实验6 微柱法分离测定糖化血红蛋白20151109
微柱法测定糖化血红蛋白方法的改进
张 家 口医学院学 报
20 02年
第 l 9卷
第 1期
微柱法测定糖化血红蛋 白方法的改进
李彪 英 候 丽娟 常 晓彤 麻 秀丽 张家 V医学 院生化教研 室 I 0 50 70 0
【 摘要】 目的: 建立一种在临床上比较实用的 口{ 的测定方法。方吐: Bo e7 b 将 i—R x0阳离子
交 换树 脂溶 液 与溶 血液充 分 振 荡、 匀后 . 心, 混 离 测定 上清 液 的 吸光度 值。 结果 : 异系 数 : 变 . 正常标 本 C V% =3 3 ; 、 % 高值 标本 C V% :4 5 、 %。方 法 比较 , 与泰 康公 司微 柱 法试剂 盒 比较 r =0 9 , .4 密切相 关 灵 敏度 , . 1 相 当于 G t 0 0A tb为 0 3 %。 结 论 :经改 进 的微 柱法 , 简便 、 快 速, 性能符合临 床要求 。
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与P I A 活性 之 间均呈显 著正相 关. 间接反 映 了体 内 L p () a 含量 与 P 或 活性 的 密切 关 系。 我们 支持 部 分 国 AI 外 学者 J 的观 点, 为 L ( ) 认 p a 不仅 直 接 干 扰 tA 对 纤 P 维 蛋 白的溶解 ,而 且通过 增加 内皮细 胞对 P 的合成 AI 与释 放 , 问接 抑 制 tA 活性 , 而 导 致 血 管 内皮细 胞 P 进 表 面血 栓 的形成。 总之 , p a 对纤 维 蛋 白溶 解 系 统 的 影 响 尚需 深 L () 人 研究 。在这 方 面的工作 对于 探 明 L ( ) 血桂 形 成 D a促 和 促动 脉粥 样硬化 的机理具 有 重要 的意 义 。 参
糖化血红蛋白检测方法学
糖化血红蛋白检测方法学
1. 原理,糖化血红蛋白检测的原理是利用血液中糖化血红蛋白
的含量来反映血糖水平。
在高血糖的情况下,血液中的葡萄糖会与
血红蛋白发生非酶催化的糖化反应,形成HbA1c。
因此,测量血液
中HbA1c的含量可以间接反映出过去2-3个月内的平均血糖水平。
2. 样本采集,进行糖化血红蛋白检测需要抽取静脉血样本。
通
常情况下,患者需要空腹抽血,以确保结果的准确性。
血样采集后,需要立即送至实验室进行检测。
3. 实验方法,常见的糖化血红蛋白检测方法包括离心法、离子
交换色谱法、免疫测定法等。
离心法是通过离心机将血液离心,分
离出血浆,然后测定血浆中的糖化血红蛋白含量。
离子交换色谱法
则是利用离子交换色谱柱将血液中的HbA1c与其他成分分离开来,
再进行定量分析。
免疫测定法则是使用特异性抗体与HbA1c结合,
然后测定抗原-抗体复合物的含量来确定HbA1c的含量。
4. 结果解读,糖化血红蛋白检测结果通常以百分比的形式呈现,反映出血液中HbA1c的含量。
根据国际标准,正常人群的HbA1c水
平应该在4%-6%之间。
超过6.5%的HbA1c水平可能意味着患者存在
糖尿病或者血糖控制不佳。
总之,糖化血红蛋白检测方法学涉及到原理、样本采集、实验方法和结果解读等多个方面。
通过这种检测方法,可以更全面地评估患者的血糖控制情况,为临床诊断和治疗提供重要参考依据。
糖化血红蛋白检测方法及临床应用
糖化血红蛋白检测方法及临床应用糖化血红蛋白(glycosylated hemoglubin,GHb)是糖尿病诊断和治疗的重要指标,广泛应用于临床。
近年来,GHb检测方法发展迅速,早期检测以电泳法、微柱层析法应用较广泛,目前免疫比浊法和化学发光法(IVIA法)检测已开始在临床应用。
现就GHb的检测及临床应用综述如下。
1 GHb的生物化学特征成人细胞中的血红蛋白(Hb)主要是HbA1,占90%以上,HbA2占2.5%,HbF占0.2%其余为HbA3,凡连接有已糖的HbA1统称为GHb。
其中HbA1又可分为HbA1a,HbA1b和HbA1c。
HbA1c最多,占GHb总量的80%。
HbA1c 的β链N—末端缬氨基酸氨基与葡萄糖醛基通过非酶促反应而连接;HbA1a1的N—末端可连接1,6—二磷酸果糖;HbA1a2可与葡萄糖—6—磷酸连接。
这种Hb与糖结合的形成过程称为糖基化作用,GHb是HbA合成化学修饰的结果。
GHb是在红细胞生存期间,HbA1与血中已糖(主要为葡萄糖)缓慢、连续的非酶促反应产物,为HbA1合成后化学修饰的结果。
GHb的形成取决于血糖浓度和作用时间,生成量与血中葡萄糖浓度成正比。
2 GHb的检测方法2.1 酶法:GHb大多采用HLPC和免疫法测定。
