响应面分析法优化闪式提取胡柚皮中黄酮类化合物工艺
响应面分析法优化红花黄色素提取工艺条件
Optimization of extraction conditions for safflower yellow pigments by response surface methodology 魏安池 2 1, 2 WEI-Anchi
1,
代红丽 2 DAI-Hongli
Var4 = 1.0225+0.0252*x+0.0285*y -0.0367*x*x-0.003*x*y-0.0302*y*y
图 6 吸光度对提取温度与 时间的响应面
图 7 吸光度对提取温度与 溶剂 pH 值的响应面
图 8 吸光度对提取时间与 溶剂 pH 值的相应面
采用 SAS RSREG 程序对响应值与各因素进行回归拟合后,得到回归方程: Y = 1.065 + 0.02525×X1 + 0.0285×X2 + 0.0555×X3 - 0.042×X1×X1 - 0.003×X1×X2 + 0.0025×X1×X3 - 0.0355×X2×X2 - 0.001×X2×X3 - 0.069×X3×X3 回归方程中各变量对指标(响应值)的影响的显著性,由 F 检验来判定,概率 P(F>Fα) 的值越小,则相应变量的显著程度越高。由表 3 可以看出,最显著的因素为一次项 X3, 其次为二次项 X3×X3。回归方程也是高度显著的,相关系数 R2 =0.0617/0.0634=97.3%, 说明响应值(吸光度)的变化有 97.3%来源于所选变量,即提取温度、提取时间和溶剂 的 pH 值。因此,回归方程可以较好地描述各因素与响应值之间的真实关系,可以利用 该回归方程确定最佳提取工艺条件。对回归方程取一阶偏导数等于零,整理可得到如下 三式: 0.02525-0.084 X1-0.003 X2+0.0025 X3=0 0.0285-0.003 X1-0.0710 X2-0.001 X3=0 0.0555+0.0025 X1-0.001 X2-0.138 X3=0 (1) (2) (3)
我的 响应面法在药物提取工艺优化中的应用
响应面法在药物提取工艺优化中的应用从药材中提取稳定的有效成分,保证药品量效关系的均一性和稳定性,是中药制造现代化的重要内容之一,因此,中药提取成为中药制造过程中极其关键的一环。
提取过程中提取效率常常会受到提取溶剂、提取时间、溶液pH值等多种因素的影响,合理选用统计学方法,筛选出最佳工艺条件,已成为中药制造现代化研究的又一重要领域。
实验设计与优化方法,都未能给出直观图形且不能凭直觉观察其最优化点,虽能找出最优值,但难以直观判断优化区域。
响应曲面法(reponse surface methodology,RSM)是由Box 等于20世纪50年代提出的1种数据分析方法,它以回归方程作为函数估算的工具,在多因子试验中,因子与响应值的相互关系用多项式拟合,把因子和响应值的关系函数化,因此,可对函数的面进行分析,研究因子与响应值之间.因子与因子之间的相互关系,并进行优化。
它是一种优化反应条件和加工工艺参数的有效方法,采用RSM法可以建立连续变量曲线模型,对影响过程的因子水平及交互作用进行优化和评价,同时运用图形技术将这种函数关系显示出来,可凭直觉的观察来选择实验设计的最优化条件。
该方法具有简便,结果直观,预测性好等优点。
以下是响应面法在各种药物提取工艺优化中的应用。
1药物中多糖的提取优化利用响应面分析法对白术多糖的提取工艺进行优化[1],在单因素实验基础上选取试因素与水平,根据中心组和实验设计原理采用3因素3水平的响应面分析法,根据回归分析确定各工艺条件的影响因子,以多糖提取率为影响值作响应面和等高线。
在分析各个因素显著性和交互作用后,得出白术多糖水浸提的最佳工艺条件为:料液比1:24,浸提温度94℃,浸提时间3.3h,浸提2次;白术多糖实际提取率可达3.13%。
在用响应面法优化双孢菇菇柄多糖的提取工艺研究中,在单因素基础上,选择水料比、提取温度和提取时间为自变量,多糖提取率为响应值,根据Box-Behnken试验设计原理利用响应面法对双孢菇菇柄多糖的超声波法提取工艺进行优化研究。
响应面分析法优化银杏叶黄酮类化合物的提取工艺
工艺技术响应面分析法优化银杏叶黄酮类化合物的提取工艺伦 琦,乔镜澄*,杨江南,刘海涛,武湘姝,文 文(天津天狮学院 食品工程学院,天津 301700)摘 要:以乙醇为浸提液,利用微波萃取辅助超声法提取银杏叶中总黄酮类化合物,通过单因素试验以及响应面试验设计优化提取工艺。
结果表明,黄酮类化合物的最佳提取条件为乙醇浓度63.15%、超声时间2.65 min、液料比116∶1(mL∶g)、微波时间3.83 min,该条件下银杏叶中黄酮化合物提取量为28.36 mg·g-1。
关键词:银杏叶;黄酮;响应面分析法;工艺优化Study on Optimization of Extraction Technology by Response Surface Methodology of Flavonoids from Ginkgo biloba leaves LUN Qi, QIAO Jingcheng*, YANG Jiangnan, LIU Haitao, WU Xiangshu, WEN Wen(Food Engineering Department Tianjin Tianshi College, Tianjin 301700, China) Abstract: The total flavonoids in Ginkgo biloba leaves were extracted by microwave extraction-assisted ultrasonication using ethanol as the extracting solution, and the extraction process was optimized by single-factor test and response surface test design. The results showed that the optimum extraction conditions for flavonoids were 63.15% ethanol concentration, 2.65 min ultrasonic time, 116∶1 (mL∶g) liquid-to-material ratio and 3.83 min microwave time, and the extraction amount of flavonoids in Ginkgo biloba leaves was 28.36 mg·g-1 under these conditions.Keywords:Ginkgo Biloba leaves; flavonoid; response surface methodology; optimization银杏叶提取物复杂的化学成分中主要起药理活性作用的是黄酮类物质,其黄酮种类多达40种。
2021年柚皮中黄酮类化合物研究进展
柚皮中黄酮类化合物研究进展柚皮中黄酮类化合物含量丰富,黄酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗炎震痛、保护心血管、免疫调节和抗衰老等多种生理功能,随着科学技术的不断进步和发展,黄酮类化合物的独特效能将得到不断的发掘及应用,目前已被广泛地应用于多种领域,对柚皮中黄酮类化合物的研究具有广阔的应用前景。
本文分析了柚皮中黄酮类化合物的结构、性质和应用,探究了黄酮类化合物的提取方法,为柚子产业的进一步发展以及黄酮类化合物的进一步提取与 ___提供理论参考。
