精浆中性α-葡萄糖糖苷酶定量测定操作卡

α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)使用说明

α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)使用说明货号：G8820规格：1g/5g级别：BR其他名称：α-D-葡萄糖苷酶;α-葡糖苷酶CAS号：9001-42-7提取来源：黑曲霉产品简介：α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase，EC 3.2.1.20）又被称为α-葡萄糖苷水解酶或葡萄糖基转移酶（GTase），是一种α-D-葡萄糖苷酶。

它可以从低聚糖类底物的非还原末端切开α-1,4-糖苷键释放出葡萄糖，或将游离的葡萄糖残基转移到另一糖类底物形成α-1,6-糖苷键，从而得到非发酵性的低聚糖。

α-葡萄糖苷酶来源广泛，在人体糖原的降解和动植物、微生物的糖类代谢方面具有重要的生理功能。

α-葡萄糖苷酶广泛应用于食品和发酵工业、化学工业以及医学应用等行业。

酶活定义：每小时产生1μg葡萄糖所需的酶量定义为一个α-葡萄糖苷酶活力单位。

酶活检测方法：参见QB2525-2001。

产品特性：酶活力：300000U/g最适作用温度：50℃，合适的作用温度：50-55℃。

最适作用pH：5.0，合适的作用pH：4.8-5.4。

外观：淡白色粉末或淡黄色液体，分子量约为68.5KD，无臭无味，溶于水，不溶于乙醚和乙醇。

用途：生化研究。

能水解葡萄糖苷(Glucoside)成葡萄糖和其他组成物质，是一种具有生物催化剂功能的蛋白质。

本产品的建议添加量为800U/g干物质，根据实际情况改变添加量。

抑制剂：铜、钛、钴等金属离子对本品有一定的影响。

铅、铝、锌等金属离子对本品有较强的抑制作用。

贮存：建议密封储藏于干燥、低温的环境中（≤25℃），最好在冷藏条件下（4-8℃）储藏。

25℃以下，液体可以储存3个月，保质期内酶活不会降低于产品标示的活力；4℃以下，可较长时间储存。

精浆中性α-葡萄糖苷酶定量试剂盒

精浆中性α-葡萄糖苷酶定量检测试剂盒简介：精浆中含有源于附睾的中性α-葡萄糖苷酶同工酶和前列腺分泌的酸性同工酶，后者能够被选择性抑制，因此测定中性α-葡萄糖苷酶可反映附睾的功能。

Leagene 精浆柠檬酸定量检测试剂盒测定原理是硝基苯酚吡喃葡萄糖苷(PNPG)在α-葡萄糖苷酶的作用下分解成p-硝基苯酚(PNP)，p-硝基苯酚通过96孔板测定仪或分光光度计测定吸光值，同时做PNP 标准曲线，通过标准曲线来计算精液中PNP 的具体含量，经过换算获得中性α-葡萄糖苷酶的活性。

Leagene 精浆柠檬酸定量检测试剂盒是根据Cooper 法改良而来，在合适浓度范围内有较好的线性关系。

用分光光度计测定吸光值，若采用比色杯时，应按照比例调节精液和试剂的量。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 1.5ml 离心管2、正向置换型加样器3、水浴锅或恒温箱4、 96孔板5、酶标仪或分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、制备标准曲线：用PNP Developer 稀释PNP 标准(5mM)。

取离心管加入PNP 标准(5mM)和PNP Developer 混合，即获得浓度为200μM 的PNP 标准；取离心管，分编号名称TC0104 50T Storage试剂(A): PNP Developer 100ml 4℃ 试剂(B): α-Gul Inhibitor 1ml -20℃ 试剂(C): PNPG powder 5支 4℃ 避光试剂(D): PNPG buffer50ml RT 试剂(E): PNPG Stopping buffer 50ml RT 试剂(F): PNP 标准(5mM) 2×1ml-20℃ 避光使用说明书1份别加入480μl、360μl、240μl 、120μl 的PNP标准(200μM)并依次加入120μl、240μl、360μl 、480μlPNP Developer并混匀，即获得浓度为160μM、120μM、80μM、40μM的PNP标准。

精浆的生化检验技术(三修)

