雷公藤甲素 分离纯化技术
雷公藤甲素的提取方法总结
雷公藤甲素的提取方法总结1 雷公藤甲素简介雷公藤甲素(Triptolide, TPL)又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇,是从卫矛科植物雷公藤的根、叶、花及果实中提取的一种环氧二萜内酯化合物,与雷公藤碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、雷公藤春碱、雷公藤增碱和雷公藤明碱等生物碱构成了雷公藤提取物的主要活性成分,白色针状晶体,难溶于水,易溶于甲醇、二甲基亚砜、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿等。
CAS #38748-32-2分子式:C20H24O6分子量:360.4保存: -20℃2 雷公藤及雷公藤甲素价格雷公藤8-10元/kg;雷公藤提取物5000-9000/g,雷公藤甲素含量不同价格不同;雷公藤甲素对照品800元/20mg(国产)2380元/10mg(进口)3 雷公藤提取分离方法3.1 回流法萃取药材粉末加入95%乙醇或石油醚加热回流提取三次,提取液回收溶剂得浸膏,浸膏用氯仿或者乙酸乙酯萃取,雷公藤甲素提取率0.00099%。
3.2 水提醇沉药材粉末加水回流提取,提取液加乙醇沉淀除杂质,回收乙醇得水溶液用乙酸乙酯萃取,得到粗总萜提取物。
3.3 超临界萃取雷公藤生药粉末,按1.0 mL /g 生药的比例加入乙醇作为夹带剂,混合均匀,将混合好的物料装入萃取釜中。
通过往复泵把二氧化碳加入到萃取釜中,使萃取釜的压力达到 30 MPa,温度40 ℃,维持 1 h。
收集物在40−50℃条件下,除去夹带剂乙醇溶液,并把得到的浸膏在真空干燥箱中充分干燥。
使用超临界CO2萃取技术提取雷公藤有效成分,甲素的得率为0.00115-0.00168 %。
3.4 液-液三相萃取柱层析采用乙醇回流提取雷公藤粉末后,在乙醇和磷酸二氢钠水溶液刚好出现两相时用乙酸乙酯/石油醚(V/V)为2∶8的体系做萃取剂来萃取雷公藤甲素。
乙酸乙酯萃取乳化很严重,且得到的浸膏杂质多,不利于后续处理。
此法改善了乙酸乙酯萃取的不足。
粗提浸膏进行硅胶柱层析,采用乙酸乙酯及石油醚洗脱,流出液浓缩,反复重结晶得雷公藤甲素。
雷公藤甲素结构优化及生物活性研究进展
雷公藤甲素结构优化及生物活性研究进展1. 雷公藤甲素的化学结构及合成方法研究进展雷公藤甲素(Tripterygium glycoside,TGT)是雷公藤中的主要活性成分,具有广泛的生物活性,如抗炎、镇痛、免疫抑制等。
对雷公藤甲素的化学结构及合成方法的研究取得了显著进展。
雷公藤甲素的化学名为三萜类化合物,其结构中含有一个环丙烯基和一个五元环骨架。
目前已经报道了多个雷公藤甲素的同分异构体,如雷公藤甲素A、B、C等。
这些同分异构体的理化性质和生物活性存在一定差异,因此对其进行深入研究具有重要意义。
雷公藤甲素的合成方法主要包括天然提取法和化学合成法,天然提取法主要通过从雷公藤中提取粗提物,再经过分离纯化得到雷公藤甲素。
化学合成法则是通过设计和合成新的化合物,再通过结构鉴定或活性测试筛选出目标化合物。
针对雷公藤甲素的合成方法研究取得了一系列重要进展,如利用微生物来源的酶催化合成、有机合成等。
雷公藤甲素具有显著的抗炎作用,能够抑制多种炎症细胞因子的产生,如白细胞介素1(IL、肿瘤坏死因子(TNF)等。
雷公藤甲素还能抑制炎症过程中的前列腺素E2(PGE的生成,从而减轻炎症反应。
雷公藤甲素具有良好的镇痛作用,能够减轻多种疼痛模型动物的疼痛反应。
雷公藤甲素通过阻断疼痛信号传导途径中的离子通道和神经递质释放,发挥镇痛作用。
雷公藤甲素具有显著的免疫抑制作用,能够降低多种免疫细胞的活性,如巨噬细胞、树突状细胞等。
雷公藤甲素还能抑制免疫细胞的增殖和分化,从而调节免疫功能。
随着对雷公藤甲素化学结构及其合成方法研究的不断深入,其生物活性也得到了更为全面和深入的认识。
有望通过优化雷公藤甲素的结构和合成方法,进一步提高其生物活性,为临床治疗提供更多选择。
1.1 雷公藤甲素的化学结构雷公藤甲素(Triptolide)是雷公藤中的主要活性成分,具有显著的抗炎、镇痛、免疫抑制等生物活性。
其化学名为3,4二羟基苯甲醛7,10二酮2,6二醇,分子式为C15H18O9。
中药雷公藤有效部位的提取纯化方法研究进展_田振
对于抗炎的治疗指数(TI),T11最大,其后依次为T10、T9、T4、TⅡ、T8、L2、