柚子为芸香科植物常绿果树柚树的成熟果实,又名朱栾、雪柚、气柑、抛、文旦,含有类胰岛素、柚皮甙、新橙皮甙、挥发油、VB1、VB2、烟酸、Vc、果糖、葡萄糖、蛋白质、脂类、铁、钙、磷及粗纤维等活性成分,具有败火、通便、除臭、解酒毒、消食健脾、治疗支气管、抗癌等功效[1]。
果皮、柚花皆可入药,有“天然水果罐头”之称,其中柚子皮具有食用、驱除异味、防蚊虫等功效,其含有的柚皮甙可降血液循环的粘滞度,减少血栓的形成。
我国柚子栽培历史悠久,远在公元前的周秦时代就有种植,目前全国多省均有栽培;美国、古巴、南非、巴西、阿根廷以及 ___也是柚子的主产地。
我国福建漳州的“文旦柚”、广西“沙田柚”、华安的“坪山柚”与泰国的“暹罗柚”合称“世界四大名柚”。
近年来,我国加大对柚子精油和果胶等活性成分的提取和研究,柚子皮中的功能性成分被不断发现,并应用于越来越多的领域。
从药用植物和经济植物中提取具有生理活性的黄酮作为天然药物、保健品和化妆品等行业的原料,已日益引起重视,柚皮中黄酮类化合物的应用前景十分广阔。
柚皮中含有多种糖类化合物[2],其中主要的单糖和双糖为葡萄糖、蔗糖、果糖,多糖为纤维素、半纤维素和果胶;此外柚皮中还含有丰富的黄酮类化合物、膳食纤维、挥发油、类柠檬苦素等[3]。
1.1 黄酮类化合物柚皮中富含黄酮类化合物,含量在1%―6%不等在,主要为二氢黄酮类化合物,如柚皮苷、新橙皮苷、柚皮芸香苷等,其中柚皮苷含量最高,达80%以上。
响应面法优化桂花总黄酮提取工艺
响应面法优化桂花总黄酮提取工艺通讯作者,陈洪国,(电话)***-*****(电子信箱)*****。
黄酮类化合物又称类黄酮化合物,是以α-苯基苯并吡喃酮为主体的一系列化合物的总称,其主要类型有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、双黄酮和异黄酮。
近年来有研究认为,部分黄酮类化合物以氢键形式与细胞膜结合,使细胞膜上的不饱和键不与自由基接触,抗脂质过氧化。
正常生理状态下,一氧化氮(NO)在舒张血管内皮、维持机体血压平衡方面起重要作用,但高浓度的NO能和活性氧反应后产生氧化能力更高的亚硝基自由基,导致细胞氧化损伤。
如在缺血再灌注损伤时NO合酶活性增加,产生大量的NO而导致氧化损伤形成。
研究发现许多黄酮类化合物包括槲皮素、姜黄素等在缺血再灌注损伤时可抑制NO合酶的活性,从而起到抗氧化作用。
本研究以湖北省咸宁市盛产的桂花(Osmanthus fragrans)为原料,采用索氏提取法提取其中的总黄酮,通过单因素试验和响应面设计[7,8]对提取工艺进行优化[9,10],以期为黄酮类化合物的开发利用提供一定参考。
1 材料与方法1.1 材料与仪器1.1.1 试验材料选取湖北省咸宁市金桂干花粉末为材料;乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯;芦丁标准品(色谱纯,Sigma公司)。
1.1.2 试验仪器恒温磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限公司);TU-1810型紫外-可见光分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);索氏提取器(上海五一玻璃仪器厂);球形冷凝管(上海五一玻璃仪器厂);DHG-9053A型干燥箱(嘉兴市中新医疗仪器有限公司)。
1.2 试验方法1.2.1 标准曲线的绘制精确称取充分干燥至恒重的芦丁标准品0.010 g,用80%(体积分数,下同)的乙醇溶液溶解并定容至20 mL,摇匀得浓度为0.5 mg/mL的芦丁标准液。
分别吸取芦丁标准液0、1、2、3、4、5 mL于25 mL刻度试管中,用80%的乙醇补至10 mL,加入1 mL 50 mg/mL的亚硝酸钠溶液,摇匀,放置6 min后加入1 mL 0.1 g/mL硝酸铝溶液,放置6 min,再加入0.5 mL乙酸,用40 mg/mL 的氢氧化钠溶液定容至刻度,摇匀,室温放置15 min后以80%的乙醇溶液为参比,于509 nm波长处测定吸光度。
响应面优化柚子皮维生素C的超声提取工艺
响应面优化柚子皮维生素C的超声提取工艺摘要】目的:基于响应面法,采用超声提取优化柚子皮中维生素C提取工艺。
方法: 以柚子皮为研究对象,用维生素C提取率作为衡量提取工艺的指标,在单因素试验的基础上,选取超声时间,液料比,超声温度为考察因素,以柚子皮中维生素c提取率为响应值,采用响应面法筛选提取工艺。
结果: 最佳的柚子皮维生素C超声提取工艺提取参数为:超声时间30min,液料比1g:9ml ,超声温度30℃。
模型的决定系数为R2=0.9896,该模型的预测性能良好。
结论: 所优选的超声提取工艺技术操作简便、成本低,可用于柚子皮中维生素C的提取.【关键词】:柚子皮; 维生素c; 响应面法; 超声提取; 总评归一值柚子皮为柚(芸香科乔木植物)的果皮,别名柚子皮、气柑皮。
气芳香.味苦、微辛。
主要生长于广东、广西、福建、云南和台湾等地。
柚皮占整个柚子的45%左右【1】,含有丰富的水分、维生素C、矿物质人体必需的营养素【2】。
众所周知,维生素C对一般感冒有特别的效果,对于消除疲劳和促进消化分秘功效显著。
《本草纲目》记载,“饮食,去肠胃中恶气,解酒毒,治饮酒人口气,不思食口淡,化痰止咳”,在我国古代以及其他国家,都吃柚子茶的习惯。
但每年都有大量的柚皮被扔掉,造成资源的极大浪费.且污染环境。
因此,对柚子皮的综合利用开发,及潜在的价值和前景有其研究价值。
目前,对柚子皮维生素C的超声提取工艺研究未见报道,本文章基于响应面法,采用超声提取优化柚子皮中维生素C提取工艺,为人们日后研究与开发提供科学依据,同时让人们在日常生活中得到应用.1,实验部分1.1 材料与试剂柚子(购自于当地超市,鲜无腐烂);淀粉指示剂(中国食品药品检定研究院);稀醋酸国药集团化学试剂有限公司,分析纯);碘滴定液(0.1mol/L)(长沙医学院药学院药剂学教研室配制);水为蒸馏水.1.2 仪器与设备KQ-400KDE 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);;JY2002电子天平(上海市精密仪器有限公司);酸式滴定管(北京普析通用仪器有限责任公司);榨汁机(台湾家必康科技集团有限公司).1.3 实验方法1. 3. 1 柚子皮维生素C的提取取新鲜柚子,剖除柚子果肉,得柚子皮,称取柚子皮10.00g于榨汁机中榨汁【3】,加入新沸过的冷水若干体积与稀醋酸10ml于榨后的渣和汁中,超声波提取,过滤,密封保存待用.1. 3. 2 柚子皮维生素C的含量测定取超声过滤后的提取液于锥形瓶中,加入淀粉指示剂,立即用碘滴定液(0.1mol/L)滴定,至溶液显蓝色并在30秒内不褪色。
响应面法优化薄荷叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性
响应面法优化薄荷叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性一、本文概述本文旨在通过响应面法优化薄荷叶中总黄酮的提取工艺,并进一步研究其抗氧化活性。
我们将对薄荷叶中的总黄酮进行概述,阐述其在食品和医药领域的重要性和应用价值。
接着,我们将介绍传统的提取方法以及存在的问题,如提取效率低、操作复杂等。
在此基础上,我们将引入响应面法这一优化工具,并介绍其基本原理和优势。
在本文的实验部分,我们将设计一系列实验,利用响应面法优化薄荷叶总黄酮的提取工艺,包括提取溶剂、提取时间、提取温度等关键参数。
通过实验数据的收集和分析,我们将建立数学模型,并绘制出响应面图,从而找到最佳的提取工艺条件。
我们还将对所提取的总黄酮进行抗氧化活性的测定,以评估其抗氧化效果。
