使用Chelex提取DNA

使用Chelex试剂盒提取DNA
实验准备：Chelex试剂、蛋白酶K、纯水、血片样本、棉拭子样本、打孔器、剪刀、镊子、移液枪、75%酒精、高速离心机、恒温水浴锅、煮沸锅、1.5ml的EP管等。

实验步骤：
试剂配方：5%的Chelex：Chelex 5g+ 100ml纯水+100-200ul 蛋白酶K
一、血片：
1.每一个样本操作前均需要使用75%的酒精对打孔器和剪刀进行消毒，并用吸水纸擦
干净。

2.使用打孔器在血片样本中央打孔，并使用镊子将打好的样本片移入做好编号的离心
管中。

3.每一个离心管中加入1ml的纯水浸泡，30min。

期间每隔一段时间摇晃均匀且保证
血片在液面以下。

4.用移液枪吸取离心管内所有液体弃去。

5.将CHelex摇晃均匀后，在每一个含有样品的离心管中加入Chelex 100ul。

6.将离心管放入56℃的水浴锅中30min后转入100℃的沸水锅中8min。

7.取出离心管14000rpm，5min后，吸取上清液80ul转入新的离心管中做好编号。

8.简短离心5-10s，-20℃储存备用。

二、棉拭子：
1.每一个样本操作前均需要使用75%的酒精对剪刀和镊子进行消毒，并用吸水纸擦干
净。

2.使用镊子将棉拭子样品放入做好标记的离心管中，使用剪刀将较长的棉拭子秆前去
以保证离心管可以正常盖好。

3.每一个离心管中加入Chelex 300ul，使用漩涡振荡器震荡5-10s后，放入56℃水浴
锅中，30min后转入100℃的沸水锅中8min。

4.使用漩涡震荡仪震荡5-10s后，14000rpm，5min，吸取上清80ul转入新的离心管中
做好编号。

5.简短离心5-10s，-20℃储存备用。