HPLC法能测异常Hb,重复性良好,但需要专用仪器且实验需要时间较长。
免疫法采用自动化分析仪,但需要分别测定总HbT GHb。
酶法能克服以上缺陷。
酶法的原理是利用果糖氨基氧化酶(Fructosyl amino acid oxidase,FAOD)将GHb分解,产生果糖氨基酸和H2O2,经过氧化物酶(POD)催化H2O2与DA—64反应产生绿色,在751 mm 波长测定吸光度求得GHb浓度。
本法特点为FAOD只使GHb产生果糖基氨基酸,用FDP活化代替触酶可以清除干扰,GHb中干扰物质可用WST—3与GHb结合而去除。
此法精度良好,可同时测GHb和Hb,不需专门仪器,简便快捷,结果精确。
糖化血红蛋白测试方法学
糖化血红蛋白测试方法学糖化血红蛋白测试方法学解析糖化血红蛋白(HbA1c)作为评估糖尿病患者血糖控制状况的重要指标,其测试方法学的准确性及可靠性至关重要。
本文将为您详细解析糖化血红蛋白的测试方法及其相关技术要点。
一、糖化血红蛋白概述糖化血红蛋白是红细胞中的血红蛋白与血液中的葡萄糖发生非酶促反应而形成的化合物。
糖化血红蛋白的测定可以反映过去2-3个月内的平均血糖水平,是评价糖尿病患者血糖控制状况的重要指标。
二、糖化血红蛋白测试方法1.高压液相色谱法(HPLC)高压液相色谱法是糖化血红蛋白测定的金标准,具有准确性和重复性好的特点。
该方法通过将血液样本中的血红蛋白与其他蛋白质分离,然后测定糖化血红蛋白的比例,从而得出HbA1c的浓度。
2.免疫比浊法免疫比浊法是一种基于抗原-抗体反应原理的测试方法。
该方法通过特异性抗体与糖化血红蛋白结合,形成免疫复合物,然后通过比浊仪测定复合物的浓度,从而计算HbA1c的值。
3.紫外可见光谱法紫外可见光谱法是通过测定血液样本在特定波长下的吸光度,进而计算糖化血红蛋白的浓度。
该方法操作简便,但准确性相对较低,适用于快速筛查。
4.电泳法电泳法是将血液样本中的蛋白质通过电泳分离,然后通过染色剂对糖化血红蛋白进行染色,从而测定HbA1c的浓度。
该方法操作复杂,但具有较高的准确性。
三、糖化血红蛋白测试方法学注意事项1.样本采集与处理:采集血液样本时应避免溶血、污染和稀释,确保测试结果的准确性。
2.试剂与仪器:选择合适的试剂和仪器,严格按照制造商的操作规程进行测试。
3.质量控制:定期进行室内质控和室间质评,确保测试结果的可靠性和稳定性。
4.方法学比较:不同测试方法之间存在一定差异,实验室应根据自己的条件选择合适的方法,并进行方法学比较。
四、总结糖化血红蛋白测试方法学的选择对于糖尿病患者血糖控制评估具有重要意义。
实验室应根据自己的条件、需求及测试方法的特点,选择合适的测试方法,为临床提供准确、可靠的糖化血红蛋白检测结果。
糖化血红蛋白检测方法
糖化血红蛋白检测方法糖化血红蛋白(HbA1c)是一种血红蛋白与葡萄糖结合后形成的化合物,它是反映血糖控制情况的重要指标。
糖化血红蛋白检测方法是临床上常用的一种检测手段,能够客观地反映出一个人近期的血糖水平,对于糖尿病的诊断、疾病管理以及疗效评估具有重要意义。
本文将介绍糖化血红蛋白检测的方法及其临床应用。
一、糖化血红蛋白检测方法。
1. 血液标本采集,糖化血红蛋白检测需要采集静脉全血标本,通常在早晨空腹时进行采集。
采集前患者需至少8小时禁食,避免饮酒及大量饮水,以免影响检测结果。
2. 实验室检测,采集的血液标本送往临床实验室进行检测。
目前常用的方法包括离心法、高效液相色谱法(HPLC)、免疫测定法等。
其中HPLC法是目前应用最为广泛的一种方法,具有准确、稳定、重现性好的特点。
3. 快速检测仪器,近年来,随着医疗技术的不断进步,一些快速检测仪器也逐渐应用于临床实践中。
这些仪器操作简便,检测时间短,适用于一些急诊室、门诊等场所的临时检测。
二、糖化血红蛋白检测结果解读。
1. 糖化血红蛋白水平的参考范围,根据世界卫生组织(WHO)的标准,糖化血红蛋白水平在6.5%以下为正常,6.5%-6.9%为糖尿病前期,大于或等于7.0%为糖尿病。
因此,糖化血红蛋白检测结果是糖尿病诊断的重要依据之一。
2. 与血糖控制的关系,糖化血红蛋白的水平可以反映出近3个月内的平均血糖水平,因此对于长期血糖控制情况的评估非常有价值。
糖化血红蛋白水平越高,说明血糖控制越差,病情越严重。
三、糖化血红蛋白检测的临床应用。
1. 糖尿病的诊断,糖化血红蛋白检测是糖尿病诊断的重要依据之一,尤其适用于那些无法进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的患者。
2. 疾病管理,对于已经确诊为糖尿病的患者,定期检测糖化血红蛋白水平可以帮助医生评估患者的血糖控制情况,及时调整治疗方案。