32
标本1实际浓度
结果报告
标本最终检测结果以“精浆中性α- 葡糖苷酶
总活性”方式报告，即总活性=标本浓度
(U/L)×一次射精的精液体积 (ml)=mU/ 一次射精
正常参考值
≥20 mU /一次射精（WHO）
33
试验中注意事项
• 严格控制禁欲时间和样本离心速度 • 操作时加样要准确，混匀充分
ENTER NUMBER OF STANDARD REPLICATES: 01
CONCN. OF STD1: 0
CONCN. OF STD2: 4.46
CONCN. OF STD3: 8.92 CONCN. OF STD4: 17.84
CONCN. OF STD5: 35.68
按“平滑曲线”方式拟合标准曲线
空白孔单孔，所有检测孔吸光度均为之相减。
30
各检测孔在微孔板上的位置排列方式如下：
1 A B C 2 B S1 S2 3 R1 R1B R2 R5 R5B R6 4 …… …… …… ……
D
E F G H
S3
S4 S5 Q QB
R2B
R3 R3B R4 R4B
R6B
R7 R7B R8 R8B
……
…… …… …… ……
Centrifugation at 2 000 r/min for 10 minutes Centrifugation at 3 500 r/min for 15 minutes
25
20 15
10
5 0 1 5 9 例数
39
49
13
17
21
25
29
33
37
41
45
•

α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase, α-GC)试剂盒说明书

货号：QS2612 规格：50管/24样α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase,α-GC）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。

测定原理：α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

，第1页，共2页测定管需设一个对照管。

α-GC活力计算：标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027；x为标准品浓度（nmol/mL），y为吸光值。

人α葡萄糖苷酶α-glucosidase试剂盒使用方法

人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）试剂盒使用方法检测范围：96T7 U/L -200 U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）水平。

用纯化的人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α葡萄糖苷酶（α-glucosidase），再与HRP标记的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）浓度。

试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

人α葡萄糖苷酶αglucosidase试剂盒使用方法

人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）试剂盒使用方法检测范围：96T7 U/L -200 U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）水平。

用纯化的人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α葡萄糖苷酶（α-glucosidase），再与HRP标记的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α葡萄糖苷酶（α-glucosidase）浓度。

1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（400 U/L）×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

200 U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液100 U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液50 U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液25 U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定方法

溶液配制底物(pNPG)溶液：pH 值6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲液配制成浓度为5 mmol/L (1.505mg/ml)反应终止液：0.2 mol/L Na2CO3称取2.16g Na2CO3于烧杯中，加入适量蒸馏水溶解，并定容到100mL，4℃下保存，备用。

阳性对照药品阿卡波糖溶液:精密称取阿波卡糖样品，以磷酸缓冲液为溶剂溶解，配成10 mg/ml的浓度。

配制DNJ标准溶液（抑制剂）：精确称取0.0010g DNJ 标准品，用容量瓶准确定容到10mL，配制成1000μg/mL DNJ标准母液。

将母液分别稀释成、1、5、10、20、40、60μg/mL六个不同梯度的标准品溶液，备用。

α-葡萄糖苷酶的酶溶液：用磷酸缓冲液配制成0.26 U/ml α-葡萄糖苷酶的酶溶液。

OR 0.2 U/ml?配制α-葡萄糖苷酶的酶溶液：将冻干酶粉（酶活力为14u/mg）用0.01mol/L磷酸缓冲液（pH为6.8）溶解，配制成2u/mL的母液。

再将酶液分别稀释，配制成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0u/mL的酶溶液，备用。

样品组（药物种类*浓度组数*3）样品空白组（药物种类*浓度组数）对照组空白组50 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG阳性对照组 60 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG50 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG 70 μl 磷酸缓冲液 +20 μl PNPG80 μl 磷酸缓冲液 +20 μl PNPG振荡使充分混匀 37 ℃水浴10 min+100 μl 酶溶液振荡使充分混匀 37 ℃水浴20 min+ 150 μl 0.2 mol/L Na 2CO 3在酶标仪405nm 处测定吸光度+100 μl 酶溶液 +100 μl 酶溶液。

