实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体的比较
巨细胞病毒荧光定量PCR与ELISA检测比较
巨细胞病毒荧光定量PCR与ELISA检测比较【摘要】目的对HCMV-DNA荧光定量PCR检测方法进行评价。
方法收集2011年1月至2011年7月我院临床高度怀疑HCMV感染病例120例,采集血清样本,分别用Real-time PCR检测HCMV DNA 和ELISA方法检测HCMV IgM抗体。
120例病例中有86例采集了尿液标本用Real-time PCR检测HCMV DNA和ELISA方法检测HCMV IgM抗体。
结果血清巨细胞病毒荧光定量PCR 与ELISA检测方法阳性率差异显著,荧光定量PCR方法阳性率高;尿液标本巨细胞病毒荧光定量PCR与ELISA检测方法阳性率差异显著,荧光定量PCR方法阳性率更高;尿液标本与血清标本HCMV-DNA阳性率差异显著,尿标本阳性率更高。
结论荧光定量PCR方法检测HCMV灵敏度高,尿液标本对诊断HCMV 感染检出率更高。
【关键词】巨细胞病毒;DNA;IgM人巨细胞病毒( human cytomegalovirus, HCMV)为疱疹病毒科β属的双螺旋DNA病毒, 具有高度种属特异性和潜伏-再激活的生物学特性。
我国是人巨细胞病毒感染的高发地区,可导致单一器官或多系统疾病,越来越引起临床医生的关注,本文用荧光定量PCR方法和ELISA方法检测120例临床高度怀疑HCMV 样本,对两种方法进行了比较。
1材料和方法1.1标本来源:选择我院2011年1月至2011年7月临床高度怀疑HCMV感染病例120例,其中男75例,女45例,年龄范围在12-56岁。
1.2标本采集:血清标本:采静脉血3ml注入无菌干燥试管中,在室温下放置1h后,2500 rpm离心20min,取血清-70℃低温冰箱储存待测。
尿液标本:清洁小儿外阴, 留取新鲜尿液(晨尿)1ml于1.5ml无菌Eppendoff管中,15000rpm 离心,沉淀即为待测标本。
1.3主要试剂:人巨细胞病毒核酸扩增荧光定量检测试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司。
两种方法对巨细胞病毒-IgM抗体水平检测敏感性和特异性的比较
两种方法对巨细胞病毒-IgM抗体水平检测敏感性和特异性的比较【摘要】目的:比较elisa和real time-pcr(rt-pcr)对产前筛查女性巨细胞病毒-igm抗体水平检测的敏感性及特异性。
方法:收集146例育龄期行产前筛查女性,采用elisa和rt-pcr法评估所有入选者外周血巨细胞病毒-igm抗体水平,同时比较这两种检测方法的敏感性和特异性。
结果:(1)elisa法的敏感性为64.6%,rt-pcr 敏感性为72.7%,差异有统计学意义(p<0.05);(2)elisa法的特异性为54.8%,rt-pcr特异性为60.8%,差异有统计学意义(p<0.05);(3)elisa法检测费用为每个标本(68.5±4.3)元,采用rt-pcr检测为(71.6±5.5)元,两组间比较差异无统计学意义(p=0.163)。
结论:与elisa相比,采用rt-pcr检测巨细胞病毒-igm抗体水平具有较高的敏感性和特异性,且不增加费用支出,值得临床推广。
【关键词】酶联免疫吸附法;荧光定量-pcr;巨细胞病毒-igm 抗体comparison of the sensitivity and specificity of two methods on the evaluation of the antibody concentration of cytomegalovirus-igm/wu fu-qing.//chinese and foreign medical research,2012,10(12):43-44【abstract】 objective:to compare the sensitivity and specificity of elisa and real time-pcr(rt-pcr) on the detection of cytomegalovirus-igm(cmv-igm) antibodyconcentration in women with pre-pregnant screening.methods:146 women underwent pre-pregnant screening were enrolled and peripheral blood were drawn to evaluate the concentration of cmv-igm antibody with the methods of elisa and rt-pcr.the sensitivity and specificity of elisa and rp-pcr on the detection of cmv-igm antibody concentration were compared concomitantly.results:(1)the sensitivity of elisa was 64.6% while rt-pcr was 72.7%,and the difference was statistically significant(p<0.05).(2)the specificity of elisa was 54.8% while rt-pcr was 60.8%,and there was statistically significant(p<0.05).(3)the expenditure was (68.5±4.3)rmb in each sample detection with elisa while it was (71.6±5.5)rmb with rt-pcr,and there was no significant difference(p=0.163).conclusion:compared to the elisa,the sensitivity and specificity of cmv-igm antibody concentration evaluation was higher with rt-pcr,and rt-pcr did not increase the expenditure which was deserved to be broadly applied.【key words】 enzyme linked immunoabsorption assay; real time-pcr; cytomegalovirus-igm antibodyfirst-author’s address:the people’s hospital of lianjiang city,lianjiang 524400,china近十几年来,随着我国妇产科医生对育龄期女性产前筛查工作的重视及开展,大量产前容易致胎儿畸形的疾病如弓形虫病、风疹和单纯疱疹病毒感染等得到一定程度的控制,从而在一定程度上减少了畸形胎儿的发生率[1-2]。