3. 疗效评估,在糖尿病治疗过程中,糖化血红蛋白检测也是评估治疗疗效的重要指标之一。
糖化血红蛋白(HbA1c)测定的原理方法与仪器解析及临床意义
糖化血红蛋白(HbA1c)测定的原理方法与仪器解析及临床意义糖尿病目前在世界上发病率很高,占免疫病的比率,在发达国家高达2-5%,而我国糖尿病的发病率亦达2-3%,并且每年还以1‰的速度增长。
糖尿病是一种终生性疾病,其并发症是至残至死的主要原因,所以人们希望能尽早发现和治疗糖尿病。
临床上广泛采用血糖参数来判定糖尿病,而血糖参数只代表抽血时的血糖水平,对确诊有局限性。
近年来的医学研究证明:血液中的糖化血红蛋白(HbA1c)浓度相对稳定,其浓度值能准确反映最近1-3个月期间的血糖水平,便于医生对糖尿病进行早期诊断;也可用于糖尿病人的血糖监控及慢性并发症的判断等,受到临床的广泛重视,目前我国各大、中型医院正逐渐开展糖化血红蛋白(HbA1c)占总血红蛋白(Hb)的百分含量的测定项目。
有些发达国家已将HbA1c的测定列入中老年人的常规体检项目。
测定HbA1c比较常用的方法,目前有乳胶凝集反应法和离子交换高压液相色谱法两种,分别用生化分析仪和糖化血红蛋白自动分析仪进行测定。
1HbA1c的临床意义糖化血红蛋白是一项说服力较强、数据较客观、稳定性较好的生化检查,不受偶尔一次血糖升高或降低的影响。
能反应糖尿病患者2-3个月以内的糖代谢状况,同时与糖尿病并发症尤其是微血管病变关系密切,在糖尿病学上有重要的临床参考价值。
1.1增高:测定HbA1c可以了解糖尿病人在2~3个月的血糖控制情况。
此外,用含葡萄糖的透析液作血透的慢性肾衰病人,地中海贫血和白血病病人亦增高。
1.2降低:溶血性及失血性贫血,慢性肾衰,慢性持续性低血糖症等。
1.3作为糖尿病的病情监测指标1.3.1作为轻症、Ⅱ型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。
1.3.2不是诊断糖尿病的敏感指标,不能取代现行的糖耐量试验。
1.3.3可以列为糖尿病的普查和健康检查的项目。
1.4当HbA1c>9%时,说明患者存在着持续性高血糖,可以出现糖尿病肾病、动脉硬化、白内障等并发症。
糖化血红蛋白的检测和临床应用
糖化血红蛋白的检测和临床应用糖化血红蛋白是指血红蛋白分子受到血糖的影响而发生糖化。
由于血糖浓度的增高,使得血液中的葡萄糖与血红蛋白结合,形成糖基化的血红蛋白。
糖基化的血红蛋白在人体内的寿命为120天,因此可以反映出近三个月内的平均血糖水平。
糖化血红蛋白是血糖控制情况的一项重要指标。
利用糖化血红蛋白检测技术,可以有效地评估糖尿病患者的长期血糖控制情况,并对疾病的预防、诊断和治疗起到重要的指导作用。
一、糖化血红蛋白的检测方法目前用于检测糖化血红蛋白的技术主要有离心法、凝胶层析法、离子交换层析法、高效液相层析法和免疫测定法等。
免疫测定法是最常用的方法。
免疫测定法是通过抗体与糖化血红蛋白结合,然后测定抗体与糖化血红蛋白结合的物质来定量测定糖化血红蛋白的浓度。
与其他方法相比,免疫测定法具有操作简便、准确性高、灵敏度好等优点,因此在临床应用中得到了广泛的推广和应用。
1. 评估糖尿病患者的长期血糖控制情况糖化血红蛋白浓度可以反映出近三个月内的平均血糖水平,因此可以作为评估糖尿病患者的长期血糖控制情况的重要指标。
研究表明,糖化血红蛋白浓度与糖尿病患者的并发症发生率和死亡率呈正相关关系,糖化血红蛋白浓度每增加1%,患者并发症的风险就增加30%。
定期监测糖化血红蛋白浓度,对于评估糖尿病患者的长期血糖控制情况,及时调整治疗方案,预防并发症的发生具有重要意义。
2. 糖化血红蛋白在糖尿病患者的治疗和预防中的应用研究表明,严格控制糖尿病患者的血糖水平可以有效地减少并发症的发生率和死亡率。
通过监测糖化血红蛋白浓度,及时调整治疗方案,可以帮助糖尿病患者更好地控制血糖水平,减少并发症的发生。
3. 预防糖尿病的发生除了对已经患有糖尿病的患者有着重要的临床应用意义外,糖化血红蛋白的检测也可以帮助尚未患糖尿病的人群了解自己的血糖水平,及时采取措施,预防糖尿病的发生。
糖化血红蛋白作为评估血糖控制情况的重要指标,已经被广泛地应用于临床实践中。
微柱法分离糖化血红蛋白实验报告
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糖化血红蛋白的检测和临床应用
糖化血红蛋白的检测和临床应用
糖化血红蛋白(HbA1c)是一种可以反映血糖平均水平的指标,通过检测糖化血红蛋白的水平,可以了解体内血糖控制的情况,并评估糖尿病的治疗效果,同时对于疑似糖尿病的患者进行糖尿病的早期诊断也有一定的意义。
