食品中去甲基他达拉非和硫代西地那非的测定
LC-MSMS测定保健食品中非法添加四种新型他达拉非衍生物
LC-MS/MS测定保健食品中非法添加四种新型他达拉非衍生物王子龙1，梁卜文1，董培智1，刘文博1，王珂2，项新华3，*（1.山西省食品药品检验所，太原 030031；2.山西中医药大学，晋中 030619；3.中国食品药品检定研究院，北京 102629）摘要：目的：建立缓解体力疲劳类保健食品中非法添加四种新型他达拉非衍生物的检测方法并考察其可行性。
方法：筛选出具有相同结构的四种新型他达拉非衍生物，建立液相色谱法初筛与定量（以富士C18-4.6×250mm-5µm为色谱柱，以乙腈-0.1%三氟乙酸水为流动相梯度洗脱，并于230nm波长下采集信号，以DAD光谱图初步定性、外标法定量）和液质联用法确证（以含0.1%乙酸的0.02mol/L乙酸铵溶液-乙腈-甲醇（45∶25∶30）为流动相等度洗脱，选择电喷雾电离源ESI+扫描，通过比较样品与对照品的分子离子峰、二级碎片离子峰进行确证）的检测方法，并在常见的饮料、酒剂、片剂、胶囊、咖啡、软胶囊和口服液7种基质中对标准曲线相关系数、线性范围、重复性、回收率、定量限、检出限等方法学参数进行考察。
结果：四种新型他达拉非衍生物质量浓度在0～80μg/mL内与峰面积有良好的线性关系，对7种不同基质分别进行三个浓度水平的准确度评价，平均回收率均在90%～105%之间。
结论：该方法具有快速、准确、高灵敏度等优点，可作为测定保健食品中非法添加四种新型他达拉非衍生物的有效方法。
关键词：保健食品；他达拉非衍生物；新型非法添加化合物；方法建立中图分类号：TS218/TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）01-0064-08doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.01.011LC-MS/MS determination of four novel Tadalafil derivativesillegally added in food supplementsWANG Zi-long，LIANG Bu-wen1，DONG Pei-zhi1，LIU Wen-bo1，WANG Ke2，XIANG Xing-hua3，*（1. Shanxi Institute for Food and Drug Control，Taiyuan 030031；2. Shanxi University of Traditional Chinese Medicine，Jinzhong 030619；3. China Food and Drug Testing Institute，Beijing 102629）Abstract：Objective：To establish a determination method of four novel Tadalafil derivatives illegally added to foods supplements for fight fatigue and its feasible. Method：Four same structure Tadalafil derivatives were selected and liquid chromatography was used in the early screening stage. Quantitative detection was performed by Fuji C18-收稿日期：2020-05-22项目基金：山西省重点研发计划项目（201903D321011）。
保健食品中75种非法添加检测
附件1保健食品中75种非法添加化学药物的检测BJS 2017101 范围本方法规定了保健食品中利血平、格列喹酮、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、格列美脲、豪莫西地那非、伐地那非、西地那非、那红地那非、伪伐地那非、那莫西地那非、瑞格列奈、红地那非、格列吡嗪、洛伐他汀羟酸钠盐、尼莫地平、辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他汀、美伐他汀、氨基他达拉非、他达拉非、佐匹克隆、尼索地平、脱羟基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地平、格列波脲、尼群地平、罗格列酮、吡咯列酮、罗通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑仑、青藤碱、呋塞米、咪达唑仑、格列齐特、劳拉西泮、酚酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑仑、扎来普隆、氯氮卓、氢氯噻嗪、艾司唑仑、奥沙西泮、地西泮、硝西泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛尔、N-单去甲基西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、沙丁胺醇、司可巴比妥、褪黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可乐定、异戊巴比妥、卡托普利、苯乙双胍、巴比妥、麻黄碱、丁二胍、氨甲环酸、二甲双胍和烟酸的液相色谱-串联质谱检测方法。
