药用植物刺五加染色体核型分析

6 Arano H..Cytological studies in subfamily carduoideae (compositae) of Japan.IX.Bot Mag,1963,76:32.
7 李懋学，张学方． 植物染色体研究技术．北京：科技出版社， 1991：38 —60.
8 李懋学，张赞平．作物染色体及其研究技术．北京：中国农业 出 版 社 ，1996:59 — 69.
*通讯作者
2.1 染 色 体 数 目 选 择 30 个 染 色 体 形 态 清 晰 ， 分 散 良 好 的 中 期 细 胞 观 察 计 数 ，90％ 以 上 的 细 胞 具 有 相 同 染 色 体 数 目 为 48 条 ，因 此 确 定 刺 五 加 细 胞 的 染 色 体 数 目 为 2n＝48。 见 图 1。
根 据 Kuo 等 ［4］ 染 色 体 分 类 标 准 ， 可 将 刺 五 加 的 24 对 染 色 体 分 成 4 组 ，第 1～2 对 为 L 组 ，第 3～ 13 对 为 M2 组 ， 第 14～20 对 为 M1 组 ， 第 21～24 对 为 S 组 ， 染 色 体 相 对 长 度 组 成 为 2n=4 L+22 M2+ 14 M1+8 S。 刺 五 加 的 染 色 体 参 数 、核 型 及 核 型 模 式图分别见下表，图 2，图 3。
1） 刺 五 加 染 色 体 平 均 长 度 为 0.64 μm， 属 于 小 型 染 色 体 类 型 ［7，8］。 刺 五 加 的 核 型 中 有 4 对 近 端 部着丝粒染色体，5 对端部着丝粒染色体，且核型 不 对 称 系 数 为 74.23% ， 不 对 称 程 度 较 高 ， 是 比 较 进化的核型类型。
1.23 M2 1.16 M2 1.15 M2 1.14 M2 1.12 M2 1.11 M2 1.10 M2 1.06 M2 1.05 M2 1.02 M2 1.01 M2 1.00 M1 0.90 M1 0.89 M1 0.89 M1 0.86 M1 0.84 M1 0.82 M1 0.73 S
（E-mail:wangmyan66@ ）
2）本试验研究表明：刺五加的核型公式为 K （2n） =48 =12 m +18 sm (SAT) +8 st +10 t； 与 崔 秋 报 道 ［9］的 人 参 核 型 公 式 为 K （2n） =48=24 m +16 sm + 8 st 略 有 不 同 ， 有 1 对 随 体 ；Nakata 报 道 ［10］Panax japo－nicus(Araliaceae)染 色 体 数 目 为 48 条 ，其 中 20 条 中 部 着 丝 粒 染 色 体 ，28 条 为 近 中 部 或 近 端 部 着 丝粒染色体的相比较，染色体数目相同，但核型不 同， 这是表明三者之间具有相近种亲缘关系的重 要依据。在对中草药进行研究的同时，对每种药用 植物的核型进行系统的研究， 在中草药的生药鉴 定、良种培育及驯化等方面都具有重要的意义。
关键词 刺五加 染色体 核型分析 中 国 图 书 分 类 号 ：Q31 文 献 标 识 码 ：B
刺 五 加 （Eleutherococcus senticosus） 是 五 加 科 五加属的一种落叶灌木，是传统的药用植物。 主要 分布在我国东北、 华北等地。 该植物具有益气健 脾、补肾安神等功效，主要用于脾肾阳虚、体虚乏 力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多梦等病症，具有一 定的开发价值。 近年来利用植物组织，细胞培养快 速繁殖刺五加和生产其药用成分的研究成为热点 ［1］，对 该 属 植 物 的 染 色 体 核 型 研 究 尚 未 见 到 报 道 。 本实验是首次对刺五加染色体核型进行分析研 究，为该植物的鉴定、起源、演化、良种培育及进一 步的分子生物学研究等提供必要的细胞学资料。 1 材料与方法 1.1 实验材料 刺五加种子（购自吉林省通化市 梅河口绿丰特产协会）。 1.2 实 验 方 法 以 刺 五 加 幼 苗 根 尖 为 试 验 材 料 ， 制备刺五加根尖压片［2］。 将发芽 7 d 9∶30~10∶30 时 间段的刺五加根尖用 0.1%的秋水仙素处理 2.5～ 3 h，蒸 馏 水 冲 洗 后 卡 诺 固 定 液 固 定 2～24 h， 室 温 下 用 1 mol/L 的 HCl 解 离 15 min、 改 良 石 炭 酸 品 红 溶 液 染 色 10 min， 冰 冻 法 揭 片 ， 干 燥 后 用 加 拿 大树胶封片。选取染色体形态清晰、分散良好的中 期 细 胞 图 像 进 行 显 微 摄 影 及 核 型 分 析 ［2］。 染 色 体 核 型 分 析 采 用 Levan 等 ［3］以 染 色 体 臂 比 来 确 定 着 丝 点 位 置 ， 和 Kuo 等 ［4］以 染 色 体 相 对 长 度 系 数 将 染色体分成 4 组的染色体分类标准。 核型类型采 用 Stebbin （1971） 标 准 ［5］； 核 型 不 对 称 系 数 （As.k.c%=长 臂 总 长/全 组 染 色 体 总 长 ） 按 Arano ［6］ (1963)的 方 法 。 2 结果与讨论