本文的研究不仅有助于提高薄荷叶总黄酮的提取效率,同时也为开发具有抗氧化功能的食品和药品提供了理论支持和实践指导。
通过本文的研究,我们期望能够为相关领域的研究者提供有益的参考和启示。
二、材料与方法2 试剂:乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、没食子酸、DPPH自由基等均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。
3 仪器:电热恒温鼓风干燥箱、电子天平、紫外可见分光光度计、高速离心机、水浴锅等。
称取一定量的薄荷叶粉末,按照不同的乙醇浓度、提取温度、提取时间进行浸泡提取。
提取液经过离心、过滤后,得到薄荷叶总黄酮的粗提物。
采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法进行总黄酮含量的测定。
绘制没食子酸标准曲线,根据标准曲线计算样品中总黄酮的含量。
根据单因素试验的结果,选取乙醇浓度、提取温度、提取时间作为影响因素,以总黄酮含量为响应值,采用Box-Behnken设计进行试验设计。
利用Design-Expert软件进行数据分析,得到优化后的提取工艺参数。
采用DPPH自由基清除率法评价薄荷叶总黄酮的抗氧化活性。
将不同浓度的总黄酮溶液与DPPH自由基溶液混合,测定混合液在517nm处的吸光度,计算DPPH自由基清除率。
响应面优化酶法提取花生壳黄酮类化合物的工艺研究
响应面优化酶法提取花生壳黄酮类化合物的工艺研究摘要:利用响应面分析法对纤维素酶辅助提取花生(Arachis hypogaea Linn.)壳黄酮类物质的条件进行优化。
首先采用单因素试验分析pH、酶量、酶解温度、酶解时间对花生壳黄酮类物质含量的影响,然后利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对其提取工艺进行了优化。
结果表明,花生壳黄酮最佳的提取工艺为pH 5.7,酶量7.3 mg/g,酶解温度58 ℃,酶解时间2.7 h,在此工艺条件下黄酮提取量为(2.300±0.002)mg/g,总黄酮提取量的验证结果与模型预测相符,该提取工艺稳定可行。
关键词:花生(Arachis hypogaea Linn.)壳;响应面;黄酮类化合物;纤维素酶中图分类号:S565.2;R284.2 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2016)06-1532-06DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2016.06.043花生(Arachis hypogaea Linn.)是重要的植物油资源,其种植范围遍及全世界。
近年来,中国种植花生的面积和产量居世界前列。
一直以来,花生仁是人们所研究的重点,而花生壳大部分被丢弃或作燃料使用,使得花生的综合利用率大大降低,花生壳中含有丰富的碳水化合物、粗纤维、甾体化合物和黄酮化合物等[1]。
黄酮类物质具有抗氧化、抑菌、抗病毒、降血脂等作用[2-7]。
因此,对花生壳黄酮类化合物的提取是研究的热点。
目前报道的花生壳黄酮提取法主要有微波辅助法[8-11]、回流提取法[12,13]、热浸提法[14]等,但未见采用酶法提取花生壳黄酮类化合物的报道。
酶辅助法提取植物活性成分,具有快捷、高效、无毒、反应条件温和等优点。
为充分利用酶辅助法的优点,本试验运用响应面分析方法探讨花生壳黄酮类化合物的最佳酶法提取工艺。
1 材料与方法1.1 材料花生壳样品来自湖南,干燥、粉碎,过80目筛,烘干备用。
响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究
响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究【摘要】本研究旨在通过响应面法优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,并研究其抗氧化活性。
优化后的提取工艺对多苞石柯总黄酮的提取率和抗氧化活性具有重要影响。
研究结果表明,响应面法在优化提取工艺中具有较好的应用效果,能够显著提高多苞石柯总黄酮的提取效率和抗氧化活性。
本文总结了其他相关研究成果,展望未来研究方向。
研究表明,多苞石柯总黄酮具有较高的抗氧化活性,优化提取工艺对其抗氧化活性具有重要意义。
本文的研究对于开发多苞石柯总黄酮的抗氧化功能食品具有一定的指导意义。
【关键词】关键词:响应面法、多苞石柯、总黄酮、提取工艺、抗氧化活性、优化、研究。
1. 引言1.1 研究背景多苞石柯(Sophora flavescens Aiton)是一种常见的中药材,含有丰富的黄酮类化合物,其中多苞石柯总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性,对人体健康具有重要作用。
多苞石柯总黄酮的提取工艺存在着诸多不足,如提取效率低、工艺复杂等问题,限制了其在药物开发和应用中的进一步利用。
通过优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,提高提取效率并保留活性成分,对扩大其应用范围和提高其经济价值具有重要意义。
响应面法是一种统计学方法,已广泛应用于优化植物提取工艺,通过设计实验矩阵和回归分析,可以有效确定影响提取工艺的关键因素,优化工艺参数,提高提取效率。
本研究旨在通过响应面法优化多苞石柯总黄酮的提取工艺,并探究其抗氧化活性,为多苞石柯药用价值的挖掘和开发提供理论依据和实验支持。
通过开展这一研究,有望为多苞石柯总黄酮的高效提取及其抗氧化活性的研究提供新思路和方法。
1.2 研究目的本研究旨在利用响应面法优化多穗石柯总黄酮的提取工艺,并探究其抗氧化活性,为开发多穗石柯总黄酮在食品、医药和化妆品等领域的应用提供科学依据。
具体目的包括:1. 确定最佳的多穗石柯总黄酮提取工艺参数,提高提取率和提取效果;2. 探讨响应面法在多穗石柯总黄酮提取工艺中的应用优势和有效性;3. 研究多穗石柯总黄酮的抗氧化活性,评估其在抗氧化方面的潜在应用价值;4. 分析不同提取工艺对多穗石柯总黄酮抗氧化活性的影响,为进一步优化工艺提供依据;5. 综合评价多穗石柯总黄酮提取工艺的优化对抗氧化活性的重要性,为后续研究和应用提供指导。
响应面法优化黄芪黄酮提取工艺的研究
01998 01999 11000
515~44 35~280 28~224
毛蕊异黄酮 、毛蕊异黄酮葡萄糖苷 、芒柄花素和 芒柄花苷均在表 1 所示质量浓度范围内线性关系良 好 。将待测液按上述方法测得 4 种黄酮化合物的质 量浓度 ,其总和记为黄酮得率 。
2) 试验方案 。在单因素实验基础上选取浸提时 间 、浸提温度 、乙醇体积分数 、液固比 4 因素 (表 2) , 采用响应面法试验设计优化黄芪黄酮的乙醇回流提 取工艺参数 。精密称取 1010 g 黄芪粉 ,按试验方案 中的条件乙醇回流反复提取 2 次 ,取上清液浓缩蒸 干加甲醇定容按 1) 的方法测定黄酮得率 。
(11College of Engineering , China Agricultural University , Beijing 100083 , China ; 21Key Laboratory of Modern Precision Agriculture System Integration , Ministry of Education , Beijing 100083 , China)
