卵巢上皮性肿瘤中EphA2与临床病理及预后的关系

【摘要】目的检测EphA2在卵巢上皮性肿瘤中的表达，探讨其与临床病理及与患者预后的关系。

方法采用免疫组织化学方法检测10例正常卵巢上皮，48例良性上皮性肿瘤，47例交界性上皮性肿瘤以及205例恶性上皮性肿瘤组织中EphA2的表达。

结果①卵巢上皮性肿瘤中EphA2蛋白定位于肿瘤细胞的胞质和胞膜，在正常卵巢，良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤组织中阳性率分别为10.00%、25.00%、57.45%、79.02%，差异有统计学意义（χ2=139.9319，P=0.0000）。

②卵巢恶性上皮性肿瘤组织中EphA2与肿瘤的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关，差异有统计学意义（P均＜0.05）；但与患者的年龄无关（P＞0.05）。

③访的185例卵巢恶性上皮性肿瘤患者的平均生存时间为28.58个月。

EphA2－、＋、＋＋、＋＋＋表达的患者术后平均生存时间分别为39.57、35.22、26.02、17.10个月，差异有统计学意义（χ2=379.64，P＝0.0000）。

结论EphA2的高表达与卵巢上皮性肿瘤的发生和恶性发展有关，与肿瘤的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关，可作为评估患者预后的指标之一。

【关键词】卵巢上皮性肿瘤；EphA2；临床病理因素；预后
doi:10.3969/j.issn.1000-0399.2010.09.006
The expressions of EphA2 in ovarian epithelial neoplasms and the relationships with clinicopathology and prognosis
Xu Min, Li Jiehua, Xu Dan, et al
Department of Obstetrics and Gynecology, No.1 People's Hospital of Yancheng, Yancheng 224001, China
［Abstract］Objective To examine the expressions of EphA2 in Ovarian epithelial neoplasms,and to investigate it′s relationships with clinicalpathologh and survivorship.Methods SP immunohistochemical staining was used to examine the expressions of EphA2 in 10 normal Ovarian specimens,48 benign specimens,47 boundary specimens and 205 malignant specimens.Results ①EphA2 protein was located in the plasma and membrane of ovarian tumor cells. The positive rates of EphA2 in normal,benigh, boundary and malignant Ovarian specimens were 10.00%,25.00%,57.45% and 79.02% respectively （χ2=139.9319,P=0.0000）.②The expressions of EphA2 in the maglignant ovarian epithelial neoplasms was positively related to clinical stage,differential and lymph node metastasis (P<0.05).③The average survivorship of 185 cases of malignant Ovarian patients was 28.58 months. The average living time of different grade expressions of EphA2 were 39.57，35.22，26.02 and 17.10 months respectively （χ2=26.30,P<0.01）. Conclusion The expressions of EphA2 was associated with the degree of
ovarian epithelial neoplasms′s malignancy.The high expression of EphA2 was correlated with clinical stage,histological grade and lymph node metastasis.It could be used as one of the indicators to evaluate the prognosis of patients.
［Key words］Ovarian epithelial neoplasms；EphA2；Clinicopathology；Prognosis
卵巢癌是女性癌症死亡的第5大主要原因，病死率超过宫颈癌与子宫体癌的总和，它的侵袭和转移是导致手术、放疗、化疗等治疗效果不佳和患者死亡的最主要原因，至今5年生存率徘徊在25%～30%［1］。

EphA2是Eph受体酪氨酸激酶家族中的一员，在乳腺癌、前列腺癌、食管癌等多种实体瘤组织中均存在高表达，其表达水平与疾病的进展及细胞的恶性程度有关。

1 资料与方法
1.1 标本来源选取2005年9月至2008年7月盐城市第一人民医院及盐城市妇幼保健院妇科手术治疗并经病理证实的原发性上皮性卵巢肿瘤组织标本300例，其中恶性205例、交界性47例、良性48例。

另取同期10例正常卵巢组织作对照（子宫肌瘤同时行附件切除者的卵巢组织，经HE染色确定）。

所有患者术前均未接受放、化疗。

1.2 主要试剂鼠抗人单克隆抗体EphA2，SP免疫组化检测试剂盒购自福州迈新生物技术公司。

1.3 免疫组织化学方法常规脱蜡水化，组织抗原微波修复，10%山羊血清封闭。

EphA2抗体的工作浓度为1∶100，免疫组化染色SP法按说明书操作步骤进行，DAB- H2O2显微镜控制下显色，苏木精复染，常规脱水中性树胶封片。

使用PBS代替一抗处理的切片作为阴性对照，已知阳性组织切片作为阳性对照。

1.4 随访及资料整理对有完整临床及随访资料的205例恶性卵巢上皮性肿瘤进行电话和书信随访。

随访原则如下：手术之日为随访开始之日，截止日期为2009年1月。

生存时间按月计算，随访期内死亡者随访时间记为完全数据，随访期内未死亡者随访时间记为截尾时间。

第31卷第9期2010年9期徐敏等：卵巢上皮性肿瘤中EphA2与临床病理及预后的关系
1.5 结果判断EphA2阳性表达定位于肿瘤细胞的胞质或胞膜，阳性细胞数判定标准为：阳性细胞占肿瘤细胞总数<1%定为阴性（-），阳性细胞数1%～10%定为弱阳性（+），11%～50%为阳性（++），>50%为强阳性（+++）。