糖化血红蛋白的检测通常通过血液检测进行,常见的检测方法包括离子交换色谱法、高效液相色谱法等,而目前临床上广泛使用的是高效液相色谱法。
检测的时间通常为3个月,因为血红蛋白的寿命为120天左右,而血糖的变化会影响其糖化水平,因此可以通过糖化血红蛋白的水平了解患者近3个月内的血糖控制情况。
糖化血红蛋白的正常范围通常为4%~6%,其中4%对应着正常人群的平均血糖水平,而6%以上则表示患者的血糖控制较差。
对于糖尿病患者来说,糖化血红蛋白的水平与发生糖尿病相关的并发症的风险程度有关,糖化血红蛋白水平越高,患者发生视网膜病变、神经病变、肾脏病变等并发症的风险也越高。
糖化血红蛋白的检测可以用于评估糖尿病的治疗效果,糖化血红蛋白水平越低,患者的血糖控制越好,治疗效果也越好。
因此,对于糖尿病患者,在治疗过程中应该定期检测糖化血红蛋白的水平,以及时调整治疗方案,保持良好的血糖控制。
此外,糖化血红蛋白的检测还可以用于糖尿病的早期诊断。
糖化血红蛋白水平高于正常范围,说明患者体内长期存在高血糖的情况,因此可以提醒医生进一步进行糖尿病的确诊。
糖化血红蛋白检测金标准方法
糖化血红蛋白检测金标准方法《糖化血红蛋白检测金标准方法:超接地气的分享》嘿,宝子们!今天我来和你们唠唠糖化血红蛋白检测的金标准方法,就像是分享我的独家秘籍一样。
这事儿可重要了,特别是对于那些关心自己健康或者家里有需要关注血糖情况的家人的小伙伴。
首先呢,咱们得知道啥是糖化血红蛋白。
你可以把它想象成一个小间谍,它能反映你过去两到三个月的平均血糖水平呢。
这可比你只测某一个时刻的血糖要全面得多啦。
就好比你看一个人学习成绩,只看他某一天的表现不行,得看他这一学期的平均成绩才靠谱,糖化血红蛋白就是这个平均成绩的概念。
那具体怎么检测这个糖化血红蛋白呢?第一步,准备工作要做好。
你得找个靠谱的医疗机构,就像找个靠谱的餐厅吃饭一样重要。
可别随便找个小诊所,那种感觉就像是在路边摊找米其林大厨做的菜,不太靠谱。
一般大医院或者正规的体检中心都是很不错的选择。
到了医疗机构之后呢,你就和医护人员说你要做糖化血红蛋白检测。
这时候,医护人员可能会让你先填个单子,就像你去餐厅点菜得先写个菜单一样。
这里面可能会问你一些基本信息,比如你的年龄、有没有啥病史之类的。
宝子们可别嫌麻烦,认真填写就对了,这就像是给医生提供做菜的食材清单一样,信息越准确,检测结果就越能反映你的真实情况。
第二步,抽血啦!这是个关键步骤呢。
你就把胳膊伸出来,像个勇士一样。
护士会在你的胳膊上找个合适的血管,这血管就像是小河流,他们要从这里取水(抽血)。
有的宝子可能会害怕打针,我跟你说,我以前也是,一看到针就紧张得不行。
我就会在心里默默给自己打气,就想这就像被小蚂蚁轻轻咬了一口,一下就过去了。
护士会在抽血的地方消毒,那感觉就像是给小河流的周围打扫一下卫生,防止有脏东西混进去。
然后就扎针抽血啦,一般来说抽个几毫升就够了。
第三步,样本处理。
你抽完血之后,这个血样就像是一个神秘的小包裹,要被送到实验室去处理啦。
在实验室里,专业的人员会用一些高科技的仪器来检测糖化血红蛋白的含量。
最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析
最全糖化血红蛋白测定的原理与仪器解析糖化血红蛋白(HbA1c)是指糖分子与血红蛋白A的糖基化产物。
尽管糖化血红蛋白的生成过程是一个非酶促反应,但当血液中的血糖水平增加时,糖化反应也会增加。
因此,糖化血红蛋白的测定可以反映出患者过去2-3个月内的平均血糖水平,通常用于糖尿病的诊断和疾病管理。
糖化血红蛋白的测定有许多方法,其中最常用的是离子交换层析法(HPLC)和免疫测定法。
下面将详细介绍这两种方法的原理和仪器解析。
1.离子交换层析法(HPLC)离子交换层析法是一种基于糖化血红蛋白与其他血红蛋白成分在离子交换柱中的不同亲和力进行分离的方法。
首先,将样品中的红细胞破碎并溶解,然后经过预处理步骤去除干扰物质。
此后,将溶解的样品装入装有离子交换柱的高效液相色谱仪中。
通过改变梯度洗脱条件,可以将血红蛋白A和其它不同类型的血红蛋白分离开来。
这些分离后的血红蛋白组分通过紫外光检测器进行检测和定量,计算出糖化血红蛋白的百分比。
离子交换层析法对仪器设备的要求相对较高。
需要使用高效液相色谱仪(HPLC)以及配套的离子交换柱和相关的分析软件。
这些设备能够提供高分辨率和高灵敏度的分离和检测,确保准确且可重复的结果。
2.免疫测定法免疫测定法是利用糖化血红蛋白与特异性抗体之间的免疫反应进行测定的方法。
首先,将样品中的红细胞破碎并溶解,然后进行预处理去除干扰物质。
然后,在试剂盒提供的试剂和缓冲液的作用下,糖化血红蛋白与特异性抗体发生免疫反应。
未结合抗体的糖化血红蛋白被洗脱掉,而结合抗体的糖化血红蛋白则与标记的酶或荧光物质形成复合物。