收稿日期 : 2007204208 基金项目 : 国家“十五”科技攻关计划课题 (2001B501A30) ;北京市科技计划项目课题 ( Y704003040511) 作者简介 : 肖卫华 ,博士研究生 , E2mail :xwhddd @163. com ; 韩鲁佳 ,教授 ,博士生导师 ,通讯作者 ,主要从事生物质资源开发利
2007 年 第 12 卷
表 3 黄芪黄酮提取响应面设计试验方案及结果 Table 3 RSM Experimental designs and results for Radix Astragali falvonoids extraction
响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺_本科毕业论文含开题报告
本科学生毕业论文题目(中文):响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺(英文):Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Camptotheca acuminata leaves Using Response Surface Methodology院(系)生命科学与化学工程系专业、年级生物工程专业2009级2013 年5 月10 日湖南科技学院本科毕业论文诚信声明本人郑重声明:所呈交的本科毕业论文(设计),是本人在指导老师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果,成果不存在知识产权争议,除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。
本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
本科毕业论文作者签名:年月日毕业论文任务书课题名称:响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺学生姓名:王凯系别:生命科学与化学工程系专业:生物工程指导教师:王宗成2013 年01 月13 日注:本任务书一式三份,由指导教师填写,经系毕业论文领导小组审批后一份下达给学生,一份交指导教师,一份留系里存档。
毕业论文开题报告课题名称:响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺学生姓名:王凯系别:生命科学与化学工程系专业:生物工程指导教师:王宗成2013 年01 月13 日湖南科技学院毕业论文指导过程记录表湖南科技学院毕业论文答辩申请暨资格审查表注:此表为学生毕业论文(设计)定稿后申请答辩,及系领导小组对申请答辩学生进行资格审查时用;资格审查项目由指导教师填写。
湖南科技学院本科毕业论文评审表优秀,80—89分记为良好,70—79分记为中等,60—69分记为及格,60分以下记为不及格。
湖南科技学院本科毕业论文答辩记录表学科分类号:081801本科学生毕业论文题目(中文):响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺(英文):Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Camptotheca acuminata leaves UsingResponse Surface Methodology姓名:王凯学号:200907002213院(系):生命科学与化学工程系专业、年级:生物工程专业2009级指导教师:王宗成2013 年5月10日目录摘要 (I)Abstract (II)第1章绪论 (1)1.1 喜树 (1)1.2 黄酮类化合物活性及生理作用 (1)1.3 国内外研究现状 (2)1.4 响应面设计分析方法 (2)1.5 实验研究方法 (3)第2章材料与方法 (4)2.1黄酮类化合物含量测定的原理 (4)2.2 材料、药品试剂及仪器 (4)2.2.1 实验材料 (4)2.2.2 主要药品与试剂 (4)2.2.3 主要仪器与器具 (4)2.3实验方法与步骤 (5)2.3.1 样品处理 (5)2.3.2 相关溶液的配制 (5)2.3.3 黄酮含量测定的标准溶液及标准曲线的绘制 (5)2.4 黄酮的提取 (6)2.5 黄酮含量测定方法 (6)2.6 黄酮提取单因素试验 (6)2.6.1 料液比的影响 (6)2.6.2 提取次数的影响 (6)2.6.3 乙醇体积分数的影响 (6)2.6.4 提取温度的影响 (7)2.6.5 提取时间的影响 (7)2.7响应面设计实验 (7)2.7.1实验设计 (7)2.7.2 实验分析 (7)第3章结果与分析 (8)3.1黄酮含量测定的标准曲线 (8)3.2 单因素试验结果与分析 (8)3.2.1 料液比的对提取率的影响 (8)3.2.2提取次数对提取率的影响 (9)3.2.3 乙醇体积分数对提取率的影响 (10)3.2.4 提取温度对提取率的影响 (11)3.2.5 提取时间对提取率的影响 (12)3.3 响应面设计试验结果及分析 (12)3.3.1 Box-Benhnken 设计方案及试验结果 (12)3.3.2提取工艺条件的响应曲面分析 (13)3.3.3响应面回归模型的方差分析 (15)3.3.4 最佳工艺条件 (16)第4章结论与讨论 (17)附录 (18)参考文献 (21)致谢 (1)响应面设计优化喜树叶黄酮提取工艺摘要研究显示,喜树叶中黄酮类化合物含量相对丰富。
响应面分析法优化微波提取夏枯草中黄酮化合物的工艺研究
夏枯 草 ( rnl u ai L ) 常见 传 统 中药 Pu l vl r . 是 e a g s 之 一 , 载于 《 农 本 草 经 》 全 球 约 1 , 泛 分 始 神 , 5种 广
布 于欧亚温 带地 区及 热 带 山 区 , 洲 北 部及 北 美 洲 非
近年 来 由 于 其 明 确 的 抗 癌 作 用 受 到 研 究 者 的 重
AbtatT em co aeas t xrc o ( A )poeso f vnisf m P u eavlai L w ss d s c :h ir v .s s det t n M E rcs f ao o o rnl ug r . a t — r w ie ai l d r l s u
ye eeivsgtdtru hB xB n n e etr o oi ei n epnesr c e o o g ( S . i dw r n et a o g o— e h kn cne mp sed s na drsos uf em t dl y R M) l ie h c t g a h o
响应面法优化黄芪三种活性成分的闪式提取工艺