T7,而免疫抑制的TI,T9最大,其后依次为TⅡ、T4、L2、T10、T8、T7。
O
O
O
O
O H
O
OH O
雷公藤甲素(T10)
HO
O O
O OH
O
H
雷公藤乙素(T8)
HO
O O
O OH
O
H
雷公藤丙素
OH OH
O OH
次数考察
每次 4h ,乙酸乙酯萃取 3~5 次
10 次萃取总量的 86%,前 4 次
占 90%,前 5 次占 93%
考 察 粗 提 物 提 95%乙醇,粒径 1~2.5 cm,提取 3 氯仿溶解浸膏,过中性氧化铝
4
14
取工艺
次,提取时间 4、4、3h,自然干燥 柱,HPLC 法测雷公藤甲素
昆明山海棠浸
考 察 总 生 物 碱 4%HCl,渗漉法, 2
提取纯化工艺 浓 NaOH 调 pH 至 10
酸性硫酸亚铁铵分光光度法 12
测雷公藤总生物碱
CH3Cl 溶解浸膏,氧化铝吸附,
氯仿萃取,薄层扫描法测定雷
乙 酸 乙 酯 萃 取 95%乙醇,浸泡 6h,提取 3 次,
3
公藤甲素含量。前 3 次萃取占 13
表 1 雷公藤提取纯化工艺研究概述及参考文献
序号
研究目的
提取纯化方法简述
含量测定方法或结果
文献
重量法测总生物碱,每 20mg 含
考 察 总 萜 类 提 95%乙醇,提取 4 次,每次 4h,乙酸乙
1
0.3~4.4mg;比色法测总二萜内 11
反相高效液相色谱法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素含量
Α βστραχτ
Τ ρι τερψγ ιυ ιλφορδ ιι Η οοκ Φ
Β
ςς
ν
ν
Κ εψ ωορδσ
与共存的其它物
法∀ 试验结果准确 方法重复性好 适用于雷公藤原 料提取物中甲素含量检测及药品质量控制∀
实验部分
流动相组成对分离保留的影响 试验表明 增
加流动相中乙腈的成分 可使雷公藤甲素的保留时
间缩短 图 ∀ 但当乙腈体积分数超过
时
仪器 高效液相色谱仪系统包括
流泵
紫外可变波长检测器及
高压恒 型进样
由雷公藤甲素 中国医学科学院皮肤病研究所精制
替代流动相中乙腈时 可得到类似的试验结果∀考虑到
检测波长为
试验选择流动相为乙腈水体系∀
重复性 连续 次配制雷公藤甲素浓度分别
为 及
样品各 份进样测定∀结
果显示 雷公藤甲素色谱峰面积的批内 批间相对标
质量分数大于
熔 点 ∗ ε 配 准偏差按以上 种浓度依次为 和
波长定量检测∀ 测定结果表明 雷公藤甲素浓度
在 ∗
范围内线性良好 最低进样检测浓度为
∀ 批内 ν 及批间 ν 测定相对标准
偏差分别为 ∗ 和 ∗ 回收率为 ∗ ∀
关键词 高效液相色谱法 雷公藤甲素 药物分析
分类号
前言
雷 公藤 Τ ρι τερψγ ιυ ιλφορδ ιι Η οοκ Φ 系 卫矛科雷公藤属植物 近年的研究表明 它具有抗肿 瘤 抗炎及免疫抑制等药理活性∀ 用雷公藤提取物研 制的制剂用于治疗类风湿性关节炎 白血病及肾炎 等 取得了较好的疗效 ∗ ∀ 雷公藤甲素 是雷公藤提取物中所含的一种二萜内酯类化合物 被认为是治疗类风湿关节炎和肾炎的主要活性成 分 但同时也是引起毒副作用的主要成分∀ 已有文献 报道采用薄层色谱法 及气相色谱法 测定雷公 藤甲素含量∀ 前者测定步骤较为简便 但检测灵敏度 不高 共存物质的干扰严重 后者则操作步骤较繁∀ 高效液相色谱法 近年也已开始应用于检测雷公
反相高效液相梯度洗脱法测定药材中雷公藤甲素的含量
反相高效液相梯度洗脱法测定药材中雷公藤甲素的含量赵宁冯锁民马远涛罗国平西安医学院药学院,陕西西安710021[目的]通过高效液相色谱法建立测定雷公藤甲素含量的方法,控制药材质量,为保证临床用药的有效性和安全性提供依据。
[方法] 采用反相高效液相层析(RP-HPLC)梯度洗脱法建立雷公藤药材中雷公藤甲素的定量方法。
采用AgilentC18柱(2.1mm×150 mm,3μm);乙腈 一水二元梯度洗脱,0~8 min( 10:90~25:75,V∶V),8~33 min(25:75 ~35:65,V∶V),33 ~40 min(35:65 ~95:5,V∶V),40~48 min(95:5,V∶V),48 ~55 min( 10:90,V∶V);流速:1.0 ml/min;检测波长:220 nm。
[结果]采用RP-HPLC梯度洗脱法不仅快速有效地实现了药材中雷公藤甲素的 良好分离,而且能够有效防止分析过程中的拖尾现象,较准确地测定雷公藤甲素的含量。
