南京市公共场所嗜肺军团菌污染状况调查
公共场所集中空调冷却水中军团菌污染状况调查
公共场所集中空调冷却水中军团菌污染状况调查摘要】目的了解泉州市公共场所集中空调通风系统冷却塔水中的嗜肺军团菌污染状况。
方法于2008年至2010年每年的6月至8月在泉州市随机抽取三星级以上酒店、超市、医院的空调冷却水，进行军团菌培养、检测和评价方法参照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（卫生部，2006年）。
结果抽检93份样品，阳性30份，阳性率32.26%。
超市阳性率最高为81.82%，医院阳性率36.36%，酒店阳性率21.67%。
结论我市公共场所集中空调通风系统的嗜肺军团菌检测阳性率较高，提示我市超市、医院、酒店集中空调通风系统的军团菌污染危险不可忽视，应加大卫生监督管理力度,使广大群众在公共场所活动有安全感。
公共场所集中空调通风系统卫生检测指标应列入国家强制标准。
【关键词】集中空调冷却水嗜肺军团菌污染随着国民经济迅猛发展和人民生活水平不断提高，集中式中央空调广泛使用，由此引发的军团菌污染水质、空气所致的军团菌病已经成为一个重要公共卫生问题受到人们的关注，目前已证实集中空调冷却水是引起军团菌病散发和流行的最重要来源。
我们于2008至2010年对泉州市三星级以上酒店、超市、医院的集中空调冷却塔水进行嗜肺军团菌检测，现将结果报告如下。
1 调查内容与方法1.1调查对象泉州市随机抽取三星级以上酒店、超市、医院，共计51家，其中酒店40家、超市5家、医院6家。
将所抽单位内的所有冷却塔作为调查对象，以无菌方法采集水样93份。
1.2调查内容集中空调通风系统冷却水中的嗜肺军团菌。
1.3检测方法冷却水嗜肺军团菌检测按照卫生部在2006年3月制定的《公共场所集中空调通风系统卫生规范》附录 A中冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检验方法，用加有硫代硫酸钠的无菌玻璃瓶,采集冷却塔500ml的水样,4h内送检。
1.4判定标准集中空调通风系统冷却水和冷凝水中不得检出嗜肺军团菌。
2 结果调查显示，公共场所集中空调通风系统冷却塔水抽检的单位51家，19家检出嗜肺军团菌，合格率为62.74%。
嗜肺军团菌生化鉴定结果
嗜肺军团菌生化鉴定结果
嗜肺军团菌生化鉴定结果通常包括以下几个方面：
1.革兰氏染色：嗜肺军团菌是一种革兰氏阴性杆菌，经过革兰氏
染色后呈红色。
2.氧化酶试验：嗜肺军团菌氧化酶试验结果为阳性，这是鉴定该
菌种的一个重要指标。
3.生长条件：嗜肺军团菌需要在特定的生长条件下才能生长繁殖，
例如在36℃左右的水环境中生存，且易通过气溶胶的形式传播。
4.培养特性：嗜肺军团菌需要在特定的培养基上培养才能获得较
好的生长效果，例如在人工水环境（如集中空调循环冷却水、
自来水、淋浴水、温泉浴池水、游泳池水、人造喷泉水）中容
易滋生。
5.抗药性：嗜肺军团菌对不同的抗生素有不同的抗药性，需要根
据药敏试验结果选择合适的抗生素进行治疗。
总之，通过以上几个方面的生化鉴定结果，可以确定是否为嗜肺军团菌感染，并采取相应的治疗措施。
公共场所军团菌的污染现状及检测、控制方法研究进展
世纪 ７ ０年代 被发 现 ， 已被 世界 卫生 组织 （ ｏ） 式 现 ｗｈ 正 列 入传染 病报 告范 围 ， 团菌 在 自然界 的广 泛 存 在 以 军
及 它的高 病死 率 引 起 了人 类 的 高 度 重视 。 目前 ， 外 国
１ ８，２： ９９ １— ８．
［４ 卫 生 部 统 计 信 息 中 心 ． 国 卫 生 服 务 调 查 研 究 ． 三 次 １］ 中 第
国 家 卫 生 服 务调 查 分 析 报 告 ，０５ １８ ２０ ： ７ ．
（ 稿 日期 ：０７一 ｌ ｏ ） 收 ２０ Ｏ — ９
［１ Ｓｉｅ Ｄ ｎＨ， ａ ｅ ． ｈ ｓ ｃ ｔｎｂｔｅｎｒｋｓ ｔ １］ ｈ ｌ Ｍ， ａ Ｂｒ ｔ Ｔ ｅａｓ ｉｉ ｅ ｅ ｓ ｔｕ ｒｙ ｎｔ ｏ ａｏ ｗ ｉ ａ ｓ
王本 利 等 调查 青 岛 中 央空 调 系统 水 样 ， 团菌 阳性 军
ｌｓ ） ｌ ｉ ，由军 团菌 引起 ， ｏｓ 是经 空 气 传播 的典 型疾 病 ， 症
状为发 热 、 炎 ， Ｓ Ｒ 肺 与 Ａ Ｓ有相 似 之 处 。军 团菌病 于 ２ ０
率为 ４ ％ （７５ ） ８ ２ ／６ 。陈 悦 等 调 查 上 海 地 区 中央 空 调 系统 、 地表 ． ％， １２ 菌型以 Ｌ 型为主， ５ ％， Ｌ １ 占 ０ 但 ６型 也 有 较 高 的 检 出 率 （ ３２ ） ２ ．％ 。朱佩 云等 调 查上 海部 分 地 铁 站空 调 冷
ｎ ｅ ｈ ａｅ ｏ ｔ ｍｏ ｔｅ ａ ｄ ｈ ａｔ ｃ ｒ ｃ ｓ ａ ｎｇ ｈ ｍｅ ｅ ｈｐ ｆ ａ Ａｕ ｔａｉ ｌ ｍｂ ｒ ｉ ｏ ｓ ｎ ｓｒ ａ ｌｎ
公共场所空调冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检测原始记录
9、菌型确定：应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养：氧化酶(-/弱+),硝酸盐还原(一),尿素酶(一),明胶液化(+),水解马尿酸。血清学实验：用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。
培养基及试剂
实验步骤
1、样品的沉淀或离心：如有杂质可静置沉淀或1000 r/min离心1min去除。