本方法适用于片剂、口服液、硬胶囊和软胶囊保健食品中的利血平、格列喹酮、羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、格列苯脲、格列美脲、豪莫西地那非、伐地那非、西地那非、那红地那非、伪伐地那非、那莫西地那非、瑞格列奈、红地那非、格列吡嗪、洛伐他汀羟酸、尼莫地平、辛伐他汀、氨氯地平、洛伐他汀、美伐他汀、氨基他达拉非、他达拉非、佐匹克隆、尼索地平、脱羟基洛伐他丁、哌唑嗪、非洛地平、格列波脲、尼群地平、罗格列酮、吡咯列酮、罗通定、醋氯芬酸、硝苯地平、三唑仑、青藤碱、呋塞米、咪达唑仑、格列齐特、劳拉西泮、酚酞、二氧丙嗪、氯硝西泮、阿普唑仑、扎来普隆、氯氮卓、氢氯噻嗪、艾司唑仑、奥沙西泮、地西泮、硝西泮、西布曲明、文拉法辛、氯苯那敏、氯美扎酮、甲苯磺丁脲、阿替洛尔、N-单去甲基西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、沙丁胺醇、司可巴比妥、褪黑素、芬氟拉明、苯巴比妥、可乐定、异戊巴比妥、卡托普利、苯乙双胍、巴比妥、麻黄碱、丁二胍、氨甲环酸、二甲双胍和烟酸共75种非法添加物质的检测，同样适用于片剂、口服液、硬胶囊、软胶囊类声称具有保健功效的食品中上述75种物质的检测。
高效液相色谱法测定保健食品中他达拉非、西地那非、伐地那非违禁药物含量
高效液相色谱法测定保健食品中他达拉非、西地那非、伐地那非违禁药物含量沈志武;唐宏兵;李群;段晋仁【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2008(044)006【摘要】应用高效液相色谱法测定了保健食品中他达拉非、西地那非、伐地那非等三种违禁药物含量.采用ODS色谱柱,乙腈-0.05 mol·L-1三乙胺(40+60)为流动相,流速1.0 mL·min-1,二极管阵列检测器,检测波长290 am.根据保留时间、光谱图定性,峰高或峰面积定量.该方法三种药物组分在0.5～100.0 mg·L-1浓度范围内呈线性关系,他达拉非和西地那非的检出限为0.3 mg·L-1,伐地那非的检出限为0.4 mg·L-1,相对标准偏差为1.5%～2.0%,回收率为95.8%～107.0%.【总页数】3页(P540-542)【作者】沈志武;唐宏兵;李群;段晋仁【作者单位】常州市疾病预防控制中心,常州,213003;常州市疾病预防控制中心,常州,213003;常州市疾病预防控制中心,常州,213003;常州市卫生监督所,常州,213003【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定露酒中伐地那非、西地那非和他达拉非含量 [J], 张书文;王锟;韩圣谦2.高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中西地那非、他达拉非和伐地那非 [J], 叶兰凤;叶晓娟;陈丽湘3.高效液相色谱-串联质谱法测定食品、保健食品中2-羟基丙基去甲他达拉非 [J], 农毅清;刘珈伶;袁光蔚;韦环;廖强;覃文霞;刘欣宜4.高效液相色谱-串联质谱法测定食品、保健食品中2-羟基丙基去甲他达拉非 [J], 农毅清;刘珈伶;袁光蔚;韦环;廖强;覃文霞;刘欣宜;5.固相萃取-高效液相色谱法用于保健食品中违禁添加物枸橼酸西地那非的分析 [J], 鲁杰;杨大进;方从容因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
食品中那非类物质的测定(90种)
附件食品中那非类物质的测定（BJS 201805）1 范围本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。
标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。
标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。
方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法2原理试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。
3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。
3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2 试剂配制3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。
3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。
3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。
3.3 标准品西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制—1 —3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafil dimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。
食品中那非类物质的测定(BJS201805).doc