通过测量这些复合物中的酶活性或荧光强度,可以定量测定糖化血红蛋白的浓度。
免疫测定法通常使用酶联免疫吸附检测(ELISA)或免疫荧光法进行糖化血红蛋白的测定。
这些方法对仪器设备的要求相对较低,通常可使用光滑板读数器或荧光光谱仪进行检测。
总结起来,糖化血红蛋白的测定主要采用离子交换层析法和免疫测定法。
离子交换层析法利用离子交换柱对血红蛋白A和其它血红蛋白成分进行分离,然后通过HPLC设备进行定量分析。
糖化血红蛋白测定方法及原理
糖化血红蛋白测定方法及原理嘿,咱今儿就来唠唠糖化血红蛋白测定方法及原理这档子事儿。
你说这糖化血红蛋白啊,就好像是身体里的一个小秘密。
那它到底是咋被测定出来的呢?目前常用的测定方法有好几种呢。
比如说高效液相色谱法,这就像是个厉害的大侦探,能把糖化血红蛋白从众多“嫌疑人”里精准地揪出来。
它通过特殊的柱子和流动相,让糖化血红蛋白乖乖现形,能准确地给出数值。
还有免疫比浊法,这就好比是个敏锐的“小雷达”,专门捕捉糖化血红蛋白的信号。
利用抗体和抗原的特异性结合,来检测糖化血红蛋白的存在。
那原理是啥呢?简单说呀,血红蛋白就像是个勤劳的“打工人”,它在身体里跑来跑去,运输氧气。
而血液里的葡萄糖呢,就像个调皮的“小精灵”,时不时地就会和血红蛋白来个“亲密接触”,一旦结合上了,就成了糖化血红蛋白。
这糖化血红蛋白可重要啦!它能反映出一段时间内血糖的平均水平,可比单次测血糖靠谱多了呢。
你想想,单次血糖就像是拍了一张瞬间的照片,而糖化血红蛋白就像是一段小视频,能更全面地展示血糖的情况。
那为啥要测它呢?这不是明摆着嘛,要是血糖控制不好,那身体可就遭罪啦!就像一辆车,油加得不合适,能跑得顺畅吗?通过测定糖化血红蛋白,咱就能知道血糖控制得咋样,是不是该调整治疗方案啦。
你说这测定糖化血红蛋白是不是很神奇?就像在身体这个大“舞台”上,各种“角色”在演绎着不同的故事。
而我们就是那个要读懂这些故事的人。
咱可不能小瞧了这小小的糖化血红蛋白,它背后可是藏着大大的学问呢。
医生们通过它来了解病人的病情,调整治疗方案,就像将军指挥打仗一样,得有准确的情报才行。
所以啊,大家都要重视糖化血红蛋白的测定,别不当回事儿。
这可是关乎咱身体健康的重要指标呢!咱得像爱护宝贝一样爱护自己的身体,可别让血糖这个“小调皮”捣乱哦!怎么样,这下你对糖化血红蛋白测定方法及原理是不是有了更清楚的认识啦?。
糖化血红蛋白的标准化检测方法
糖化血红蛋白的标准化检测方法咱今儿个就来唠唠糖化血红蛋白的标准化检测方法。
你说这糖化血红蛋白啊,那可真是个重要的指标呢!它就像是身体给咱发出的一个信号,能让咱知道血糖控制得咋样。
要检测糖化血红蛋白,那可得讲究方法。
就好比咱做饭,得有合适的食材、火候和调料,这检测方法也是一样。
首先得有可靠的仪器吧,这仪器就像是厨师手里的锅铲,没有它可不行。
然后呢,操作的人也得专业呀,不能马马虎虎的,不然得出的数据能准吗?检测的时候,就像是一场精心编排的舞蹈。
每一个步骤都得准确无误,不能有丝毫偏差。
从样本的采集,到检测的过程,再到结果的分析,都得严丝合缝。
这可不是闹着玩的,一个小失误可能就会让结果大相径庭。
你想想看,要是检测不准确,那医生怎么能根据这个结果来给病人制定治疗方案呢?那不就像盲人摸象,摸不着头脑嘛!所以说呀,这标准化检测方法真的太重要啦!咱再打个比方,这糖化血红蛋白的标准化检测就像是修房子,每一块砖都得放对位置,每一道工序都得做好,这样房子才能坚固耐用。
检测方法也是如此,每一个环节都不能马虎,不然得出的结果能让人放心吗?而且啊,不同的检测方法可能就像不同的菜系一样,各有各的特点。
有的可能更准确一些,有的可能更快速一些,但不管怎样,都得符合标准,不然那不就乱套了嘛。
咱平时去医院检查,可得留意这个检测是不是按照标准来的哟。
要是不标准,那可得多问几句,毕竟这关系到咱的健康呢!这可不是开玩笑的事儿,咱得对自己负责呀!总之呢,糖化血红蛋白的标准化检测方法真的是至关重要。
它就像是我们健康的守护者,通过它,我们能更好地了解自己的身体状况。
所以呀,大家一定要重视起来,可别不当回事儿哟!让我们一起关注糖化血红蛋白的标准化检测,为我们的健康保驾护航!。
实验6 微柱法分离测定糖化血红蛋白20151109
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七.注意事项
1.层析时一般在28℃较为适宜,冬季应将柱置于28℃温箱 中洗脱。
2.HbA1不能和HbF、HbH及Hb Bart’s分开,有前述异 常血红蛋白病者不宜用此方法。 3.标本置室温超过24h可使结果增高,贮4℃冰箱可稳定5 天。