雷公藤甲素的线性范围为25 ~2 000 μg/ml(r=.0.9999),该方法回收率为97.48%(RSD= 1.55%)。
[结论]该方法灵敏度高,准确可靠,重现性好,结果稳定。
反相高效液相层析梯度洗脱法;雷公藤;雷公藤甲素.;含量测定S567A0517 -6611 (2011)21 - 12851 -02Determination of Triptolide Content in Tripterygium wilfordii by RP-HPLC Gradient Elution Method ZHAO Ning西安医学院校级课题:二藤风湿药酒的制备工艺及质量标准研究(2009FZ4)。
赵宁(1985 -),女,陕西渭南人,助教,硕士,从事药物制剂研究,E-mail: zhaoning-happy@ 163.com。
2011-05-20万方数据@@[ 10] JACODSON AR,MCBRIDE M B,BAVEYE P,et al. Environmental factors determining the trace-level sorption of silver and thallium to soils[J]. Sci ence of the Total Environment,2005,345:191 -205.@@[11] ALF(S) VAN(E)K,VLADISLAV CHRASTN Y,MARTIN MINALJEVI(E),et a1. Lithogenic thallium behavior in soils with different land use[J]. Jour nal of Geochemical Exploration ,2008 ,102 :7 -12.@@[12] AIF(S) V,VLADISLAV.C,MICHAEL K,et al. Thallium dynamics in con trasting light sandy soils—Soil vulnerability assessment to anthropogenic contamination[J]. Journal of Hazardous Materials,2010,173:717-723.@@[13] YANG C X,CHEN Y,DENG P A,et al. Distribution of natural and an thropogenic thallium in the soils in an industrial pyrite slag disposing area [J]. Science of the Total Environment,2005,341:159 - 172.@@[14]齐剑英,李祥平,陈永亨,等.动态反应池-电感耦合等离子体质谱法 测定土壤中重金属元素[J].分析实验室,2008,27(5):30 -33.@@[15]倪吾钟,龙宪新,杨肖娥.菜园土壤镉吸附-解吸特性的研究[J].广 东微量元素科学,2000,7(10):11 - 15.@@[16]于颖,周启星,王新,等.黑土和棕攘对铜的吸附研究[J].应用生态学 报,2003,14(5):761 -765.@@[17]郭云周,尹小怀,雷素芬,等.等氮条件下烟草化肥绿肥合理配施初探 [J].西南农业学报,2011(6):1930 -1934.@@[18]王鹏,赵志忠,王军广,等.海南岛西部地区砖红壤中重金属分布特征 及潜在生态风险评价[J].安徽农业科学,2011,39(9):5210 -5212, 5339.@@[19]彭锐,王远会,马鹏,等.黄花蒿中青蒿素含量与产地气象因子及土壤 的关系研究[J].西南农业学报,2010(2):519 -522.@@[20]邹金浪,王金政,王鹏,等.基于土地利用变化的红壤丘陵区生态系统 服务价值响应及驱动因素分析[J].安徽农业科学,2011,39(9):5195 -5198.@@[21]李小飞,陈志彪,陈志强,等.典型红壤侵蚀区土壤养分空间差异一 以长江县朱溪河小流域为例[J].安徽农业科学,2010,38(12):7026 - 7029.@@[1]苏维广,孟江.雷公藤的临床应用[J].辽宁中医杂志,2003,30(10):845 -846.@@[2]邓思删,张韬,阙慧卿,等.雷公藤药材含量测定方法的研究[J].中草 药,2004,35(S1):198 -199.@@[3]黄文华,郭宝林,斯金平,等.雷公藤属3种植物不同群体和个体雷公藤 甲素的研究[J].中草药,2005,36(7):1065 -1068.万方数据反相高效液相梯度洗脱法测定药材中雷公藤甲素的含量作者:赵宁, 冯锁民, 马远涛, 罗国平作者单位:西安医学院药学院,陕西西安,710021刊名:安徽农业科学英文刊名:Journal of Anhui Agricultural Sciences年,卷(期):2011,39(21)本文链接:/Periodical_ahnykx201121077.aspx。
