茵栀降酶丸质量标准研究

茵栀降酶丸质量标准研究

杜毅

（淄博市中医医院，山东淄博 255300）

摘要：目的建立茵栀降酶丸的质量标准，为医院制剂的质量控制提供依据。方法采用显微鉴别法，对茵栀降酶丸中黄柏、栀子药材进行了定性鉴别；采用薄层色谱法（TLC），对茵栀降酶丸中的大青叶、板蓝根、栀子、赤芍、黄柏药材进行定性鉴别；采用高效液相色谱法（HPLC），对本制剂中赤芍的有效成分芍药苷进行了定量鉴别。结果显微鉴别粉末特征明显；薄层色谱斑点清晰，阴性无干扰；芍药苷的进样量在0.1374～3.4354μg范围内呈良好的线性关系，r=0.9999，平均加样回收率为96.64%，RSD为0.365%（n=6）。结论该试验所用方法灵敏度高，专属性强，重复性好，简单易行，结果准确可靠，能有效控制茵栀降酶丸的质量，可作为茵栀降酶丸的质量标准。

关键词：茵栀降酶丸；显微鉴别、薄层色谱鉴别；高效液相法含量测定；质量标准

茵栀降酶丸是我院中药自制制剂，由茵陈、大青叶、板蓝根、栀子、赤芍、黄柏、白花蛇舌草等药材组成，具有清热解毒，利胆退黄，消肿排石，降酶降浊的功效。用于急性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，肝内胆管结石，胆囊炎引起的黄疸、低热、厌油等症。疗效确切。为了有效控制药品质量，笔者参考有关文献，对其中的栀子、黄柏进行了显微鉴别，对其中的大青叶、板蓝根、栀子、赤芍、黄柏进行了薄层色谱鉴别，并对赤芍中的芍药苷进行了高效液相法含量测定，以进一步控制该制剂的内在质量，适应提高医疗机构中药制剂质量标准的要求，确保其临床应用更加安全、有效、稳定、可控。

1仪器与试药

1.1仪器

奥林巴斯BX53型生物显微镜；GOODLOOK-1000薄层色谱成像系统；岛津LC-20A高效液相色谱仪；MS205DU梅特勒电子天平；KS-500EI超声波清洗机；真空脱气器；DP-01无油真空泵。

1.2试药与试剂

靛玉红对照品（110717-200204）；栀子苷对照品（110749-201316）；芍药苷对照品（110703-201529）；盐酸小檗碱对照品（110713-201212）；茵栀降酶丸供试品及阴性对照（批号

151027、151229、160302）；硅胶G薄层板（Merck公司）；乙腈为色谱纯（天津科密欧）；甲醇（天津康科德，色谱纯）；磷酸（上海安普科学仪器有限公司，色谱纯）；水为娃哈哈纯净水；其他试剂均为分析纯。以上对照品均购自中国食品药品检定研究院。

2方法与结果

2.1 显微鉴别

取本品粉末，置显微镜下观察：黄柏纤维鲜黄色，直径16～38μm，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶鞘纤维；含晶细胞壁木化增厚（1）。栀子种皮石细胞黄色或淡棕色，长多角形、长方形或形状不规则，直径60～112μm，长至230μm，壁厚，纹孔甚大，胞腔棕红色（2）。结果见图1。

1

12

1：黄柏晶鞘纤维2：栀子种皮石细胞

图1 黄柏、栀子显微鉴别

2.2薄层色谱鉴别【1】

2.2.1大青叶、板蓝根薄层色谱鉴别

取本品5g，研细，加三氯甲烷20ml，超处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取按处方比例和工艺制备不含大青叶、板蓝根的阴性对照样品，按上述供试品制备方法制得阴性对照溶液；再取靛玉红对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2015版药典通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－三氯甲烷－丙酮（5∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液色谱在相应位置没有斑点。结果见图2。

图2 大青叶、板蓝根薄层色谱图

2.2.2 栀子薄层色谱鉴别

取本品10g，研细，加甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取按处方比例和工艺制备不含栀子的阴性对照样品，按上述供试品制备方法制得阴性对照溶液。再取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2015版药典通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液色谱在相应位置没有斑点。结果

见图3.

图3 栀子薄层色谱图

2.2.3 赤芍薄层色谱鉴别

取本品10g，研细，加甲醇50ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，再用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解【2】，加在中性氧化铝柱（100-200目,5g,内径1cm）上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取按处方比例和工艺制备不含赤芍的阴性对照样品，按上述供试品制备方法制得阴性对照溶液。再取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2015版药典通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液色

谱在相应位置没有斑点。结果见图4。

图4 赤芍薄层色谱图

2.2.4 黄柏薄层色谱鉴别

取本品10g，研细，加浓氨试液2ml，甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml作为供试品溶液。另取按处方比例和工艺制备不含黄柏的阴性对照样品，按上述供试品制备方法制得阴性对照溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2015版药典通则0502）试验【3】，吸取上述三种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－浓氨试液（6∶3∶1.5∶1.5∶0.5）为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液色谱在相应位置没有

斑点。结果见图5。