4.抗凝剂EDTA和氧化物不影响结果,肝素可使结果增高。
3.血红蛋白溶液的制备
取EDTA抗凝血或毛细管血20L,加入2.0mL生理盐水中,摇 匀,2000rpm离心5分钟,弃上清液,仅留下细胞。加溶血剂 0.3ml,摇匀,置37℃水浴中15min,以除去不稳定的HbA1。
四.操作步骤
4.柱的准备
将微柱摇动使树脂混悬,然后去掉上下盖,将柱插入1.5cm x 15cm的试管中,让柱内缓冲液完全流出。
实验原理?带负电荷的biorex70阳离子交换树脂与带正电荷的hba及hbai有亲和力但由于hbai的两个?链n末端正电荷被糖基清除正电荷较hba少二者对树脂的亲和力不同
实验十 微柱法分离测定糖化血红蛋白
一. 目的要求
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了解测定糖化血红蛋白的意义。 掌握微柱法测定糖化血红蛋白的原理和实验技术。
三.器材及试剂
1.器材:
(1)塑料微柱。 (2)紫外-可见分光光度计。
三.器材及试剂
2.试剂:
(1)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液:称取无水磷酸氢二钠28.369g,溶 于蒸馏水中并定容至1L。 (2)0.2mol/L磷酸二氢钠溶液:称取NaH2PO42H2O 31.206g,溶 于蒸馏水中并加1L。 (3)溶血剂:取试剂(2)25ml,加Triton X-100 100mg,加蒸馏 水至100ml。 (4)磷酸盐缓冲液(pH6.7) :取试剂(1)100ml、试剂(2) 150ml,加蒸馏水至1L。 (5)磷酸盐缓冲液(pH6.4 ) : 取试剂(1)300ml、试剂(2) 700ml,加蒸馏水300ml,混匀即成。 (6)Bio-Rex 70阳离子交换树脂,200—400目,钠型,分析纯级。
微柱法测定血清糖化血红蛋白及其临床意义
微柱法测定血清糖化血红蛋白及其临床意义
朱海英
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2006(027)010
【摘要】目的探讨血清糖化血红蛋白(GHb)在糖尿病监测中的临床应用.方法利用离子交换微柱法分离糖尿病组和健康对照组血清中的GHb,并测定其在总Hb中所占的百分比.结果糖尿病组血清GHb含量(%)与健康对照组比较,GHb含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);并且糖尿病患者血中GHb含量与受控制时间有关,受控制约8周后其血清GHb含量与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论血中GHb水平是检测糖尿病患者长期血糖控制水平的良好指标.
【总页数】2页(P872-873)
【作者】朱海英
【作者单位】030012,太原,山西职工医学院生化室
【正文语种】中文
【中图分类】R4
【相关文献】
1.免疫比浊法与离子交换层析微柱法测定糖化血红蛋白的方法学比较 [J], 杨军
2.微柱法测定糖化血红蛋白方法的改进 [J], 李彪英;候丽娟;常晓彤;麻秀丽
3.微柱法测定糖化血红蛋白及对血糖控制的评价 [J], 潘莉莉;张玉英;李强;卢丽萍;马长锁
4.亲和色谱微柱法测定糖化血红蛋白对糖尿病的诊断价值 [J], 闵庆芝;王大惠
5.亲和色谱微柱法测定血清糖化白蛋白 [J], 邹定;吴学军
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糖化血红蛋白的检测和临床应用
糖化血红蛋白的检测和临床应用
糖化血红蛋白是指血红蛋白与葡萄糖化合物发生非酶促的糖基化反应形成的化合物,又称糖基化血红蛋白。
它是一种反映血糖控制状况的指标,能够明确反映过去2-3个月血糖的平均水平。
糖化血红蛋白的检测方法主要有高效液相色谱(HPLC)、离子交换层析法和凝胶过滤层析法等。
其中HPLC方法是目前最常用的检测方法,具有灵敏、准确、精密度高、可操作性强等特点。
临床应用方面,糖化血红蛋白是糖尿病控制的重要指标之一。
通过测定糖化血红蛋白的水平,可以及时评估糖尿病患者的控制状况,并根据测量结果进行调整治疗方案,以达到更好的治疗效果。
同时,糖化血红蛋白还可以作为糖尿病的一项预测指标,能够提示患者的长期血糖控制状况。
除了糖尿病外,糖化血红蛋白的检测在其他疾病的诊断和临床应用中也具有很高的价值。
例如,糖化血红蛋白的水平可作为肾脏疾病的预测指标,也可以用于评估患者的贫血状况。
此外,随着研究的深入,糖化血红蛋白还可用于评估心血管疾病的风险和预测患者的生存率等。
糖化蛋白检测方法指南:如何分析和解释实验结果?