实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体的比较
[】 杨锡 强 , 著 文 .L 学 [ . . 京 : 民卫 生 H 版 社 , 0 : 2 3 1 2 易 J科 M] 6版 北 人 { 24 2 — 0. 0 9 [] 黄永 坤 , 娟 . 糖 不 耐 受 症 及 其 治 疗 『. 用 儿 科 学 杂 志 , 1,57: 3 杨 乳 J实 ] 2 02 ( 0 )
( 稿 日期 :0 0 1 — 8 收 2 1- 10 )
I] 姜 凯, 锋 . 泻 患 儿 粪 便 检 测 结 果 探 讨 【. 国现 代 药 物 应 用 ,0 93 4 姜 腹 J中 J 20,
() 6 1. 5: — 7 1
【] 陆 惠 强 , 晓 萍, 妍 妍 , 撄 幼 儿 腹 泻 轮 状 病 毒 检 测 及 结 果 分 析 [ 5 李 姜 等 珏
21 1第 卷 2 0年 月 8第 期 1
・医学检 验 ・
实 时荧 光定 量 一 CR 和 酶 联 免 疫 吸 附法 P 检 测 巨细胞 病 毒一g 抗体 的 比较 IM
范文 勇
( 东 省深 圳 市宝 安 区人 民 医院 , 东 深圳 广 广
58 0 ) 1 1 1
【 要]目的 : 摘 比较 实 时荧 光定 量一 C P R和酶联 免 疫 吸附 法检 测 巨 细胞 病 毒一 g IM抗 体 水 平 的敏 感性 及 准确 率 。方 法 : 收集 18例孕 前筛 查妇 女 . 0 同时采 用 实时 荧光 定量 一 C P R和 酶联 免疫 吸 附法 检 测外 周 血 巨细 胞病 毒一 g 抗体 水 平 , IM 并 对 这 两 种 检 测 方 法 的 阳 性 率 进 行 比较 。结 果 : 时 荧 光 定 量 一 C 法 阳 性 率 为 7 % , 联 免 疫 吸 附 法 为 5 % , 者 实 PR 4 酶 7 两
巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用
巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用作者:钟伟明何浩瑜黄家亮来源:《中国医学创新》2011年第15期作者单位:537100 广西贵港市妇幼保健院通讯作者:钟伟明【摘要】目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒(CMV)DNA在儿科CMV感染诊断中的价值。
方法对565例临床疑诊CMV感染患儿分别应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、酶联免疫法(ELISA)检测尿液CMV-DNA及血清CMV-IgM抗体。
结果 FQ-PCR检测尿CMV-DNA的阳性率为42.83%,ELISA检测婴儿血清CMV-IgM抗体阳性率为20.18%。
两种方法对CMV感染诊断符合率为76.46%,前者诊断阳性率显著高于后者(χ233.59,P【关键词】荧光定量聚合酶链反应;酶联免疫法;巨细胞病毒巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒(CMV)引起的病毒感染性疾病,可累及多脏器、多系统,临床症状多样且轻重不一。
婴儿感染可导致黄疸、肝脾肿大、皮肤出血点及淤斑等,重症病死率高,并可导致运动、听力、视力及智力等多种严重的后遗症[1,2],因而受到儿科医生的极大关注。
由于CMV感染临床表现的非特异性,所以敏感和可依赖的实验诊断指标显得非常重要。
目前常用的实验室诊断方法有病毒分离、ELISA检测CMV特异性抗体、抗原血症pp65的检测及DNA的定量检测。
不同的方法各有优缺点。
本研究采用荧光定量PCR方法检测婴儿尿液CMV DNA,并与血清抗体检测进行比较,旨在探讨尿液CMV DNA定量检测的诊断意义。
1 资料与方法1.1 一般资料 2009年7月~2010年10月在本院儿科住院的临床疑似CMV感染[3]的患儿565例。
年龄14天~2岁。
1.2 标本收集采集所有被检验者静脉血2 ml,3000 r/min,离心5 min分离血清,置4 ℃冰箱保存,24 h内进行CMV-IgM检测。
同时,留取所有被检验者尿液5~10 ml,-20 ℃冰箱保存,24 h内进行CMV DNA检测。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析1. 引言1.1 背景介绍人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)是一种广泛存在于人类群体中的病原体,属于疱疹病毒科。
HCMV感染在全球范围内具有高发病率,尤其是在免疫功能受损的个体中,如艾滋病毒感染者、器官移植患者和新生儿等。
HCMV感染对人类健康造成了一定的威胁,容易引起各种严重疾病,包括肺炎、胃肠道炎、感染性单核细胞增多症等。
实时荧光定量PCR技术是一种高灵敏、高特异、快速、准确的核酸检测技术,已被广泛用于病原体的检测和定量。
在HCMV感染的检测中,实时荧光定量PCR技术具有极大的优势,能够快速准确地检测出病毒的存在和数量,为临床诊断和治疗提供了重要依据。
本文将对实时荧光定量PCR技术进行介绍,探讨HCMV感染及其危害,分析实时荧光定量PCR在HCMV感染检测中的应用,进一步探讨其临床意义,并对检测结果进行解读,以期为临床诊疗提供科学依据和参考。
1.2 研究目的研究目的是探讨实时荧光定量PCR技术在检测人巨细胞病毒感染中的应用及临床意义,为临床诊断和治疗提供可靠依据。
具体目的包括:1.了解实时荧光定量PCR技术的原理和方法,探讨其在人巨细胞病毒感染检测中的优势和局限性。
2.分析人巨细胞病毒感染的病原学特点及危害,探讨实时荧光定量PCR在早期诊断和治疗中的应用潜力。
3.总结实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义,探讨其在指导临床决策、评估疗效和预后预测方面的作用。
4.通过对检测结果的解读,分析实时荧光定量PCR在人巨细胞病毒感染监测中的可靠性,并提出进一步研究的展望和建议。