2、样品的过滤：将经沉淀或离心的样品通过滤膜过滤，取下滤膜置于15mL灭菌水中，充分洗脱，备用。
3、样品的热处理：取1mL洗脱样品，置50℃水浴加热30min。
4、样品的酸处理：取5mL洗脱样品，调pH至2.2,轻轻摇匀，放置5min。项目编号样品Fra bibliotek称检测项目
嗜肺军团菌
环境条件
温度： ℃ 湿度： %
收样时间
检测时间
检测方法
嗜肺军团菌培养法
检测依据及方法
《公共场所卫生检验方法 第五部分：集中空调通风系统》GB/T 18204.5-2013（3）
主要仪器设备
生物安全柜BHC-1300ⅡA2（KLM-YQSB-002）、立式蒸汽灭菌器LDZM-60KCS-Ⅱ（KLM-YQSB-022）、二氧化碳培养箱BPN-150CW（UV）（KLM-YQSB-005）
10、结果报告：根据生化培养与血清学实验结果报告是否检出嗜肺军团菌。
观察时间
第一次：第二次：第三次：第四次：第五次：
第六次：第七次：第八次：第九次：第十次：
样品编号
GVPC平板培养
菌落验证
公共场所水环境中活嗜肺军团菌的快速检测方法
公共场所水环境中活嗜肺军团菌的快速检测方法郭沛;赵龙;胡翮【摘要】旨在建立一种基于16S rRNA前体的分子学检测方法用于快速检测活嗜肺军团菌,应用该方法与ISO标准法调查公共场所水环境中嗜肺军团菌的水平及污染现状.此研究方法的理论基础在于营养刺激后可诱导嗜肺军团菌16S rRNA前体的合成,后者可作为检测细胞活性的指标.分别应用预刺激RT-qPCR法和ISO法对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌以及非军团菌进行检测,并验证两种方法的特异性、灵敏度.应用预刺激RT-qPCR法和ISO法检测公共场所水环境中的嗜肺军团菌,比较两者结果的一致性.结果显示,预刺激时间大于3h时,嗜肺军团菌16S rRNA前体的增长缓慢,最佳预刺激时间设置为3h.预刺激RT-qPCR法与ISO法均能较好地检出嗜肺军团菌,特异性均为100％,预刺激法的最低检测浓度(Limit of detection,LOD)为102Cell/L,ISO标准法的LOD为104 Cell/L.预刺激法及ISO法的总阳性率分别为43.5％(30/69)和40.6％(28/69),两种方法的检出率差异无明显统计学意义(C2=0.119,P=0.730).预刺激RT-qPCR法是一种快速有效的检测活嗜肺军团菌的方法,诊断灵敏度及特异性高,是ISO标准法潜在的替代方案.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2019(035)003【总页数】7页(P203-209)【关键词】嗜肺军团菌;PCR;水环境;公共场所;16S rRNA;快速检测方法【作者】郭沛;赵龙;胡翮【作者单位】湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100;湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100;湖南省湘潭市食品药品检验所,湘潭411100【正文语种】中文军团菌病是一种细菌性疾病，主要表现为自限性非肺炎性庞蒂亚克热（Pontiac fever）和军团菌病症状，其特征是严重的呼吸道症状，包括具有高度致命性的肺炎。
公卫评价报告
X X区疾病预防控制中心评价报告评价项目：公共场所卫生学评价评价类别：经常性卫生学评价委托单位：XXX委托单位地址：XX区XX街道XX路148号委托单位联系人：卢XX委托单位联系电话：XXXXXX被评价单位：XXXXX被评价单位地址：XX区XX街道XX路148号卫生学评价人员：审核人：评价技术负责人：一、评价项目名称XXX酒店公共场所卫生学评价。
二、任务来源XXX酒店位于XX区XX街道XX路148号，1998年1月11日竣工并投入使用。
卫生许可项目有旅业、沐浴场所（桑拿）、健身室、游泳场所及二次供水。
该酒店于2013年4月11日委托我中心对整个酒店进行公共卫生监测和卫生学评价。
三、评价目的按照国家相关卫生法律、法规、规章、标准和规范要求，通过对XXX酒店的旅业、沐浴场所（桑拿）、健身室、游泳场所、二次供水，以及集中空调通风系统运行状况进行现场卫生学调查和监测，发现和分析存在的问题，提出改进建议，确保公众和工作人员的身体健康，有效预防传染病在公共场所的传播。
四、评价范围本次卫生学评价的范围主要是XXX酒店的旅业、沐浴场所（桑拿）、健身室、游泳场所、二次供水以及集中空调通风系统。
五、评价依据（一）国家相关法律、法规、规章、标准、规范1.《全国疾病预防控制机构工作规范》2.《中华人民共和国传染病防治法》3.《中华人民共和国传染病防治法实施办法》4.《公共场所卫生管理条例》5.《公共场所卫生管理条例实施细则》6.《公共场所集中空调通风系统卫生管理办法》7.《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（WS 394—2012）8.《公共场所集中空调通风系统清洗规范》（WS/T 396—2012）9.《公共场所集中空调通风系统卫生学评价规范》（WS/T 395—2012）10.《公共场所卫生标准》（GB 9663~9673—1996,GB 16153）11.《公共场所卫生监测技术规范》（GB/T17220-1998）12.《公共场所卫生标准检验方法》（GB/T18204.1~18204.29-2000）13.