超声提取雷公藤中雷公藤甲素的提取工艺研究
超声提取雷公藤中雷公藤甲素的提取工艺研究张璐;史国富【摘要】Objective:To study the optimum extraction progress on triptolide by ultrasonic extraction. Method:Orthogonal experiment method was used and triptolide content as an indicator was determined by HPLC.Results:The optimal extraction process of triptolide were as follows:ethyl acetate as extraction solvent,pharmaceutical ratio 1∶15,extraction time 60 min. Conclusion:The method is simple and rapid and could serve as a optimum extraction progress of triptolide by ultrasonic extraction in tripterygium wilfordii.%目的:研究超声提取雷公藤甲素的最佳提取工艺。
方法:采用正交试验法进行优选,并以雷公藤甲素含量为指标,采用HPLC法测定雷公藤甲素含量。
结果:根据实验所得数据表明,雷公藤甲素的最佳提取工艺:提取溶剂为乙酸乙酯,药剂比为1∶15,提取时间为60 min。
结论:该方法简便快捷,可作为超声提取雷公藤中雷公藤甲素最佳的提取工艺。
【期刊名称】《山西中医学院学报》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】2页(P35-36)【关键词】雷公藤甲素;超声提取法;正交试验;HPLC法【作者】张璐;史国富【作者单位】山西省医药与生命科学研究院,山西太原030006;山西省医药与生命科学研究院,山西太原030006【正文语种】中文【中图分类】R285.5雷公藤为卫矛科雷公藤属植物雷公藤的根及根茎。
液_液三相萃取法分离纯化雷公藤甲素
第36卷第3期2011年6月广西大学学报:自然科学版Journal of Guangxi University :Nat Sci Ed Vol.36No.3June 2011收稿日期:2011-04-02;修订日期:2011-04-15基金项目:广西自然科学基金项目重点项目(2011GXNSFD018016);广西科学研究与技术开发计划项目(0992003A -14)通讯联系人:韦万兴(1963-),男,广西隆安人,广西大学教授;E-mail :wxwei@gxu.edu.cn 。
文章编号:1001-7445(2011)03-0496-04液-液三相萃取法分离纯化雷公藤甲素肖世基1,韦万兴1,刘志平1,2,周敏1,卓家雄1,陈松1,刘力恒3(1.广西大学化学化工学院,广西南宁530004;2.广西师范学院化学与生命科学学院,广西南宁530001;3.玉林师范学院化学与生物系,广西玉林537000)摘要:为了克服传统溶剂萃取法的缺点,达到从雷公藤中分离富集雷公藤甲素的目的,利用磷酸二氢钠水溶液-乙醇-水不溶性有机溶剂液-液三相萃取方法,从雷公藤提取物中富集得到含雷公藤甲素的有效部位,经过简单柱色谱分离和重结晶得到雷公藤甲素(triptolide )。
雷公藤甲素的收率约为0.00055%,纯度达98.2%。
这为分离富集雷公藤甲素提供了一种新的方法。
