大鼠肝组织染Masson染色的体会
加味四逆散对大鼠肝纤维化的改善作用
■实验研究■doi:10.3969/j.issn.1005-0264.2021.04.017加味四逆散对大鼠肝纤维化的改善作用*晁利芹王付A河南中医药大学中医药科学院(河南郑州,450046)摘要目的:探讨加味四逆散对猪血清诱导的大鼠免疫损伤性肝纤维化的改善作用,为加味四逆散的科学应用提供依据。
方法:采用腹腔注射未灭活猪血清联合保持激怒饥饿状态建立大鼠肝纤维化模型。
造模结束后,连续56d灌胃加味四逆散(7mg/kg)及秋水仙碱(0.2mg/kg)。
观察各组大鼠中医症候指标、肝脏系数变化;测定血清肝功能、纤维化标志物的含量;肝组织TGF-p/Smad信号通路相关基因表达水平;MASSON染色观察肝组织病理学变化。
结果:与模型组比较,阳性药物秋水仙碱组、加味四逆散组、预防组大鼠的肝脏系数,血清肝功能,纤维化标志物含量均显著下降(P<0.05);总蛋白、白蛋白、白球比水平均显著上升(P<0.05),血清球蛋白含量显著下降(P<0.05);体质量虽有增加,但与模型组无显著差异(P>0.05);TGF-|31、Smad3mRNA表达均显著下降(P<0.05),Smad7mRNA表达显著升高(P<0.05)。
此外,加味四逆散组、秋水仙碱组、预除组之间结果无显著差异(P>0.05),但均未恢复到正常水平。
肝脏病理组织切片结果显示加味四逆散组、阳性药物组、预防组肝脏病变程度明显减轻。
结论:加味四逆散对猪血清联合激怒饥饿状态诱导大鼠肝纤维化具有改善疗效,且与秋水仙碱有相似的治疗效果。
关键词加味四逆散;猪血清;肝纤维化中图分类号R289.3;R259文献标志码AImproved effect of Supplemental Sini San on hepatic fibrosisCHAO Li-qin,WANG Fu^.Henan university of traditional Chinese medicine(Zhengzhou Henan,450046)China Abstract Objective:To investigate the effect of Supplemental Sini San on the immune induced liver fibrosis induced by porcine serum in rats,and to provide evidence for the scientific application of Supplemental Sini San.Methods:Rat liver fibrosis model was established by intraperitoneal injection of non inactivated pig serum in combination with maintaining irritability.After the end of modeling,the stagnation of sedum and colchicine(0.2mg/kg)were administered intragastrically(7mg/kg)for56days.The changes of TCM symptom index and liver coefficient of rats in each group were observed.The levels of serum liver function and fibrosis markers were determined.The expression levels of TGF-p/Smad signaling pathway-related genes in liver tissues were observed.The pathological changes of liver tissues were observed by MASSON staining.Results:Compared with the model group,the liver coefficient,serum liver function and fibrosis markers of the positive drug colchicine group,Supplemental Sini San group and prevention group were significantly decreased(P<0.05);total protein,white Protein and white spheres increased significantly(P<0.05),serum globulin content decreased significantly(P<0.05);although the body mass increased,there was no significant difference between the model and the model group(P>0.05);TGF-pl,Smad3mRNA The expression was significantly decreased(P<0.05),and the expression of Smad7mRNA was significantly increased(P<0.05).In addition,there was no significant difference between the Supplemental Sini San group,the colchicine group and the prevention group(P>0.05),but none of them returned to