通过本研究,旨在为临床医生提供更准确、快速和可靠的人巨细胞病毒感染检测方法,为患者的诊断和治疗提供更好的支持。
2. 正文2.1 实时荧光定量PCR技术介绍实时荧光定量PCR是一种高度灵敏和特异性的分子生物学技术,可用于快速、准确地检测目标DNA或RNA序列的数量。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析【摘要】本文旨在探讨实时荧光定量PCR在检测人巨细胞病毒感染中的临床意义。
首先介绍PCR技术在临床诊断中的应用,然后解析实时荧光定量PCR的原理。
人巨细胞病毒感染的临床表现被详细描述,接着介绍实时荧光定量PCR检测该病毒感染的方法。
实验结果分析将进一步探讨该技术在病毒检测中的重要性。
结论部分将总结实时荧光定量PCR在人巨细胞病毒感染诊断中的临床意义,并展望未来的研究方向。
本研究旨在为临床医生提供更准确、快速的诊断手段,帮助早期干预和治疗人巨细胞病毒感染。
【关键词】实时荧光定量PCR、人巨细胞病毒、临床意义、PCR技术、临床诊断、原理、临床表现、方法、实验结果、结果分析、结论、未来研究方向、总结。
1. 引言1.1 背景介绍巨细胞病毒(CMV)是一种普遍存在于人类中的病毒,感染率随年龄增长逐渐增高。
在免疫功能正常的人群中,CMV感染通常无症状或仅产生轻微的症状,但在免疫功能受损的人群中,如HIV感染者、器官移植患者、白血病患者等,CMV感染可引起严重的并发症,甚至危及生命。
实时荧光定量PCR作为PCR技术的一种变种,通过在PCR反应过程中监测产生的DNA扩增产物的实时荧光信号来实现对目标DNA的定量检测,具有高度的灵敏度和特异性。
利用实时荧光定量PCR技术检测人巨细胞病毒感染具有重要的临床意义,可以根据检测结果及时进行诊断和治疗,降低感染带来的风险。
本研究旨在探讨实时荧光定量PCR技术在人CMV感染诊断中的应用,为临床提供更准确、快速的诊断手段。
1.2 研究目的我们的研究旨在验证实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染检测中的准确性和可靠性,并探讨其在临床诊断中的实际意义。
通过本研究,我们希望可以为提高人巨细胞病毒感染的早期检测率、准确性和治疗效果提供科学依据,为临床医生在诊疗工作中提供更好的支持和指导。
我们也希望能够为今后相关疾病的研究提供启示,推动相关领域的发展与进步。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析1. 引言1.1 研究背景人巨细胞病毒是一种广泛存在于人类群体中的常见病毒,主要通过呼吸道、唾液等途径传播,在全球范围内都有较高的感染率。
人巨细胞病毒感染可以引起一系列不同严重程度的疾病,如呼吸道感染、消化系统感染、神经系统感染等,对特定人群,如免疫功能低下的患者、新生儿和儿童等,病情可能会更加严重甚至威胁生命。
传统的人巨细胞病毒感染检测方法包括细胞培养、免疫荧光等,然而这些方法存在着检测灵敏度低、耗时长、操作复杂等缺点。
迫切需要一种快速、准确且高灵敏度的检测方法来及时诊断人巨细胞病毒感染,以指导临床治疗和预防控制措施的制定。
1.2 研究目的本研究旨在通过实时荧光定量PCR技术对人巨细胞病毒感染进行准确、快速的检测和定量分析,深入探讨该技术在人巨细胞病毒感染诊断中的应用潜力以及临床意义。
具体目的包括:1. 探究实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染检测中的灵敏度和特异性,评估其在临床诊断中的准确性和可靠性。
2. 分析人巨细胞病毒感染的临床表现特点,探讨实时荧光定量PCR技术在早期诊断和治疗监测中的应用前景。
3. 探讨实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染预防、控制和治疗中的临床意义,促进相关疾病的早期诊断和有效治疗。
通过对以上目的的研究,本研究旨在为人巨细胞病毒感染的临床诊断和治疗提供科学依据,并为相关疾病的防控工作提供技术支持和指导。
1.3 研究意义本研究的意义在于提高人巨细胞病毒感染的诊断准确性和效率,从而为临床治疗和预防提供更科学的依据。
目前,传统的检测方法存在着准确性低、耗时长、操作复杂等缺点,而实时荧光定量PCR技术具有高度灵敏性、特异性和快速性的优势,可以在短时间内准确检测出病毒感染情况,为疾病的早期筛查和诊断提供重要依据。
通过该技术的应用,可以对病情的发展和治疗效果进行动态监测,为临床医生调整治疗方案提供实时数据支持。
本研究的意义在于推动人巨细胞病毒感染的诊断技术的进步,为改善患者的治疗效果和生存质量做出贡献。
实时定量PCR法检测巨细胞病毒感染与传统抗原检测法的比较
实时定量PCR法检测巨细胞病毒感染与传统抗原检测法的比较目的对比实时定量PCR法与抗原检测法检测全血样品巨细胞病毒(CMV)感染的差异。
方法采自79例患者的479份全血样本,分别应用CMV DNA PCR 法和CMV抗原检测法进行测试,结果进行比对。
其中13例患者应用更昔洛韦进行抗病毒治疗,在治疗前后反复采血,对比两种检测方法在治疗监测方面的差异。
结果13例抗病毒治疗患者中,PCR法可更早检测到病毒感染,治疗后PCR 法病毒转阴时间长于CMV抗原检测法。
结论全血样本CMV DNA PCR法检测,敏感度较高,是一种检测CMV感染的有效工具。
Abstract:Objective To compare the efficacy of use of real-time PCR for quantitation of Cytomegalovirus(CMV)DNA in whole blood with the antigenemia assay. Methods 479 whole blood samples from 79 patients,falling under different disease groups,were tested by real-time CMV DNA PCR using the Q-CMV real-time complete kit and CMV antigenemia assay,and the results were compared. Repeatedly tested patients were selected and their charts were reviewed for ganciclovir therapy. Results The 13 patients were transplant recipients and treated with ganciclovir. Before treatment,CMV was detected earlier by real-time CMV DNA PCR than the antigenemia assay. After treatment,the antigenemia assay achieved negative results earlier than real-time CMV DNA PCR. Conclusion Q-CMV real-time complete kit is a useful tool for early detection of CMV infection in whole blood samples .Key words:Cytomegalovirus;Real-time quantitative PCR;Antigen detection test巨细胞病毒(CMV)主要发生于实质器官抑制和骨髓移植的患者中,直接影响器官移植的效果,因此早期诊断治疗CMV感染意义重大[1]。