《住宿业卫生规范》（卫监督法[2007]221号）14.《沐浴场所卫生规范》（卫监督法[2007]221号）15.《生活饮用水卫生监督管理办法》16．《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）17．《二次供水设施卫生规范》（GB17051-1997）18．《建筑给水排水设计规范》（GB 50015-2009）19．《二次供水工程技术规程》(CJJ140-2010)20．《建筑给水排水及采暖工程施工验收规范》(GB50242-2002) 21．《游泳场所卫生规范》（卫监督法[2007]205号）22．《游泳池和水上游乐池给水排水设计规程》(CECS14-2002) （二）其他相关资料1．集中空调系统基本情况登记表、现场调查表、空调通风平面图、卫生检测结果；2．旅业、沐浴场所（桑拿）、健身室基本情况登记表、现场卫生调查记录、从业人员体检及培训情况记录表、场所平面图、卫生检测结果；3．游泳场所工程设计资料、现场调查资料、卫生检测结果；4．二次供水现场调查资料、卫生检测结果。
公共场所卫生检验方法 第5部分：集中空调通风系统-最新国标
公共场所卫生检验方法第5部分：集中空调通风系统1 范围本文件描述了公共场所集中空调通风系统中嗜肺军团菌、细菌总数、真菌总数、空调送风中β-溶血性链球菌、新风量、空调送风中可吸入颗粒物（PM10）、空调风管内表面积尘量和空气净化消毒装置的检测方法。
本文件适用于公共场所集中空调通风系统，其他场所使用的集中空调通风系统参照执行。
本文件中同一个指标如果有两个或两个以上检验方法时，根据技术条件选择使用，但以第一法为仲裁法。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 4789.28 食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 18204.1 公共场所卫生检验方法第1部分：物理性指标GB/T 18204.2 公共场所卫生检验方法第2部分：化学性指标GB/T 18883 室内空气质量标准GB 19489 实验室生物安全通用要求GB/T 34012 通风系统用空气净化装置3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
嗜肺军团菌Legionella pneumophila两端钝圆，有鞭毛，无芽孢和荚膜的革兰氏阴性杆菌，具有在含有L-半胱氨酸和三价铁盐缓冲液的活性炭-酵母提取液培养基上生长的特性，经生化试验和血清学试验鉴定确认的一种具有致病性的军团菌，是引起军团菌病的主要菌型。
细菌总数 total bacteria count在营养琼脂培养基上经36 ℃±1 ℃培养48 h所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。
真菌总数 total fungal count在沙氏琼脂培养基上经28 ℃±1 ℃、5 d培养所形成菌落数。
β-溶血性链球菌β-hemolytic streptococcus能产生溶血素，血平板上在菌落周围形成界限分明、完全透明的溶血环（β-型溶血）的化脓（或A群）链球菌（Streptococcus pyogenes）和无乳（或B群）链球菌(Streptococcus agalactiae)。
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法 (2)
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法1范围青岛精诚仪器仪表有限公司本标准规定了公共场所空气、水、土等不同类别环境样品中嗜肺军团菌的定量检测方法。
本标准适用于公共场所环境样品中嗜肺军团菌的定量检测，其他环境样品中嗜肺军团菌的定量检测可参照执行。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T18204.3公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物GB/T18204.5公共场所卫生检验方法第5部分：集中空调通风系统3空气中嗜肺军团菌定量检测3.1原理采用液体冲击法采样、叠氮溴乙锭（EMA）前处理结合定量聚合酶链反应(qPCR)方法定量检测室内空气和集中空调送风中存活的嗜肺军团菌。
3.2仪器和设备3.2.1微生物气溶胶浓缩器：采样流量≥100L/min，3.0μm以上粒子的捕集效率≥80%（或浓缩比≥8）。
3.2.2液体冲击式微生物气溶胶采样器：采样流量7L/min～15L/min，0.5μm以上粒子的捕集效率≥90%。
3.2.3便携式冷藏箱。
3.2.4冷冻离心机：温度4︒C。
3.2.5恒温水浴锅或金属浴：温度范围50︒C～99︒C。
3.2.6荧光定量PCR仪：非耦合6色激发光片和6色检测滤光片通道，4°C–100°C温度范围。
3.2.7卤素灯：500W。
3.2.8涡旋震荡器：调速范围0~3000rpm。
3.3材料和试剂3.3.1酵母浸出粉。
3.3.2蒸馏水。
3.3.3EMA固体粉：5mg/管。
3.3.4无核酸酶去离子水。
3.3.5矿物油，用于减少气溶胶采样时的吸收液蒸发。
3.3.6核酸提取试剂盒：DNA产量15～30μg，A260/A280在1.7～1.9之间。