normal levels.The results of liver pathological biopsy showed that the degree of liver lesions in the Supplemental Sini San group,the positive drug group and the prevention group were significantly reduced.Conclusion:Supplemental Sini San has improved curative effect on liver fibrosis induced by porcine serum combined with irritability and starvation,and has similar therapeutic effect with colchicine.Key Words:Supplemental Sini San;pig serum;liver fibrosis肝纤维化是肝损伤发展至肝硬化的中间环节,及时阻断或逆转肝纤维化的发生至关重要,但西药抗纤维化毒副作用基金项目:河南中医药大学博士基金(No.BSJJ2016-11),国家自然科学基金项目(N。
病理标本观察实验报告总结
病理标本观察实验报告总结一、实验目的本次实验的目的是通过对病理标本的观察,了解病理学基本概念和常见疾病的病理变化,以及掌握常用病理标本处理技术。
二、实验过程1. 病理标本制备:将小鼠肝脏、心脏、肾脏等器官取出,用生理盐水清洗后固定在10%中性缓冲福尔马林溶液中。
2. 石蜡包埋:将固定好的组织标本经过甲醇梯度脱水后,用乙醇和苯并加入适量的石蜡进行包埋处理。
3. 切片染色:将包埋好的标本切成5μm厚度的切片,然后进行染色处理。
其中常用的染色方法有HE染色、Masson染色等。
三、实验结果1. 小鼠肝脏切片观察:肝细胞排列紧密,中央静脉周围有明显血窦。
HE染色显示肝细胞核大而圆,胞浆呈深粉红色。
Masson染色显示纤维化程度较轻。
2. 小鼠心脏切片观察:心肌细胞排列整齐,有明显的纵横交错的纤维。
HE染色显示心肌细胞核圆形,胞浆呈深粉红色。
Masson染色显示心肌纤维化程度较轻。
3. 小鼠肾脏切片观察:肾小球内有明显毛细血管丛,肾小管排列整齐。
HE染色显示肾小球内有明显的Bowman囊和肾小管,核呈圆形或椭圆形。
Masson染色显示肾小球内无明显纤维化。
四、实验分析通过对病理标本的观察,我们可以发现不同器官在组织结构上存在差异。
例如,肝脏中央静脉周围有血窦,而心脏和肾脏则不存在这种结构。
同时,在不同染色方法下,我们也可以观察到不同的病理变化。
例如,在Masson染色下,我们可以看到组织中是否存在明显的纤维化。
五、实验总结通过本次实验,我们了解了病理学基本概念和常见疾病的病理变化,掌握了常用病理标本处理技术。
同时,我们也发现了不同器官在组织结构上的差异以及不同染色方法下观察到的病理变化。
这对于我们进一步深入学习病理学知识具有重要意义。
masson 染色肾组织的描述
尊敬的客户:在本文中,我将为您撰写一篇关于“masson 染色肾组织的描述”的文章。
我将以从简到繁、由浅入深的方式来探讨这一主题,以便您能更深入地理解。
1. masson 染色肾组织的描述让我们来了解一下什么是masson染色以及它在肾组织中的应用。
masson染色是一种组织染色方法,主要用于分辨胶原纤维和肌纤维,并且可用于观察肾小球间质的纤维化情况。
在肾脏疾病的诊断中,masson染色可以帮助医生准确评估患者的肾脏病变程度,对疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义。
2. masson 染色肾组织的应用在肾脏病变的研究中,masson染色被广泛应用于观察肾小球间质的纤维化程度。
肾小球间质的纤维化是很多肾脏疾病的共同表现,包括慢性肾炎、糖尿病肾病等。
通过masson染色,可以清晰地观察到肾小球周围的胶原纤维沉积情况,以及肾小管间质的纤维化情况,从而评估肾脏病变的程度和类型。
3. masson 染色肾组织的意义根据masson染色结果,医生可以更准确地判断患者肾脏病变的类型和程度,为后续的治疗方案提供重要参考。
通过观察纤维化程度,可以及时采取有效的治疗措施,延缓疾病的进展,保护肾功能。
masson 染色在肾脏疾病的诊断和治疗中具有非常重要的意义。
4. 个人观点和理解在我看来,masson染色对于肾脏疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
通过对肾组织进行染色观察,可以从纤维化的角度全面评估病变情况,为医生制定个性化的治疗方案提供重要依据。
masson染色的应用也为科学研究提供了重要的技术支持,有助于深入了解肾脏疾病的发病机制和进展规律。
总结回顾通过本文的介绍和解释,相信您已经对masson染色肾组织的描述有了更深入的了解。
这种染色方法在肾脏疾病的诊断和治疗中扮演着重要角色,帮助医生更准确地评估病变情况,制定有效的治疗方案。
也为科学研究提供重要的技术支持,推动肾脏疾病的深入研究和治疗进展。
希望本文能够帮助您更全面、深刻和灵活地理解masson染色肾组织的描述。
梗阻性黄疸大鼠肝脏损害及血清毒性物质变化
梗阻性黄疸大鼠肝脏损害及血清毒性物质变化(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)作者:韩德兰苑建斌王永清闫秀玲【摘要】目的:探讨梗阻性黄疸(梗黄)大鼠肝脏损害及其血清毒性物质的变化。
方法:采用胆总管结扎方法建立梗阻性黄疸大鼠模型,将36只大鼠随机分为假手术(sham)组6只、梗阻性黄疸(CBDL)组30只(CBDL组又分为1周、2周、3周、4周、5周亚组,每组6只)。