响应面法优化黄芪三种活性成分的闪式提取工艺王梦茹;雷振宏;梁华;李文倩;张莹;梁建萍;赵建平;柴智【摘要】[目的]确定黄芪药效成分中3种主要活性成分闪式提取的最佳工艺条件.[方法]分别采用硝酸铝-亚硝酸钠法、苯酚-硫酸法、香草酫-硫酸法对黄芪黄酮、多糖、皂苷的含量进行测定,以各成分得率为指标,采用响应面法对提取工艺参数进行优化并得到回归模型.[结果]结果表明:回归模型较好地反映了黄酮、多糖、皂苷得率与提取条件的关系,最优工艺条件分别为,黄酮:乙醇浓度85%、料液比1:25、提取时间60 s、提取电压120 V;多糖:乙醇浓度2.5%、料液比1:15、提取时间105 s、提取电压115 V;皂苷:乙醇浓度70%、料液比1:30、提取时间120 s、提取电压110 V.[结论]此工艺条件下提取黄酮、多糖、皂苷的得率为0.663%、0.965%、1.126%,回归模型的预测值与实测值的相差均小于0.05%,3个回归方程与实际情况拟合较好,优化工艺可靠.【期刊名称】《山西农业大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2019(039)003【总页数】9页(P14-22)【关键词】黄芪活性成分;响应面法;闪式提取技术【作者】王梦茹;雷振宏;梁华;李文倩;张莹;梁建萍;赵建平;柴智【作者单位】山西农业大学生命科学学院,山西太谷 030801;山西振东道地药材开发有限公司,山西长治 047100;山西农业大学生命科学学院,山西太谷 030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷 030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷 030801;;山西中医药大学黄芪资源产业化及产业国际化协同创新中心,山西晋中 030619;山西中医药大学黄芪资源产业化及产业国际化协同创新中心,山西晋中030619【正文语种】中文【中图分类】R284.2黄芪是豆科植物蒙古黄芪[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]或膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.]的干燥根,为历代中医常用的药材,素有“十药八芪”之称,具有扶正补气之功效。
响应面法优化番木瓜叶总黄酮提取工艺
响应面法优化番木瓜叶总黄酮提取工艺作者:吕金慧马洁王府润于靖陈萍来源:《南方农业学报》2020年第04期摘要:【目的】利用响应面法优化番木瓜叶总黄酮的超声波辅助提取工艺,为番木瓜叶中黄酮类成分提取及番木瓜葉综合开发利用提供技术支持。
【方法】利用超声波提取番木瓜叶片总黄酮,采用氯化铝显色法测定总黄酮含量,选取乙醇体积分数(A)、料液比(B)、超声波时间(C)和超声波温度(D)为试验因素,总黄酮提取率(Y)为响应值,在单因素试验的基础上进行Box-Behnken中心组合试验设计,建立回归方程,优化总黄酮提取工艺。
【结果】建立的回归方程:Y=4.54-0.11A+0.29B+0.023C-8.333×10-4D-0.18AB+0.19AC-0.068AD+0.23BC+0.017BD+0.18CD-1.13A2-0.72B2-0.44C2-0.61D2。
4个因素对番木瓜叶总黄酮提取率的影响排序为料液比>乙醇体积分数>超声波时间>超声波温度,两因素间的交互作用以料液比与超声波时间的交互作用对总黄酮提取率影响最大,而料液比与超声波温度的交互作用影响最小。
最佳提取工艺条件:乙醇体积分数79%、料液比1∶72(g/mL)、超声波时间42min、超声波温度50 ℃,实际总黄酮提取率为4.15%,与理论预测值(4.18%)接近。
【结论】采用响应面法优化超声波辅助提取番木瓜叶总黄酮的工艺条件稳定可行,可在生产实际中推广。
关键词:番木瓜;叶片;总黄酮;超声波提取;响应面法Abstract:【Objective】The response surface methodology(RSM) was used to optimize the ultrasonic-assisted extraction process of total flavonoids in papaya leaves,providing technical support for the extraction and separation of flavonoids in papaya leaves and the comprehensive development and utilization of papaya leaves. 【Method】Ultrasound-assisted extraction of total flavonoids from papaya leaves was carried out. The total flavonoids content was determined by AlCl3 chromogenic method. The volume fraction of ethanol(A), the material-liquid ratio(B),ultrasonic time(C),and ultrasonic temperature(D) were selected as different experimental factors. Based on the experiment of single factor,the combined experimental design of Box-Behnken center was carried out. Establishing regression equation to optimize the extraction process of total flavonoids. 【Result】Established regression equation:Y=4.54-0.11A+0.29B+0.023C-8.333×10-4D-0.18AB+0.19AC-0.068AD+0.23BC+0.017BD+0.18CD-1.13A2-0.72B2-0.44C2-0.61D2. The influence order of the four factors on yield of total flavonoids in papaya leaves was material-liquid ratio>ethanol volume fraction>ultrasonic time>ultrasonic temperature. The interaction between the material-liquid ratio and the ultrasonic time had the greatest effect on the extraction rate of total flavonoids, and the interaction between the material-liquid ratio and the ultrasonic temperature had the least effect. The optimal process conditions were:ethanol volume fraction 79%,solid-liquid ratio 1∶72(g/mL),ultrasonic time 42 min,and ultrasonic temperature 50 ℃. The actual verification value of the total flavonoid extraction rate was 4.15%,which was close to the theoretical prediction(4.18%). 【Conclusion】The response surface method is used to optimize the ultrasonic-assisted extraction of the total flavonoids in papaya leaves,which is stable and feasible,and can be popularized in production.0 引言【研究意义】番木瓜(Carica papaya L.)为番木瓜科番木瓜属植物,原产于中美洲地区(Liu et al.,2018),被称为“岭南果王”(周常清等,2014)。
响应面法优化马鞭草中总黄酮闪式提取工艺及其体外抗氧化活性
