ；检测 波长为 ２ ７ｎｎ ２ ｌ；柱温 为 ２ ￣ 进 样 ８Ｃ； 量 为 １ Ｌ。标 准 品和 样 品色 谱 图如 图 １ ０ 。
ｔ ｘ １ ＪＮａ Ｐ ｏ ，１ ９ ， ３ １ ：ｌ ２ ｌ ａ ｏ ． ｔ ｒ ｄ ９ ０ ５ （ ） ｌ ～ｌ ３
２ 张沿军， 李铣． 吴立军． 东北 紫杉 茎皮化学成分 的研 究． 中草
药 ，１ ９ ， ７４ ：２ ０ ２ ６ ２ （ ） ０ ￣ ０１ ９
３ 佟 晓杰 ，方唯硕，周金云．东北红豆 杉枝叶 的化 学成分研究 ． 药学学报，１９ ， ９ １： ５ ６ ９ ４ ２ （）５ ～ ６
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植物 生理学通 讯 第 ４ 卷 第 ５期，２ ０ 年 １ １ ０５ ０月
６７ ５
几种影 响提取东北红 豆杉鲜枝 叶 中紫杉醇含 量的干燥 方法 比较
薛艳华 祖元刚 ， 史权 。唐 中华 于景华 韩梅 ，
１ 东北林 业大学森林植物 生态学教育部重 点实验 室，哈尔滨 １ ０ ４ ； 佳木斯 大学 基础医学部 ，黑龙江 佳木斯 １ ４ ０ ５ ０ ０ ５０ ７
别为 ６ ０、７ ０、８ ０、９ ０、 １ ０、 １ １ ０℃ ， ０ ０、 １ ２
结果与讨论
１ 烘 箱干燥 对紫 杉醇 含 量 的影响 图 ２和表 １显 示 ： １采用 烘 箱 干 燥 东北 红 豆 （） 杉 枝 叶 中 的紫 杉 醇含 量 高 于 自然 风 干 的 ，烘 干 温 度 为 ９ 、 １ ０Ｃ的含 量 最 高 ，８ ０ ０￣ ０和 ６ ￣ 次之 ， ０Ｃ的
高。 目前紫杉醇主要来源于红豆杉的树皮 ，由此
导 致 红豆 杉 资源 破坏 严 重 。另 外 ，传 统 的紫 杉 醇
生产方法一般是将原料（ 树皮、枝 叶） 自然风干后
提 取 分 离 ， 方 法 粗 放 ，紫 杉 醇 浪 费 严 重 。本 文 以东北 红 豆杉 新 鲜枝 叶为 材料 ， 比较 不 同烘 干 预 处 理 方法 对紫 杉 醇 含量 的影 响 ， 寻 找一 种 既能 产 业 化 生产 ，又 能最 大 限度 地 减少 原 材料 中有效 成 分紫杉 醇损失 的方法 ，减 少 由于材 料预处理工艺粗 放 而造 成的不 必要 浪 费， 以提 高原材料 的利用 率 。
Ｍｅ ｉ ｌ ｃｅ ｃｓ ｐ ｒ ｎ， ｉｍｕｉ ｎｖ ｒｉ ， ｉｍｕｉＨｅｌｎ ｊ ｎ ５ ０ ７ Ｃ ｉａ Ｃ ｅ ｓｒ ｎ ｈ ｒ ｃＳ ｉｎ ｅ ｄｃ ｉ ｅ ａ ｔ ｔＪａ ｓ Ｕ ｉ ｓ Ｊａ ｓ ａ Ｓ ｎ Ｄｅ ｍｅ ｅ ｔ ｙ ， ｉ ｇｉ ｇ１ ４ ０ ， ｈｎ ； ｈ ｍｉ ｙａ ｄＰ ａ ｍｉ ｃｅ ｃｓ ｏ ａ ｔ Ｉｓ ｔｔ Ｊ ｍｕｉ ｎｖｒｉ ， ｉｍ ｓ Ｈｅｌｎｊ ｎ ５ ０ Ｚ Ｃ ｉａ ｎｔｕｅ ｉ ｓ Ｕ ｉ ｓｔ Ｊａ ｕｉ ｉ ｇｉ ｇ１４ ０ ｈｎ ｉ ，ａ ｅ ｙ ， ｏ ａ