3.3.7引物：上游引物5’-GAAAATAAAGTAAAAGGGGAAGCC-3’；下游引物5’-ATCAATCAGACGACCAGTGTATTC-3’。
公共场所嗜肺军团菌检测标准
公共场所嗜肺军团菌检测标准嘿，大家知道吗？公共场所里有一种小小的细菌，叫嗜肺军团菌。
这玩意儿可不能小瞧啊！你想想，咱们平时去的那些大商场、游泳馆、酒店啥的，人来人往的，要是有这嗜肺军团菌在捣乱，那可不得了！就好像家里有个调皮的小捣蛋鬼，到处乱跑乱搞破坏。
那怎么检测它呢？这可得好好说道说道。
检测嗜肺军团菌就像是一场侦探游戏，我们得找到各种线索来抓住这个“小坏蛋”。
首先呢，采样就很关键啦！就好比我们要去抓小偷，得先知道他可能会在哪些地方出现吧。
我们得在那些容易藏着嗜肺军团菌的地方采集样本，比如空调系统的冷却水啊、淋浴喷头的水啊之类的。
这可不是随随便便弄一下就行的，得专业、得仔细！然后呢，检测方法也有很多种。
就像我们有不同的工具来对付不同的情况一样。
有的方法很灵敏，能一下子就发现它的踪迹；有的方法可能稍微慢点，但也能把它给揪出来。
检测的时候可不能马虎啊！这可不是闹着玩的。
要是没检测好，让嗜肺军团菌这个“小捣蛋”溜走了，那后果可能很严重呢！大家想想，如果因为没检测好，让很多人感染生病了，那多糟糕啊！我们得像爱护自己家一样爱护这些公共场所。
检测嗜肺军团菌就是为了让大家能安心地在这些地方玩耍、工作、休息。
就像我们会定期打扫家里一样，对公共场所的检测也得重视起来呀！而且啊，这可不是一次性的事情哦！得经常去检测，就像我们要经常检查家里的东西有没有坏一样。
不能说今天检测了没问题，以后就不管啦！那可不行！大家说，我们能让嗜肺军团菌在公共场所里肆意妄为吗？当然不能啊！所以啊，大家都要重视起来，让我们一起把这个“小捣蛋鬼”给抓住，让我们的生活环境更加安全、健康！总之，公共场所嗜肺军团菌检测可太重要啦！这关系到我们每个人的健康和安全呢！大家可别不当回事儿呀！。
公共场所水源中军团菌的研究进展
口岸卫生控制第24卷第4期卫生检疫监管与卫生监督公共场所水源中军团菌的研究进展杨闯李云峰张琳辽宁国际旅行卫生保健中心国家口岸传染病检测重点实验室(辽宁，大连，116001)摘要军团菌是一种条件致病菌，存活在各种水环境中。
当感染的气溶胶被吸入到体内，可能会导致严重的肺炎，称之为军团病。
近年来各种公共场所水源中嗜肺军团菌的污染情况逐年增加，对人类的健康造成严重威胁，本文从军团菌的生物学特性、生境环境、流行病学、检测方法等几个方面对军团菌研究进展做以综述。
关键词军团菌公共场所水源嗜肺军团菌中图分类号R文献标识码B doi10.3969/j.issn,1008-5777.2019.04.009Research Progress of Legionella in Public Water SourcesYang Chuang Li Yunfeng Zhang LinLiaoning International Travel Healthcare Center(Dalian,Liaoning,116001)Abstract Legionella are opportunistic pathogens that develop in aquatic environment.When infected aerosols reach the human respiratory tract,they may accidentally lead to a severe pneumonia called Legionnaires'disease (LD).Recently,accumulated evidences showed pollution of Legionella in public water sources are more serious and threaten public health.The present study aimed to investigate the prevalence of Legionella species in public water resources by a systematic review which include that biological characteristic,habitat environment,epidemiology and detect method.Key words Legionella Public Water Source Legionella Pneumophila军团菌属(Legionella spp)广泛存在于自然界，是一种需氧革兰氏阴性杆菌。
公共场所集中空调通风系统军团菌污染情况调查
空调冷却水中检出嗜肺军团菌，检出率 ３ ． ５ ％。 ７
２２ 不 同公 共场 所 检 出情 况 ． ００ ） ． ，见 表 １ ５ 。
表 １ 不同类型公 共场所冷却水嗜肺军团菌检 出情 况
是最常见 的致病种 ，所 以９ ％以上 的军 团菌肺炎 ０ 都是 由嗜肺军团菌引起 ２ １ 了解 阳江市公共场所 。为 集 中空调 冷却 水 的污 染状 况 ，２０ 年 ３ 至 １ ０９ 月 １
月 ，笔 者抽 查 ４ 家公 共 场 所 的集 中空 调 进行 调 查 ２ 研究 ，现将结 果报 告如 下 。
２４个 ，做 革 兰 染 色 。革 兰 染 色 阴性 的 菌 落 接 种 ～
集空调冷却水 ４ 份 ，每份水样采样量为 ５ ０ Ｌ ２ ０ｍ ，
