铁皮石斛组织培养与栽培技术研究进展
铁皮石斛组织培养技术研究进展
Re s e a r c h Pr o g r e s s o n Ti s s u e Cu l t ur e o f De nd r o b i z Ⅱ 丑o f t T c i na l e
铁皮石 斛( D e n d r o b i u m c a n d i d m Wa l 1 . e x L i n d) 属
多 的是 外 植 体 的 选 择 、 培养基组 成 、 p H值 、 温 度 和 光照等 。
兰 科石 斛属 多年 生 附生 草本植 物 , 具 有 极 高 的 观 赏价 值 、 药 用 价 值 和 经 济 价 值 。铁 皮 石 斛 种 子
姜 艳, 李泽生 , 耿 秀英 , 高 燕, 姚 春, 李 薇 莎
( 云 南省 德 宏 热 带 农 业 科 学研 究 所 , 云南 瑞丽 6 7 8 6 0 0 )
摘要 : 简述铁 皮石 斛 组 织培 养技 术研 究进展 , 针 对 当前 石斛 产 业发 展 的 需 求 , 提 出组培 技 术 需要 深入 解 决 的 问题 , 为石斛 产 业的 有序 发展提 供 借鉴 和依 据 。 关键词 : 铁 皮石 斛 ; 组 织培养 ; 研 究进展
一
2O 一
热 带 农 址 科 技 2 0 1 5 , 3 8 ( 1 )
T  ̄ o F i e a t A , t c “ c t “ t 4 c S c i e n c e & T e c h n o l o  ̄ , y
◎
铁 皮石 斛 组 织 培 养技 术研 究进 展
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.
铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6,MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6,White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH 、Kn 、MS 次之,l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30d 种子发芽率均达到95 % ,但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发,浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用。
2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1mg/L 时,对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用,但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。
1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加人2 %蔗糖。
曾宋君等在改良N6+NAA 0.2mg/L 的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。
铁皮石斛组培快繁技术的研究分析
铁皮石斛组培快繁技术的研究分析摘要:铁皮石斛的种子极为细小、无胚乳,自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发,因此自然繁殖率很低,不易获得实生苗;而传统的分株、杆插等方式的繁殖率极低,加上人为的过度采挖和破坏生境,其资源已濒临灭绝,被国家列为重点保护的药用植物之一。
文章基于此,对铁皮石斛组培快繁技术进行综述性分析。
关键词:铁皮石斛;组培快繁;技术研究植物组织培养技术是20世纪初,以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术。
植物组织培养是指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养,使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。
目前,植物组织培养技术己经在科学研究以及实际生产上得到非常广泛的应用。
该技术不仅具有缩短育种年限、加快繁殖过程,改良品质,节省空间,减少劳力,并可全年进行生产,不受季节、气候等自然条件限制等特点,而且组培苗的体积不大,方便运输和资源交流。
在促进农林业现代化方面展现出了巨大的经济、社会和生态效益,被认为是一项很有潜力的高新技术。
铁皮石斛种子细如粉尘,一个果实内所含种子达100万粒之多,由于缺乏胚乳,种子需与真菌共生才能正常萌发,自然条件下萌发率非常低。
因此,虽然分布广,但生活环境狭窄,产量还不能满足目前药用需求,利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。
铁皮石斛的组织培养中有几个关键的时期:原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。
根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件,我国研究人员在铁皮石斛组培快繁技术方面的研究取得了一定的进展。
在20世纪70年代谭文澄等就进行铁皮石斛组织培养研究并获得完整植株;何静波等尝试通过种胚培养繁殖铁皮石斛;左春芳等于1985年开始研究铁皮石斛的组织培养,并取得进展。