附件食品中那非类物质的测定（BJS 201805）1 范围本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。
标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。
标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。
方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法2原理试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。
3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。
3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2 试剂配制3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。
3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。
3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。
3.3 标准品西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制—1 —3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafil dimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。
保健食品中11种西地那非类药物的检测分析
保健食品中11种西地那非类药物的检测分析摘要：目的试探究对保健食品中含有的西地那非类药物的高效检测方法。
方法选择具有抗疲劳功能的保健品为样本，经过乙腈提取，对样品利用优化色谱、质谱条件进行初步判断，对疑似西地那非类药物实施离子扫描和监测。
结果通过优化后的液相色谱、液质联用分析，可高效的在保健食品中检出所含有的西地那非类药物，且检测线均低于1μg/ml。
结论对保健食品实施液质联用分析后，并采取液相色谱定量检测法，可有效检测出非法添加的西地那非类药物，使保健食品的安全性得到保证。
关键词：保健食品；西地那非类药物；非法添加；液质联用随着生活水平及医疗条件的提高，健康及养生问题得到高度重视，而为了满足人们需求，保健食品不断得到研发，种类及功效也逐渐增多。
随着市场竞争压力的剧增，部分企业为了利益而非法添加违禁药物的现象屡见不鲜，使保健品不仅未发挥保健作用，甚至对健康造成影响[1]。
为此，本文主要对抗疲劳保健品中西地那非类药物实施拟建检测，并将结果作如下总结阐述。
1仪器与试剂选用QTRAP 4500/UPLC 安捷伦1290超高效液相-质谱联用仪及XSE105DU梅特勒天平，所选用的试剂：超纯水、色谱纯：甲醇、乙腈；分析纯试剂：那红地那非、红地那非、氨基他达拉非、羟基豪莫西地那非、盐酸伐地那非三水合物、豪莫西地那非、硫代艾地那非、那莫西地那非、枸橼酸西地那非、他达拉非、伪伐地那非。
选用具有抗疲劳功能的保健品作为检验样本。
2实验方法2.1制备对照液试品将适量对照品分别置于量瓶，加入适量甲醇，浓度为5μg/ml，超声溶解、摇匀，形成对照品储备液。
将各照品储备液置于同一量瓶，利用甲醇稀释，作为混合对照品。
2.2样品制备2.2.1液体样品在50ml量瓶中放置一次口服剂量的保健食品，并加入适量乙腈稀释保健食品至刻度，振荡摇匀，用0.22μm过滤膜获得制剂。
2.2.2固体样品混匀、研磨固体保健食品，剂量为一次口服剂量，并将研细保健食品置于25ml量瓶中，并将20ml乙腈加入量瓶中进行稀释，经过15min超声处理后置于室温，摇匀后用0.22μm过滤膜进行过滤，获取制剂。
中药及保健品中非法添加3种PDE5抑制剂的TLC—SERS检测方法研究
中药及保健品中非法添加3种PDE5抑制剂的TLC—SERS检测方法研究目的建立补益类中药及保健品中非法添加西地那非、氨基他达拉非、伐地那非的快速检测方法。
方法采用硅胶GF254薄层板，以乙醇-正己烷（70∶30）为展开剂，展开制备薄层斑点，对斑点滴加银胶测定其SERS图谱。
结果该方法用于检测3种PDE5抑制剂的专属性较好，并检测出7种补益类中药及保健品中有3种非法添加了那非类成分。
结论TLC-SERS联用法简便、快速，可用于补益类中药及保健品中非法掺入的3种PDE5抑制剂的快速检测。