糖化蛋白检测方法指南:如何分析和解释实验结果?糖化蛋白是一类具有糖基化修饰的蛋白质,在生物制品糖组学领域,对其进行准确的检测与分析至关重要。
糖化蛋白的糖基化状态在生物学功能、药物疗效以及疾病发展中起着重要作用。
本文将介绍糖化蛋白检测的方法指南,帮助读者了解如何分析和解释实验结果。
1.样品准备和预处理。
糖化蛋白检测的第一步是样品准备和预处理。
在样品处理过程中,必须小心避免糖基化修饰的损失或者添加,以保证实验结果的可靠性。
通常,样品预处理包括蛋白质提取、降解、洗涤和去除杂质等步骤。
正确的样品准备将有助于获得可靠的糖化蛋白检测结果。
2.质谱分析技术:质谱分析技术是目前最常用的糖化蛋白检测方法之一。
质谱能够鉴定蛋白质的质量、结构和糖基化状态。
在质谱分析中,糖化蛋白首先需要通过蛋白质降解技术将其分解为肽段。
然后,利用质谱仪器对这些肽段进行质谱分析,以确定糖基化位点和糖基结构。
质谱分析技术的高灵敏度和高分辨率有助于提供准确的糖化蛋白检测结果。
3.糖组学技术。
糖组学技术是一种系统性研究糖基化的方法。
它结合了质谱学、色谱学和生物信息学等多种技术,能够全面分析糖化蛋白糖基化谱系。
糖组学技术可以快速鉴定糖基化异质性,并对糖基化的生物学功能进行深入研究。
这种综合性的方法有助于理解糖化蛋白的功能与结构之间的关联,为生物药物研发和临床治疗提供重要信息。
4.生物信息学分析。
在糖化蛋白检测中,生物信息学分析在解释实验结果方面起着重要作用。
通过对质谱数据和其他实验数据进行生物信息学分析,可以帮助鉴定糖基化位点、确定糖基结构,并对糖化蛋白的功能进行预测。
这些分析为研究者提供了更多有关糖化蛋白的信息,并帮助解释实验结果的意义。
5.结果解释与应用。
最后,糖化蛋白检测的结果需要正确解释和应用。
根据实验结果,研究者可以深入了解糖化蛋白的糖基化状态及其在生物学过程中的作用。
这些信息对于药物研发、临床诊断和疾病研究具有重要的指导意义。
总结起来,糖化蛋白检测是生物制品糖组学领域中的关键技术之一。
糖化血红蛋白检测
糖化血红蛋白检测1.预期用途糖化血红蛋白检测试剂盒(微粒色谱法)与NycoCard READERⅡ特种蛋白金标检测仪配合使用,用于定量检测中的糖化血红电白含量。
2.检验原理糖化血红蛋白检测试剂盒采用微粒色谱的原理,试剂盒所包含的检测装置包括:多孔膜滤网、预装有反应试剂的检测管及清洗液。
确切的说,反应试剂中,含有可溶解红细胞并使血红蛋白沉淀的物质,与可与糖化血红蛋白的顺式- 二醇基结合的蓝色硼酸结合物。
当将血滴入反应试剂时,血红细胞将立即被溶解。
所有的血红蛋白随机沉淀。
硼酸结合物即可与糖化血红蛋白的顺式-二醇基结合。
将部分反应混合物置于检测设备,那么说有已沉淀的血红蛋白,无论其是否被硼酸结合物所结合,都将残留在滤网之上。
然后使用清洗液,去除多余的有色结合物。
最后使用NycoCard READERⅡ特种蛋白金标检测仪对蓝色(糖化血红蛋白)与红色(总体血红蛋白)的颜色色谱进行分析,计算二者的比率,该比率代表了样品中HbA1c的浓度。
3.储存条件及有效期试剂盒有效期内,应保存在2-8度下。
避免放在阳光直射或者高湿度的环境中,有效期是6个月。
试剂盒平直打开后,试剂R1在室温能够保存6小时。
反应板(TD)及洗涤液R2打开后室温能够保存至有效期。
使用后瓶盖应当拧紧。
4.适用仪器NycoCard READERⅡ特种蛋白金标检测仪5.样本要求在检测过程中,可以使用毛细血管血或静脉血。
血液中是否含有抗凝血剂(EDTA、肝素和NaF)均可。
在使用前,血液样本(含有抗凝血剂)在2-8度的环境中最多可存放10天。
要避免检测样本发生溶血(参阅“检测方法的局限性”)。
不要对血液样本进行冷冻。
6.检验方法6.1. 裂解红细胞,着色标记向带有试剂R1的检测管中加入5uL全血。
充分搅拌,静置2-3分钟,待其反应完全。
本过程需要使用计时器。
注意!在使用试剂R1之前,需要将其平衡至室温(20-25度)。
6.2. 添加样本再次搅拌,使悬浊液均匀。
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8.比色
以蒸馏水作空白,415nm波长,测定各管吸光度。
9.柱的清洗
用过的柱先加试剂(5)3ml,使Hb全部洗下,再用试剂(4) 洗3次,每次3ml。最后加试剂(4) 3ml,加上下盖,保存备用。
五ห้องสมุดไป่ตู้计算
测定管吸光度 HBA1 %= 100% 对照管吸光度 5
参考值 HbAl:6.590.69%
四.操作步骤
1.树脂处理
称取树脂4g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15ml,搅匀,置室温 30min,间隔搅拌2-3次。然后加浓盐酸数滴,调至pH6.7,弃去 上清液。用蒸馏水约25ml洗1次,再用试剂(5)10ml洗2次,最 后用试剂(4)洗4次即可。
2.装柱
树脂加试剂(4)搅匀,用毛细滴管加入塑料微柱内,使树脂 床高度达3-4cm即可,树脂床应均匀,无气泡、无断层才可。
九.思考题
1.糖化血红蛋白和血糖有何区别?