WHO人类精液检查与处理实验手册

正主段应是直的，均一的，比中段细，其主段应是直的，均一的，比中段细，非
常长约45um。
卷曲的，其长约为45um。
标准
异主段缺陷包括：短、多尾、发卡形、断主段缺陷包括：短、多尾、发卡形、断
常裂
裂
标主段急剧弯曲、主段宽度不规则、主段主段弯曲（>90度）、主段宽度不规则、
准卷曲以及上述缺陷的任何组合
生育力评估
评估男性生育三大要点：
女方妊娠妊娠时相精液参数
其他男性病诊断
精子的总数：睾丸生殖功能输精管道的通畅程度
血精、脓精：附性腺疾病精浆生化：附性腺功能
治疗策略制定（常规治疗及辅助生殖）
少精子症的分类和ART治疗方案
精子浓度
治疗
轻度少精子症 ≧10，<20(15) ×106/ml
主段卷曲以及上述缺陷的任何组合
精子胞浆小滴判断标准
胞浆小滴体积大于精子头部的1/3
胞浆小滴体积大于精子头部的1/3
WHO第四版与第五版精子形态学评估标准比较研究
研究目的：比较WHO第四版与第五版精子形态学评估标准的变化。研究对象： 1000个精子图片，一张精子形态质控版研究方法： 1.用WHO第四版的评估标准，对上述精子进行评估 2.精子库9名工作人员学习第五版精子形态学评估标准及精子图谱，并进行室内质量控
因此，有必要建立或选用特殊实验对精子功能进行测定。
精子存活率精子形态分析精子顶体完整性精子与透明带结合试验精子细胞核成熟度与DHA损伤检测精子表面结合抗体检测附睾功能检测
精子形态学评估标准
在评估精子正常形态时应采用严格标准（Krugeret al.,1986;Menkveld et al.,1990;Coetzee al.,1998)

精浆中性

试剂准备和储存要求
糖苷酶抑制剂冻干粉以120μl蒸馏水溶解， 2-8℃可使用20天，分装保存-20 ℃一下可长期使用（切勿反复冻融）底物冻干粉以2.2ml底物溶解液充分溶解，分装保存，溶解后的底物液，2-8 ℃保存可使用5天，-20 ℃以下可保存数月（切勿反复冻融）经验：底物一定要临用现配（37 ℃ 预温5 分钟的时候溶解），决不能2-8 ℃保存。
操作方法
每个待检标本均需同时设定测定和对照管, 标准管仅在比色时使用
质控测定质控对照标本标本测定对照
酸性抑制剂 ul 蒸馏水 ul 质控液 ul 样本 ul 糖苷酶抑制剂ul 5 10 5 10 5
10
10
5
5 5
上述样品管混匀后置37℃预温5分钟,同时底物溶解后预温5分钟同时加入底物100ul,37 ℃准确反应25分钟加入终止液1000ul 在微孔板上加样顺序如下,每孔加入样本或标准品各250ul,酶标仪450nm比色关键步骤:精确的温度和孵育时间
检验原理
酸性条件下，通过对精浆酸性α -葡糖苷酶的抑制，保留中性α -葡糖苷酶活性，后者分解底物生成终产物对硝基芬，对硝基芬在405nm波长有最大吸收波长，颜色深浅与单位时间内精浆中性α -葡糖苷酶成正比。
样本要求
记录受检者一次射精的精液总量（ml），精液液化后以3000g离心10分钟，保留精浆。若样本不能立即测定，可以Eppendorf 管分装精浆，-20℃一下保存待检。
精浆中性 α -糖苷酶定量检测
临床意义
中性α -葡糖苷酶是附睾分泌功能的指标。结合激素和睾丸其他指标，对远端输精管阻塞有较好的诊断价值。果糖结合中性α 葡糖苷酶检测，可大大提高其无创性诊断阻塞性无精子症的价值。

人精浆中性a-葡糖苷酶酶联免疫分析

人精浆中性a－葡糖苷酶酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T20 U/L -480 U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中精浆中性a－葡糖苷酶含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人精浆中性a－葡糖苷酶水平。

用纯化的人精浆中性a－葡糖苷酶抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入精浆中性a－葡糖苷酶，再与HRP标记的精浆中性a－葡糖苷酶抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的精浆中性a－葡糖苷酶呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人精浆中性a－葡糖苷酶浓度。

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

葡萄糖苷酶测定的标准操作程序

葡萄糖苷酶（NAG）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清和尿液中NAG活性浓度。

【适用仪器】Olympus AU-27全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】NAG催化PNP - NAG水解，生成产物对硝基苯酚（PNP）,经一定时间后终止反应，并使PNP显色，在规定波长下检测PNP引起的吸光度高值，推算样品中的NAG活性。

在尿NAG测定的同时，测定尿肌酐（Cr ）浓度，计算出NAG活性（U/L）与Cr浓度（mmol/L ）的比值，借以消除尿液浓缩和稀释浓度对结果的影响。

【试剂】1.成份：低物液每升内含：对硝基苯-0-D氨基葡萄糖苷9.8克、18 -冠5醚50ml、叠氮钠1克；缓冲液每升内含：PH4.6柠檬酸-柠檬酸三钠1mmol/L、叠氮钠1克；终止液每升内含：氢氧化钠4.0克。