采 样后 立 即送 检 。 １ 材 料 与方 法 ． ２ Ｇ Ｐ 、Ｂ Ｙ 、Ｂ ＹＥ ｃｓ Ｖ Ｃ Ｃ Ｅ Ｃ —ｙ 培养 基 购 自广 东 环 凯 微 生 物 科 技 有 限公 司 ；军 团菌 乳 胶 凝 聚 试 剂 盒 购 自广 东 环 凯 微 生 物 科 技 有 限 公
应 用预 防 医学 ２ １ 年 ２ ０ ２ 月第 ｌ ８卷第 １ 期
３ ５ 中图分类号 ：Ｒ １６４ ２ ． 文献标识码 ：Ａ
文章编号 ：１７ ６ ３—７ ５ （０ ２０ — ０ ５ ２ ８ Ｘ２ １）１ ０ ３ —０
公 共场所集 中空调 通风 系统军 团茵污染情 况调查
许 小婵 ， 秀媚 ，庞天才，冯 云 ，林飞燕 谭
阳江 市公共场所 集 中空 调冷却水 中存在 嗜肺 军 团菌 ，对人群构 成潜在健 康危害 ，应加强预 防控制工
【 关键词】 公共场所 ；通风系统 ；军团菌 ；调查
军 团菌 是 一 种 常 见 的革 兰 阴性 菌 ，能 引 起 严 重 的 呼 吸道 感 染 疾 病 。 自 １７ 年 美 国 首次 发 现 军 ９６
南京市土壤中嗜肺军团菌污染状况调查
ｓ ｑ ｕ ａ ｒ ｅ ｔ ｅ ｓ ｔ ．Ａｍｏ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｏ ｉ ｌ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｍｅ ｎ ｓ ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｎ ｅ ａ ｒ ｃ ｏ ｏ ｌ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｗｅ ｒ ｓ ，５ ０ ． ０％ （ １ ８ ／ ３ ６ ）ｗｅ ｒ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｆ ｏ ｒ［ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ ｐ ｎ ｅ ｕ —
冷 却 塔 旁 土 壤 中 嗜肺 军 团 菌 阳性 率 较 高 ， 存 在 导 致 军 团病 散 发 流 行 或 暴 发 的 潜 在 危 险 。
关键词 ： 军团菌 ； 嗜肺 军 团 菌 ； 土壤 ； 冷却塔 ； 阳性 率
中 图分 类 号 ：Ｒ ３ ７ ８ 文献标识码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ６ —９ ０ ７ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ —０ ０ １ ６ —０ ３
沈赘 ， 马恺， 符 晓梅 ， 秦思， 庄菱， 唐 震
江 苏省疾 病预 防控 制 中心 ， 南京 ２ １ ０ ０ ０ ９
摘要 ： 目 的 了解 南 京 市 土 壤被 嗜肺 军 团 菌 污 染 情 况 。方 法 分别从南京市冷却塔 水嗜肺军 团菌培养法 阳性 的 １ ２个 公
共场所 中， 采集冷却塔 ２ ｍ 范 围 内及 距 离 冷 却 塔 ＞ ２ ｋ ｍ居 民区土壤样 品， 用Ｐ Ｃ Ｒ方 法 检 测 军 团 菌 的 ５ ｓ ｒ Ｒ ＮＡ 和 Ｍｉ ｐ基 因 。 结 果 冷 却 塔 旁 土 壤 样 品 中军 团菌 阳性 率 为 ７ ５ ． ０ （ ３ ６／ ４ ８ ） ， 居 民 区 土 壤 样 品 军 团 菌 阳性 率 为 ７ Ｏ ． ８ （ ３ ４／ ４ ８ ） ， 差 异 无 统 计 学 意 义 。冷 却 塔 旁 军 团菌 阳性 土 壤 样 品 中 嗜肺 军 团 菌 阳 性 率 为 ５ ０ ． ｏ （ １ ８ ／ ３ ６ ） ， 居 民 区军 团菌 阳性 土 壤 样 品 中未 检 出 。结 论
小心潜伏在身边的“军团病”
小心潜伏在身边的“军团病”作者：阿缘来源：《环境》2012年第06期“费城肺炎”军团病最初发现于1976年。
那一年，美国退伍军人协会（俗称“美国军团”）在宾夕法尼亚州费城的斯特拉福美景饭店召开第85届年会。
在大会进行的第三天，有些与会者突然病倒，高烧达39～41摄氏度，出现呼吸困难、头痛、呕吐、咳嗽、浑身乏力现象，伴有腹痛、腹泻等症状，少数人还出现了血尿现象。
此后陆续又有180多人染病，甚至斯特拉福美景饭店附近的居民中有36人也出现了相同症状，90%的患者的胸部X光片都显示出肺炎迹象。
最终，此次疾病导致221人染病，34人死亡，死亡率高达15.1%。
由于此次发病地点为费城，因此起初该病被称为“费城肺炎”。
但在疫情爆发半年以后，美国疾病控制中心专家麦克德从斯特拉福美景饭店的空调系统冷却水中培养出一种新的革兰氏阴性杆菌——嗜肺军团杆菌（LP），并在死者的肺中也分离出此种病菌，至此该病又被改称为军团病。
无独有偶，2011年2月3日，一年一度的域名全球大会在美国洛杉矶的“花花公子大厦”举行，700多名宾客参加了这场盛会。
可是会议结束48小时后，多名客人突然病倒，并且出现了发烧、呼吸困难以及剧烈头疼等症状，经过诊断，他们均患上了军团病。
这是我们身边最新发生的一起军团病事件。
死亡率最高为80%军团病在临床上分为两种类型，一种是以发热、咳嗽和肺部炎症为主的肺炎型；另一则以散发为主，病情较轻，仅表现为发热、头痛、肌痛等，是无肺部炎症的非肺炎型，又称庞提阿克热。
肺炎型军团病对人的危害比较严重，重者可致死亡。
未经特效治疗者病死率为10%～30%，而免疫缺损患者病死率可达80%，死亡原因多数为呼吸及多器官衰竭。
此类型的军团病潜伏期2～10天，平均5.5天，而且该病发病的症状与肺炎球菌等引起的肺炎十分类似，很难区分。