监测各组血液TNFα、内毒素、肝功能变化。
结果:CBDL组均可见肝细胞坏死及增生,汇管区可见胆管扩张、胆汁淤积,肝组织改变随梗阻时间的延长而逐渐加重,血清内毒素及TNFα含量与梗阻时间明显相关。
结论:CBDL大鼠肝脏形态改变明显,血ALT、TBIL、内毒素、TNFα含量明显升高,并与梗黄时间有关。
【关键词】大鼠;黄疸/阻塞性;肝脏;肿瘤坏死因子【ABSTRACT】Objective:To study the liver damage and toxicity index variation in serum for obstructive jaundice rats.Methods:Choledoch ligation method was used to establishobstruction jaundice rat model,while 36 models were divided into sham group with 6 mice,and CBDL group 30,30 models in CBDL group were sub divided into.1week、2week、3week、4week、5week,per 6 groups.The blood TNFα,endotoxin,liver function were detected.Results:For the rats in CBDL group,liver shape changed obviously,and blood ALT,TBIL,the endotoxin,TNFαcontents increased evidently,concerning with time of OJ.Conclusion:Microscope examination showed that liver cell necrosis was heavy in rats of CBDL group,bile was filled up in bile duck in rats of both group,and the liver organization was damaged along with the obstruction time extension,but was aggravated gradually.The blood endotoxin and TNFαcontent were obviously related with obstruction time.【KEY WORDS】Rats,Jaundice/Obstructive,Liver,Tumor necrosis factor梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)是多种肝胆疾病的共同病理过程,具有死亡率高、并发症多的临床特点,目前普遍认为与内毒素(ETX)有关[12]。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用1. 引言1.1 Masson染色的原理Masson染色是一种常用的组织切片染色技术,广泛应用于肝纤维化的辅助诊断中。
其原理是利用酸性品红染料染色胶原蛋白和肌纤维蛋白,这两种成分在组织切片中呈现出蓝绿色,而细胞核则呈现出红色。
这种染色方法能够清晰地显示出胶原纤维的分布和形态,从而帮助医生判断纤维化程度和类型。
Masson染色通过特定的着色方式可以将不同组织结构和成分区分开来,使得观察者能够更准确地识别有关组织的特征。
在肝纤维化的诊断中,Masson染色通常用于显示胶原纤维在肝脏组织中的沉积情况,帮助医生评估病变程度。
通过观察Masson染色的结果,医生可以判断出肝脏组织中胶原纤维的增多和分布情况,从而判断出肝纤维化的严重程度。
Masson染色的原理是利用不同成分在酸性品红染料染色下呈现出的不同颜色来区分组织结构,从而帮助医生辅助诊断肝纤维化等疾病。
这种染色方法具有简单易行、结果清晰等优点,是肝纤维化辅助诊断中常用的技术之一。
1.2 肝纤维化的概述肝纤维化是指肝脏在长期受损或慢性炎症作用下,纤维组织不断增生,最终导致肝脏结构的改变和功能异常。
其病理特点主要表现为肝小叶结构紊乱,肝细胞损伤和坏死,以及纤维组织增生。
肝纤维化是许多慢性肝病的共同表现,如慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、酒精性肝病等。
在肝纤维化的发展过程中,纤维组织的沉积逐渐增多,形成纤维化带,最终会影响肝脏的正常功能。
临床上,肝纤维化的程度往往反映了肝脏受损的程度和肝功能的恶化程度。
准确评估肝纤维化的程度对于肝病的诊断和治疗具有重要意义。
2. 正文2.1 Masson染色在肝纤维化中的应用Masson染色是一种常用的组织学染色方法,可用于观察胶原蛋白和其他纤维蛋白的沉积情况。
在肝纤维化的辅助诊断中,Masson染色可以帮助医生快速准确地识别肝脏组织中的纤维化程度,并指导后续的治疗方案。
通过Masson染色,医生可以明显看到不同颜色的纤维组织,从而对肝脏的纤维化程度进行评估。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用一、 Masson染色的原理和方法1. 原理Masson染色是一种常用的组织学染色方法,其原理是利用不同组织成分对染色剂的亲和性不同而显现出不同的颜色。
Masson染色主要是用于染色胶原纤维和肌纤维,胶原纤维呈蓝色至黑色,肌纤维呈红色。
在肝组织中,Masson染色可以清晰地显示出纤维组织的存在和分布情况。
2. 方法Masson染色的方法相对简单,通常包括以下几个步骤:①取肝组织标本,经过适当的固定、脱水和透明化处理后,将其包埋在石蜡中,切制成4μm的切片。