两种方法检测新型冠状病毒肺炎特异性IgM抗体比较分析
两种方法检测新型冠状病毒肺炎特异性IgM抗体比较分析一、本文概述本文旨在比较分析两种用于检测新型冠状病毒肺炎(COVID-19)特异性IgM抗体的方法。
新型冠状病毒肺炎自2019年底爆发以来,已成为全球面临的严重公共卫生挑战。
早期诊断和隔离患者是控制疫情传播的关键,而特异性IgM抗体检测在此过程中发挥着重要作用。
因此,研究和比较不同检测方法的性能,对于提高诊断准确性和效率至关重要。
本文将介绍两种常用的IgM抗体检测方法,分别是酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免疫分析(CLIA)。
我们将从检测原理、操作简便性、检测时间、灵敏度、特异性以及成本等多个方面进行比较分析。
通过对比这两种方法的优缺点,旨在为临床实验室和诊断机构在选择适合自身需求的检测方法时提供参考依据。
本文还将讨论这两种方法在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用前景,以及未来可能的发展方向。
通过综合分析,我们期望能够为提高新型冠状病毒肺炎的早期诊断能力,以及有效应对疫情提供有益的信息和建议。
二、材料与方法本研究采用了两种常用的检测新型冠状病毒肺炎特异性IgM抗体的方法:方法一为酶联免疫吸附试验(ELISA),方法二为胶体金免疫层析法(GICA)。
其中,ELISA试剂盒购自某知名生物科技公司,严格按照说明书操作;GICA试剂盒则来自另一家生物科技公司,同样按照说明书进行操作。
研究共收集了100份疑似新型冠状病毒肺炎患者的血清样本。
所有样本均来自同一医院,且在采集后立即进行处理和保存。
a. ELISA法:按照试剂盒说明书,对血清样本进行稀释、加样、孵育、洗涤、酶标二抗孵育、显色和终止等步骤,最后使用酶标仪测定吸光度值,根据标准曲线计算IgM抗体浓度。
b. GICA法:按照试剂盒说明书,将血清样本滴加至胶体金试纸条上,根据说明书规定的反应时间观察试纸条上的颜色变化,根据颜色变化判断IgM抗体是否阳性。
a. ELISA法:根据标准曲线计算出的IgM抗体浓度,与试剂盒提供的参考范围进行比较,判断样本是否为阳性。
两种常见病毒检测方法的比较:酶联免疫吸附试验(ELISA)与聚合酶链式反应(PCR)
两种常见病毒检测方法的比较:酶联免疫吸附试验(ELISA)与聚合酶链式反应(PCR)病毒检测是诊断和控制病毒性疾病的关键步骤,目前常见的病毒检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶链式反应(PCR)。
这两种方法在病毒检测领域有着广泛的应用,它们各有特点和适用范围。
下面将分别介绍这两种常见的病毒检测方法,并比较它们的优缺点。
酶联免疫吸附试验(ELISA)酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常用的免疫学检测方法,可以用于检测病毒抗体或抗原。
ELISA方法利用抗体和抗原的特异性结合来检测病毒感染情况。
ELISA方法简单、快速、成本低,因此在临床诊断和流行病学调查中得到了广泛应用。
ELISA的原理是在固相载体上固定一种反应物质,如抗体或抗原,然后加入待检测样本,通过特异性抗体或抗原的结合来检测待检测物质的存在。
常见的ELISA方法包括间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA等。
ELISA方法的优点在于操作简单、结果可靠、灵敏度高,能够同时检测多个样本。
此外,ELISA方法还能够快速判断病毒感染情况,为临床诊断和流行病学调查提供了有力的工具。
然而,ELISA方法也存在一些局限性。
例如,ELISA方法对样本的处理要求较高,需要特定的实验室条件和设备。
此外,ELISA方法在检测病毒RNA或DNA方面的特异性和灵敏度相对较低。
聚合酶链式反应(PCR)聚合酶链式反应(PCR)是一种高灵敏度、高特异性的核酸检测方法,能够快速、准确地检测病毒RNA或DNA。
PCR方法在病毒检测领域得到了广泛应用,特别是在临床诊断、流行病学调查和病毒基因组学研究中发挥了重要作用。
PCR方法利用特异性引物和DNA聚合酶来在体外扩增待检测的RNA或DNA序列,得到大量的目标DNA片段,然后通过凝胶电泳或实时荧光定量来检测目标序列的存在。
PCR方法可以快速、准确地检测病毒感染,并且能够对病毒进行分型和基因序列分析,为病毒病的诊断和病毒生物学研究提供了重要工具。
酶联免疫吸附法与RT-PCR法对血液标本内乙肝病毒的检验结果比较
健康域检验乙肝病毒在我国属于常见且多发的一种传染性疾病,其患病率很高,传播比较广泛,一般情况下均表现为持续性带病毒的状态,进而形成慢性感染,是目前不容忽视的公共卫生问题。
如果患者长期携带乙型肝炎病毒,且不加以控制,很容易出现肝衰竭及肝硬化的情况,进而危及患者生命安全[1]。
传统的临床检验主要是多采取血清学标志物,不过期间一旦发生检测失误就会出现检测者被传染的情况[2]。
随着临床上抗病毒药物的不断广泛应用,HBV变异株数量也不断的增加,进而导致血清学检查更加困难,其敏感性及准确性均大大降低[3]。
近年来,生物技术得到不断发展,对HBV的检测也有了很多新的突破,弥补了传统技术的缺陷。
为进一步探讨对比ELISA(酶联免疫吸附法)与RT-PCR(实时荧光定量-PCR)法对血液标本内乙肝病毒的检验结果,本文将我院在2019年4月至2020年12月收入的血液标本,抽取其中的300份乙肝病毒标本进行研究,具体报道如下。
1资料与方法1.1一般资料以我院在2019年4月至2020年12月收入的血液标本,抽取其中的300份乙肝病毒标本进行研究,对其临床资料作回顾性分析。