[Abstract]Objective To establish a rapid screenning method for tonic traditional Chinese medicines and to products with illegally added chemicals such as Sidenafil，Amino Tadalafil，Vardenafil.Methods The thin-layer spots was prepared by slica gel GF254 thin layer developing in ethanol-hexane （70∶30），and SERS spectrum was determined via adding silver glue on it.Results This metod was applied to the detection of seven tonic traditional Chinese medicines and health products，and three were detected with sidenafil drμgs.Conclusion This TLC-SERS rapid method is simple and rapid，and can be use to detect the three PDE5 inhibitors illegally added into tonic traditional Chinese medicine and health products.[Key words]Health products and traditional Chinese Medicine；Illegally added；Inhibitor of PDE5；TLC-SERS中成药、保健品非法添加化学药品现象在我国屡见不鲜[1-2]，对食药非法添加的专项整治一直以来都是各地市食药监督稽查的重点，西地那非、他达拉非、伐地那非均为磷酸二酯酶5抑制剂，是补肾类或缓解体力疲劳类保健食品中最常添加的3种壮阳类化学成分。
进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法(一)
进出口保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测方法（一）1 范围本标准规定了保健食品中、、他达那非的液相色谱-质谱/质谱检测办法。
本标准适用于片剂、胶囊剂和口服液剂类保健食品中伐地那非、西地那非、他达那非的检测。
2 测定办法 2.1 办法提要片剂、胶囊剂试样中的伐地那非、西地那非、他达那非用甲醇超声提取，提取液经稀释后过滤。
口服溶液剂经挺直稀释后过滤，用配有电喷雾离子源的液相色谱-质谱/质谱仪举行测定，外标法定量。
2.2 试剂和材料全部试剂除特别注明外，均为分析纯，水为二次蒸馏水。
2.2.1 ：高效液相色谱级。
2.2.2 ：高效液相色谱级。
2.2.3 ：优级纯。
2.2.4 ：优级纯。
2.2.5 0.1 mol/L＋甲醇混合液(9+1，体积比)。
2.2.6 伐地那非(vardenafil, CAS号：224785-90-4，分子式：C23H32N6O4S·HCl·3H2O)标准品：纯度大于等于99.5%。
2.2.7 西地那非(Sildenafil, CAS号：139755-83-2，分子式：C22H30N6O4S)标准品：纯度大于等于99.5％。
2.2.8 他达那非(tadalafil, CAS号：171596-29-5，分子式：C22H19N3O4)标准品：纯度大于等于99.5%。
2.2.9 标准溶液：分离精确称取适量伐地那非、西地那非、他达那非标准品，用甲醇配制成浓度为10 ug/mL的混合标准储备液，于4℃下保存。
按照需要用0.1mol/L盐酸＋甲醇混合液(2.2.5)将标准储备液稀释成1 ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的混合标准工作溶液。
2.3 仪器和设备 2.3.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：三重四极杆质谱检测器，配电喷雾离子源(ESI)。
2.3.2 超声波清洗器。
2.3.3 旋涡混匀器。
高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中西地那非、他达拉非和伐地那非
高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中西地那非、他达拉非和伐地那非叶兰凤;叶晓娟;陈丽湘【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2013(25)12【摘要】目的建立保健食品中他达拉非、西地那非和伐地那非3种药物的液相色谱-串联质谱检测方法.方法样品采用甲醇提取,经超声、离心,Agilent ZORBAXC18色谱柱(50mm×2.1mm,1.8μm)分离,梯度洗脱,在LC-MS/MS多反应监测(MRM)模式下进行定性及定量分析.结果 3种药物的检出限:西地那非为:1.0mg·kg-1,他达拉非和伐地那非为:0.2mg·kg-1,在191.7～317.8mg·kg-1范围内,3个添加水平的平均回收率为105.4%～113.4%,相对标准偏差(RSD,n=3)为2.1%～5.7%.结论该方法可快速、准确地对保健食品中非法添加的西地那非、他达拉非和伐地那非进行定性和定量测定.【总页数】3页(P123-125)【作者】叶兰凤;叶晓娟;陈丽湘【作者单位】福建省南平市药品检验所,南平,353000;福建省南平市药品检验所,南平,353000;福建省南平市药品检验所,南平,353000【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.高效液相色谱法测定保健食品中他达拉非、西地那非、伐地那非违禁药物含量[J], 沈志武;唐宏兵;李群;段晋仁2.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定露酒中伐地那非、西地那非和他达拉非含量 [J], 张书文;王锟;韩圣谦3.高效液相色谱法测定中药制剂中西地那非和他达拉非含量的研究 [J], 张爽;曹悦4.高效液相色谱-串联质谱法测定食品、保健食品中2-羟基丙基去甲他达拉非 [J], 农毅清;刘珈伶;袁光蔚;韦环;廖强;覃文霞;刘欣宜5.高效液相色谱-串联质谱法测定食品、保健食品中2-羟基丙基去甲他达拉非 [J], 农毅清;刘珈伶;袁光蔚;韦环;廖强;覃文霞;刘欣宜;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