②将切片放在60℃温水上融化并贴在玻片上。
③将玻片上的肝切片在60℃的干燥箱中干燥。
④将玻片浸入温热的Bouin液中,使之充分浸润。
⑤取出后,用水冲洗使组织切片褪色。
⑥脱水和透明化后,用干净的刷子将一层胶原纤维转换液均匀涂在玻片上。
转换液的成分主要是盐酸和甘油混合。
⑦用转换液浸润后,将切片放入染色盒中,加入适量的酸性fuchsin染色液,在60℃下加热20分钟。
⑧取出后,用水冲洗,转换液褪色。
⑨用一层绿色显色液均匀浸润切片,显色液的成分主要是翠蓝和甘油混合。
⑩用显色液浸润后,再次在60℃下加热20分钟。
⑪取出后,用水冲洗,转换液褪色。
⑫脱水、透明化、封片后即可观察。
1. Masson染色在肝纤维化程度的评估通过Masson染色,可以清晰地染色显示肝组织中的胶原纤维的分布和密度。
在正常的肝脏组织中,胶原纤维的分布较少,呈现较浅的蓝色或呈现为红色。
而在纤维化肝脏组织中,胶原纤维会显著增加,并呈现为深蓝色或黑色。
可以根据Masson染色的结果,来评估肝纤维化的程度,从而为临床的诊断和治疗提供重要的依据。
2. Masson染色结合免疫组织化学染色的应用在实际的临床应用中,Masson染色也常常结合免疫组织化学染色进行检测。
通过Masson染色和免疫组织化学染色的结合使用,可以更加清晰地显示出肝组织中胶原纤维的分布和类型,同时也能够检测出许多炎症细胞和相关生物标志物的表达情况,从而更准确地判断肝纤维化的程度和病理改变。
masson 染色肾组织的描述
masson 染色肾组织的描述摘要:一、引言二、Masson染色原理三、Masson染色在肾组织中的应用四、Masson染色的操作步骤五、Masson染色结果的解读六、Masson染色在肾组织研究中的优势与局限七、展望与总结正文:一、引言Masson染色是一种常用的组织化学染色方法,广泛应用于病理学、组织学等领域。
在肾组织研究中,Masson染色具有重要的意义。
本文将对Masson染色在肾组织中的应用进行详细介绍,并探讨其在肾组织研究中的优势与局限。
二、Masson染色原理Masson染色是一种双染色方法,主要通过两种染色剂对组织中的胶原纤维和肌纤维进行染色。
胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。
这种染色方法能够清晰地显示肾组织的胶原纤维和肌纤维分布,有助于研究肾组织的结构与功能。
三、Masson染色在肾组织中的应用1.肾小球肾炎:Masson染色可以显示肾小球的纤维化程度,有助于判断肾小球肾炎的病理类型和病情严重程度。
2.肾间质纤维化:Masson染色可以清晰地显示肾间质的纤维化程度,有助于评估肾间质纤维化的程度和病变范围。
3.肾血管病变:Masson染色可以显示肾血管的胶原纤维分布,有助于研究肾血管病变的发生机制和病变特点。
4.肾肿瘤:Masson染色可以显示肾肿瘤周围的纤维组织,有助于判断肿瘤的侵袭性和转移风险。
四、Masson染色的操作步骤1.取材:切取新鲜肾组织块,固定于甲醛溶液中。
2.脱水:依次用乙醇、丙酮进行脱水处理。
3.透明:采用透明剂使组织透明。
4.染色:按照Masson染色试剂盒说明书进行操作,染色剂包括Masson 试剂、丽春红试剂等。
5.脱色:用分化液进行脱色处理。
6.冲洗:用清水冲洗组织切片。
7.透明:用透明剂透明处理。
8.封片:滴加封片剂,覆盖玻片,晾干。
五、Masson染色结果的解读1.胶原纤维:呈蓝色,分布于肾小球、肾小管、肾血管等部位。
2.肌纤维:呈红色,主要分布于肾小球和肾小管。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用1. 引言1.1 Masson染色简介Masson染色是一种常用的组织染色方法,用于检测胶原蛋白和纤维组织。
该染色方法以法国病理学家皮埃尔·马松(Pierre Masson)命名,最初用于研究纤维组织的形态结构。
Masson染色主要通过梵斯基与苏木精染液染色,使得胶原纤维呈蓝色,肌肉纤维和胶原纤维上的细胞核呈黑色或蓝色,而细胞质和胶原纤维之外的结缔组织呈红色或紫红色,从而能够清晰地区分不同类型的组织结构。
在肝纤维化的辅助诊断中,Masson染色被广泛应用于观察肝组织中的纤维化程度和类型。
通过Masson染色,医生可以清晰地看到肝组织中纤维组织的分布情况、密度和形态,从而帮助判断肝纤维化的严重程度和发展趋势。
Masson染色还可以帮助鉴别不同类型的纤维化组织,例如胶原纤维和弹性纤维,有助于提高对肝组织结构的准确理解。
Masson染色是一种简单而有效的组织染色方法,在辅助诊断肝纤维化中具有重要意义。
它的应用可以为医生提供更直观、全面的肝组织信息,有助于制定更精准的治疗方案和预后评估。
Masson染色在肝纤维化诊断中的重要性将在后续内容中进一步探讨。
1.2 肝纤维化的诊断意义肝纤维化是一种常见的肝脏疾病,它是由于长期的肝脏损伤导致肝脏组织纤维化增生而引起的。
肝纤维化的诊断在临床上具有重要的意义,因为它往往是其他肝病发展到晚期的先兆。
通过及时的诊断和治疗,可以有效预防肝纤维化进一步发展成为肝硬化甚至肝癌等严重疾病。
2. 正文2.1 Masson染色原理Masson染色是一种常用的组织染色方法,主要用于观察和分析胶原和纤维蛋白等胶原纤维的存在和分布情况。
它是通过同时染色细胞核、胶原和肌纤维蛋白,使之呈现不同的颜色,从而能够清晰地区分不同的细胞和组织结构。
Masson染色的原理主要是基于组织成分对染色剂的亲和性不同所导致的颜色差异。
具体来说,Masson染色是将织片浸入酸性酒红O染色液中,再经过苏木红和亚甲蓝的染色,最后脱水、透明和封片,使细胞核呈蓝色,胶原呈蓝色(富含胶原的纤维呈绿色),而肌纤维蛋白则呈红色。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用Masson染色是一种组织染色技术,常用于辅助肝纤维化的诊断。