1外植体的选择在植物组织培养中,外植体的选择是十分关键的因素,不同的取材部位和时期,培养的结果也不一样。
目前,诱导铁皮石斛原球茎采用的外植体主要有种子种子、无菌苗幼苗茎段、根尖、不定芽、幼叶,及人工种子等。
铁皮石斛组培苗驯化移栽技术
铁皮石斛组培苗驯化移栽技术铁皮石斛是一种珍贵的中药材,具有极高的药用价值,被广泛用于中药制剂和保健品中。
由于野生铁皮石斛越来越稀少,因此进行铁皮石斛的组培苗驯化移栽技术研究,对于解决野生资源短缺和保护珍稀药材资源具有重要意义。
一、铁皮石斛概述铁皮石斛,又名兰科石斛,为兰科植物,根茎肉质,裸露在地表上,常呈皮革状而有光泽,故名铁皮石斛。
铁皮石斛主要分布在东南亚地区,具有滋阴清热、益肺生津、滋阴补肾等功效,被誉为“滋肺养阴之圣品”。
由于野生资源的过度开采和环境污染,铁皮石斛资源逐渐枯竭,已经成为濒临灭绝的珍稀药材之一。
1. 组培繁殖铁皮石斛的组培繁殖是实现苗木驯化和大规模种植的关键技术之一。
通过嫩茎或叶片等植物组织的离体培养,利用植物生长激素的作用,诱导出新的植物体,并将其移栽到适宜的基质中进行生长。
组培技术不仅能够大幅度提高繁殖效率,还能有效避免病虫害的传播,提高植株的品质和产量。
2. 生长环境控制铁皮石斛对生长环境要求严格,需要适宜的光照、温度、湿度等条件才能正常生长。
在组培苗移栽阶段,需要对生长环境进行严格的控制和调节,确保植株健康生长。
还需要注意防治病虫害,保持植株的健康状态。
3. 移栽技术移栽技术是组培苗驯化的重要环节,它直接影响着植株的生长发育和成活率。
在进行移栽时,需要选择适宜的时间和方法,同时保证移栽后的植株得到适当的护理和管理。
还需要根据不同的生长环境和地理条件,选择适宜的基质,确保植株能够顺利生长。
1. 保护珍稀资源铁皮石斛组培苗驯化移栽技术的应用,可以有效保护珍稀的铁皮石斛资源,减缓其野生资源枯竭的趋势。
通过组培繁殖和移栽技术,可以实现大规模种植,减少对野生资源的依赖,从而达到保护珍稀资源的目的。
2. 提高产量和品质组培苗驯化移栽技术可以提高铁皮石斛的产量和品质。
由于组培苗具有较高的生长速度和较好的抗逆性,因此能够有效提高植株的产量和品质。
由于组培苗能够避免病虫害的传播,因此能够大幅度提高植株的品质。
铁皮石斛组培苗研究进展
作 者简介 : 马赞留 ( 1 9 7 7 一) , 男, 江 苏如皋人 , 硕士 , 农艺师 , 主要研究方 向为花卉繁育与栽培。
段 出 芽最 合适 的分 裂 素及浓 度 是 4 mg / L的 6 - B A。
表 2 不同浓度 生长激素处理对 茎段形成愈 伤组织 的影响
3 小 结
四药 门花 的组 织培 养茎 段 作外 植体 , 通 过 对培 养 条 件 的 初步 摸 索 , 确 定 了外植 体 的最 佳 灭菌 时 间 以及诱 导 愈伤 组织 和芽 分 化 的最佳 激 素及 浓 度 , 四药 门花 的茎 段最 佳灭 菌 时 间
参 考 文献
1 张宏达. 中国植物志[ M] . 北京 : 科学 出版社 , 1 9 7 9
表3 不同浓度 生长分 裂素 处理对 茎段分化 芽的影响
2 顾 垒, 张奠湘. 濒危植物四药门花的 自花授粉明. 植物分类学报 , 2 0 0 8 ( 5 )
3 刘华. 四 药 门花 扦插 繁 殖技 术 Ⅱ 】 . 现 代 园艺 , 2 0 1 3 ( 2 3 )
被 国家 列 为重点 保 护 的药用植 物 之一 。
2 铁皮 石斛 组 织培 养技术
铁 皮 石 斛 种子 细 如 粉 末 , 又缺 乏 胚 乳 , 需在 适 宜 的环 境
与真菌共生才能萌发嘲 , 自然繁殖率极低 , 生长周期长。只有
通 过组 织 培养 技术 实现 铁皮 石斛 快速 繁殖 以满 足市 场需 求 。 组 织 培养 一 般采 用野 生 铁皮 石 斛植 株种 子 、 茎 尖 和茎 段
问题 和 展 望 了发 展 前 景 。
关 键词 : 铁 皮 征
铁皮石斛( D e n d r o b i u m c a n d i d u m W a l 1 . e x t a ' n d 1 ) 是 兰科 石 斛属 多年 生 附生 草本 植 物 , 俗 称铁 皮 兰 、 黑 节草 , 是 我 国名 贵 的传 统 中药 材 之 一 , 位于“ 九大仙草” 之首 , 同 时也 是 一 种 重 要 的 花 卉植 物 f 1 ] 。其 生 物学 特 征 为 : 茎直立 , 圆柱 形 , 通 常 长 2 0~3 5 c m, 直径 2 4 c m; 幼 嫩 茎 长 5~ 7 c m, 肥壮饱满 , 可 粗 达8 m m; 长茎 着花 时略弯 垂 。 叶3 ~ 5 枚, 生 于茎 上部 节 上 , 二
铁皮石斛组织培养与栽培技术分析
铁皮石斛组织培养与栽培技术分析作者:杨洪兰来源:《农民致富之友》2018年第07期一、铁皮石斛组织培养技术铁皮石斛种子在萌发的过程中会受到多种因素的影响,如果不能对这些因素进行有效控制变化铁皮石斛种子的发芽率,进而影响铁皮石斛的产量和质量。
有部分学者对种龄与萌芽的关系进行研究之后可以发现,在采用组织培养技术进行萌芽操作时,选用了2-6月种龄的种子进行分别培养,其中种龄较大的种子在培养操作中表现出明显的优势,无论是萌芽时间还是萌芽率都表现为种龄越大萌芽所用时间越短,萌芽率越高。
由此可见,在进行组织培养时需要优先选择种龄较大的种子进行培养。
另外,在培养基中添加适当的NAA、IAA、IBA激素对试管苗培养的根系生长具有促进作用,为此,在组织培养的过程中为了提升幼苗的根系生长率,可以根据实际培养情况在培养基中适当添加激素,进而达到增收增产的目的。