食品中那非类物质的测定
附件1食品中那非类物质的测定BJS2016011范围本方法规定了食品（含保健食品）中西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非、伪伐地那非、他达拉非、氨基他达拉非含量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于酒、咖啡、功能饮料、玛咖片、保健食品中西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非、伪伐地那非、他达拉非、氨基他达拉非含量的测定。
2原理试样经乙腈提取后，采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1乙腈（CH3CN)：色谱纯。
3.1.2甲酸（CH2O2）：质谱级。
3.1.3 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1ml用水稀释至1000ml,用滤膜（3.4）过滤后备用。
3.1.4 0.1%甲酸乙腈溶液：取甲酸1ml用乙腈稀释至1000ml,用滤膜（3.4）过滤后备用。
3.2标准品西地那非盐酸盐、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非盐酸盐、伪伐地那非、他达拉非、氨基他达拉非标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.3标准溶液配制3.3.1标准储备液：分别称取西地那非盐酸盐、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非盐酸盐、伪伐地那非、他达拉非、氨基他达拉非标准品（3.2）0.1 g（精确至0.000 1 g），用乙腈溶解，并转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度为1 mg/mL。
贮存于4℃冰箱中，有效期3个月。
3.3.2混合标准系列工作液：分别准确吸取西地那非盐酸盐、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非盐酸盐、伪伐地那非、他达拉—1—非、氨基他达拉非标准储备液适量（3.3.1），用乙腈将其稀释成含量分别为1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL的标准系列混合工作液。
试谈保健食品中非法添加物的检测及判定依据
试谈保健食品中非法添加物的检测及判定依据作者：路亚静来源：《西部论丛》2019年第21期摘要：保健食品中非法添加行为屡禁不止，不利于食品安全的保证，也威胁着人们的身体健康。
基于此，本文从检测依据与检测方法两方面入手，分析了保健食品中非法添加物的检测。
同时，简述了国家标准GB 2760-2014、国食药监稽[2011]223号这两种保健食品中非法添加物的判定依据。
关键词：保健食品;非法添加物;成分检测;判定依据引言国民生活水平的提升促使人们对食品营养与保健作用更为关注，推动了保健食品行业的迅速发展。
同时，“大健康”理念的兴起加大了保健食品企业的市场竞争激烈程度。
此时，部分企业为了占据更大的市场份额，在保健食品中添加非法成分，不利于食用安全的保证，需要展开重点检测判定及监管。
一、保健食品中非法添加物的检测分析（一）檢测依据在我国发布的《保健食品检验与评价技术规范》中，将保健食品划分为27类。
当前，市场中保健食品添加非法成分较高的类型主要有减肥保健食品、调节血糖功能产品、抗疲劳功能产品、调节免疫功能产品、优化睡眠功能产品、调节血脂功能产品。
其中，减肥功能产品的常见非法添加物有西布曲明、芬氟拉明等，检测依据为国家食品药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2006004;调节血糖功能产品的常见非法添加物有格列齐特、瑞格列奈、盐酸二甲双胍等，检测依据为批准件2009029;抗疲劳功能产品的常见非法添加物有那红地那非、西地那非、他达拉非等等，检测依据为批准件2008016和2009030;调节免疫力功能产品的常见非法添加物与抗疲劳功能产品相同，因此检测依据也具有一致性;调节免疫力功能产品的常见非法添加物为氯氮卓、艾司唑仑、巴比妥、苯巴比妥等等，检测依据为批准件2009024;调节血脂功能产品的常见非法添加物为盐酸可乐定、卡托普利、利血平等等，检测依据为批准件2009032。
同时，在2016年，为了解决食品检测中的缺失问题，国家食品药品监督管理部门陆续发布了多种非法添加物的补充检查方法[1]。
食品中非法添加西地那非和他达拉非的快速检测 胶体金免疫层析法(征求意见稿)