其中,男性160例,女性140例,年龄18~89岁,平均(53.56±5.24)岁。
1.2纳入标准(1)均经过相关检验明确诊断为乙肝患者;(2)均未进行任何抗病毒治疗;(3)家属及患者均知情同意本研究,签署相关的同意书,本研究得到我院伦理委员会批准。
(4)均为自愿参加本研究。
1.3排除标准(1)对于其他类型的肝炎患者进行排除,例如甲型、丙型等;(2)对于合并肝脏恶性肿瘤的患者进行排除;(3)对于有严重心脑血管疾病的患者进行排除;(4)对于中途退出本研究及不愿参加本研究的患者进行排除。
1.4检验方法抽取其中的100份乙肝病毒标本进行研究,分别采取酶联免疫吸附法与RT-PCR法进行乙肝病毒检测。
其中,酶联免疫吸附法:在清晨空腹状态下,抽取患者的外周静脉血,约5ml,放置于环境温度为4℃的冰箱内,保存2h,在经过离心后取上层血清进行待检测。
荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值体会
荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值体会【摘要】本文就荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值展开讨论。
在研究背景中介绍了乙型肝炎病毒检测的重要性,研究目的旨在比较两种方法的优劣以及探讨其结合应用的优势。
通过对荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的具体应用进行分析,探讨了它们的优缺点和适用场景。
通过研究案例分析,得出了结论,并展望未来的研究方向。
本文全面评价了两种方法在乙型肝炎病毒检测中的应用效果,但也指出了研究的局限性,为相关领域的研究提供了一定的参考和借鉴。
【关键词】乙型肝炎病毒、荧光定量PCR法、酶联免疫吸附法、检测、应用、比较、优劣、结合应用、优势、案例分析、综合评价、展望未来、局限性。
1. 引言1.1 研究背景乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种常见的肝脏感染疾病,全球范围内有数十亿人感染HBV,其中数百万人患有慢性乙型肝炎。
乙型肝炎病毒感染可引起肝脏炎症、肝硬化和肝癌等疾病,对人类健康造成严重威胁。
传统的乙型肝炎病毒检测方法主要包括血清学检测和核酸检测,其中酶联免疫吸附法(ELISA)是一种常用的血清学检测方法,但其灵敏度和特异性相对较低。
而荧光定量PCR法(qPCR)则是一种高灵敏度、高特异性的核酸检测方法,能够精确地检测乙型肝炎病毒的DNA 或RNA。
随着分子生物学和免疫学领域的不断发展,荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用也得到了广泛关注。
这两种方法的结合应用可以提高检测的准确性和可靠性,有助于早期发现乙型肝炎病毒感染,及时采取措施进行治疗,减少病毒传播和疾病的发展。
深入研究荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值具有重要意义。
1.2 研究目的乙型肝炎病毒是一种造成肝炎的主要病原体,严重危害人类健康。
开展对乙型肝炎病毒的检测具有非常重要的意义。
本文旨在探讨荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值,并比较两种方法的优劣,分析结合应用的优势,最终通过研究案例进行实际应用效果的验证,为研究者提供参考依据。
实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体的比较
实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体的比较范文勇【摘要】目的:比较实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测巨细胞病毒-IgM抗体水平的敏感性及准确率.方法:收集108例孕前筛查妇女,同时采用实时荧光定量-PCR和酶联免疫吸附法检测外周血巨细胞病毒-IgM抗体水平,并对这两种检测方法的阳性率进行比较.结果:实时荧光定量-PCR法阳性率为74%,酶联免疫吸附法为57%,两者差异有统计学意义(P<0.05);18例荧光定量-PCR法阳性的妇女血清巨细胞病毒-IgM拷贝数低于10-4/ml.结论:实时荧光定量-PCR与酶联免疫吸附法相比,对巨细胞病毒-IgM抗体检测具有较高的敏感性和准确率,值得临床推广使用.%Objective: To compare the sensitivity and accuracy of cytomegalovirus-IgM (CMV-IgM) detection by real-time PCR and enzyme linked immunoabsorption assay (ELISA). Methods: We enrolled 108 females who were underwent pre-pregnancy evaluation and evaluated peripheral blood CMV-IgM level by both real time-PCR and ELISA. Positive rates of these two methods were compared. Results: Positive rate in real time-PCR was 74% while in ELISA was 57%, and there was a significant difference between these two methods (ρ<0.05). Copy number in 18 positive cases with real-time PCR detection was less than l0-4/ml. Conclusion: The sensitivity and accuracy of CMV-IgM detection with real-time PCR is higher than ELISA, and real-time PCR deserves broadly applied in clinic.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(008)002【总页数】2页(P83-84)【关键词】实时荧光定量-PCR;酶联免疫吸附法;巨细胞病毒-IgM 抗体【作者】范文勇【作者单位】广东省深圳市宝安区人民医院,广东深圳518101【正文语种】中文【中图分类】R446.5近年来,随着产前筛查在基层医院的开展以及基层医生对巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染致畸认识的加深,本地区现已基本普及对孕前妇女CMV抗体(CMV-IgM)的检测。