肝纤维化是慢性肝病的常见并发症,严重影响肝脏的功能和结构。
通过检测肝组织中的纤维化程度,可以评估病情的严重程度,指导临床治疗和预后评估。
Masson染色主要是通过染色纤维化组织,使其显色,从而与正常的肝细胞区别开来。
该技术主要使用苏木精嫩红、铁铬酸盐和胶体矽藻土等试剂进行染色,使纤维化区域呈现出蓝色或绿色,而正常的肝细胞和血管组织则呈现为红色或粉红色。
这样,通过显微镜观察,可以清晰地区分纤维化与正常肝组织。
Masson染色的优点之一是可以同时识别肝组织中的胶原纤维和颗粒物质。
胶原纤维是纤维化过程中主要的组成部分,染色后呈现蓝色,因此可以直观地显示纤维化的程度。
而颗粒物质主要是肝细胞内的胆固醇和胆红素等物质,在正常肝组织中富集,染色后呈现红色或粉红色,可以作为对照标准。
通过观察Masson染色的结果,可以对肝纤维化进行分级。
纤维化的程度一般分为四级:F0级表示无纤维化,F1级表示纤维化仅限于血管周围,F2级表示纤维化弥漫在全肝,但未达到房间隔水平,F3级表示纤维化达到和/或扩展到房间隔水平,F4级表示存在肝硬化。
通过Masson染色,可以直观地在显微镜下观察到这些纤维化区域和组织结构,对纤维化的程度进行定量评估。
Masson染色可以作为肝纤维化的辅助诊断技术,结合临床症状和其他检查结果,为临床提供更全面的信息。
它相对简便、可靠且较为经济,成为常用的组织学检查方法之一。
尽管Masson染色在肝纤维化诊断中有一定的局限性和主观性,但结合其他检查结果,可以提高诊断的准确性和可靠性,为肝纤维化患者的治疗提供科学依据。
韩英:面对疾病从不服输
韩英:面对疾病从不服输作者:彭洋来源:《肝博士》 2013年第1期韩英女,47岁,教育部长江学者计划特聘教授,现任第四军医大学第一附属医院消化内科副主任,主任医师, 教授, 博士生导师,精品教员。
获国家自然科学基金面上项目3项,国家863计划课题一项,国家重大传染病专项合作课题一项,陕西省13115重大科技专项一项,参与多项国家自然科学基金的合作研究,发表论文50余篇,SCI收录32篇。
不服输的医科生早在学生时代,韩英就以不服输成了学校的小名人,虽然成绩偶有波动,但从来没跌出过班上的前三名,只要一发现同学超过了自己,就要千方百计迎头赶上。
1981年韩英被第一志愿的河北医科大学录取,虽然当时她对医学没有半点兴趣,但同样凭着一股不服输的劲头,成绩也一直名列前茅。
在一次消化科的见习中,她第一次看到一个年仅37岁的男性患者消化道出血,患者躺在床上呕血,血液都喷到了对面的床上,虽然医务人员紧急输血补液,但这个年轻的生命还是没有抢救过来。
第一次看到患者在眼前失去生命,虽然自己并不是主治医生,但对韩英内心造成了不小冲击,“怎么不能早期发现?如何能预防?”这些问题在这个年轻的韩英心里埋下了种子,从此以后不管是有关消化专业的课还是实习,她都格外认真。
毕业以后自然选择了消化内科,考研究生也选择了消化内科,师从于我国著名的消化专家樊代明院士,也成了一名军医。
失败也是贡献“让我最难忘的一个患者,是我的同行,一个职工医院的医生。
”韩英告诉记者,这名患者90年代有过输血史,因腹泻就诊发现是丙型肝炎肝硬化失代偿期,低蛋白血症,大量腹水,白细胞、血小板明显减低,既不能接受干扰素治疗又不能耐受脾切手术。
韩英给她介绍了当时正在探索研究中的干细胞治疗,没想到她坚决要求作为受试者,并签订了知情同意书。
患者告诉韩英:“我现在有病的不能直接给患者直接服务,我和你一起努力,既使失败了,也是为探索这个疾病的治疗做一个小小的贡献。
”听完这句,韩英不自觉地流下了眼泪,这也更加坚定的她攻克这个疾病的决心。
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色步骤如下:(一)固定与修块取组织块放入Bouin氏液中,组织块的直径应小于7mm。
6小时左右后用双面刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。
(二)脱水与透明1. 75%乙醇50分钟2. 85%乙醇50分钟3. 95%乙醇(I) 30分钟4. 95%乙醇(II) 30分钟5. 100%乙醇(I) 30分钟6. 100%乙醇(II) 30分钟7 1/2二甲苯(乙醇与二甲苯等体积)20分钟&二甲苯(I)20分钟9 .二甲苯(II)10分钟(可依据透明效果而定)若脱水不好,二甲苯溶液颜色会变混浊。
在每一步骤之后,要充分滤干组织块,一般用筒纸吸干组织块上的液体,以免影响其他液体的浓度,但也要防止组织块干燥。
全过程约需要5h。
(三)浸蜡、包埋与修蜡块1.浸蜡:将60C恒温箱打开,使石蜡充分溶解,待脱水与透明结束后,将组织块转入石蜡里,放置于60 C恒温箱120分钟。
2 .包埋:将60 C的石蜡倒入纸盒内,然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好,使切面朝下。
不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中,以保证切片和染色条件相同。
为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固,可将纸盒置于一玻璃板上(或大培养皿内),然后将玻璃板置于80-90 C左右热水上,包埋时蜡盒底部要放平,做蜡块的蜡要反复冻融较好。
3 .修蜡块:待纸盒内蜡凝固后,用刀片将其修成梯形,组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。
(四)切片在载玻片上擦少量甘油蛋白。
可滴半滴甘油蛋白于载玻片上,用手指充分抹匀,呈半干状为佳。
切片厚约4-8卩m,将切片在55C左右水浴中展开,展开程度以带黄颜色的组织完全摊平为准。