附件1食品中非法添加西地那非和他达拉非的快速检测胶体金免疫层析法（征求意见稿）1 范围本方法规定了食品及保健食品中非法添加西地那非和他达拉非的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于声称具有抗疲劳、调节免疫等功能的保健食品及涉嫌添加化学药品的食品中西地那非和他达拉非的快速测定。
2 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的西地那非和他达拉非等物质经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中西地那非和他达拉非进行定性判定。
3 试剂材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇：色谱纯。
3.1.2 三羟甲基氨基甲烷，Tris碱。
3.1.3 浓盐酸。
3.1.4 吐温-20。
3.1.5 盐酸溶液：量取浓盐酸（3.1.3）16.7 mL，用水溶解并稀释至100 mL。
3.1.6 缓冲液：称取12.1 g Tris碱（3.1.2），加适量水溶解，混匀，用盐酸溶液（3.1.5）调节pH 至8.0，加入5.0 g吐温-20（3.1.4）搅拌均匀，定容至1000 mL。
3.2 参考物质参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度均≥99%。
注：或等同可溯源物质。
3.3 标准溶液的配制3.3.1 西地那非标准储备液（1.0 mg/mL）：精密称取西地那非标准品（3.2）适量，用甲醇（3.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0 mg/mL的标准储备液。
-20℃避光保存，有效期1年。
3.3.2 西地那非标准工作液（10μg/mL）：精密移取适量西地那非标准储备液（1.0 mg/mL）（3.3.1）置于10mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为10μg/mL的标准工作液。
BJS201805食品中那非类物质的测定.doc
附件食品中那非类物质的测定（BJS 201805）1 范围本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。
标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。
标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。
方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法2原理试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。
3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。
3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2 试剂配制3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。
3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。
3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。
3.3 标准品西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafil dimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。
食品中那非类物质的测定
食品中那非类物质的测定（BJS 201805）1 范围本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。
标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。
标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。
方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法2原理试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。
3试剂和材料注：水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。
3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。
3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。
3.2 试剂配制3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。
3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。
3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。