关键词:雷公藤;雷公藤甲素;液-液三相萃取;分离;二萜中图分类号:O629.61文献标识码:AIsoltion of triptolide from Triptergium wilfordii Hook .f .by liquid-liquid three-phase extraction combiningcolumn chromatographyXIAO Shi-ji 1,WEI Wan-xing 1,LIU Zhi-ping 1,2,ZHOU Min 1,ZHUO Jia-xiong 1,CHEN Song 1,LIU Li-heng 3(1.College of Chemistry and Chemical Engineering ,Guangxi University ,Nanning 530004,China ;2.College of Chemistry and Life Science ,Guangxi Teachers Education University ,Nanning 530001,China ;3.Chemistry and Biology department ,Yulin Normal University ,Yulin 537000,China )Abstract :In order to overcome the shortcomings of traditional solvent extraction ,attain the goal ofisolation of triptolide from Triptergium wilfordii Hook.f.Liquid-liquid three-phase extraction wasapplied to partition fractions from extraction of Triptergium wilfordii Hook.f.to obtain an enrichedtriptolide fraction.Then this enriched fraction was subject to column chromatography and recrystalli-zation to harvest triptolide.The yield and purity of the triptolide were 0.00055%and 98.2%,re-spectively.This work provide a new method for separation of triptolide from Triptergium wilfordiiHook.f.Key words :Triptergyium wilfordii Hook.f.;triptolide ;liquid-liquid three-phase extraction ;isola-tion ;diterpenes雷公藤(Triptergium wilfordii Hook.f.)系卫矛科雷公藤属一年生藤本植物,为我国传统中草药。
雷公藤中雷公藤红素分离纯化工艺研究
( S c h o o l o f E t h n i c Me d i c i n e , Gu i z h o u Mi n z u Un i v e r s i t y , Gu i y a n g 5 5 0 0 2 5 , C h i n a ) A b s t r a c t : Ob j e c t i v e : E x p l o r i n g t h e i s o l a t i o n a n d p u r i i f c a t i o n t e c h n o l o g i e s o f a c t i v e c o mp o n e n t s c e l a s t r o l r f o m T r i p t e o ' g i u m w l  ̄ r d i i . Me t h o d s : T h e e x t r a c t i o n
[ 摘 要1 目的 ;探 索 了雷 公藤 中活 性成 分雷 公藤 红索 的分 离纯 化工 艺 。方法 :将经 过粉 碎 处理 雷 公藤植 物根 皮 , 氯 仿为提 取 剂 ,超 声提 取 2 h ,所 得浸 膏经 过石 油醚 脱脂 ,再 用醇 提水 沉法 ,得到 雷 公藤红 素粗 品 粗 品先经 过 硅胶 柱 分离 。再 用重 结 晶方法 进行 纯化 结 果: 并考 察 了 不 同的 溶剂 体系 重结 晶 的分离 效果 。采 用石 油醚/ 乙酸 乙 酯 比例为 9 . 2: 0 . 8重 结晶 溶剂 的效 果最 佳 ,所得 产物 的 纯度达 到 9 8 . 2 % 。结论 :本 文的 雷 公藤 红素 分离 纯化 方法 ,工 艺简 单 ,产 品的质 量 和纯 度较 好 ,具有 一定 的参 考 应用 价 值。 [ 关键 词1 雷公 藤 ;雷 公藤红 素 :超声 波提 取 ;分 离纯 化 [ 中 图分类 。  ̄ - ] T Q f 文献标 识 码】 A f 文 章编号 】 l 0 0 7 . 1 8 6 5 ( 2 0 1 7 ) 2 1 . 0 0 3 2 — 0 1