应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法对疱疹病毒检验效果的比较研究
应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法对疱疹病毒检验效果的比较研究发表时间:2016-06-22T10:34:03.927Z 来源:《医药前沿》2016年5月第15期作者:朱善军朱同华沈昊陆静芬马春芳沈国荣(通讯[导读] 至于应用实时定量法检测血液中的疱疹病毒,由于受到采血量的限制,阳性率偏低,尚不具备应用价值。
朱善军朱同华沈昊陆静芬马春芳沈国荣(通讯作者)(江苏省苏州市吴江区第一人民医院检验科江苏苏州 215200)【摘要】目的:研究比较疱疹病毒应用实时定量方法与酶联免疫吸附试验方法的检验效果。
方法:择取对象为2013年4月至2015年9月期间本院收治的疱疹病毒感染者,共有45例,分别用实时定量法与酶联免疫吸附试验法检测患者血液、分泌物,比较分析两种方法检测情况。
结果:在分泌物检测中,实时定量法检测所获阳性率(88.9%)明显高于酶联免疫吸附试验法(44.4%);在血液标本上,实时定量法检测所获阳性率(37.7%)明显低于酶联免疫吸附试验法(57.7%),两种方法检测阳性率差异显著,有统计学意义(P<0.05)。
结论:在疱疹病毒分泌物检验中应用实时定量法所获阳性率明显高于酶联免疫试验法,检测准确率高,值得在临床中优先使用,但要注意在血液检测中一般不建议使用实时定量法。
【关键词】疱疹病毒;实时定量法;酶联免疫吸附试验法;比较【中图分类号】R751 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)15-0098-02疱疹病毒属于双股DNA病毒,生长周期较长,其感染的宿主范围较广,能够感染人类与其他脊椎动物[1]。
疱疹病毒一般侵犯外胚层来源的组织,比如神经组织、皮肤组与粘膜组织,感染位置与引起的疾病比较复杂,且还存在潜伏感染的风险,对人们的健康易造成严重影响,故及时检测出疱疹病毒也变得尤为重要[2-3]。
本次研究笔者就疱疹病毒应用实时定量法与酶联免疫吸附试验法的检验效果进行对比分析。
1.材料和方法1.1 研究对象选取2013年4月至2015年9月期间本院收治的疱疹病毒感染者45例,均为女性,年龄在20~58岁之间,平均年龄为39.61±3.24岁,临床症状表现为女性宫颈炎、疱疹性口腔炎、生殖器疱疹、唇疱疹以及皮肤疱疹等,患者和其家属均于知情同意书下愿意配合本次研究。
比较酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR在麻疹检测中的应用效果
比较酶联免疫吸附试验和荧光定量 PCR在麻疹检测中的应用效果摘要:目的:对酶免疫吸附试验与荧光定量PCR在麻疹检测中的应用效果进行了分析。
方法:选取2019年1月至2019年12月收治的60例接受麻疹检测的疑似麻疹患者,作为研究对象。
对60例患者提供的检测标本采用对酶免疫吸附试验与荧光定量PCR进行麻疹检测,对两种检测方法在不同时间段的标本阳性率以及标本检测水平进行了对比分析。
结果:发现在60例疑似麻疹患者中,使用对酶免疫吸附试验法进行检测,总共有14例麻疹病毒IgM抗体阳性,16例麻疹病毒IgM抗体阴性,阳性率为44.67%;而使用荧光定量PCR法进行检测,总共有16例麻疹病毒IgM抗体阳性,14例麻疹病毒IgM抗体阴性,阳性率为53.33%。
两种检测方式的阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
将患者出疹第1天设定采集时间设定为0d,采用对酶免疫吸附试验法检测阳性率为60.00%,采用荧光定量PCR法检测阳性率为80.00%。
随着患者采样时间不断改变,两种检测方式的阳性率均逐渐降低,两种方法检测的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论:在2d之内疑似麻疹患者的诊断中,使用对酶免疫吸附试验法比较适用。
在2d或以上出疹的疑似麻疹患者针对中,荧光定量PCR法比较适用。
关键词:酶免疫吸附试验荧光定量PCR 麻疹病毒检测水平应用效果To compare the effect of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and fluorescence quantitative PCR in measles detectionAbstract: Objective: To analyze the effect of enzyme immunosorbent assay and fluorescence quantitative PCR in measles detection.Methods: A total of 60 suspected measles patients admitted from January 2019 to December 2019 were selected as study subjects.The enzyme immunosorbent assay and fluorescence quantitative PCR were used to detect measlesfrom 60 patients. The positive rate and detection level of the two detection methods at different time periods were compared and analyzed.Results: Among the 60 suspected measles patients, enzyme immunosorbent assay was used for detection. A total of 14 cases were positive for measles virus IgM antibody, and 16 cases were negative for measles virus IgM antibody, with a positive rate of 44.67%.By using fluorescence quantitative PCR, a total of 