HPLC法测定银杏叶缓释微丸胶囊中槲皮素的含量

HPLC法测定银杏叶缓释微丸胶囊中槲皮素的含量

发表时间：2013-03-20T16:30:42.200Z 来源：《医药前沿》2013年第2期供稿作者：吴杏梅

[导读] 取处方比例辅料，按银杏叶缓释微丸胶囊制备工艺制得空白胶囊，再按“2.3”项下制备方法制得空白供试品溶液

吴杏梅(佛山市第一人民医院广东佛山 528000)

【摘要】目的：建立高效液相色谱（HPLC）法测定银杏叶缓释微丸胶囊中槲皮素的含量。方法:采用C18为色谱柱，以甲醇－0.4%磷酸溶液（45：55）为流动相，检测波长为360nm，流速为1mL/min，柱温为30℃，进样量是10μl。结果: 槲皮素在0.1505～0.9030μg（r＝

0.9999）浓度范围内有良好的线性关系，平均回收率为99.86％，RSD=0.4％。结论: HPLC法简便、准确、专属性强，可用于该制剂的质量控制。

【关键词】银杏叶缓释微丸胶囊槲皮素高效液相色谱法含量测定

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2013）02-0277-02 银杏叶为银杏科植物银杏树的干燥叶，从银杏叶中分离出大量的极性和非极性化合物，主要包括黄酮（双黄酮6种，黄酮苷元7种，黄酮苷17种，桂皮酰衍生物5种）、萜类（银杏内酯A，B，C，J及白果内酯）、烷基酚和烷基酚酸类化合物[1]。性味甘苦涩平，功效为益心敛肺、化湿止泻、主治胸闷心痛、心悸怔忡、痰喘咳嗽、泻痢、白带。银杏叶提取物在临床上主要应用于治疗冠心病、心绞痛、高血压、高血脂症及脑出血痉挛等症，防治中风、心肌梗塞、老年脑血管病、痴呆、大脑脑外伤后遗症、大脑紊乱等[2]。目前开发的银杏叶制剂有片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、口服液、滴剂、软膏、气雾剂、霜剂等多种剂型，也有银杏叶缓释片和缓释胶囊。国内生产的银杏叶制剂多为普通片剂和胶囊等，存在服用次数多、生物利用度低等问题，因此有必要进一步研制开发缓释制剂，满足预防和治疗心脑血管疾病的用药需要。本项目制备了银杏叶缓释微丸，为更好地控制本品质量，本文采用HPLC法测定槲皮素的含量，报道如下。

1 仪器与试药

Waters2695－2996型高效液相色谱仪（美国Waters公司）。

槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号：100081-200406）；银杏叶缓释微丸胶囊（自制，规格：含总黄酮醇苷2mg/g，批号：100503）；甲醇、乙腈（色谱纯，美国迪马公司）；磷酸等其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适应性试验

色谱柱：KromasilC18（250mm×4.6mm,5μm）；流动相：甲醇－0.4%的磷酸溶液=45：55；流速：1 ml/min；检测波长：360nm；柱温：30℃；进样量：10μl。在此条件下，供试品中槲皮素峰能达到基线分离，理论板数按槲皮素峰计应不低于2500，色谱图见图1、图2、图3。

图3 空白样品高效液相色谱图

2.2 对照品溶液的制备

精密称取槲皮素对照品适量置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，再精密量取20ml对照品溶液置200ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度得到槲皮素的浓度分别是30.1μg/ml的对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取银杏叶缓释微丸胶囊10粒，研细，精密称取适量（约相当于银杏叶提取物80mg），置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液。

2.4 空白供试液的制备

取处方比例辅料，按银杏叶缓释微丸胶囊制备工艺制得空白胶囊，再按“2.3”项下制备方法制得空白供试品溶液。

2.5 辅料干扰试验

取上述溶液，照“2.1”项下色谱条件，分别注入液相色谱仪，结果表明供试品色谱在与对照品色谱相应保留时间位置上，有三个相同的色谱峰，而空白供试液在此保留时间内不出峰，表明此法专属性强。

表1