微生物传感器20111134010025
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微生物传感器的研发与应用
摘要:本文介绍了微生物传感器的结构组成,工作原理及分类,总结了该传感器在发酵工业、生物工程、医学等领域的应用,并对其今后的发展进行了展望。
关键词:微生物传感器;结构;原理;应用;
1.前言
生物传感器是一门集微电子学、生物技术等学科为一体的高新技术。由分
子识别元件和与之结合的信号转换器件两部分组成的分析工具。前者可以是生
物体成分(酶、抗原等)或生物体本身(细胞、细胞器、组织),它们能特异
地识别各种被测物质并与之反应;后者主要有电化学电极、离子敏场效应晶体
管(ISFET )、热敏电阻器等,其功能为将敏感元件感知的生物化学信号转变
为可测量的电信号。
2.微生物传感器:
微生物传感器是生物传感器的一个重要分支。1975年Divies制成了第一
支微生物传感器,由此开辟了生物传感器发展的又一新领域。
在不损坏微生物机能情况下,将微生物固定在载体上制作出微生物传感器,达到对被分析物进行检测的目的。
3.微生物传感器的组成和原理:
3.1固定化微生物:微生物利用被检测物质进行呼吸或代谢,在此过程中,
消耗溶液中的溶解氧或产生一些电活性物质。
3.2换能器:燃料电池、光敏二极管、离子敏场效应管、气体敏感膜电极等
物质检测溶解氧和电活性物质的变化。
3.3信号输出装置:信号输出。
4.微生物传感器的分类:
根据微生物作用的生理特点分为:
1.呼吸活性测定性微生物传感器:由固定化需氧性细菌膜和氧电极组合而成。
它是以细菌呼吸活性物质为基础测定被测物的。试液中的有机物受到细菌细胞的同化作用,细菌细胞呼吸加强,扩散到电极表面上氧的量减少,电流减小。当有机物由试液向细菌膜扩散速度达到恒定时,产生一个恒定电流,此电流与试液中的有机物浓度存在定量关系,据此可测定有关有机物。
2.代谢活性型微生物传感器:固定化的厌氧菌膜和相应的电化学传感元件组合
而成。它是以细菌代谢活性物质为基础测定被测物的。此类细菌摄取有机物产生各种代谢产物,若代谢产物是氢、甲酸或各种还原型辅酶等,则可用电流法测定;若代谢产物是二氧化碳、有机酸(氢离子)等,则可用电位法测定。根据测定的电流或电位便可得到有机物浓度的信息。
5.微生物传感器的优势:
微生物传感器的稳定性较好,使用寿命也较长且价廉。微生物细胞中的酶因为仍处于它的自然环境中,这就增加了稳定性和活性,还免除了花费昂贵的酶纯化和辅助因素再生的步骤。另外,传感器的生物学成分可通过浸入生长基使之再生。因而有可能长时间地保持其生物催化活性,延长传感器的有效使用期限。微生物传感器的应用范围十分广泛。现已应用于发酵工业、环境监测、临床医学、食品检验等领域。
6.微生物传感器在发展中面临的问题:
一是多酶体系的存在,有可能对复杂样品产生非特异性响应。二是维持细胞活性是一个精细的过程。然而常常由于缺乏足够的经验而导致细胞过旱的死亡。微生物传感器的工作寿命因而受到影响。三是以全细胞为敏感元件的微生物电极,测定受到多种因素的影响,如细胞的通透性、酶的诱导活性、细胞内相关酶的活性状态等,因而微生物电极测定的精度和重复性一般比酶电极的要差。四是微生物固定化方法也需要进一步完善。首先,要尽可能保证细胞的活性;其次,细胞与基础膜结合要牢固,以避免细胞的流失;另外,微生物膜的长期保存问题也有待进一步的改进,否则难以实现大规模的商品化。五是生物
响应稳定性和微型化便携式等问题。仪器小型化将降低样品体积、试剂消耗和
生产费用。
7.微生物传感器的应用:
在发酵工业领域,微生物传感器已应用于原材料、代谢产物的测定。应用
微生物传感器可不受发酵过程中常存在的干扰物质的干扰,并且不受发酵液混
浊程度的限制。
在医学领域里,我国许春向等人首次运用半微分循环伏安法进行了人白血
病白细胞和健康人白细胞的识别工作,取得了令人满意的结果。着眼于致癌物
质对遗传因子的变异诱发性,人们利用微生物传感器对致癌物质进行一次性筛选。在临床检验中,利用变形杆菌制成了尿素传感器和用于测定血中肌酸肝含
量的微生物传感器。
在生物工程领域,微生物传感器已用于酶活性的测定。微生物传感器还能
用于测定微生物的呼吸活性,在微生物的简单鉴定、生物降解物的确定、微生
物的保存方法的选择等方面也有应用。
微生物传感器还用于测试物质的生物毒性,微生物传感器法适用于天然微
生物,快速简便,有很好的灵敏性和可靠性。并且,细菌本身没有危害性。
环境监测领域是微生物传感器应用最广泛的领域,其典型代表是BOD 传感器。它可以测定水中生化需氧量,改变了传统测定时间5天为15min。另外,
微生物遇到有害离子CN-,Ag+,Cu2+ 等会产生中毒效应,可利用这一性质,
实现对废水中有毒物质的评价。微生物传感器还可应用于测定多种污染物:
NOx 气体传感器用于监测大气中氮氧化物的污染;硫化物微生物传感器用于测
定煤气管道中含硫化合物;酚微生物传感器能够快速并准确地测定焦化、炼油、化工等企业废水中的酚。
8.结语与展望:
微生物传感器成本低、操作简便、设备简单,因此在市场上的前景是十分
巨大和诱人的,测定对象中的毒害因素如重金属和有毒有机物是影响微生物传
感器稳定响应和寿命的关键因素,也是微生物传感器市场化的主要控制因素。
开发新的固定化技术、利用微生物育种、基因工程和细胞融合技术研制出新型、高效耐毒性的微生物传感器是该领域科研人员面临的课题。
相信微生物传感器作为一个具有发展潜力的研究方向。定会随着生物技术、材料科学、微电子技术等的发展取得更大的进步,并逐步趋向微型化、集成化、智能化。
参考文献:
[1]. 郏建波, 董绍俊.生化需氧量微生物传感器的研究进展. 分析化学评述与进展. 2003. 31(6): 742- 748
[2]. 谢佳胤, 李捍东, 王平, 李霁. 微生物传感器的应用研究. 现代农业科技. 2010. 6