2.校准品：Electrollyte CAL 1、Electrollyte CAL 2.3.质控品：Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3.【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l）,不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。

血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。

2.尿液标本定时或随机尿标本，不可加防腐剂，根据实验室标准采集程序采集标本，室温保存24小时，冷藏7天，冷冻保存6个月。

尿钠高于线性可用双蒸水对倍稀释。

【操作步骤】1. 仪器测定参数设置2. 试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8C ）。

3. 校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。

精浆中性α—葡糖苷酶定量检测试剂盒(酶法)产品技术要求华康

精浆中性α-葡糖苷酶定量检测试剂盒（酶法）2.性能指标2.1外观性状a）试剂盒标签应印制清晰、无错误；包装应清洁干净、无泄漏液体；组份组装应正确无误；b）酸性抑制剂室温下应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；c）糖苷酶抑制剂（冻干粉）复溶后应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；d）底物（冻干粉）复溶后应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；e）终止液应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；f）校准品 1 应为无色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；g）校准品 2 应为浅淡黄色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；h）校准品 3 应为淡黄色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；i）校准品 4 应为黄色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；j）校准品 5 应为深黄色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体；k）质控液应为无色悬浮物；l）空白微孔板应清洁，孔底平整，无灰尘杂质。

2.2装量试剂盒液体组份平均装量不小于组份标签标示装量。

2.3校准品空白吸光度值（405nm）符合下表1要求。

表1 校准品吸光度值要求2.4精密度a)试剂盒重复性CV%≤10%。

b)试剂盒批间相对偏差R≤15%。

2.5准确度a)参考物质测试值相对偏差R不超过±15%。

b)质控液检测结果在靶值范围内。

2.6特异性干扰试验干扰率不超过±10%。

2.7线性范围a)在线性范围0～35.68U/L内,回归系数r≥0.990。

b)线性偏差X1～X3不超过±10%,X4、X5不超过±20%。

2.8最低检出限不高于1.12U/L。

2.9空白吸光度不高于0.100。

2.10分析灵敏度介于0.450 OD～0.850 OD/（10U/L）单位浓度。

2.11批内瓶间差a)试剂盒组份底物（冻干粉）批内瓶间差的变异系数CV%≤10%。

b)试剂盒组份糖苷酶抑制剂（冻干粉）批内瓶间差的变异系数CV%≤10%。

改良精浆中性α—糖苷酶测定法的效果观察

改良精浆中性α—糖苷酶测定法的效果观察谷翊群【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】1992(000)002【摘要】采用常规及改良的中性 a-糖苷酶测定法对37例正常男性精浆中性 a-糖苷酶总活力进行了测定,数值分别为28.38～116.68 m U/每次射精(()±1.96s,下同)及15.54～84.81 m U/每次射精。

两种方法所测出的中性 a-糖苷酶总活力有显著相关性。

改良的方法为临床提供了正常参考值的下限。

使用同样两种方法测定了48例输精管结扎术后精子已消失男性精浆中性 a-糖苷酶总活力。

常规方法测定,48例全部可测出酶活力,数值为2.57～37.38mU/每次射精,而改良方法测定,其中32例酶活性消失,16例可测出酶的活性,上限为5.85 m U/每次射精。

【总页数】1页(P89)【作者】谷翊群【作者单位】国家计划生育委员会科学技术研究所;国家计划生育委员会科学技术研究所【正文语种】中文【中图分类】R698.204【相关文献】1.丹红通精方合针挑疗法对慢性附睾炎不育症精液质量、精浆中性α-葡糖苷酶的影响 [J], 袁少英;卢玉忠;覃湛;王伟光;张兆磊;李慎果2.男性不育患者精子形态与精中性α-葡糖苷酶和精浆弹性硬蛋白酶关系的研究 [J], 邴晏如;莫和国;黄健云;李璐琳;欧水连;黎泳仪;陆小琴;蔡锦梅3.手术结合聚精汤治疗精索静脉曲张不育合并精浆中性α-糖苷酶异常60例临床观察 [J], 杨文涛;余文龙;李群生;周磊;赵自垒;周能飞4.无精子症患者精浆中性α-1,4糖苷酶测定的临床价值 [J], 罗英5.少弱精子症患者精浆中性α-葡糖苷酶水平对精液质量的影响 [J], 冯玲;冼英杰;周秀琴;颜秋霞;乔静;陈润强;陈彩蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