3.3 标准品西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafildimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。
补肾壮阳类保健品中7种非法添加成分的检测
１ ２
北方药学 ２ ０ １ ５年第 １ ２ 卷第 ３期
补 肾壮 阳类保健 品 中 ７种非法添加成分 的检测
杨 洋 李 珍 （ 鄂尔多 斯市 食品 药品 检验研究中 心 鄂尔多 斯 ０ １ ７ ０ １ ０ ）
摘要 ： 目的： 建立液质联 用方法 同时测定 ７种磷酸二酯酶 ５型（ Ｐ Ｄ Ｅ ５ ） 抑制剂类化学成分的方法。方法 ： Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ － ＭＳ ／ ＭＳ ， 以含 ０ ． １ ％乙
表２
４ ． ２《 中国药典＞ ＞ ２ Ｏ Ｌ Ｏ 年版一部和第一增补本 在含量测定项下规
定相 同 ，即 每 １ ｇ 含 姜厚 朴 以厚朴 酚 （ Ｃ 。 。 Ｈ。 Ｏ ： ）与和厚 朴 酚 （ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＣ Ｈ ８ ０ ： ） 的总量计 ， 不得 少于 １ ． ２ ｍ ｇ 。 第 二增补本含量测定项下 质量标准规定每 ｌ ｇ 含姜厚朴 以厚朴 酚 （ Ｃ 。 Ｈ 。 Ｏ ： ）与 和厚 朴酚 （ Ｃ 。 。 Ｈ Ｏ ） 的总量计 ， 不得少于 ０ ． ３ ｍ ｇ 。 以上 ７ 个批次各成分含量 测定结果均符合规定 。但是 ，比较各厂家姜 厚朴 中有效成分的 含量测定结果 ，五厂家之 间存在明显的差异 。造成该现象 的原 因可能有 ： 一是不 同厂家选用的厚朴 的质量差别大 ， 甚至 同厂家 选用药材 的入药部位不 同， 加工 、 炮制等因素都会导致药材含量 的差异＿ ｚ ｌ ； 二是在挥发油成分的提取 过程 中， 生产 工艺控制点及 控制量 的差异 ， 也会造成有效成 分含量 的不 同。 ４ ． ３第 二增补本 中香 砂养 胃丸（ 浓缩 丸 ） 的处方组 成 ， 只是较 药
国家食品药品监督管理总局关于发布《食品中去甲基他达拉非和硫代
国家食品药品监督管理总局关于发布《食品中去甲基他达拉非和硫代西地那非的测定》食品补充检验方法的公告
【法规类别】食品卫生
【发文字号】国家食品药品监督管理总局公告2017年第48号
【发布部门】国家食品药品监督管理总局
【发布日期】2017.05.02
【实施日期】2017.05.02
【时效性】现行有效
【效力级别】部门规范性文件
国家食品药品监督管理总局关于发布《食品中去甲基他达拉非和硫代西地那非的测定》
食品补充检验方法的公告
（国家食品药品监督管理总局公告2017年第48号）
按照《食品补充检验方法工
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附件
食品中去甲基他达拉非和硫代西地那非的测定
高效液相色谱—串联质谱法
BJS 201704
1.范围
本标准规定了食品（含保健食品）基质中去甲基他达拉非和硫代西地那非的高效液相色谱—串联质谱测定方法。
本标准适用于酒、牡蛎粉等食品（含保健食品）中去甲基他达拉非和硫代西地那非的测定。
其他低糖、低脂、低蛋白类基质可参照本方法定性检测。
2.原理
试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供高效液相色谱—串联质谱测定，外标法定量。
3.试剂和材料
注:水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1试剂
3.1.1乙腈（C2H3N）：色谱纯。
3.1.2甲酸（HCOOH）：色谱纯。
3.1.3 甲醇（CH3OH）：分析纯。
3.2 试剂配制
3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL。
3.2.2 0.1%甲酸乙腈溶液：取甲酸1mL用乙腈稀释至1000mL。
3.3标准品
去甲基他达拉非、硫代西地那非对照品或标准物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制
3.4.1标准储备液（500 μg/mL）：分别精密称取去甲基他达拉非、硫代西地那非（3.3）各10.0 mg，用甲醇溶解并稀释至20mL，摇匀，制成浓度为500 μg/mL标准储备液，-20℃保存，保存期1个月。
3.4.2混合标准中间工作液（1 μg/mL）：分别准确吸取去甲基他达拉非、硫代西地那非标准储备液(500 μg/mL)（3.4.1）各0.1 mL，用甲醇稀释至50mL，摇匀，制成1 μg/mL的混合标准中间工作液，-20℃保存，保存期1个月。
3.4.3混合标准工作溶液：分别吸取混合标准中间工作液(1 μg/mL)(3.4.2) 0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、1.0 mL、2.0 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，作为系列混合标准工作溶液S1—S5，浓度依次为各化合物10 μg/L、20 μg/L、40 μg/L、100 μg/L、200 μg/L，临用新制或依仪器响应情况配制适当浓度的混合标准工作溶液。