2.本实验为何采用415nm作为测定波长?
六.临床意义
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糖化血红蛋白测定用于评定糖尿病的控制程度,当糖尿病 控制不佳时,糖化血红蛋白浓度可高至正常2倍以上。 因为糖化血红蛋白是血红蛋白生成后与糖类经非酶促结合 而成的。它的合成过程是缓慢的,而且是相对不可逆的, 持续于红细胞120天生命期中,其合成速率与红细胞所处 环境中糖的浓度成正比。 因此,糖化血红蛋白所占比率能反映测定前1-2个月内平 均血糖水平,现已成为反映糖尿病较长时间血糖控制水平 的良好指标。
3.血红蛋白溶液的制备
取EDTA抗凝血或毛细管血20L,加入2.0mL生理盐水中,摇 匀,2000rpm离心5分钟,弃上清液,仅留下细胞。加溶血剂 0.3ml,摇匀,置37℃水浴中15min,以除去不稳定的HbA1。
四.操作步骤
4.柱的准备
将微柱摇动使树脂混悬,然后去掉上下盖,将柱插入1.5cm x 15cm的试管中,让柱内缓冲液完全流出。
❖
测定糖化蛋白的方法有比色法、电泳法、等电聚焦法、离
子交换层析法、高效液相层析法、亲和层析法、免疫化学
法、毛细管电泳法等。国内以比色法、离子交换层析法及 电泳法较常用。
二.实验原理
带负电荷的Bio-Rex 70阳离子交换树脂与带正电荷的 HbA及HbAi有亲和力,但由于HbAi的两个链N-末端正 电荷被糖基清除,正电荷较HbA少,二者对树脂的亲和力 不同。用pH6.7磷酸盐缓冲液可首先将带正电荷较少、吸
5.上样
用微量加样器取血红蛋白溶液100l,加至微柱内树脂床上, 待其完全进入树脂床后,将柱移入另一支1.5cm x 15cm的试管中。
6.洗脱
取试剂(4)3ml缓缓加至树脂床上,注意勿冲动树脂。收集 洗脱液,此即为HbA1(测定)。
四.操作步骤
7.对照
取上述血红蛋白溶液50L,加蒸馏水7.5ml,摇匀,此即为总 Hb管。
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❖
七.注意事项
1.层析时一般在28℃较为适宜,冬季应将柱置于28℃温箱 中洗脱。
2.HbA1不能和HbF、HbH及Hb Bart’s分开,有前述异 常血红蛋白病者不宜用此方法。 3.标本置室温超过24h可使结果增高,贮4℃冰箱可稳定5 天。
4.抗凝剂EDTA和氧化物不影响结果,肝素可使结果增高。
实验十 微柱法分离测定糖化血红蛋白
一. 目的要求
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了解测定糖化血红蛋白的意义。 掌握微柱法测定糖化血红蛋白的原理和实验技术。
二.实验原理
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葡萄糖可以和体内多种蛋白质中的氨基不可逆地以共价键 结合,这个过程不需要酶的参与,其反应速度主要取决于 葡萄糖的浓度。这种被葡萄糖糖化的蛋白主要存在于糖尿 病或其他高血糖患者中。糖化过程通常缓慢地进行,一旦
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附力较弱的HbA1洗脱下来,再用分光光度计测定洗脱液
中的HbA1占总Hb的百分数。
三.器材及试剂
1.器材:
(1)塑料微柱。 (2)紫外-可见分光光度计。
三.器材及试剂
2.试剂:
(1)0.2mol/L磷酸氢二钠溶液:称取无水磷酸氢二钠28.369g,溶 于蒸馏水中并定容至1L。 (2)0.2mol/L磷酸二氢钠溶液:称取NaH2PO42H2O 31.206g,溶 于蒸馏水中并加1L。 (3)溶血剂:取试剂(2)25ml,加Triton X-100 100mg,加蒸馏 水至100ml。 (4)磷酸盐缓冲液(pH6.7) :取试剂(1)100ml、试剂(2) 150ml,加蒸馏水至1L。 (5)磷酸盐缓冲液(pH6.4 ) : 取试剂(1)300ml、试剂(2) 700ml,加蒸馏水300ml,混匀即成。 (6)Bio-Rex 70阳离子交换树脂,200—400目,钠型,分析纯级。
形成,不再解离。
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对血糖或尿糖波动较大的患者来说,采用糖化蛋白来诊断 或追踪病情的发展具有独特的临床意义,它可以反映较长 时期以来的平均血糖浓度。
二.实验原理
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临床上测定的糖化蛋白主要有糖化血红蛋白
(glycohemoglubin,GHb)和糖化血清蛋白(glycated serum protein,GSP)。