军团病典型病例的表现是：初期有乏力，低热和食欲减退等症状，约12～48小时后突起高热并一直持续，最高可达40摄氏度以上，并伴有反复发作的寒战，全身肌肉酸痛。
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法（2）
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法（2）公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法1范围青岛精诚仪器仪表有限公司本标准规定了公共场所空气、水、土等不同类别环境样品中嗜肺军团菌的定量检测方法。
本标准适用于公共场所环境样品中嗜肺军团菌的定量检测，其他环境样品中嗜肺军团菌的定量检测可参照执行。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
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GB/T18204.3公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物GB/T18204.5公共场所卫生检验方法第5部分：集中空调通风系统3空气中嗜肺军团菌定量检测3.1原理采用液体冲击法采样、叠氮溴乙锭（EMA）前处理结合定量聚合酶链反应(qPCR)方法定量检测室内空气和集中空调送风中存活的嗜肺军团菌。
3.2仪器和设备3.2.1微生物气溶胶浓缩器：采样流量≥100L/min，3.0μm以上粒子的捕集效率≥80%（或浓缩比≥8）。
3.2.2液体冲击式微生物气溶胶采样器：采样流量7L/min～15L/min，0.5μm以上粒子的捕集效率≥90%。
3.2.3便携式冷藏箱。
3.2.4冷冻离心机：温度4?C。
3.2.5恒温水浴锅或金属浴：温度范围50?C～99?C。
3.2.6荧光定量PCR仪：非耦合6色激发光片和6色检测滤光片通道，4°C–100°C温度范围。
3.2.7卤素灯：500W。
3.2.8涡旋震荡器：调速范围0~3000rpm。
3.3材料和试剂3.3.1酵母浸出粉。
3.3.2蒸馏水。
3.3.3EMA固体粉：5mg/管。
3.3.4无核酸酶去离子水。
3.3.5矿物油，用于减少气溶胶采样时的吸收液蒸发。
3.3.6核酸提取试剂盒：DNA产量15～30μg，A260/A280在1.7～1.9之间。
3.3.7引物：上游引物5’-GAAAATAAAGTAAAAGGGGAAGCC-3’；下游引物5’-ATCAATCAGACGACCAGTGTATTC-3’。
公共场所军团菌污染与检测技术研究进展
现 已发 现 ４ ２种 菌 型 ６ ４个 血 清 型 ， 中最 重 要 且 常 其
男性 １ 名 、 ６ 女性 １ 名 ， 龄 最 大 为 ７ １ 年 Ｏ岁 ， 小 １ 最 １
卤菜 、２ １ 份病人排泄物和 ８ 份刀具 与砧板涂抹拭子
样 品 ， 检验 ， 卤菜 、 经 ４份 ２份病 人 排泄 物样 品中均检
出副 溶血 性 弧菌 。
４ 讨 论
岁， 均年龄 ３． 平 ４ ７岁 。发 病 曲线 呈 单 峰 型 分 布 ， 符 合 暴发 性食 物 中毒 特点 。将 食物 中毒 发病 高 峰 向前 推 算一 个 平 均 潜 伏 期 （ ３ ９ｈ） 首 发 病 例 时 间 １． 和 ２ ：０ ３４ 向前 推算 一个 最 短潜 伏 期 （ ）经 推 算 就 餐 ５ｈ ，
９ 的感 染是 由 Ｌ ０ Ｐ所 致 ， 血 清 Ｉ （ Ｐ ）最 常 以 型 Ｌ １
见 ，Ｐ Ｌ ６次 之 。 我 国 已 定 型 者 有 Ｌ １ Ｌ ３ Ｌ ５ Ｐ 、 Ｐ 、Ｐ 、
Ｌ ６ Ｌ ９Ｌ 等 。军 团 菌 嗜热 怕 冷 ， 自然 条件 下 Ｐ 、Ｐ 、ｍ 在 可 长期 存 活 于水 中 ，生 物膜 上 ， 可 寄 生 在 淡 水 原 也 虫 如 阿米 巴 的细胞 内 ， 但人 工培 养极 其 困难 ， 故有 苛 养 菌之 称 。嗜 肺 军 团 菌 在 Ｂ ＹＥ 琼 脂 培 养 基 上 培 Ｃ 养 ３～ ４ ｄ 可 形 成 灰 色 菌 落 。该 菌 具 有 内 毒 素 （ Ｓ 、 Ｉ ）外毒 素 及 多种 活性 酶 ， 使其 具 有 较 强 的致 病
江苏省学校卫生监督工作现状研究
称 ２ １ ９名 ，占 ４ ９ ． ７ ； 预 防 医学 专业 １ ９ ２ 名 ，占
１ ． １ 调 查 对 象 全 省 ｌ ｌ ７家卫 生 监 督 机 构 ， 包 括 省 级 １家 、 地市 级 ｌ ３家 。 县 区级 １ ０ ３家 ， 在 编卫 生监 督人 员 ３ ８ ０ ８名 。截 至 ２ ０ １ ２年 底 全 省共 有 各 级各 类 学 校
关键词 ： 学校卫生监督 ； 工 作现状 ； 研 究 中 图分 类 号 ： Ｒ １ ９ ７ 文 献标 识 码 ： Ｂ 文章编号 ： １ ０ ０ ６ —９ ０ ７ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ ～０ ０ ７ ２ —０ ２
学校卫生监督是一项政策性、 法律规范性 、 科 学 性 和技 术性 都很 强 的卫 生 监 督 工作 ， 是 卫 生 执 法 的 重 要 内容 之 一 ， 是 国 家 卫 生 监 督 的 一 个 重 要 组 成 部 分ｕ 。近年 来 ， 学校 卫生 监 督 工 作得 到进 一 步 重 视 与 加 强 。为 了解 江苏 省学 校 卫 生监 督 工 作 现 状 ， 开展 了