响应面法优化马鞭草中总黄酮闪式提取工艺及其体外抗氧化活性张迪【摘要】采用响应面法优化马鞭草中总黄酮的提取工艺.在单因素实验的基础上,以乙醇浓度(A)、料液比(B)、提取时间(C)、提取次数(D)为自变量,总黄酮含量为因变量,运用Box-Behnken设计-响应面优化马鞭草中总黄酮闪式提取工艺.并通过马鞭草总黄酮对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用来评价其抗氧化活性.结果表明:马鞭草中总黄酮提取的最佳工艺条件为乙醇浓度50%,料液比为1∶35 (g/mL),提取时间为1.5 min,提取次数为2次.在此条件下,总黄酮含量达到(8.282±0.003) mg/g,与模型预测值8.280 mg/g相近.重复性试验结果表明,此方法稳定可靠,总黄酮得率高,适于马鞭草中总黄酮的提取.体外抗氧化活性实验表明,当马鞭草中总黄酮浓度为60 μg/mL时,其对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子3种自由基清除率分别为74.8%、43.2%、89.5%,表明马鞭草总黄酮具有较强的体外抗氧化活性.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2019(040)003【总页数】7页(P173-178,184)【关键词】马鞭草;总黄酮;响应面法;抗氧化【作者】张迪【作者单位】南阳医学高等专科学校,河南南阳473061【正文语种】中文【中图分类】TS201.1马鞭草(Verbena officinalis L.)为马鞭草科植物马鞭草的干燥地上部分,马鞭草作为传统中药,收录于《中国药典》之中,具有活血散瘀、解毒、利水消肿、退黄、截疟等功效[1-2],在临床上广泛用于治疗白喉、疟疾等症状。
《中国药典》2015版将马鞭草中齐墩果酸和熊果酸作为马鞭草质量控制的主要指标,但是马鞭草中还存在多种化学成分如:黄酮类、挥发油类、环烯醚萜类、糖类等[3-4]。
这些化学成分也具有显著的活性作用,故亟需对其理化性质及生物活性进行研究分析。
响应面法优化微波辅助提取枳壳中总黄酮工艺_邹建国
Abstract:This paper deals with the optimization of the process conditions for the microwave-assisted extraction of total
flavonoids from Fructus Aurantii Immaturus using response surface methodology (RSM). Based on one-factor-at-a-time
响应面法对枳壳中总黄酮的工艺条件进行优化,以期为 微波辅助提取枳壳中总黄酮的工业化生产提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 枳壳产地江西,购于樟树市医药公司,经南昌大
学环境与化学工程学院制药工程教研室蒋以号博士鉴定 为芸香科植物酸橙 Citrus aurantium L.的干燥未成熟果 实;柚皮苷( 批号:1 1 0 7 2 2 - 2 0 0 6 1 0 ) 标准品、橙皮苷( 批 号:110721-201014)标准品 中国食品药品检定研究院; 乙腈、甲醇为色谱纯,水为自制二次蒸馏水,其余试 剂均为分析纯。 1.2 仪器与设备
橙皮苷得率(mg/g)
柚皮苷得率(mg/g)
橙皮苷得率(mg/g)
52
柚皮苷
8
50
橙皮苷
48
6
46
44 42
4
40
38
2
36
34
0
30 40 50 60 70 80 90
乙醇体积分数 /%
A.乙醇体积分数
52 50 48 46 44 42 40 38 36 34
40:1
52 50 48 46 44 42 40 38 36 34
响应面法优化扶桑叶黄酮超声提取工艺
响应面法优化扶桑叶黄酮超声提取工艺郑梦娇;陈清西【摘要】The Hibiscus rosa-sinensis leaves were used as the meterials, and the response surface methodology was used to optimize the flavonoids extraction process, which was designed by Box-Behnken. The results showed that the optimum conditions for extracting flavonoids from H.rosa-sinensis leaves was:the ethanol concentration 70%, 70 min ultrasound treatment and the ratio of solid 40:1. Under the optimum conditions, the yield of flavonoids was 34.56 mg/g.%以扶桑叶为研究材料,以Box-Behnken中心组合实验设计,利用响应面法对扶桑叶黄酮提取工艺进行优化。
结果表明,超声波辅助乙醇提取扶桑叶黄酮优化工艺条件为乙醇浓度70%,超声提取时间70 min,液料比40∶1。
在最佳工艺条件下扶桑叶黄酮提取的得率最高,为34.56mg/g。
【期刊名称】《亚热带植物科学》【年(卷),期】2013(000)003【总页数】6页(P205-210)【关键词】扶桑叶;黄酮;响应面法【作者】郑梦娇;陈清西【作者单位】福建农林大学园艺学院,福建福州 350002;福建农林大学园艺学院,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】Q586扶桑Hibiscus rosa-sinensis为锦葵科木槿属常绿灌木,原产印度、非洲及我国南部,目前国内作为民间常用药材和优良的园林观赏植物,应用十分广泛。
响应面分析法优化山楂叶中黄酮的提取工艺_施红林
浙江科技学院学报,第26卷第3期,2014年6月Journal of Zhejiang University of Science and TechnologyVol.26No.3,Jun.2014doi:10.3969/j.issn.1671-8798.2014.03.002响应面分析法优化山楂叶中黄酮的提取工艺施红林,黄 琦,褚沈佳,库娜娜,俞小燕,王媛媛(浙江科技学院生物与化学工程学院,杭州310023)摘 要:响应面分析法优化山楂叶中黄酮的提取工艺,以黄酮粗提取率为指标,采用乙醇回流法提取。
通过单因素试验及响应面分析,研究了提取温度、液固比、乙醇体积分数和提取时间4个主要因素对山楂叶中黄酮粗提取率的影响。
采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,建立了回归方程的预测模型,确定最佳提取条件为液固比29mL/g,乙醇体积分数68%,提取温度64℃,提取时间34min,在此条件下黄酮粗提取率为3.07%。
试验结果与模型预测值基本相符,因此,该工艺可应用于山楂叶中黄酮的提取。