无精子症患者精浆中性α-1, 4糖苷酶测定的临床价值

无精子症患者精浆中性α-1, 4糖苷酶测定的临床价值无精子症是一种男性不孕症状，主要特征是精液中没有精子，亦或者精子数量明显减少。

据统计，无精子症约占男性不育症的10-15%，是造成夫妻不孕的一个主要原因。

对于无精子症患者来说，要想治愈病症让其获得生育能力，首先必须找到其发病原因。

此时精液中的一些生化指标测定就显得尤为重要，比如α-1, 4糖苷酶的检测就被证明对于无精子症的诊断和治疗具有临床价值。

α-1, 4糖苷酶是一种酶类蛋白，对于碳水化合物的降解和合成具有重要的作用。

在男性疾病中，精子的产生和成熟受到α-1, 4糖苷酶调控的影响。

一些研究表明，无精子症患者的精浆中α-1, 4糖苷酶活力明显低于正常人，因此可以通过检测精浆中α-1, 4糖苷酶的活性来评估患者的生育能力和诊断无精子症。

对于无精子症患者而言，精液中α-1, 4糖苷酶的测定具有重要的临床意义。

精浆中α-1, 4糖苷酶的测定可以帮助医生进行无精子症的诊断。

传统的无精子症诊断主要依靠精液分析以及生殖系统的影像学检查，但这些方法对于部分病因不明的患者并不敏感或特异。

而α-1, 4糖苷酶的测定能够提供一个新的诊断指标，通过测定精浆中α-1, 4糖苷酶的活性，可以更准确地判断患者是否患有无精子症，有助于提高无精子症的诊断准确性。

精浆中α-1, 4糖苷酶的测定对于无精子症的治疗也具有一定的指导作用。

了解患者的生育能力可以帮助医生更好地选择治疗方案，对于那些生育能力较差的患者，可以更快地采取相应的治疗措施，提高治疗的效果。

针对α-1, 4糖苷酶活性低的患者，可以通过一些措施来提高其α-1, 4糖苷酶的活性，从而改善生育能力，使其具备生育的可能性。

精浆中α-1, 4糖苷酶的测定对无精子症的诊断、治疗和生育能力评估具有重要的临床价值。

随着对无精子症发病机制的深入研究，相信精浆中α-1, 4糖苷酶的测定会在未来无精子症的临床应用中发挥更加重要的作用，为患者提供更好的诊疗服务。

精浆的生化检验技术三修

酶标仪低速自动平衡离心机微量水平振荡器水浴箱（37℃）精密移液器（加样枪）
0.5~20ul、50~200ul、100~500ul、 200~1000ul 石英定时钟
实验操作方法试剂准备
糖苷酶抑制剂冻干粉以120μl蒸馏水溶解，4℃可使用20天，分装保存-20℃可长期使用（切勿反复冻融）
精浆柠檬酸定量测定
二、精浆中性α-葡萄糖甘酶测定（酶法）
检测目的
主要是附睾分泌功能的指标，较左旋肉毒碱和甘油磷酸胆碱对附睾更敏感、更特异先天性副睾发育不良明显降低、急慢性副睾炎降低正常见于单纯输精管阻塞无精症
原理
α-葡糖
P-硝基酚吡喃葡糖苷（底物）苷酶对硝基
加酸
酚（产物） Na2CO3 淡黄色物质，在405nm
男性生殖腺分泌功能
睾丸:精子、雄性激素、转铁蛋白、附睾 : 中性α-葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸
胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关精囊腺: 分泌果糖、前列腺素等，呈碱性前列腺: 分泌酸性磷酸酶、柠檬酸、谷氨酸转
肽酶、PSA、锌、镁等，其分泌物呈酸性
精液的组成和来源
OF STD1: 0 精液是由精子和精浆组成的混合物
检测前，将待检精浆标本用样本稀释液1:4稀释，充分混匀
五、精浆酸性磷酸酶的检测
精浆果糖检测标准化和管理
精液经2 000 r/min离心在10 mi精n后，浆84. 中约30%来自前列腺，60%来自精囊
腺，5-10%来自于附睾及尿道球腺
正常精浆应具备
外观和粘稠度都正常
精浆各项生化指标正常精液WBC＜ 1×106/ml 细菌培养阴性或细菌计数＜1000/ml
波长有最大吸收峰
加酸是抑制酸性α-葡萄糖甘酶，保护中性α-