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７ ２・
江苏 预防 医学 ２ ０ １ ３年 １ １月第 ２ ４卷第 ６期
Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｊ Ｐ ｒ ｅ ｖ Ｍｅ ｄ ， Ｎｏ ｖ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ， ２ ０ １ ３ ， Ｖｏ １ ． ２ ４ ， Ｎ ｏ ． ６
状况调查Ｅ Ｊ ７ ．实 用 预 防 医学 ， ２ ０ １ ｌ ， １ ８ （ ３ ） ： ４ ５ ６ —４ ５ ７ ． ［ ６ ］ 葛明， 石利民， 包 亚 慧 ．２ ０ ０ ８年 南 京 市 公共 场所 空 调 冷却 水 中 嗜 肺 军 团 菌 的污 染 状况 调 查 ［ Ｊ ］ ．预 防 医 学论 坛 ， ２ ０ １ ０ ， １ ６ （ ３ ） ： ２ ３ ４ ～２ ３ ５ ． ｒ ７ ］ 陶静 ， 洪亮 ， 张静 ， 等 ．上 海 市 集 中式 中 央 空 调 冷 却 塔 水 嗜 肺 军 团 菌污染状况Ｅ Ｊ ７ ．医 学 信 息 ， ２ ０ １ ０ ， ２ ３ （ ３ ） ： ６ ６ ４ —６ ６ ５ ． ｒ ８ ］ 陈茸 ， 吴涌兴 ， 刘 斌 ．浅 谈 我 市 集 中 空 调 通 风 系 统 项 目化 管 理 的 实施［ Ｊ ３ ．现 代 预 防 医 学 ， ２ ０ ０ ９ ， ３ ６ （ ２ ） ： ２ ２ ２， ２ ３ ２ ．
传统细菌培养法与荧光PCR法分离公共场所嗜肺军团菌结果比较
传统细菌培养法与荧光PCR法分离公共场所嗜肺军团菌结果比较作者：金萍等来源：《中国医学创新》2014年第14期【摘要】目的：对公共场所环境样本（水、土壤、气溶胶）进行嗜肺军团菌监测，掌握南京市公共场所中军团菌的污染情况和菌型分布。
方法：对12家商场、医院中央空调系统采集水样（冷却水、景观水、淋浴水、自来水），土壤类样品（背景土、花卉土、风管积尘、景观土），采用传统细菌培养法及荧光PCR法进行嗜肺军团菌的分离鉴定。
结果：12家单位共采样234份（水样88份、土壤146份），传统细菌培养法检出嗜肺军团菌9份（主要类型为Lp1型），检出率为3.85%；而实时荧光PCR法检出47份阳性（主要类型为Lp1型），检出率为20.08%。
两者检出阳性率比较差异有统计学意义（P【关键词】嗜肺军团菌；荧光PCR法；公共场所【Abstract】 Objective： To monitor the Legionella pneumophila of public environmental samples （water， soil， aerosol）， and grasp the pollution situation and strains of Legionella pneumophila in public places in Nanjing city distribution.Method： Samples in water and soils of twelve stores and hospitals were collected， Legionella pneumophila were detected and identified by tradtional culture and real-time PCR. Result： 234 samples were collected（water 88 samples， soil 146 samples） and 9 Legionella pneumophila strains were isolated used culture methods （the main type of Lp1 type）， the detection rates of pneumophila was 3.85%. while 47 samples were tested positive using Real-time PCR（the main type of Lp1 type）. The detection rates of pneumophila were 20.08%. The detection rate of positive comparative difference was statistically significant （P【Key words】 Legionella pneumophila； Real-time PCR； Public places据美国疾病预防控制中心报道，普通肺炎中约15%由嗜肺军团菌（Lp）感染引起，军团菌肺炎中约85%由Lp1引起。
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军 团 菌病 是 由军 团 菌 引起 的 以肺 炎 为 主 的全 身
样品 ４ Ｉ ｃ条 件 下 保 存 ， 水 和 土壤 样 品 ７ ｄ内 提 取 ＤＮＡ， 气溶 胶样 品 ４ ８ ｈ内提 取 ＤＮＡ。 １ ． １ ． ２ 采样 方 法 ： ①气溶 胶： 使 用浓 缩 器 （ 北 京 宾 达 绿创 公 司生产 ） 与Ｂ ｉ ｏ Ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｒ 生物 冲击式 采样 器联 合 采样 方法 ， 总 采样 流量 １ ２ ０ Ｌ ／ ｍｉ ｎ ， 采样时 间 １ ０ ～１ ５