16 cases of measles virus IgM antibody positive, 14 cases of measles virus IgM antibody negative, positive rate of 53.33%.Comparison of positive rates between the two detection methods showed no statistically significant difference (P>0.05).The collection time was set as 0d on the 1st day after the eruption, and the positive rate was 60.00% by enzyme immunosorbent assay and 80.00% by fluorescence quantitative PCR.As the sampling time of patients kept changing, the positive rates of the two detection methods gradually decreased, and the difference of the positive rates of the two detection methods was not statistically significant (P>0.05.).Conclusion: The enzyme immunosorbent assay is more suitable for the diagnosis of suspected measles patients within 2d.Fluorescence quantitative PCR is more suitable for suspected measles patients with 2d or above eruption.Key words: enzyme immunosorbent assay fluorescence quantitative PCR measles virus detection level application effect酶免疫吸附试验和荧光定量PCR法均为检测麻疹病毒的有效检测方法,但是在实际的应用过程中,两种检测方法在不同的时间段检测水平也有不同【1】。
新生儿巨细胞病毒感染临床检测方法的比较
新生儿巨细胞病毒感染临床检测方法的比较王雪珂;程秀永【摘要】目的比较临床常用新生儿巨细胞病毒的检测方法.方法收集193例新生儿的血液与尿液标本,分别采用ELISA法检测抗体CMV-IgM和实时荧光定量PCR 法检测血清和尿液CMV-DNA,并对检测结果进行比较分析.结果 193例患儿中,血清抗体CMV-IgM阳性51例,检出率为26.4%;尿液HCMV-DNA阳性92例,检出率为47.7%;两种检测方法比较,差异有统计学意义(P<0.05),一致性强度指标Kappa=0.46,吻合度一般.血清HCMV-DNA阳性14例,检出率为7.3%,与尿液检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05),一致性强度指标Kappa=0.158,两种检测方法吻合度较差.结论尿液CMV-DNA较血清抗体CMV-IgM和血液CMV-DNA检出率高,可与IgM联合检测提高诊断准确性,减少漏诊的发生.【期刊名称】《河南医学研究》【年(卷),期】2018(027)019【总页数】3页(P3464-3466)【关键词】新生儿;巨细胞病毒;检测方法【作者】王雪珂;程秀永【作者单位】郑州大学第一附属医院新生儿科河南郑州 450000;郑州大学第一附属医院新生儿科河南郑州 450000【正文语种】中文【中图分类】R446人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种双链DNA病毒,是新生儿最常见的感染源之一,能够导致神经、消化等多个系统的损害,是婴幼儿感音神经性耳聋的主要非遗传原因。
患儿发生CMV感染后仅有10%~15%出现临床症状,均缺乏特异性,其诊断主要依靠实验室检查,比如:病毒分离培养、病毒抗原检测(如PP65抗原)、血液特异性抗体CMV-IgM检测及血清和/或尿液CMV-DNA病毒载量检测,其中任意一项阳性即可确诊。
临床常用的方法是血清抗体IgM及病毒定量测定,两种检测方法各有利弊,本研究对其进行对比分析。
实验室2种检测小儿巨细胞病毒方法的比较
实验室2种检测小儿巨细胞病毒方法的比较李娇;马洪刚;单风平【摘要】Sensitivity and accuracy of colloidal gold (CG) and real-time fluorescence quantitative PCR (RTFQ-PCR) methods to delect infantile cytomegalovirus-IgM ( CMV-IgM) antibody levels were compared. Peripheral blood specimens of 243 cases collected clinically were detected their CMV-IgM antibody levels respectively using RTFQ-PCR and CG methods, compared and analyzed their positive rate and sensitivity of the methods. The results showed that positive rate of RTFQ-PCR method was 11. 93% , CG was 6. 58% , there was statistical significance between both (P< 0.01). In HCMV-DNA positive specimens, IgM antibody positive group HCMV-DNA copy number was much higher than that in the negative group (P < 0. 01) . Comparison of the sensitivity of two methods, RTFQ-PCR sensitivity was 72.5% , CG was 40% , there was statistical significance between both (P <0.01). Therefore, as compared sensitivity and accuracy of RTFQ-PCR with CG to detect CMV-IgM, RTFQ-PCR had fairly higher than CG, and RTFQ-PCR was worth expending its application clinically.