二、铁皮石斛的栽培管理技术1、炼苗与出瓶炼苗指的是将培育之后的试管苗移植到炼苗房,让其在炼苗房内栽植3周左右的时间,在此期间内,实现试管苗对自然环境的适应的整个过程。
经过一段时间的培育,幼苗的叶子呈现浓绿色且根系生长到一定长度之后便可出瓶栽植。
试管苗在炼苗房内培育2-3三周时间之后,观察幼苗的生长状况,当增值代数为10代以内,幼苗长至3cm,长出3节以上肉质茎,且叶片数量达到5片左右,颜色正常的情况下方可出瓶。
除此之外,对根系的生长状态也具有一定的要求,具体表现为根系表皮应呈现白中带绿的颜色,根系长度在3cm以上,且数量在5根以上,不存在黑色根须和畸形根系。
出瓶的具体操作方式如下:为了减少出瓶操作不当为幼苗带来损伤,需要将培养基和幼苗同时取出,之后将发育良好的幼苗与被污染幼苗、根系较少的幼苗分开处理。
正常发育的幼苗在取出之后需要先使用自来水清洗掉表面的琼脂,避免因琼脂残留导致的根系腐烂现象,待表层的琼脂清洗干净之后,使用清水进行再次冲洗。
而对于根系发育不良的幼苗来说,则需要采用生根粉进行浸泡,待根系发育完全之后,方可进行下阶段的栽植操作。
铁皮石斛的研究进展
养基有利于种胚的萌发 ,萌发率接近 80% ; 培养基中加入 2%活性炭 ,原球茎增殖倍数高 ; 添加 NAA 使试管苗生根多 且长 。
为解决原球茎转接成活率低的问题 ,侯丕勇等 [5 ]对悬浮 培养的原球茎在固体培养基上生长和分化进行了研究 。他 们选用不同的培养基 ,以植株鲜重和成苗数为指标 ,考察原 球茎的生长和发育 。结果发现 ,降低培养基微量元素含量有 利于原球茎的生长 ,但不利于分化 ,灭活真菌容易引起原球 茎形态变异 。刘骅等 [6 ]对降低试管苗繁殖成本进行了研究 , 用常水替代蒸馏水 、食用白糖替代药用蔗糖 ,成效明显 。
铁皮石斛的种子细如粉末 ,一个蒴果内所含种子达百万 粒之多 ,由于缺乏胚乳 (营养物质 ) ,种子必须飘落到非常适 宜的环境与真菌共生 ( symbiotical)才能萌发 ,自然条件下萌 发率极低 。组织培养是实现快速繁殖 、人工栽培的最佳技术 手段 。组织培养一般采用野生铁皮石斛植株 ,以其胚 、茎尖 或根尖为外植体 ,接种到培养基上进行细胞培养 。从细胞到 微苗 、幼苗 、壮苗 ,周期约 1年 。 1985年左春芳等开始研究铁皮石斛的组织培养 ,并取得 进展 。唐桂香等 [4 ]以成熟的铁皮石斛种胚 ,用 1 /2M S为培 养基 ,接种到含有 6 - 苄基腺嘌呤 (BA )和萘乙酸 (NAA )以 及含有马铃薯 、香蕉提取物的培养基上 ,诱导种胚萌发 、增 殖 、分化及生根 。研究结果认为含有 20%马铃薯提取物的培
铁皮石斛栽培技术研究进展论文
铁皮石斛栽培技术研究进展论文铁皮石斛栽培技术研究进展论文摘要:通过对近年来国内外关于铁皮石斛栽培技术的相关文献进行归纳和总结,发现适合铁皮石斛的种植基质多种多样,这些基质有共性,也有特性。
通过对其栽培环境因子的研究,为合理开发和种植铁皮石斛提供理论依据。
关键词:石斛;基质;栽培模式;肥料1基质1.1菌渣∶水苔栽培食用菌后的培养料称为菌渣,富含纤维素、维生素、抗生素、木质素、矿质元素和其他生物活性物质。
陈世昌等的研究表明,添加适宜菌渣,可以增加土壤孔隙度,降低土壤容重[5]。
唐敏[6]设计了5种栽培基质:A(菌渣∶水苔=1∶9)、B(菌渣∶水苔=3∶7)、C (菌渣∶水苔=5∶5、D(菌渣∶水苔=4∶6)、CK(菌渣∶水苔=0∶10),结果表明,当菌渣和水苔的比例为3∶7时,其基质对铁皮石斛的根长、根数、苗高、生长速度和存活率起到了较明显的促进作用。
我们每年产生的菌渣至少400万t,传统的处理方法为燃烧或丢弃,但会造成环境污染,这也为菌渣的合理开发开辟了新的途径。
1.2松树皮∶泥炭土谢静等[7]所做试验设3个处理,分别为松树皮∶泥炭土=2∶1、松树皮、松树皮∶蔗渣=2∶1,结果表明,松树皮与泥炭土体积比为2∶1时能显著促进铁皮石斛节数、根数增多,茎伸长,增加鲜叶和鲜条产量,提高生物量,总体情况显著优于其他处理。
蔗渣因其通气性差,基质潮湿,容易造成根系腐烂死亡,从而影响铁皮石斛生长。
1.3细陶粒∶腐殖土李关艳等[8]以细陶粒、珍珠岩、腐殖土、椰糠、刨花、泥炭6种基质配制不同的混合基质进行炼苗筛选,具体试验设计如下:珍珠岩∶细陶粒(1∶1、1∶2、1∶3)、珍珠岩∶腐殖土(1∶1、1∶2、1∶3)、珍珠岩∶泥炭(1∶1、1∶2、1∶3)、珍珠岩∶椰糠(1∶1、1∶2、1∶3)、珍珠岩∶刨花(1∶1、1∶2、1∶3)、细陶粒∶腐殖土(1∶1、1∶2、1∶3)、细陶粒∶泥炭(1∶1、1∶2、1∶3)、细陶粒∶椰糠(1∶1、1∶2、1∶3)、细陶粒∶刨花(1∶1、1∶2、1∶3)、细陶粒∶珍珠岩∶腐殖土(2∶1∶1)、细陶粒∶珍珠岩∶泥炭(2∶1∶1)、细陶粒∶珍珠岩∶椰糠(2∶1∶1)、细陶粒∶珍珠岩∶刨花(2∶1∶1)。
铁皮石斛组培快繁技术研究进展
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2 基本培养基及培养条件
铁 皮石 斛 组 织 培 养 主要 采 用 MS 、改 良 MS和 B |. 1H为基 本培 养基 ;适 宜 光照 周期 为 1 / l] I 2hd ; 1 7
温度 以 ( 5±1 ℃最 适合 原球 茎 的生 长繁 殖 ,较 低 2 )
种源的重要基础。关于铁皮石斛 的组培快繁技术 已
参 考文 献 :
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河 南 农 业 科 学 ,20 ( ) 0— 2 0 9 5 :4 4 .