关键词:黄酮;山楂叶;响应面分析法中图分类号:R284.2 文献标志码:A 文章编号:1671-8798(2014)03-0165-07Optimization of extraction technology of flavonoids fromhowthorn leaves by response surface methodSHI Honglin,HUANG Qi,CHU Shenjia,KU Nana,YU Xiaoyan,WANG Yuanyuan(School of Biological and Chemical Engineering,Zhejiang University of Scienceand Technology,Hangzhou 310023,China)Abstract:Response surface method was used to optimize the technological conditions of extractingflavonoids compounds from howthorn leaves,with extraction yield of flavonoids as indicator andethanol reflux as extraction method.Single factor experiment and response surface method were usedto discuss the influence on extraction yield by extraction temperature,liquid-solid ratio,the ethanolconcentration and extraction time.The regression equation prediction model was developed by Box-Behnken center combination design and response surface method.The best extract conditions are asfollows:the liquid-solid ratio 29mL/g,ethanol concentration 68%,extracting temperature 64℃andextracting time 34min.Under the condition,the extraction yield of flavonoids is 3.07%.The resultsare agreed with model predictions.Thus the technology can be used as the extraction process offlavonoids from howthorn leaves.Key words:flavonoids;howthorn leaves;response surface method收稿日期:2014-05-19基金项目:浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)(2013R415019);浙江科技学院青年教师进企事业单位实践进修基金项目(2014-SJ09)作者简介:施红林(1991— ),女,浙江省萧山人,2010级制药工程专业本科生。
响应面分析法优化超声提取赣南脐橙皮中黄酮类化合物的工艺研究
响应面分析法优化超声提取赣南脐橙皮中黄酮类化合物的工艺研究杨佳;张国文;汪佳蓉;冯利辉【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2009(030)016【摘要】研究响应曲面法超声辅助提取赣南脐橙皮中黄酮类化合物的工艺.在单因素试验的基础上,利用Design Expert Software7.1.3.1设计了响应面试验,研究提取温度、乙醇体积分数、液固比(V/m)和超声提取时间等因素对黄酮类化合物得率的影响.结果表明,赣南脐橙皮中黄酮类化合物的最佳超声提取工艺为:提取温度75℃、乙醇体积分数58.91%、液固比30.68∶1、提取时间20.79min、提取2次,模型预测可获得黄酮类化合物的得率为3.298%,验证实际得率为3.351%.【总页数】4页(P94-97)【作者】杨佳;张国文;汪佳蓉;冯利辉【作者单位】南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,食品科学与技术国家重点实验室,江西,南昌,330047【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.响应面分析法优化紫花杜鹃中黄酮类化合物提取工艺的研究 [J], 陈玲;张志平;李炳辉;李冰;李晓玺2.响应面分析法优化闪式提取胡柚皮中黄酮类化合物工艺 [J], 韩帅;李淑燕;陈芹芹;李珊;倪元颖3.响应面法优化超声提取杜仲雄花中黄酮类化合物的工艺参数 [J], 董发明;白喜婷4.响应面分析法优化超声提取党参皂苷的工艺研究 [J], 王婧;刘慧婷;柴庆凯;郝象瑢;李二峰;池明;刘慧芹;王远宏5.响应面法优化杭白菊中黄酮类化合物提取工艺研究 [J], 黄涵年;董浠婷因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
响应面分析法优化闪式提取胡柚皮中黄酮类化合物工艺韩 帅,李淑燕,陈芹芹,李 珊,倪元颖*(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083)摘 要:以胡柚皮为原料,采用闪式提取技术提取胡柚皮中黄酮类化合物。
在单因素试验基础上,采用响应面法对提取溶剂浓度、料液比、提取时间进行优化。
结果表明,溶剂体积分数、提取时间、液料比对黄酮提取率的影响比较显著,最佳工艺条件为乙醇溶液体积分数78%、液料比31:1(mL/g)、提取时间95s ,由此得到的柚皮黄酮提取率为4.37%。
闪式提取法是一种快速有效的柚皮黄酮的提取方法。
关键词:胡柚皮;闪式提取;黄酮;响应面Response Surface Methodology as an Approach to Optimization of Flash-extraction of Flavonoids fromPeel of Citrus Changshan-huyouHAN Shuai ,LI Shu-yan ,CHEN Qin-qin ,LI Shan ,NI Yuan-ying*(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China)Abstract :The peels of citrus Changshan-huyou were used as the raw material to extract flavonoids by flash-extraction technology. Based on single factor experiments, extraction conditions such as solvent concentration, liquid/material ratio, and extraction time were optimized by response surface methodology. The results showed that each of the three extraction condi-tions affected flavonoid extraction significantly. The optimized conditions were as follows: 78% ethanol concentration, 31:1liquid/material ratio, and 95 s extraction time, resulting in an extraction efficiency of 4.37% for flavonoids. As a conclusion, flash-extraction is an effective and efficient method to extract flavonoids from peel of Citrus Changshan-huyou.Key words :citrus Changshan-huyou peel ;flash-extraction ;flavonoids ;response surface methodology中图分类号:TS255.1 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2011)10-0052-05收稿日期:2010-07-23作者简介:韩帅(1985—),男,硕士研究生,研究方向为食品天然产物的提取与功能性质。