4.仪器和设备
4.1高效液相色谱—串联质谱仪，配有电喷雾（ESI）离子源。
4.2天平：感量分别为0.1mg和1mg。
4.3超声波发生器。
5.分析步骤
5.1 试样制备
5.1.1固态试样
取适量混匀，研细，称取1g试样（精确至0.01 g）于具塞试管中，加入甲醇10mL，密塞，称重，超声提取10min，放冷，再次称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用滤膜（0.22μm，有机相型）过滤，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至标准曲线线性范围内，备用。
5.1.2 液态试样
取适量摇匀，吸取1.0 mL于具塞试管中，加入甲醇9mL，密塞，称重，超声提取10min，放冷，再次称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用滤膜（0.22μm，有机相型）过滤，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至标准曲线线性范围内，备用。
5.1.3 空白试验
不加试样按试样同法处理，制得空白溶液。
称取与试样等量的空白基质试样，按试样同法处理，制得空白基质试样溶液，备用。
5.2 仪器参考条件
5.2.1 色谱条件
a）色谱柱：Waters CORTECS T3（2.1×100 mm, 2.7 µm），或性能相当者。
b）流动相：A为0.1%甲酸水溶液（3.2.1），B为0.1%甲酸乙腈溶液（3.2.2），梯度洗脱程序见表1。
c）流速：300 μL/min。
d）柱温：30℃。
e）进样量：1μL。
表1 梯度洗脱程序表
注：在有共流出成分影响目标化合物检测时，可以适当调节流动相比例，使尽可能与干扰成分分离，减少干扰。
5.2.2 质谱条件
a) 离子源：电喷雾离子源（ESI源）。
b) 检测方式：多反应离子监测（MRM）。
c) 干燥气、雾化气、鞘气、碰撞气等均为高纯氮气或其他合适气体，使用前应调节相应参数使质谱灵敏度达到检测要求，毛细管电压、干燥气温度、鞘气温度、鞘气流量、喷嘴电压、碰撞能量、碎裂电压等参数应优化至最佳灵敏度，监测离子对和定量离子对等信息详见附录B。
5.3 定性测定
按照高效液相色谱—串联质谱条件测定试样和标准工作溶液，记录试样和标准溶液中各化合物的色谱保留时间，当试样中检出与某标准品质量色谱峰保留时间一致的色谱峰（变化范围在±2.5%之内），并且试样色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比的偏差不超过表2规定的范围，可以确定试样中检出相应化合物。
表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
5.4定量测定 5.4.1标准曲线的制作
将混合标准工作溶液（3.4.3）分别按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到相应的标准溶液的色谱峰面积。
以混合标准工作溶液的浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
必要时可用空白基质试样溶液（5.1.3）配制基质混合标准工作溶液绘制标准曲线。
5.4.2试样溶液的测定
将试样溶液（5.1）按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到相应的样品溶液的色谱峰面积。
根据标准曲线得到待测液中组分的浓度，平行测定次数不少于两次。
对照品色谱图参见附录C 。
6 分析结果的表述
将液相色谱—质谱测得浓度代入下式计算含量：
K m V
c X ⨯⨯⨯=
1000
(1)
式中：
X — 试样中各待测物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg ）；
c — 从标准曲线中读出的供试品溶液中各待测物的浓度，单位为微克每升（μg/L ）； V — 样液最终定容体积，单位为毫升（mL ）； m —试样溶液所代表的质量，单位为克（g ）； K — 稀释倍数。
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
8 其他
当称样量为1g或1mL，定容体积为10mL时，本方法中去甲基他达拉非和硫代西地那非的检出限均为50μg/kg或50μg/L，定量限均为100μg/kg或100μg/L。
空白试验应无干扰。
附录A
化合物相关信息
附录B
质谱参考条件
质谱参考条件
a)离子源：电喷雾离子源(ESI) ；
b)检测方式：多反应监测(MRM) ；
c)扫描方式：正离子模式；
d)毛细管电压：正离子模式：4000V ；
e)离子源温度：200℃；
f)干燥气流量：12L/min；
g)雾化气压力：25psi；
h)鞘气温度：250℃；鞘气（N2）流量：10L/min ;
i)喷嘴电压：正离子模式：500V ；
j)其他质谱参数见表B.1。
表B.1化合物定性、定量离子和质谱分析参数
* 定量离子对。
附录C
标准色谱图
图C.1 去甲基他达拉非和硫代西地那非对照品的提取离子(定量)色谱图
本方法负责起草单位：上海市食品药品检验所。
验证单位：中国食品药品检定研究院、四川省食品药品检验检测院。
主要起草人：胡青，孙健，金绍明，余晓琴，闵宇航，高文超。