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ ～０ ７ —１ ０ 编辑 ： 朱 荣
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பைடு நூலகம்
疾 病 防治 ・
南 京 市公 共场 所嗜 肺 军 团菌 污染 状 况调 查
唐彦 钊 ， 熊丽林 ， 葛明 ， 吕雪筠 ， 包亚 慧
江 苏省 南京 市疾病预 防控 制 中心 ， 南京 ２ １ ０ ０ ０ ３
摘要 ： 目 的 了解 南 京 市 公 共 场 所 的 嗜 肺 军 团 菌 污 染 状 况 ， 为制定 其控制措 施提供依 据。方法 选取 ｌ ３家 公 共 场 所
版） ［ Ｍ］ ．北 京 ： 北 京 大 学 医 学 出版 社 ， ２ ０ １ １ ：６ —１ ７ ．
［ ６ ］ 吕淑 荣 ， 潘 晓群 ， 向全 永 ， 等 ．２ ０ ０ ７年 江 苏 省居 民血 糖 水 平 及 糖 尿
值高 ， 利于及 时 、 早期发 现病人 ＿ ８ ］ 。
参 考 文 献
可靠 ， 能 够用 于糖尿 病流行 学病 现场 大规模 调查 。 针对 当前 糖 尿 病 的流 行 现 状 以及 大 量 的糖 尿 病
［ ２ ］ 陆再 英 ， 钟南山 ， 谢毅 ， 等 ．内科 学 ［ Ｍ］ ．７版 ， 北京： 人 民卫 生 出
版社 ， ２ ０ １ ０： ７ ７ ０ —８ Ｏ ７ ．
气溶胶为 １ ． ４ ９ 。结 论 菌， 以降低其潜在危害。 南 京 市 公 共 场 所 存 在 较 严 重 的 嗜肺 军 团 菌 污 染 ， 须 针 对 各 类 环 境 介 质 的 特 点 选 择 适 宜 方 法 除 菌 抑
关键 词 ： 嗜 肺 军 团 菌 ； 公共场所 ； 空调 ； 冷 却 水
［ ３ ］ 徐雪勤 ， 张 智敏 ．驻 马 店 市 某 职 业 人群 血糖 水 平 调 查 结 果 ［ Ｊ ］ ．职
业与健康 ， ２ ０ ０ ８ ， ２ ４ （ ６ ） ： ５ ２ ６ —５ ２ ７ ．
［ ４ ］ 施红梅 ， 孟祥． 肝 源性 糖 尿 病 发 病 机 制 的研 究 进 展 Ｅ Ｊ ］ ．吉林 医学 ，
采集气溶胶 、 土 壤 和水 样 本 ， 采 用 巢式 Ｐ Ｃ Ｒ检 测 嗜 肺 军 团菌 。结 果 南 京 市 公 共 场 所 嗜 肺 军 团 菌 阳性 检 出率 １ ６ ． １ Ｏ ， 其 中
空调冷却水为 ８ ５ ． ７ １ ， 花卉土为 ２ １ ． ５ ４ ， 淋浴水为 ２ Ｏ ． Ｏ Ｏ ， 景观水旁土为 １ ２ ． ５ Ｏ ， 自来 水 为 ４ ． Ｏ ｏ ， 风管积尘为 １ ． ５ ６ ，
２ ０ ０７ ， ２ ８（ ２ ）： １ ７ ８ — １ ８ ０ ．
高危 人群 ， 今 后糖 尿病 预 防 中要加 强 对健 康 人 群 的定 期 检查 。血糖 仪具 有携 带 方便 ， 操作简单 ， 灵敏度高，
检测结果快， 便 于 日常 自我监 测 等 优 点 ， 现 场 应 用 价
［ ５ ］ 中华 医学 会 糖 尿 病 学 分 会 ．中 国 ２型 糖 尿 病 防 治 指 南 （ ２ ０ １ ０年
性疾 病 ， 最常见 的 病原 体 为嗜 肺 军 团菌 。该 病 呈 世 界
性分 布 ， 四季 均可 发病 ， 以夏秋 季 较 为 多见 ， 研 究 显 示
喷泉 水 、 洗浴水 、 环境 土 壤 、 集 中空 调 冷 却 水 、 风 管 积
尘 等样 品 中检 出率 ２ Ｏ ～９ Ｏ 口 ］ 。 为 了解 南 京 市 公 共场 所 嗜肺军 团菌 的分布 状况 ， 于２ ０ １ ２年 ８月 进行 了嗜肺 军 团菌污染 状 况调查 。
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５ ８ ・
江 苏预 防医学 ２ ０ １ ４年 １ 月第 ２ ５卷第 １期
Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｊ Ｐ ｒ ｅ ｖ Ｍｅ ｄ ， Ｊ ａ ｎ ｕ ａ ｒ ｙ ， ２ ０ １ ４ ， Ｖｏ １ ． ２ ５ ， Ｎｏ ． １
联 合筛 查方 法可行 ， 即先 采 用德 国罗 氏活 力 型 血糖 仪 进 行初 筛后 ， 对异常者再用迈瑞 Ｂ Ｓ 一 ２ ０ ０全 自动 生 化 仪 常规法 ， ３ ｄ内连续 ２次进 行 复查 ， 该 方 法结 果 准确
［ １ ］ 叶众 ， 裴广军 。 陈 子 萌 ．浙 江 省 象 山 县 居 民 糖 尿 病 患 病 率 及 相 关 因素 调 查 ［ Ｊ ］ ．上 海 预 防 医 学 ， ２ ０ １ ｌ ， ２ ３ （ １ ２ ） ： ６ ２ ２ —６ ２ ３ ．
病 患病 情 况 监 测 分 析 Ｅ Ｊ ］ ．江苏 预 防医 学 ， ２ ｏ １ １ ， ２ ２ （ １ ） ： １ ０ —１ ３ ． ［ ７ ］ 高 金 彬 ，黄 亚 民 ， 朱玉芳 ， 等 ．血 吸 虫 病 传 播 阻 断 地 区 中 老 年 人
空 腹 血 糖 调查 ［ Ｊ ］ ．国际 医 学 寄 生 虫病 杂 志 ， ２ ０ １ ３ ， ４ ０ （ ２ ） ： ８ ３ —８ ８ ． ［ ８ ］ 王春娜， 刘 新 民 ．血糖 仪 检 测 空 腹 毛 细 血 管 血糖 在 糖 尿病 筛 检 中
的应用［ Ｊ ］ ．中 国慢 性 病 预 防 与 控 制 ， ２ ０ ０ ８ ， １ ６ （ ３ ） ： ２ ６ ７ —２ ７ ０ ．