用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片,放入37C烘箱中过夜。
每个组织块捞片2张。
过夜后,将载玻片置于玻片架上,进行下面的实验。
(五)脱蜡、染色与脱水倾斜玻片架,将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干,减轻对其他试剂浓度的影响。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
肝纤维化几种病理染色方法及意义归纳
肝纤维化几种病理染色方法及意义归纳徐艳华;金刚;巴图德力根;苏日古嘎;孙德志【摘要】目的:归纳肝组织各种病理切片染色方法,探讨不同方法在大鼠肝纤维化病理诊断中的意义.方法:将实验大鼠分为正常组和模型组,每组各8只,模型组腹腔注射30%CCl4橄榄油溶液2.0ml/kg,1次/4天,共7次,建立肝纤维化模型.取材肝组织制作病理切片,分别进行HE染色、弹力胶原纤维染色、网状纤维染色、Masson(马松)三色染色、天狼星红染色.结果:正常组大鼠肝组织各种染色均呈现正常形态.模型组大鼠肝脏切片HE染色示肝细胞变性、坏死,呈现大面积假小叶组织结构,属坏死后肝硬变;弹力胶原纤维染色示大量胶原纤维沉积,汇管区周围胶原纤维沉积,纤维条索较粗且染色着色较深,包裹,已形成假小叶;马松染色示大量蓝色胶原纤维沉积,自汇管区周围向外延伸,纤维条索较粗且染色着色较深,表明胶原纤维较多,已形成假小叶;网状纤维染色示网状纤维失去正常分布状态,自汇管区周围网状纤维塌陷、融合、增粗、包裹并已形成假小叶;天狼星红染色示各型胶原纤维自汇管区向外扩展,偏光镜下观察可见胶原沉积、扩展已形成假小叶,其中大量红色I型胶原纤维、绿色III型胶原,少量疏网状II型胶原纤维和淡黄色IV型胶原纤维.结论:HE染色可以观察细胞形态,弹力胶原纤维染色、网状纤维染色、Masson(马松)三色染色均能诊断肝纤维化,而天狼星红染色可以对肝纤维化组织中各型胶原纤维进行分型.【期刊名称】《中西医结合肝病杂志》【年(卷),期】2018(028)006【总页数】3页(P352-353,后插1)【关键词】大鼠肝纤维化;病理染色;方法;意义【作者】徐艳华;金刚;巴图德力根;苏日古嘎;孙德志【作者单位】内蒙古民族大学附属医院内蒙古通辽,028007;内蒙古民族大学附属医院内蒙古通辽,028007;内蒙古民族大学附属医院内蒙古通辽,028007;内蒙古呼伦贝尔市新巴尔虎右旗结核病防治所;内蒙古民族大学附属医院内蒙古通辽,028007【正文语种】中文肝纤维化是慢性肝炎发展至肝硬化的早期可逆阶段。
微波改良Masson三色法在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中应用
微波改良Masson三色法在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中应用林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【摘要】@@ 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病.主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化,最终导致肺脏结构和功能严重破坏,其发病机制尚未明确.研究发现,经气管内灌注博莱霉素(bleomycin, BLM)可以造成大鼠肺纤维化,此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似,因此,对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究,探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度,为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据.本文用显示大鼠肺纤维化的效果来比较微波改良Masson三色法和VG染色法.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2011(027)009【总页数】3页(P1014-1016)【关键词】微波改良Masson三色法;VG染色法;肺间质纤维化;博来霉素【作者】林云恩;龙惠东;许惠娟;何新明;杨通【作者单位】广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院附属肿瘤医院ICU,广州,510095;汕头大学医学院附属第二人民医院呼吸内科,汕头,515041;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120;广州医学院第一附属医院病理科,广州,510120【正文语种】中文【中图分类】R446特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种原因不明的弥漫性肺疾病。
主要表现为弥漫性肺泡炎、肺泡单位结构紊乱和肺纤维化,最终导致肺脏结构和功能严重破坏,其发病机制尚未明确。
研究发现,经气管内灌注博莱霉素(bleomycin,BLM)可以造成大鼠肺纤维化,此病理过程与人类TPF的病理过程极其相似,因此,对BLM致大鼠肺纤维化不同阶段的肺组织病理改变进行研究,探讨肺纤维化在IPF不同阶段的病变程度,为临床制定有效的治疗策略提供理论和实验依据。
masson染色详细原理
masson染色详细原理Masson染色是一种常用的组织学染色方法,用于观察和研究组织和细胞的形态结构。
它是由法国病理学家Masson于1923年提出并改进的,在组织学研究中得到广泛应用。