( 责任 编辑 :柯 文辉 )
2 6
琅 舛妓
20 第1 0年 期 1
箱 t 琅 舛艘
2 5
铁 皮 石 斛 组培 快 繁 技 术研 究 进展
铁皮石斛原球茎组织培养研究进展
一••琴••零••零••琴••琴■■琴丨••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴••琴••琴••零••零■•零■•零■•零■•琴■•琴■•琴f文章编号:1002-0659 (2018) 02-0036-05I|铁皮石斛原球茎组织培养研究进展i专题综述t张鑫!(天津创世生态景观建设股份有限公司,天津南开300000)摘要:铁皮石斛是我国传统的名贵中药材,具有很高的药用价值,其所含的主要成分为石斛多糖和生 物碱。
由于长期的采挖,自然资源日益枯竭,现阶段铁皮石斛的种苗主要通过组织培养方法获得,但 在培养过程中存在诸多问题如出苗的成本过高,幼苗移栽成活率低,工厂化生产效率低等。
鉴于以上 问题,对于铁皮石斛原球茎的研究日益广泛,原球茎中含有同石斛苗相同的药用成分,通过大规模培 养来提取,同样可以满足药材市场对石斛的需求。
本文通过对相关文献的查阅,阐述了有关铁皮石斛 原球茎的组织培养方面的研究概况。
关键词:铁皮石斛;原球组织培养;多糖中图分类号:S682.1+9 文献标识码:A铁皮石斛(■O e/zdraW M m q^dna/e Kimura et Migo)是兰科(Orchidaceae)石斜属(Dendrobium)多年生附生草本植物,因其老基外呈黑色,又名为黑节草,是名贵中药,居“中华九大仙草”之首,所含的主要成分为石斛多糖及生物碱,另外,还 有酚类、菲类、芪类、倍半萜类及香豆素等。
现 代药理研究证明石斛多糖具有抗肿瘤、增强免疫 力的功能。
但由于铁皮石斛生长环境特殊,以及 长期采挖,自然资源日趋枯竭,已被国家列为重 点保护的野生药材。
从20世纪中期开始就有关 于铁皮石斛的研究,主要涉及组织培养方法、有 效成分含量和药理作用方面的研究。
随着研究的 深人,发现铁皮石斛在组织快繁过程中存在一些 问题,例如通过组培生产出苗的成本过高,幼苗 移栽成活率低,工厂化生产效率低。
铁皮石斛栽培、组培技术研究进展
关键 词 : 皮 石 斛 ; 培 ; 培 ; 用 价 值 铁 栽 组 药 中图分类号 Q 4 .1 .3 99 7 8 4 文献标识码 A 文章编号 10 7 3 (0 2 l 4 o 0 7— 7 1 2 1 )9— O— 4
Pr g e s o h tfca o r s n t e Ar i i lCuli a o an s u l tv to fDe r b u c n du i tv t n d Tis e Cu i a n o nd o i m a di m i i
摘
要: 综述 了铁皮石斛的植物学特 性、 栽培技 术、 组培技 术、 药用价值 。总结 了近 年来 多个科研单位及 个人 在铁 皮
石斛 育种技术上所取得 的研 究成果 , 包括种子 萌发 、 原球 茎分化 、 苗以及 生根 培养 , 壮 以期 为今后 的育种工作提 供借
鉴 。 并对 未 来我 国铁 皮 石 斛 的 研 究发 展 进 行 了展 望 。
铁 皮石 斛 ( edoim a dd m) 兰科 石 斛 属 多 年 D n rbu cn iu 是 生 附生 草本植 物 ,被誉 为“ 中华九 大仙 草 ( 铁皮 石 斛 、 山 天 雪莲 、 千年人 参 、 百二 十年首 乌 、 甲之 茯苓 、 花 苁蓉 、 山灵 深
霜多雾 、 降雨 量 5 0~10 m 的常 绿 阔 叶林 中 。铁 皮 年 0 00 m 石 斛 自然 结实率 很低 , 何平 荣 等 认 为其 平 均 自然结 实 率为 0 3 % , 中 以 开花 当天 萼 片 还 没有 完全 展 开 时 .1 其 的人 工授 粉结 实率最 高。铁皮 石斛 自花授 粉成 功 率极 低 ,
大进展 。
仅 3%左 右 , 0 而异 花授粉成 功率 达 10 。铁 皮石 斛野 0%
铁皮石斛组培快繁及移栽技术研究
高其移栽成活率 ,为铁皮石斛工厂化育苗及其高效 栽成活率及长势的影 响。以上 3 种基质 ,每个处理
栽 培 提供 技术 依 据 。
1 材料 与方 法
1 . 1 材 料
5 0 0 株丛苗 , 设3 次重 复 , 移栽 6 0 d后统计成 活率 及小 苗长势。 1 . 3 培 养条 件
以诱 导 的原 球 茎进 行 以下试 验 。
1 . 2 方法
大棚 。9月授 粉 成 功后 , 来 年 2月选 择天 气 晴朗 的下 其 他 为 暗培 养 ,湿度 保 持在 7 0 %。大 棚温 度 在
1 . 2 . 1 原球茎增殖。将原球茎分别接种在 以下培养
铁皮石斛种 子在 M S空 白培养基上进行播种 , 基中 : I 一 1 : MS + 2 0 g / L蔗糖 + 6 g / L琼 脂 ; I - 2 ; M原 球茎 为 材 马铃薯 泥+ 2 0 g / L蔗 糖 + 6 g / L琼 脂 ; I - 3 : MS + 2 0 %马 料 , 研 究不 同培养 基对 铁皮 石 斛原 球茎 增 殖 的影 响 , 铃薯 泥+ 2 0 g / L蔗 糖 + 6 g / L琼 脂 ; 1 - 4 : MS + 3 0 %马铃 结果见表 1 。 根据方差分析结果 , 不 同培养基对铁皮
成 功 的红 杆铁 皮 石斛 原球 茎 为外 植 体 ,对 原球 茎 增 松 树 皮 为 基 质 , 每个处理设 9 0株 生 根 组 培 苗 , 设 3 殖、 原 球 茎分 化 、 壮 苗 生根 、 试 管 苗 驯化 时 间 以及 栽 次 重复 , 移栽 4 5 d后记 录小 苗长 势情 况 。