材料与方法
东 北红豆 杉（ａ ｕ ｕｐｄ ｔ Ｓｅ ．ｔ ｕｃ鲜 Ｔｘ ｓｃｓｉａａ ｉｂ ｅ ｃ） Ｚ
枝 叶采 自东北 林业 大 学 植物 实 验 园 内， 树龄 在
１ — ０ 龄 。剪 取 长 ７ １ ｍ 的 新 鲜枝 叶 ，每 份 ８２ — ２ｃ ５ｇ ，分 别 进 行 以下 ３种 处 理 ： １ 自然 风 干 ，干 （） 燥 条件 为室 温 ２ ５ ，置通 风 处 风干 至Ｉ ， ０２℃ 叵重 并 记 录相 应 的风 干 时 间 ；（） ２ 烘箱 干 燥 ，温 度 梯度 分
ＸＵ ａ — ａ’ Ｚ Ｙ ａ — ａ ｇ’ Ｓ ｕ ｎ， ＡＮ ｈ ｎ — ｕ Ｙ Ｊｎ — ｕ Ｈ Ｅ Ｙ ｎＨｕ ， Ｕ ｕ ｎＧ ｎ ， ＨＩ ａ Ｔ Ｇ Ｚ ｏ ｇＨ ａ， Ｕ ｇＨ ａ， ＡＮ ｉ Ｑ ｉ Ｍｅ
Ｋ ｙ ａ ｏａｏｙ ｆ ｎｓ ｙ ｆ ｄ ｃｔ ｎ Ｆ ｒｓ ｌｎ ｃｌｇ． ｏｔｅｓ ｏｅｔ ｎｖｒｉ， ａｂｎ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ ａ ｉ ｅ ｂ ｒｔｒ Ｍｉｉ ｒ Ｅ ｕａｉ ｏｅｔ Ｐａ ｔ ｏｏｙ Ｎ ｒ ａｔ ｒｓ Ｕ ｉ ｓｙ Ｈ ｒｉｌ ０ ４ ， ｈ ；Ｂ ｓ Ｌ ｏ ｔ ｏ ｏ ｙ ｒ Ｅ ｈ Ｆ ｙ ｒ ｅ ｔ ｎ ｃ
一ａＩ ． Ｉ －ｖ暑暑 ＿ Ｔ
综 上 所 述 ，在 ３种 干燥 方 式 中，微 波 干燥 法 为 最 佳 （ ４、表 １ 。 图 ）
舍 ０
４０ ０
曲
３０ ５ 缸
礁 ３０ ０
氍 ２０ ５
风干 高火 中高火
风干 ６℃ ７℃ ０ ０ ８℃ ０ ９ ℃ ｉ０ Ｉ ０ １ ０ ０ ０ ℃ １ ℃ ２ ℃
８ １ １ ） ２ ９１ ７ 。 ５
记 录 参 数 同 前 ； ３ 微 波 干 燥 ， 条 件 设 为 高 火 （ ） （８１ 、 中高火 （７３ 、中火 （５５ 、解 冻 ７ ．℃） ６ ．℃） ５ ．℃）
（７８ ） ４ ．。 、低火（５３ ５ ，记录参数同前。每 Ｃ ３ ．℃） 档 种处理 ６份样品。取经不同方式干燥 处理后 的样
佳 木斯大学化学 与药学 院，黑龙江佳木 斯 １ ４ ０ ５０７
Ｃｏ ｍｐ ｒｓ ｎ ｏ ｏ ｅＤｒ ｅ ｒ ａ ｍｅ ｔＭ ｅ ｈ ｄ ｏ ｔ ａ ｔｏ ｆＴ ｘ ｌ ｎ－ ａ ｉｏ ｆＳ ｍ ｙ Ｐｒ ｔ ｅ ｔ ｎ ｔ ｏ ｓｆ ｒＥｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ａ ｏ Ｃｏ ｔｎ ｈ ｅ ｔｉ ｔ ｅＴｗｉ ． ａ ｆＴ ｘ ｓｃ ｓ ｄ ｔ ｉｂ． ｔＺｕ ｃ ｎ ｇ Ｌｅ ｆ ａ ｕ ｕ ｐｉ ａ ａ Ｓ ｅ ｅ ｃ ｏ
豆 杉枝 叶时 ，高火档 为最 佳 ，但 微波 高火档与
９ 、 １ ０℃烘 箱 干燥 相 比，紫 杉 醇 含 量 无 显著 差 ０ ０
异 ，所用 时 间则 差异 显著 。