Masson染色主要用于染色胶原纤维和肌纤维,使其显色,从而更好地观察和研究组织的结构和性质。
Masson染色的原理是利用染色剂对组织中的不同成分具有选择性染色作用。
其核心原理是根据不同的成分对染色剂的亲和力不同,从而实现对组织结构的染色。
Masson染色的主要步骤包括固定、去脂、脱水、浸透、包埋、切片和染色。
组织标本需要进行固定处理,常用的固定剂有福尔马林和乙醛等。
固定可以保持组织的形态结构,防止其变性和腐败。
然后,固定的组织标本需要去除其中的脂肪物质,以便更好地观察其他组织成分。
脱脂的方法主要是使用有机溶剂,如乙醚或苯等,将脂肪溶解并去除。
接下来,需要对标本进行脱水处理,以便将其转变为透明的状态,便于浸透和包埋。
脱水常用的方法是使用酒精和醋酸酯等有机溶剂,逐渐浓度递增地进行脱水处理。
脱水后,组织标本需要进行浸透处理,即将其浸泡在合适的浸透剂中,使其渗透和渗透固化。
常用的浸透剂有蜡和树脂等,浸透剂的选择取决于具体的研究目的和标本类型。
浸透完成后,需要将组织标本进行包埋,即将其嵌入到固化剂中,以便进行切片。
常用的固化剂是石蜡,可以使组织标本坚固并保持其形状。
在包埋完成后,可以使用切片机将固化的组织标本切成薄片,以便于后续的染色和观察。
切片的厚度通常为5-10微米,取决于具体的研究需求。
对组织标本进行染色。
Masson染色的染色剂主要有酸性双染剂和嗜酸性染料组成,如苏木素、伊红、天青和酸性绿等。
这些染料对不同的组织成分具有选择性染色作用,使得胶原纤维显色为蓝色,肌纤维显色为红色,细胞核显色为深紫色。
通过Masson染色,可以清晰地观察和研究组织中的胶原纤维和肌纤维,了解其形态、分布和性质。
同时,Masson染色还可以与其他染色方法结合使用,如免疫组织化学染色和原位杂交等,以实现更全面和深入的组织学研究。
Masson染色技术
胶原纤维染色(Masson三色染色法)胶原纤维:是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。
广泛分布于各脏器内。
在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。
胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
应用意义:定性定量胶原纤维在体内分布广泛。
HE染色不能以不同颜色将其显示出来,而胶原纤维定性特染可作到这一点,故在多种疾病的病理诊断和研究用中具有实用价值.如:1.显示组织,器官的损伤或炎症的修复与纤维板化程度2.判断心肌坏死后被除纤维结缔组织所取代的区域:HE染色时胶原纤维与心肌均为红色,胶原纤维染色则使胶原纤维呈红色,心肌纤维呈黄色.3.鉴别心肌纤维化与心内膜弹纤维增生症。
4.区别胶原纤维透明变性与淀粉样变性。
5。
对肿瘤方面提供诊断和诊断鉴别的依据。
胶原纤维染色结果:胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色.组织样品应为:4%多聚甲醛固定组织,石蜡切片.天狼猩红:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其它成分呈黄色.V。
G染色法:胶原纤维:鲜红色,肌纤维:黄色,红细胞:黄色。
细胞核:蓝黑或灰色。
Nagar-Olsen染色观察心肌缺氧早期改变,是早期心肌病变组织染色:显色结果:缺氧心肌红细胞呈现红色,正常心肌呈黄色或棕黄色,细胞核呈蓝色。
丽春红(Ponceau S)新法染色首先采用维多利亚蓝将细胞核染成绿色,再用Ponceau S 丽春红复合物将胶原纤维染成红色,肌肉成黄色。
实验流程一、实验试剂1。
Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml.将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用;2。
Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml;3。
0。
2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0。
2 ml,蒸馏水100 ml;4. 1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml;5。
苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml;6。
CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝小叶内卵圆细胞总体积与轮廓数密度变化的体视学分析
·肝纤维化及肝硬化·DOI:10.12449/JCH240113 CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝小叶内卵圆细胞总体积与轮廓数密度变化的体视学分析王川林1,刘全明2,杨霞2,杨正伟3,梅小平1,彭彬31 川北医学院附属医院感染科,四川南充 6370002 川北医学院临床医学系,四川南充 6370003 川北医学院基础医学与法医学研究所,四川南充 637000通信作者:彭彬,****************(ORCID: 0000-0002-6947-2570)摘要:目的 定量研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝小叶内卵圆细胞(HOC)总体积和轮廓数密度的变化。
方法 将11只雄性健康SD大鼠随机分为对照组(n=5)、肝纤维化组(n=6),每周2次皮下注射CCl4与橄榄油混悬液,每次3 mL/kg。