%比较胶体金法和实时定量PCR法对小儿巨细胞病毒IgM抗体水平检测的敏感性及准确率.收集临床上243例小儿的血液标本,分别采用实时荧光定量PCR法和胶体金法检测这243例患者外周血巨细胞病毒IgM抗体水平,并对这2种检测方法的阳性率和敏感性进行比较分析.实时荧光定量PCR法阳性率为11.93%,肢体金法为6.58%,2者差异有统计学意义(P<0.01).在HCMV-DNA检测阳性患者中,IgM抗体阳性组HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01),比较这2种检测方法的敏感性,实时荧光定量PCR法的敏感性为72.5%,胶体金法的敏感性为40%,两者差距有统计学意义(P<0.01).实时荧光定量PCR法与胶体金法相比,对巨细胞病毒IgM抗体检测具有较高的敏感性和准确率,值得临床推广应用.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2013(033)001【总页数】4页(P100-103)【关键词】实时荧光定量PCR法;胶体金法;巨细胞病毒IgM抗体【作者】李娇;马洪刚;单风平【作者单位】中国医科大学免疫教研室,辽宁沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】Q93-332人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是一类在自然界普遍存在,但又具有严格种属特异性的病毒。
实时荧光定量聚合酶链反映与酶链免疫法检测儿童疱疹病毒感染的临床评判
实时荧光定量聚合酶链反映与酶链免疫法检测儿童疱疹病毒感染的临床评判[摘要]目的:比较实时荧光定量聚合酶链反映(PCR)与酶链免疫法(ELISA)两种不同方式检测传染性单核细胞增多症儿童及正常儿童疱疹病毒(EBV)感染与临床符合情形。
方式:应用实时荧光定量PCR与ELISA法同步平行检测我院2006年1月至6月期间125例被临床诊断为传染性单核细胞增多症的儿童发烧第7天及50例门诊体检健康的儿童血标本中EBV的检出率。
结果:125名传染性单核细胞增多症儿童中,其中1周岁以下20名,4周岁~10周岁105名,PCR法检出124例,阳性符合率%。
ELISA法检出107例阳性符合率%,但1周岁以下的20名儿童,PCR法检出19例,阳性符合率95%,而ELISA 法检出10例,阳性符合率仅为50%;50例健康儿童,PCR法检出49例,阴性符合率98%,ELISA法检出42例,阴性符合率84%。
结论:PCR法与ELISA法比较,前者的阳性及阴性检出率均明显优于后者,专门是关于1周岁以下的儿童。
与ELISA法相较PCR法是一个快速、灵敏、特异的检测方式,可帮忙临床明确诊断及早医治。
[关键词]疱疹病毒;酶链免疫;实时荧光定量聚合酶链反映;传染性单核细胞增多症EBV又称人疱疹病毒4型,属于r疱疹病毒亚科淋巴滤泡病毒属成员,1968年Henle等证明EBV是传染性单核细胞增多症的病原体。
全世界约有80%~90%成年人感染过EBV,第一次感染者一样发生在10岁以前[1]。
传染性单核细胞增多症的并发症包括脾肿大、肝炎、心包炎或累及中枢神经系统,故关于儿童明确诊断及早医治尤其重要。
本实验目的是对PCR法与ELISA法检测儿童EBV感染进行临床应用的比较及评判。
1 材料与方式仪器上海枫岭生物提供的FTC—2000型实时荧光定量PCR仪;上海迅达医疗仪器提供的XD—711酶标分析仪;北京拓普分析仪器有限责任公司提供的DEM—Ⅲ型自动酶标洗板机。
荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值体会
荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值体会1. 引言1.1 研究背景乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的传染病,由乙型肝炎病毒(HBV)引起。
HBV感染在全球范围内广泛存在,其传播途径主要为血液传播、母婴传播和性传播等。
乙型肝炎病毒感染可引起急性和慢性肝炎,严重者可发展为肝硬化和肝癌,对人类健康造成极大危害。
为了及时、准确地进行乙型肝炎病毒检测,保护人类健康,迫切需要开发出高灵敏度、高特异性的检测方法。
荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和酶联免疫吸附法作为两种常用的检测方法,在HBV检测中具有重要的应用价值。
荧光定量PCR法利用特异性引物和探针结合HBV的核酸片段,通过实时检测荧光信号来测定病毒载量,具有高灵敏度和准确性的优势;而酶联免疫吸附法则利用抗原抗体反应来检测HBV的特异性抗原或抗体,具有简便快速的特点。
为了更好地探讨荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用,本研究旨在分析两种方法的优势和劣势,探讨它们的互补性,并评估其在乙型肝炎病毒检测中的应用效果,为临床诊断和治疗提供更加科学的依据。
【字数:278】1.2 研究目的本文旨在探讨荧光定量PCR法与酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值,并比较两种方法的优缺点以及它们的互补性。
通过对这两种检测方法在乙型肝炎病毒检测中的应用效果进行全面的分析和评价,旨在为临床实验室提供更科学、准确和高效的检测手段,为乙型肝炎病毒的预防、诊断和治疗提供更有力的支持。
本研究也旨在为进一步完善乙型肝炎病毒检测方法和提升检测准确性提供一定的参考和借鉴,促进乙型肝炎病毒检测技术的发展与进步。
通过对荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法在乙型肝炎病毒检测中的综合应用进行探讨,将为临床医生提供更有力的检测依据,为乙型肝炎病毒的早期筛查和诊断提供更准确和可靠的方法,为临床治疗和防治提供更科学、可靠的依据。
2. 正文2.1 荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用荧光定量PCR法是一种高灵敏度、高特异性的检测方法,已经在乙型肝炎病毒检测中得到广泛应用。