1.6 统计学处理运用Stata 7.0软件对相关数据进行统计处理。

率的比较采用χ2检验和Fisher-exact检验。

采用Cox比例风险回归模型分析与临床病理因素间的关系。

对生存数据采用Kaplan-Meier法分析并绘制生存曲线，应用Log-rank检验差异性。

以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 正常卵巢组织及不同性质的上皮性肿瘤中EphA2的表达正常卵巢组织、良性上皮性肿瘤、交界性上皮性肿瘤、恶性上皮性肿瘤组织中EphA2的阳性表达率分别为10.00%、25.00%、57.45%、79.02%，差异有统计学意义（χ2=139.9319，P=0.0000）。

EphA2在正常卵巢组织与交界性及恶性卵巢组织、良性卵巢组织与交界性及恶性卵巢组织、良性卵巢组织与恶性卵巢组织中的表达差异均有统计学意义（P均<0.05）。

见表1。

表1 不同卵巢组织中EphA2的表达
肿瘤性质例数
（n）
EphA2－++++++阳性表达率
（％）
正常10910010.00
良性4836111025.00
交界性4720617457.45
恶性20543151812979.02
2.2 恶性上皮性肿瘤组织中EphA2与临床病理的关系卵巢恶性上皮性肿瘤组织中EphA2的表达与肿瘤的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关，差异有统计学意义（P均＜0.05），但与患者的年龄、组织学类型无关（P＞0.05）。

见表2。

2.3 恶性上皮性肿瘤组织中EphA2表达与患者术后生存时间的关系对205例卵巢恶性上皮性肿瘤患者进行随访，得访185例，得访率为87.80％。

得访者的平均生存时间为28.58个月。

EphA2-、+、++、+++表达的患者术后平均生存时间分别为39.57、35.22、26.02、17.10个月。

Log-rank检验发现在Ⅰ期病例中EphA2不同表达强度组间患者术后平均生存时间差异无统计学意义（χ2=4.08，P＝0.2526），在Ⅱ期及Ⅲ－Ⅳ期病例中EphA2不同表达强度组间患者术后平均生存时间存在差异，且差异有统计学意义（χ2=27.28，P＝0.0000；χ2=16.57，P＝0.0009）。

见图1、2、3。

图1 Ⅰ期患者EphA2的Kaplan-meier生存曲线
图2 Ⅱ期患者EphA2的Kaplan-meier生存曲线
图3 Ⅲ－Ⅳ期患者EphA2的Kaplan-meier生存曲线
表2 卵巢恶性上皮性肿瘤组织中EphA2表达与临床病理因素间的关系
EphA2
年龄≤50＞50
临床分期Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ－Ⅳ期
分化程度低分化中分化高分化
淋巴结转移有无
组织学类型浆液性黏液性子宫内膜样癌透明细胞癌
-4518171412191952617251152
+8557213810310337221243810736154
χ22.517721.76157.91434.47461.2456
P0.1130.0000.0190.0340.742
安徽医学第31卷第9期2010年9期
3 讨论
肿瘤的发生是由于细胞间信号传导功能异常造成的细胞异常增殖或不能发生凋亡。

酪氨酸蛋白激酶受体（RTK）在细胞的生长及分化中起重要作用。

Eph（erythropoietin producing hepatoma cell line）受体酪氨酸激酶是RTK家族中最大的亚族。

到目前为止，已发现14 种Eph 受体。

Eph 受体的配体称为ephrin，现已发现有8 种ephrin。

ephrin 按照固定在细胞膜上方式的不同分为2 类：ephrin-A 是通过糖基化磷脂酰肌糖（glycosylphosphatidylinositol，GPI）固定在细胞膜表面，而ephrin-B 则是穿膜蛋白。

根据Eph受体和其配体的结合特异性，将Eph 受体分为A、B两类，受ephrin-A 激活的Eph 受体称为EphA，而受ephrin-B 激活的Eph 受体称为EphB［2～4］。

EphA2是EphA亚家族受体14个成员中的第2个，其配体为ephrin-A1，是将外界刺激信号传递给细胞核，转化成细胞效应的信号通路的关键组成，其正常表达时可以调节细胞的粘附、运动，维持细胞骨架的稳定，而过表达时，可导致肿瘤的形成，甚至加速肿瘤的侵袭、浸润及转移。

现已发现在乳腺癌、前列腺癌、食管癌、非小细胞肺癌、结肠癌及卵巢癌等多种实体瘤组织中均存在EphA2的高表达，且在肿瘤组织中EphA2受体的表达水平与肿瘤的恶性程度之间存在正相关［5，6］。

Thaker等［7］研究表明EphA2过表达与低分化，较晚分期有关，提示EphA2过表达是卵巢癌侵袭性行为的有效预测者，可能是卵巢癌重要的治疗靶点。

Lin等［8］的研究表明EphA2在76%的卵巢癌中过度表达，且与晚期疾病有关，与肿瘤细胞减灭术有关，EphA2过度表达与高微血管密度显著相关，他们认为EphA2参与卵巢癌的血管生成和侵袭过程，且EphA2过表达的患者预后不良。

本研究通过对正常卵巢上皮、不同类型上皮性肿瘤组织中的EphA2进行检测，结果发现随着卵巢肿瘤恶性程度的增加，EphA2的阳性表达率随之升高，且在恶性上皮性肿瘤组织中，EphA2表达程度的高低与肿瘤的临床分期、分化程度有关。

我们通过对所获得的随访资料进行统计分析发现EphA2的表达强度随着患者生存时间的下降呈上升趋势，即EphA2表达强度越高患者的生存时间越短，说明EphA2通过与其他因子间的相互作用在促进肿瘤细胞的恶性增殖、迁移、血管生成等方面共同影响了患者的预后。

我们认为EphA2可作为评价卵巢肿瘤恶性程度、侵袭性及预后的参考指标之一。

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[6]佚名.卵巢上皮性肿瘤中EphA2与临床病理及预后的关系.中国医学期刊学会/fuchanke/html/?13488.html。