培养 室 温度 ( 2 5 ± 2 ) ℃, 生 根 培养 光 照 3 0 0 0 l x , ( 2 5 _ + 5 ) ℃, 光照 1 0 0 0 0 l x , 湿 度保 持在 7 0 %。
石斛组织培养研究进展
石斛组织培养研究进展张明夏鸿西朱利泉张玉进[摘要]目的:综述国内外对石斛组织培养进行的深入研究。
方法:系统查阅国内外近10年来的有关文献20余篇。
结果与结论:介绍了石斛组培的多种方法,对培养基、激素及多种条件对组培的影响作了论述,并提出了存在的问题及对策。
[关键词]石斛;组织培养[中图分类号]S567.035.3 [文献标识码]A[文章编号]1001-5302(2000)06-0323-04石斛属Dendrobium为兰科第2大属,多年生草本植物,全球计有1 500种。
多生于树皮或岩石上,开花多,结果少,每果可含100万粒种子。
种子细如粉尘[1],每粒重约0.3~0.4 μg。
种胚不超过球形阶段,即存在后熟现象。
由于缺乏胚乳组织,需与真菌共生(symbiotical)才能萌发,自然条件下发芽率一般不及5%。
石斛为合轴生长(sympodial),分株是其繁殖的主要方式,对生长条件的要求较为苛刻。
石斛属植物中有不少是名贵中药,在《本草纲目》中石斛被列为上品。
我国76种石斛属植物中有近40种作药用[2],著名的有D.nobile(金钗石斛)、D.candium(铁皮石斛)、D.huosanness(霍山石斛)等。
具有强阴益精、补肾益力、轻生延年等作用,其应用范围正迅速扩大。
石斛属植物约有四分之一可供观赏[3],称为石斛兰D.orchids,以花艳丽而著称,近年作为观赏植物发展迅速,已形成独立产业。
集药用和观赏于一体的价值,加之过度的采伐利用和繁殖率低,造成了石斛供需之间的紧张状况,我国已将其列为濒于绝灭的受保护的中药品种之一。
自1960年法国人Gmorel利用石斛基尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来,石斛组织培养逐步走向深入化。
近年来,石斛组织培养的最佳条件,包括光照、温度、pH以及如何选用外植体,选用激素等取得长足进展,并利用组培技术研究种子萌发过程中的生理生化变化等,还获得了转基因石斛植株。
铁皮石斛的快速组培实验分析----农研铁石斛种植
农研铁皮石斛种植铁皮石斛的快速组培实验分析铁皮石斛(Dendrobium Nobil)是兰科石斛属多年生附生兰,但目前由于专业性培育斛的整体水品不是很高,关键的生产环节技术薄弱,造成石斛繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种短缺,品质较低,且市场售价较高。
因此建立和完善石斛组培快繁技术是解决这一问题的重要途径。
本试验以石斛花后假鳞茎带节茎段为外植体诱导丛生芽,研究以丛生芽途径建立植株再生体系。
主要围绕外植体灭菌、腋芽诱导、丛生芽增殖、壮苗生根、炼苗移栽等几方面进行,集中研究不同灭菌方法、不同基本培养基类型、不同激素配比和浓度、不同添加物、不同碳源等多个方面问题。
试验中的培养基方案均采用正交设计,数据采用SPSS软件分析。
通过试验,获得如下主要结果:1、以石斛开花后假鳞茎带节茎段为外植体,最佳的灭菌方法是Ⅱ处理组,即假鳞茎带节茎段→自来水冲洗→洗衣粉上清液浸泡10min并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗30min→置于超静工作台上70%酒精浸泡20s→无菌水冲洗4次→0.1%HgCl_2浸泡15min→无菌水冲洗8次→取出吸干水分并除去包叶→接种,成活率达80%。
2、影响石斛假鳞茎带节茎段诱导腋芽的主要因素是基本培养基、细胞分裂素BA和天然添加物,其次是NAA。
丛生芽诱导最适宜的培养基配方为1/2 MS+BA1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+椰汁150.0mL/L+食糖30.0 g/L+琼脂7.0 g/L,pH5.4,诱导达94.47%。
3、影响石斛丛生芽增殖的主要因素是:(1)基本培养基,以1/2MS最佳;(2)细胞分裂素BA,以1.0mg/L最佳;KT以0.5 mg/L最佳;(3)生长素NAA,以1.0mg/L最佳。
其次,试验中发现添加物、培养基pH值、接入茎段长度、丛植密度对丛芽增殖有显著影响。
丛生芽增殖的最适宜的培养基配方是1/2MS+BA1.0mg/L+NAA1.5mg/L+KT0.5mg/L+食糖30.0g/L+琼脂 6.0g/L+椰汁150.0mL/L,pH5.4。
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养
铁皮石斛组织培养研究进展1、1种子萌发1.2基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6 , MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW、KundsonC , 1 / 2N6 White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS等14种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH、Kn、MS次之,I /2MS、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH、改良N6、MS、KS、VW、KundsonC 培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30d种子发芽率均达到95 % ,但1 / 2MS培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3激素在培养基中添加一定浓度的NAA可促进种子的萌发,浓度以0.2 —0.5mg/L最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用。
