第十六章转基因技术与作物育种分析

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第十六章转基因技术与作物育种分析
第十六章转基因技术与作物育种分析
第十六章转基因技术与作物育种分析
(三)受体材料的选择 受体是指用于接受外源DNA的转化材料。能否建 立稳定、高效、易于再生的受体系统是植物转基 因操作的关键技术之一。良好的植物基因转化受 体系统应满足如下条件:①高效稳定的再生能力; ②受体材料要有较高的遗传稳定性;③具有稳定 的外植体来源,即用于转化的受体要易于得到而 且可以大量供应,如胚和其他器官等;④对筛选 剂敏感,即当转化体筛选培养基中筛选剂浓度达 到一定值时,能够抑制非转化植株细胞的生长、 发育和分化,而转化细胞、植株能正常生长、发 育和分化形成完整的植株。
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与常规育种技术相比,转基因育种在技术上较为复 杂,要求也很高,但是具有常规育种所不具备的 优势。主要体现在: (1)转基因育种技术体系的建立使可利用的基因资 源大大拓宽。实践表明,从动物、植物、微生物 中分离克隆的基因,通过转基因的方法可使其在 三者之间相互转移利用。 (2)转基因育种技术为培育高产、优质、高抗,适 应各种不良环境条件的优良品种提供了崭新的育 种途径。这既可大大减少杀虫剂、杀菌剂的使用, 有利于环境保护,也可以提高作物的生产能力、 扩大作物品种的适应性和种植区域。
第十六章Βιβλιοθήκη Baidu基因技术与作物育种分析
(一)目的基因的获得 目的基因的获得是利用作物转基因育种的 第一步。根据获得基因的途径主要可以分 为两大类:根据基因表达的产物——蛋白 进行基因克隆;从基因组DNA或mRNA序 列克隆基因。
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(二)目的基因重组质粒的构建 通过上述方法克隆得到目的基因只是为利 用外源基因提供了基础,要将外源基因转 移到受体植株还必须对目的基因进行体外 重组。质粒重组的基本步骤包括:从原核 生物中获取目的基因的载体并进行改造; 利用限制性内切酶将载体切开,并用连接 酶把目的基因连接到载体上,获得DNA重 组体。
第十六章 转基因技术与作物育种
转基因育种就是根据育种目标,从供体生物 中分离目的基因,经DNA重组与遗传转化 或直接运载进入受体作物,经过筛选获得 稳定表达的遗传工程体,并经过田间试验 与大田选择育成转基因新品种或种质资源。
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它涉及目的基因的分离与改造、载体的构 建及其与目的基因的连接等DNA重组技术; 通过农杆菌介导、基因枪轰击等方法使重 组体进入受体细胞或组织以及转化体的筛 选、鉴定等遗传转化技术和相配套的组织 培养技术;获得携带目的基因的转基因植 株(遗传工程体);遗传工程体在有控条件下 的安全性评价以及大田育种研究直至育成 品种。
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据农业部资料,到1999年我国已批准进行中 试的转基因作物有48项,包括水稻、小麦、 玉米、番茄、白菜、番木瓜、甜瓜、花生、 棉花、烟草、广藿香等11种作物;主要目 标性状是抗虫、抗病、耐盐、抗冻、耐储 藏和抗衰老等。已批准环境释放的有49项, 包括水稻、玉米、大豆、马铃薯、番茄、 甜椒、线辣椒、棉花、杨树、烟草等10种。
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目前所种植的转基因作物主要为大豆、 玉米、棉花和油菜等,其中以转基因 大豆的种植面积最大。
转基因作物的主要目标集中在培育具有 抗除草剂特性的农作物优良品种,其次 为培育抗虫和毒病新品种上。
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(二)我国转基因作物研究与利用概况 我国是世界上第一个商品化种植转基因作 物的国家。自行培育的双价转基因烟草的 抗病虫性达到60%,产量比对照增加15%, 产值增加20%,1992年每亩增产200元, 遗憾的是由于市场的原因现已不推广。
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目前经农业部审查并经全国基因工程安全委 员会批准商品化生产的作物已有我国自行 研制开发的抗虫转基因棉花、美国 Monsanto公司开发的Bt抗虫棉、延迟成 熟期的转基因番茄、抗黄瓜花叶病毒(CMV) 转基因番茄、抗CMV转基因甜椒及转查尔 酮合酶(CHS)反义RNA基因矮牵牛。但是 除了转基因抗虫棉已经大面积生产外,后 几种作物的种植面积仅在1 hm2左右。
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二、转基因育种的程序 利用转基因技术进行作物育种的基本过程 可分为:目的基因或DNA的获得;含有目 的基因或者DNA的重组质粒的构建;受体 材料的选择和再生系统的建立;转基因方 法的确定和外源基因的转化;转化体的筛 选和鉴定;转基因植株的育种利用。
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(3)利用转基因育种技术可以对植物的目标性 状进行定向变异和定向选择,同时随着对 基因认识的不断深入和转基因技术手段的 完善,对多个基因进行定向操作也将成为 可能,这在常规育种中是难以想象的。
(4)利用转基因技术可以大大提高选择效率, 加快育种进程。此外,通过转基因的方法, 还可将植物作为生物反应器生产药物等生 物制品。正是由于转基因技术育种具有上 述强大的优势,使得转基因技术从发现到 如今仅仅30年的历史就得到了快速的发展。
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已经分离的目的基因一般都保存在大肠杆 菌内的一类辅助质粒中,常用的有pBR322 系列、pUC以及pBluescriptK+(—)系列 等。在进行外源基因转移前还必须将外源 基因重组到合适的载体上,具体采用哪种 载体要根据转基因的方法和目的而定。Ti质 粒转化载体的结构见图16—6、16—7。
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第一节 作物的转基因技术
一、转基因技术的发展现状 (一)国际转基因植物研究与现状 自从20世纪70年代重组DNA技术创建到1983年 第一株转基因烟草获得以来,至今已有35个科 120种植物转基因获得成功。先后有30多个国家 批准了3000多例田间试验,涉及的植物种类有 40多种,2000年已有13个国家种植了商品化的 转基因植物。1996—2001年全球转基因作物种 植面积增加很快(图16—1)。到2001年全世界已 种植转基因作物5260万hm2。
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