E-mail :topaik@ *通信作者:倪元颖(1960—),女,教授,硕士,研究方向为天然产物的提取与功能性食品开发。
E-mail :niyuanying@常山胡柚(Citrus Chang shan-huyou Y.B. Chang)是常山特有的柑橘地方品种,为芸香科植物柚[Citrus grandis (L.) Osbeck]与甜橙[Citrus sinensis (L.) Osbeck]的杂交品种,已有近百年的栽培历史[1]。
2009年仅浙江常山县胡柚种植面积就达到了10.5万亩,产量达到了13.6万吨。
胡柚富含多种营养活性物质,且风味独特,胡柚皮约占整个果重的30%,其中富含了丰富的香精油,果胶,黄酮类化合物和色素等成分,是一种宝贵的食物资源[2-3]。
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的一类天然产物,其在抗氧化[4]、预防心血管疾病[5]、抗菌[6]、抗肿瘤[7]等方面展现了良好的生物活性,被广泛应用于制药和食品行业。
胡柚皮作为下脚料常常得不到利用被丢弃,造成了资源的浪费,提取其中富含的黄酮类物质是对柚果皮综合利用的有效途径之一,具有潜在的开发利用价值和可观的经济效益。
闪式提取技术是一种新兴的天然产物提取技术,其依靠机械剪切力和超速动态分子渗透作用,在室温及溶剂存在下数秒内将植物组织破碎至细微颗粒,并使有效成分达到组织内外平衡,实现提取目的[8]。
闪式提取技术能最大限度的避免植物有效成分受热破坏、具有溶剂用量小、提取时间短、效率高、处理量大、安全可靠等特点[9]。
本研究采用闪式提取法提取胡柚皮中的总黄酮,结合中心旋转回归试验(central composite design ,CCD)和响应曲面(RSM)分析方法对影响胡柚皮总黄酮提取率的主要因素进行分析,从而确定闪式提取的适宜工艺,为规模化提取柚皮黄酮、开发新产品以及综合利用胡柚皮提供一定参考。
1材料与方法1.1材料与试剂新鲜的常山胡柚购于北京。
将胡柚果皮剥下后用清水洗净,在室内晾至24h后切成约0.2cm×0.2cm×0.2cm 的小块,放入热风干燥箱40℃烘干12h,用破碎机粉碎至粉末,过40目筛后备用。
NaNO2、AL(NO)3、NaOH、乙醇、正己烷等(均为分析纯) 北京蓝弋化工公司;芦丁对照品(质量分数≥91.7%) 中国药品生物制品检定所。
1.2仪器与设备BP221S精密电子天平德国Satorious公司;RE-52A旋转蒸发器、SHZ-Ⅲ循环水真空泵上海亚荣生化仪器厂;UV757CRT紫外-可见分光光度计北京普析通用仪器有限公司;Hitachi Himac CR22g高速冷冻离心机日本日立株式会社;JHBE-50S闪失提取器河南金鼐科技发展有限公司;WKX高速粉碎机青州市精诚机械有限公司;S22-2恒温磁力搅拌器上海司乐仪器有限公司。
1.3方法1.3.1标准溶液配制及标准曲线的建立参照文献[10]方法配制标准溶液并绘制标准曲线:准确称取减压干燥至质量恒定的芦丁标准品25mg,用无水乙醇溶解定容于25mL容量瓶中,摇匀,得到1mg/mL 的芦丁标准溶液,分别吸取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于25mL容量瓶中,分别加入0.8mL 5% NaNO2溶液1mL,摇匀,静置6min,再加入0.8mL 10% Al(NO3)3摇匀,放置6min,然后再加入10mL 1moL/L N a O H溶液,摇匀显色,以蒸馏水定容至刻度,静置15min。
以零管为空白,光程1cm,在波长510nm处测定各容量瓶溶液的吸光度,以吸光度(A)为纵坐标、质量浓度(C)为横坐标,得到回归方程C=6.1225A-0.0263,R2=0.9998。
1.3.2样品中黄酮含量的测定准确称取柚皮粉10.0g,放入三角瓶中,加入一定体积分数的乙醇溶液室温下浸泡,磁力搅拌5min,采用闪式提取器在120V电压(r=3500r/min)条件下,提取一定时间,提取完成后,转移至离心机中,在转速4000r/ min条件下离心20min,收集上层清液,将滤渣重复上述过程提取若干次。
合并收集的清液,减压浓缩(t≤50℃)后采用30mL正己烷脱色两次,用提取体积分数的乙醇定容至100mL。
取提取液1mL加入25mL容量瓶中,按1.3.1节所述方法测定其在波长510nm处的吸光度,然后按照下式计算胡柚皮中黄酮类化合物的提取率。
C×V×n黄酮类化合物提取率/% =—————×100m式中:n为提取溶液的稀释倍数;C为柚皮提取液的黄酮质量浓度/(g/mL);V为提取液的体积/mL;m为原料的质量/g。
1.3.3闪式提取工艺试验设计1.3.3.1提取溶剂的选择准确称取柚皮粉末4份,每份10.0g,分别采用无水甲醇、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯各150m L溶解,经闪式提取60s后,按1.3.2节所述方法完成吸光度的测定,计算不同溶剂时的柚皮黄酮提取率。
1.3.3.2试验设计首先进行单因素试验,选取溶剂体积分数、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,以柚皮黄酮提取率为指标。
各因素水平见表1。
水平因素溶剂体积分数/%液料比(mL/g)提取时间/s提取次数15015:1301 26020:1602 37025:1903 48030:11204 59035:11505表1 单因素试验因素水平Table 1 Factors and levels in single-factor design1.3.3.3CCD优化试验设计因素水平(x i)-1.68179-101 1.68179 X1溶剂体积分数/%7074808690X2液料比(mL/g)25:127:130:133:135:1 X3提取时间/s607290107120表2 响应面三因素五水平试验设计Table 2 Factors and levels in response surface analysis采用Design Expert软件,采用CCD[11]建立数学模型,以溶剂体积分数X1、液料比X2和提取时间X3三个因素为自变量,按方程x i=(X i-X0)/ΔX对自变量进行编码。
其中,x i为自变量的编码值,X i为自变量的真实值,X0为实验中心点处自变量的真实值,ΔX为自变量的变化步长。
以柚皮黄酮提取率为响应值,建立回归方程模型。
由此求出影响因素的一次效应,二次效应及交互效应,实现对柚皮黄酮提取工艺优化,并做响应面法分析。
中心复合试验各因素和水平见表2。
2结果与分析2.1提取溶剂的选择由图1可知,采用无水甲醇和无水乙醇作为提取溶剂,提取效果更加理想,而丙酮和乙酸乙酯做溶剂,黄酮提取率相对较低。
从提取率上来看,甲醇提取率较乙醇略高,但经多重比较看,甲醇和乙醇的提取率并不存在显著性差异,但考虑到甲醇的毒性以及易对环境造成的污染,从使用安全和环保的角度考虑,选择乙醇作为提取胡柚皮黄酮的提取试剂。
2.2溶剂体积分数对柚皮黄酮提取率的影响在液料比20:1(mL/g)、提取时间60s 、提取1次的条件下,乙醇溶液体积分数对胡柚皮黄酮提取率的影响如图2所示。