2,4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT、IAA对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1mg/L时,对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用, 但张铭等发现ABA能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。
1.5炭源在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加人2 %蔗糖。
曾宋君等在改良N6 + NAA 0.2mg/L 的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2原球茎增殖2.1基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。
石斛种植的研究进展
石斛种植的研究进展石斛(Dendrobium)是兰科植物中的一种,也是中国传统药材之一。
它的根茎被广泛应用于中药制剂和保健品的制造中,并且具有很高的药用价值。
近年来,石斛的种植研究得到了广泛的关注和推动,在培育新品种、改进种植技术、利用基因工程等方面取得了一系列的进展。
首先是石斛品种选择和培育方面的进展。
石斛的品种繁多,但由于其繁殖困难以及生态环境要求严苛,一直以来人们都希望培育更好的石斛品种。
通过传统育种、细胞培养和遗传改良等手段,研究人员获得了一些新的优良石斛品种,例如“天涯石斛”和“丽江石斛”等。
这些新品种具有更高的产量和更好的品质,能够满足市场需求。
其次是石斛种植技术方面的进展。
石斛是高山兰花,对生长环境的要求较高,一直以来在种植过程中都存在一系列的困难和问题。
近年来的研究主要集中在石斛的温度、光照、湿度和营养等方面的调控上。
研究人员发现,适宜的温度和光照条件可以提高石斛的生长速度和产量,同时合理调节湿度和施肥可以改善石斛的品质。
此外,还可以通过引入激素和生物诱导剂等手段来提高石斛的营养吸收和抗逆性,从而改善种植效果。
再次是石斛的组织培养和饮片加工方面的进展。
石斛的根茎富含多种活性成分,但传统的种植方式效率低下,无法满足工业化生产的需要。
近年来,研究人员通过组织培养和生物工程等手段,成功培育了石斛的组织培养苗,并利用这些苗进行大规模生产。
此外,石斛的饮片加工工艺也在不断改进和完善,通过优化炮制工艺,提高饮片的品质和有效成分的提取率。
最后是石斛基因工程研究方面的进展。
基因工程是一种应用广泛的技术,可以通过改变植物的基因组成来调节其性状和代谢产物的合成。
近年来,石斛基因工程的研究取得了一系列的进展。
研究人员通过转基因技术成功引入了一些与石斛生长和药用性状相关的外源基因,例如提高石斛产量和抗病性的基因。
此外,还通过基因靶向编辑等技术,有效地改变了石斛次生代谢产物的合成途径和产量,从而提高了石斛的药用价值。
铁皮石斛组织培养研究进展
民营科技2018年第3期生态农林铁皮石斛组织培养研究进展曾铭(福建农林大学林学院,福建福州350000)铁皮石斛是属于兰科石斛属的一种多年生草本植物,它又被人们称作黑节草、铁皮兰。
早在1000多年前的《道藏》中更是被誉为“中华九大仙草”之首,主要分布于福建、浙江、湖南等地[1]。
铁皮石斛有着丰富的药用价值和超高的经济价值,它可以滋阴补益,抗疲劳抗氧化[2,3],延缓人体衰老;可以降血糖、降血压、抗肿瘤[4],增强特异性或非特异性免疫[5]。
因此,有着广泛药理作用的铁皮石斛一直被认为是珍贵的中药材,但是由于铁皮石斛的种子较小并且无种胚,需要和特定的真菌与其共生才能促进萌发[6],故在天然状态下其繁殖率一直较低,并且生长缓慢,加上人为过度开采,野生铁皮石斛更是少之又少。
组织培养技术是实现植物的快速繁殖,人工栽培的最快技术手段,从20世纪70年代开始,我国已经展开了对铁皮石斛快繁技术的研究。
本文对近几年来的铁皮石斛组织培养的研究,包括外植体的选择,培养基和激素配置以及组培常见问题等情况做出综述。
1外植体的选择铁皮石斛的外植体来源十分广泛,种子、叶片、茎段、根、腋芽等都可以作为组织培养材料。
较为常见的铁皮石斛快繁技术是使用灭菌的成熟种子与幼嫩茎段作为外植体[7],其中使用种子所需要经历的过程有种子→愈伤组织→原球茎→再生植株,而以茎为外植体只需要经过茎段→愈伤组织→丛芽→再生植株,故使用茎段作为外植体诱导成苗的速度要比种子萌发成苗的速度快[8],以茎段建立的繁育体系其平均增殖系数小,苗木生长不一;而以种子为外植体建立的繁育体系苗木生长整齐,增殖系数大[9]。
从生产角度上看,以茎段建立的繁育体系成苗期段,处于短期代数的苗可以用于生根;而以种子萌发繁育,则可以在一段时间之内获得大量的成苗。
从无菌体系的建立的角度上看,饶宝蓉等[10]研究表明,茎段外植体明显输于种子外植体,其中种子外植体的污染率仅为8%~13%,而茎段外植体的污染率为48%~62%,是前者的大约5~6倍。
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高矮判 断其株 丛 “ 年龄 ”1 i 9 。一 年生新茎 下 萌生 须 根 , 春 季 和夏季 是 生长高 峰 。 秋季进 入休 眠状态 时 叶不脱 落 .