在肝纤维化造模5周后取材,从每只大鼠肝脏随机抽选5个大小约1 mm3的肝组织块分别制作1张Epon812环氧树脂包埋超薄切片,运用体视学方法结合透射电子显微镜技术,对大鼠肝小叶内的HOC总体积和轮廓数密度进行定量研究,另从每只大鼠剩余肝脏等距随机抽选4个2 mm厚的肝组织块并分别制作2张石蜡包埋的Masson染色切片,按照肝纤维化Metavir分期标准定性评估每只大鼠的肝纤维化程度。
计量资料两组间比较采用成组t检验。
结果 体视学定量研究显示,对照组肝小叶内HOC总体积为(15.40±7.63) mm3,肝纤维化组肝小叶内HOC总体积为(146.80±114.00) mm3,与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内HOC总体积显著增加了8.53倍(t=−2.551,P=0.031);对照组肝小叶内HOC轮廓数密度为(56.20±40.40),肝纤维化组肝小叶内HOC轮廓数密度为(566.50±317.00),与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内轮廓数密度显著增加了9.08倍(t=−3.539,P=0.006);定性观察研究结果显示,肝纤维化大鼠肝纤维化分期按照Metavir评分标准达到Ⅱ~Ⅲ期,大鼠窦周隙内肝星状细胞增生部位周围伴随着HOC的大量增生。
肝浊肿实验报告
肝浊肿实验报告实验名称:肝浊肿实验报告,实验类别:动物性实验报告;实验目的:观察大鼠肝脏浊肿病理变化。
二、材料与方法1.取体重40-45g 的雄性 Wistar- Barron 系大白鼠30只。
常规准备好后,从第4-6周龄开始,每天取血样各20 ul。
2.用3%戊巴比妥钠10-15毫升及酚红指示剂5滴混合成试剂作为对照组。
将每日分离血清制成涂片,进行观察。
对照组大鼠饮水量较正常增加25%,其他给药均同正常大鼠。
3.对照组大鼠喂以生理盐水(按0.05%浓度配制)100毫升,分别于第12-14天处死动物,记录肝浊肿程度,取血清20-50ul 于载玻片上,经吉姆萨染色镜检。
再将血清同生理盐水反复洗涤干净,以高压蒸气灭菌法消毒,置冰箱中保存备查。
4.实验组按常规准备并处理实验动物。
其余步骤和要求与对照组相同。
三、结果一、引言。
人体在不良因素影响下会发生某些病理改变,例如肝硬化等都是人体受到某种因素损伤而导致肝功能失调所产生的疾病,当然人体出现这种情况也有可能导致肝细胞坏死或者变性,那么我们就需要通过检测患者肝细胞是否有坏死,甚至是不是得了肝癌来判断身体状况。
这个时候我们做检测最先想到的肯定是肝炎标志物,包括乙型肝炎表面抗原( HBsAg),丙型肝炎抗体(抗HCV),甲型肝炎抗体(抗 HAV),丁型肝炎抗体(抗 HDV)等,它们在很多肝病病例中确实具有诊断意义。
但由于有些疾病自身的特殊性,使得单纯靠这些标志物去评估病情还是远远不够的,必须要借助其他辅助手段才能全面综合地判断患者的病情。
虽说有的疾病不一定要依赖于血液标志物,但我们医务工作者在遇见任何一种疾病时,首先应该提醒患者注意排除肝炎,接着向患者详细介绍本病的基本知识,以便尽快让患者熟悉本病,并鼓励患者积极治疗,争取早期康复。
肝细胞性黄疸是一种严重的疾病,可导致肝衰竭甚至危及生命,近年来随着科学技术的飞速发展,新的检测方法和研究思路层出不穷,但我认为仍无法代替临床检查。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色是一种常用的组织学染色技术,用于辅助诊断肝纤维化的过程中,在组织学病理学诊断中有重要的应用。
该方法可用于评估肝脏组织中纤维化程度,通过染色显色,判断不同形态的胶原纤维(纤维化组织)分布状况,并对其他疾病的组织学评估也有帮助。
Masson染色是常用的肝组织病理学评估技术之一。
该技术的基本原理是染色法通过使纤维化组织(如胶原纤维)染色,更容易地观察和评估其在肝脏中的分布和范围。
Masson
染色主要是将纤维化组织亲水性较大的胶原染色为蓝色,同时将细胞质和胆红素染为红色,使纤维化组织与正常组织区分出来。
0分:未见纤维化;
1分:轻微纤维化,分散分布胶原纤维;
2分:中度纤维化,纤维形成轻度增加,胶原纤维团块比较集中;
3分:严重纤维化,纤维形成明显增加,呈现普遍性分布,部分肝细胞尚可见;
4分:极严重纤维化,胶原纤维严重增加,几乎代替肝脏原有组织结构。
1. 对于炎症反应的评估:Masson染色是一种用于评估组织炎症反应的技术,纤维组
织的染色会帮助区分纤维组织和感染的情况。
2. 对于成纤维细胞的检测:Masson染色的另一种应用是检测在肝纤维化过程中的成
纤维细胞分布情况。
3. 对于肝癌的诊断: Masson染色可以确定肝细胞和其他成分的位置,通过比较正常组织和肿瘤组织,可帮助评估肝癌的细胞类型。
总的来说,Masson染色对评估肝纤维化具有重要的临床价值。
对于判断肝脏是否发生纤维化,有助于早期发现肝病变化。
Masson染色在诊断肝病的过程中具有重要的作用,
目前已经成为肝病组织学诊断标准化的必要技术之一。
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大鼠肝组织染Masson染色的体会
贾旭赵丽云任丽薇毛颖秋
北京中医药大学基础医学院病理教研室
显示多种纤维的Masson染色方法在病理诊断中被广泛应用,大鼠肝纤维化模型的肝脏组织经过Masson染色以后,胶原纤维弹性纤维能够地被染成绿色和红色交织在一起,,为病理诊断提供了依据。
我们体会染色第一步用苦味酸乙醇液浸泡切片一个小时,并且延长磷钼酸的分化时间,可以使各种纤维色彩更为鲜艳,达到比较好的染色效果。
大鼠肝组织染Masson染色的体会
作者:贾旭, 赵丽云, 任丽薇, 毛颖秋
作者单位:北京中医药大学基础医学院病理教研室
引用本文格式:贾旭.赵丽云.任丽薇.毛颖秋大鼠肝组织染Masson染色的体会[会议论文] 2013。