一种亚临界法提取雷公藤中雷公藤甲素的方法[发明专利]
专利名称:一种亚临界法提取雷公藤中雷公藤甲素的方法专利类型:发明专利
发明人:祁祺,刘静,刘旺衢,胡鑫,雷建都,何静,王璐莹
申请号:CN201510766447.4
申请日:20151111
公开号:CN105198956A
公开日:
20151230
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开一种利用亚临界水提取雷公藤甲素的方法,属于天然活性成分提取领域。
先将雷公藤根粉碎,后过20~80目筛,然后放入亚临界水提取装置,在温度100~150℃、压力0.5~2.0MPa、亚临界水与雷公藤粉末的液固比为10~40mL/g条件下,提取30~90min,提取1~3次,然后收集提取液,静置后离心得到的沉淀即为粗品,再通过旋转蒸发浓缩和柱层析法得到雷公藤甲素。
本发明采用先进的亚临界水提取技术提取雷公藤甲素,提取时间短,提取效率高,该方法绿色无污染,对设备要求低,易于工业化生产。
申请人:北京林业大学
地址:100083 北京市海淀区清华东路35号
国籍:CN
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雷公藤红素生产工艺
雷公藤红素生产工艺
雷公藤红素是一种生物碱类化合物,具有广泛的药用价值。
目前,雷
公藤红素的生产工艺已经得到了不断改进和优化,从而实现了高效率、高产量、低成本的生产。
以下是对雷公藤红素生产工艺的简要介绍。
一、原料准备
雷公藤红素生产的原料主要是雷公藤根皮,需经过粉碎、筛选等处理,去除杂质和根茎。
二、提取醇沉
经过原料的加工和处理后,首先要进行提取醇沉,利用乙醇等有机溶
剂将雷公藤根皮中的生物碱类化合物溶解并进行分离。
此过程一般采
用光谱分析和色谱分离技术,确保提取物中有较高含量的雷公藤红素。
三、精制再结晶
提取物经过过滤、干燥等处理后,还要进行精制再结晶,以提高雷公
藤红素的纯度。
此过程一般采用醋酸类有机溶剂进行结晶,将精制产
品从提取物中分离出来。
四、加工制成
经过精制再结晶的提取物,还要进行粉碎和颗粒化处理,制成可用于
制剂和药品制造的原料。
总体来说,雷公藤红素的生产工艺具有一定的复杂性和技术含量,需
要专业生产厂家具备一定的技术力量和设备条件。
但不论从原料准备
到提取、精制以及加工制成的整个过程,都需要严格控制质量,确保
生产出的产品的质量和效益,才能满足药品制造领域中的应用需求。
总之,雷公藤红素的生产工艺与成本、收益等因素密切相关,需要生
产厂家进行严格的过程控制和质量管理,以确保高效、高质量的生产。
同时,与此相关的还应有完整的配套生产线和设备,以及专业的技术
和人员,为生产企业提供可靠的技术和服务支持,促进行业的快速发
展和成熟。
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雷公藤甲素,又叫雷公藤内酯醇,雷公藤是一个有着悠久历史、广泛应用的中药。
雷公藤甲素(Triptolide, TPL)是雷公藤的主要活性成分之一,具有抗炎及免疫抑制作用。
分子式:C20H24O6,分子量:360.4,难溶于水,易溶于甲醇、二甲基亚砜、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿等。
2012年10月,美国明尼苏达大学研究人员研究发现,小鼠模型显示雷公藤甲素对治疗胰腺癌有效。
研究人员于是对雷公藤甲素进行加工,最终得到一种水溶性、注射用
新药明尼甲素,该药对杀灭肿瘤细胞及缩小肿瘤效果极佳, 无疑为胰腺癌患者带来了新希望。
雷公藤甲素提取分离纯化新方法:
道地药材雷公藤粉碎过筛100目,甲醇/乙醇浸提3遍,减压浓缩蒸除溶剂,乙腈盐水相萃取,浓缩,三氯甲烷萃取,浓缩,SKS-30-200氧化铝层析氯仿甲醇系分离, SKS -10-4300硅胶层析得雷公藤甲素纯度大于98%。
博纳生物开发的SKP-10-450 可以用于雷公藤甲素相关衍生物的的分离纯化,产品纯度达到99%以上。
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