属 于常绿 生 活型 ; 二年 生茎 主要 是积 累 营养 和孕 花 。 一
有的起 促进作用 , 有的起抑制作用 ; 同种激 素不 同浓度对 铁皮石 斛种子萌 发的影 响表现亦有所 不 同 . 一般 表现 为 低浓度 促进 、 高浓度 抑制 。研究表 明 , 定浓 度 的 N A 一 A
广东农业科学
2 0年第 4期 01
8l
铁皮石斛组织培养与栽培技术研究进展
魏 凤 娟
( 徽农业大学生命科学学 院, 安 安徽 合 肥 2 0 3 ) 3 0 6
摘 要 : 合 铁 皮 石 斛 的 生 物 学 特 性 , 不 同 因 素 对 铁 皮 石 斛 种 子 萌发 、 球 茎 增 殖 与 分 化 、 定 芽 诱 导 与 增 殖 、 根 结 从 原 不 生
日益 减 少 , 远 不 能 满 足 国 内 外 市 场 经 济 发 展 和 临 床 远 医 学 的 需 要 , 因 此 铁 皮 石 斛 人 工 种 植 的 规 模 迅 速 扩 大 [ 。在 拥 有 实 地 的 石 斛 种 植 管 理 经 验 和 阅 读 大 量 文
献 资料 的基础 上 ,笔者 结 合铁 皮 石 斛 的 生物 学 特 性 . 总 结 了铁 皮 石 斛 组 织 培 养 与 栽 培 管 理 技 术 的最 新 研 究 与应 用 结果 , 以期 为 铁皮 石 斛 的大 规 模 人 T种 植 提 供参 考 与理论 依据 。
与壮 苗 的 影 响 等 方 面综 述 了 铁皮 石 斛 组 织 培 养 技 术 研 究 概 况 , 栽 培技 术 和 田问 管 理 两 大 方 面 总结 了铁 皮 石 斛 的 栽 培 管 从 理 技 术 研 究 进 展 , 对 铁 皮 石 斛 的 组 织 培 养 与 栽 培 管 理 技 术 发 展 方 向 进行 了展 望 。 并
无 霜 多雾 、年 降雨量 5 0 10 0f 的常绿 阔 叶林 中 0 — 0 l i m 铁 皮 石斛 自然结 实 率很 低 , 何平 荣等 朔 为平 均 自然 认 结 实率 为 03 %, 中 以开 花 当天萼 片还没 有完全 展 开 .1 其 时 的人 工授粉 结实率 最高 。铁皮石 斛 以异花授 粉为 主 , 其 白花 授粉 成功 率极 低 、 3 %左右 , 异花 授粉 成功 仅 0 而 率 达 1 0 。铁 皮石 斛野生 种子 的成 活率很 低 。 0 %同 122 生 长 周 期 铁 皮 石 斛 的 假 鳞 茎 基 部 具 分 孽 能 ..
有 明显 的节 和 纵 槽 纹 , 部 稍 窄 ; 几 厘 米 至 几 十 厘 基 高
收 稿 日期 :0 9 1 — 8 2 0 — 1 1 作 者 简 介 :魏 风 娟 ( 9 3 ,女 ,硕 士 ,农 艺 师 , mal 1 7 一) E— i
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1 MS培养 基 可 明显提 高种 胚 的萌 发率【 ; 张玲 等[ / 2 但 9 1 2 o l 认 为 。香蕉 提取 物 和椰乳 对种 子萌 发 和正 常发 育有不 利 影 响 , 干扰其 正 常发育 过程 。 会 在 组织 培养 过程 中适 当添 加活 性炭 。可 以 吸附代
谢过程 中产 生 的废弃 物 , 防止组 织褐 变 . 并刺 激胚 胎 的 发 生 与 生 根 [2。 曾 宋 君 等 [发 现 , 改 良 N + A 11 5] , 1 2 1 在 N A 02 m / 的最 适 培 养 基 上 添 加 白糖 、 糖 , 萌发 效 . gL 片 胚 果 比添加 蔗糖好 , 可能是 因为 白糖 、 这 片糖 中含 有适合 胚 萌发 和成 苗 的矿质 元素 的缘 故 。 22 不 同 因素对铁 皮石 斛原球 茎 增殖 与分化 的影 响 .
主 要 成 分 为 石 斛 多 糖 和 石 斛 碱 . 有 滋 阴 、 胃 、 津 具 益 生
止渴 、 肺 止 咳 、 壮 及 增 强 免 疫 活 性 的作 用 , 南 润 强 为 亚和 东南 亚 地 区著 名 的 中草 药 _ 5 J 。铁 皮 石斛 产 品如 枫
斗等 的 市场 价格 不 菲 。在 野 生 状态 下 , 铁皮 石 斛 繁 殖 速 率 低下 、 长 缓 慢 , 生 加之 掠 夺 性采 挖 , 其 野 生 资 源 使
关 键 词 : 皮 石 斛 ;生 物 学 特 性 ;组 织 培 养 ;栽 培 技 术 铁
中图 分 类 号 :6 23 ¥ 8 号 :0 4 84 (0 00 — 0 10 1 0 — 7 X2 1)4 0 8 - 5
Adv n e o he ts ue c t r n r i c a uli a i n a c n t is ulu e a d a tf i lc tv to i o e d o i m a di u a 1e nd fD n r b u c n d m W l.x Li l
12 生 长 特 性 .