图 1 刺 五 加 细 胞 分 裂 中 期 （ 示 染 色 体 2n＝48 ）
2.2 染色体相对长度组成及核型分析 对 5 个 细胞的染色体进行测量分析，取其平均值。将刺五 加 的 48 条 染 色 体 配 为 24 对 。 根 据 Levan 等 ［3］染 色 体 分 类 标 准 ， 刺 五 加 的 24 对 染 色 体 中 第 1、2、 7、20、21、24 对 为 中 部 着 丝 粒 ， 第 4、5、6、8、10、 12、13、14、22 对 为 近 中 部 着 丝 粒 ， 第 9、17、19、23 对 为 近 端 部 着 丝 粒 ， 第 3、11、15、16、18 对 为 端 部 着 丝 粒 ， 其 核 型 公 式 为 ：K （2n） =48 =12 m +18 sm （SAT）+8 st+10 t。
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生物学通报
2011 年 第 46 卷 第 4 期
药用植物刺五加染色体核型分析
王明艳 1 韩秀玲 1 吴 鹏 1 王艳超 1 殷必轩 2 邢朝斌 1*
（1 华 北 煤 炭 医 学 院 生 物 科 学 系 河 北 唐 山 063000 2 兰 州 大 学 外 国 语 学 院 甘 肃 兰 州 730000 ）
主要参考文献
1 邢朝斌，沈海龙，赵丽娜等． 刺五加叶柄的体细胞胚胎发生 研 究 ． 中 草 药 ，2009,40(8):1302 — 1305.
2 朱 瀓 ． 植 物 染 色 体 及 染 色 体 技 术 . 北 京 ： 科 学 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 版 社 ．1982 ： 42 — 92 .
3 Levan A.,Fredga K., Sandberg A.A..Nomenclacture for centromericposition on chromosomes.Hereditas,1964,52:201.
2011年 第 46 卷 第 4 期
生物学通报
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刺五加染色体的核型分析结果
染色体 编号 长
相对长度
染色体 相对长 长度
短
总长度 臂比 类型 度系数 类型
1 5.14 3.37 8.51 1.53 m
1.49 L
2 5.04 3.13 8.17 1.61 m
1.43 L
3 7.03 0 4 4.31 2.30 5 4.35 2.20 6 4.65 1.83 7 3.72 2.66 8 4.50 1.87 9 4.98 1.28 10 4.04 1.99 11 5.97 0 12 3.71 2.12 13 4.04 1.71 14 3.88 1.84 15 5.11 0 16 5.10 0 17 4.09 0.97 18 4.92 0 19 3.61 1.18 20 2.78 1.90 21 2.56 1.60
7.03 ∞ t 6.61 1.87 sm* 6.55 1.98 sm 6.48 2.54 sm 6.38 1.40 m 6.35 2.43 sm 6.26 3.89 st 6.03 2.03 sm 5.97 ∞ t 5.83 1.75 sm 5.75 2.36 sm 5.72 2.11 sm 5.11 ∞ t 5.10 ∞ t 5.06 4.22 st 4.92 ∞ t 4.79 3.06 st 4.68 1.46 m 4.16 1.60 m
9 崔 秋 华 ． 人 参 染 色 体 核 型 及 Giemsa 染 色 的 研 究 ． 吉 林 农 业 大 学 学 报 ，1984, (1):511 — 513.
10 Nakata K., Takeuch A.. Chromosome observation on Panax japonicus(Araliaceae) Using Conventional Orcein Staining and Fluorescent Chromosome Banding with CMA and DAPI. Blletin of the Botanic Gardens of Toyama.2000,5 ：45—51.
摘要 采用根尖压片技术对刺五加的细胞染色体计数,并对其进行了核型分析 ,结果表明: 刺 五 加 染 色 体 数 目 为 2n=48， 染 色 体 基 数 X=24。 其 中 1 对 染 色 体 上 有 随 体 ， 核 型 公 式 为 ：K （2n）=48=12 m+18 sm(SAT)+8 st+10 t。 染 色 体 相 对 长 度 组 成 2 n=4 L+22 M2+14 M1+8 S，属 于 “3B”型 。 全 组 染 色 体 总 长 30.82 μm，长 臂 总 长 22.88 μm，核 型 不 对 称 系 数 为 74.23%。
22 2.86 1.25 4.11 2.29 sm
0.72 S