( e do im cn iu l e id.的茎 。 皮 右斛 D n rbu a dd m Wa . xLn 1 1 ) 铁 在 我 国主 要 分 布 于 江 两 、 』 两 、 东 、 州 、 南 、 广 贵 云 安 徽、 江、 浙 湖南 、 西 、 南 、 建 等地 ] 陕 河 福 。铁 皮石 斛 的
生 长 速 度 ;添 加 5 %香 蕉 泥 和 2 % 马 铃 薯 提 取 物 的 O
况、 花蕾 发育 阶段 和花 被片 开展 程度 , 其单 花花 期划 将 分 为 5 阶段 , 个 即萌芽期 、 现蕾期 、 初花期 、 盛花期和枯萎 期: 在湖 南省新 宁县 良山 国家 地质 公 园 , 每年 5月 中旬 铁皮石斛 萌发少数单 花小花苞 、 多数仍 是花序包 。 6月上 旬花苞开始 绽放 , 6月 中旬初为盛花期 。 自 6月底花量 大 幅减少 , 7月初花期结束 。 金银兵[ q 认为 , 铁皮石斛在 6月
力, 自然 条 件 下分 孽 很 慢 , 般 1 只 分孽 1 , 一 年 茎 每年 分孽 茎 生 长量 也 增 加 , 因此一 般 可 以 根据 茎 数 和茎 的
1 铁 皮 石 斛 的 生 物 学 特 性
11 形 态 特 征 .
铁 皮石 斛 的茎丛 生 , 圆柱 形 , 直立 , 色或铁 灰 色 , 绿
12 生 长 环 境 __ 1
铁 皮 石 斛 多 生 长 于 海 拔 9 0 1 0 I 0 ~ 01 5 T
之 间 、 平均 气 温 1 ~ 8 、 对 湿度 6 %~ 5 、 光 年 2 l℃ 相 0 7% 透 度 6 %左右 、 0 生长季 节温度 2 ~ 8I、 季气 温 9 1 o 0 2c 冬 = ~ 2C、
初至 7 月上旬 都有植株 开花 ,但其 开花期主要集 中在 6 月下旬 , 从花芽 萌发 至开花所需要 的时 间为 3 左 右。 5d
2 铁 皮 石 斛 组 织 培 养 技 术
目前 . 铁皮 石斛 组织 用 于外植 体 的 主要有 种 子 、 原 球 茎 、 工种 子及无 菌 苗幼 苗茎 段等 。 再生 植株 获得 人 的方式 主要有 以下 几种 : 1 ( )种 子一 原球 茎 小植株 ;
铁皮石斛 为兰科植 物
( rhd ca ) 黑 节 草 O c ia ee
米不 等 , 多节 , 问略 膨大 , 部稍 缢缩 , 褐色并 具 明 节 节 黑 显光 泽 。叶少 数 , 生 于茎 上部 , 柄 , 片长 圆状 披 互 无 叶 针型 : 叶鞘 膜 质 , 紧抱 节 间 , 白色 : 面与 叶鞘 均具 淡 灰 叶 紫色 斑 点 。总 状 花 序生 于 具 叶或 无 叶 茎 的上 部 节 上 , 花 2 5朵 , 黄 绿 色 或淡 黄 色 。果 实 为 蒴果 , 卵 状 , ~ 淡 长 蒴果 种 棱 为 3棱 , 暗绿 至 青 绿 色 , 有 棕褐 色 斑 点 ; 色 布 种 子小 而 多 . 种皮是 一 层透 明 的薄 壁细胞 , 加厚 的环 有 纹, 种皮 含 大量 空气 ; 内胚 发育 不 全 或不 成 熟 , 胚 种 无 乳 。根附生 于 岩石上 。 为无 分枝 的气 生根 , 圆 。 扁 白色 , 绿 色 或灰 白色 、 袍 色 , 1m 左 右 , 度 与 株高 一 灰 粗 m 长 般[o 8l -。
生 的茎 相继枯 萎死 亡 。 1 _ 物候期 -3 2 何 平荣 等[ 9 1 根据铁 皮石 斛 的花 芽发 育状
作 用【5] 一 A对胚 萌发后 的生长起 抑制作用I : ,一 -; B L16 7 24 s D对胚的萌发起抑制作用 [51 B 1 ,; A有抑制种子萌发 和 1 A ,7 1 抑制植 物生长 的作用 ; T、 A对胚萌发和成苗 的影 K I A 响不 大 , 当浓 度过高时对胚萌发起抑制作用【。 l l 】 213 添加 物 与碳 源 蒋 慧 萍 等[研 究 发 现 . .. 8 1 在播 种 培养基 中加 入适 宜浓 度 的 6 B 一 A、椰 子汁和 马铃 薯泥 , 均 能提 高 萌发率 和原球 茎 发生率 ,并 加快 萌 发速 度和
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Absr ct Co b n n wih he n rducin f binon c o ndr i ta : m iig t t i to to o o ri s f De obum c n du , t lt s r s a c a d pp iai n a di m he ae t e e r h n a lc to r s ls o is e u t e nd a t ca c lia in e hn l g we e umm aie fo difr nta pe t,de eo e u t f ts u c lur a ri il u tv to tc o o y i f r s rz d r m fe e s c s v lpme t ie t o n d r ci on f tsue c lu e a ri ca lia in tc noo y o is ut r nd a tf ilcutv to e h lg fDen r bi m a di i d o u c n dum e a s oi e uti hi a r wer lo p ntd o n t sp pe . Ke y wor :De dr i ds n obum a i u W a1e nd ;b o o is is u c nd d m l.x Li l i n m c ;tsue e hur ;a t cilcutv to e ri a liai n i f