(推荐)总多酚的测定
总多酚含量测试试剂盒 分光光度计法
总多酚含量测试试剂盒(C001-96T 分光光度计法)一、测定原理福林酚试剂氧化多酚中-OH基团并使其显蓝色,蓝色的深浅与多酚的含量成正相关,没食子酸一般在该方法中被默认为标准物质,采用没食子酸溶液制作标准曲线,然后将多酚含量表示为等价没食子酸的量,即可求得待测样品中总多酚含量。
二、试剂组成试剂一:酚试剂25mL×1瓶试剂二:显色液 200mL ×1瓶试剂三:1.0mg/mL没食子酸标准溶液 20mL×1瓶三、储存条件及有效期试剂一、试剂二4℃保存,试剂三-20℃保存,可保存3个月。
四、试剂的配制试剂一应用液:将试剂用双蒸水10×稀释,制备成酚应用液,每次测试需使用2.5mL,根据样品数量计算好,用多少配制多少。
例:需要进行38次测试,则可配制40次使用量:40×2.5mL=100mL,量取10mL试剂一加入90mL双蒸水,充分混匀即可。
试剂三应用液:分别采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL试剂三于100mL容量瓶中,采用双蒸水定容至刻度,摇匀,制成浓度分别为10,20,30,40,50μg/mL的没食子酸应用液。
习惯用使用移液器的老师也可先在15mL离心管中分别加入9.9,9.8,9.7,9.6,9.5mL双蒸水,再采用移液器分别移取100,200,300,400,500 μL 试剂三于相应的离心管中,充分颠倒混匀,制成浓度分别为10,20,30,40,50μg/mL的没食子酸应用液。
五、操作步骤充分混匀,室温静置5min使之充分反应2。
充分混匀,室温静置60min4,使用1cm光径比色皿,765nm处采用分光光度计测定吸光度。
1必须做标准管,以绘制标准曲线;23-8分钟均可,但标准管和所有测定管反应时间应保持一致;3如样品颜色较深,可做对照管,对照管将试剂二改为双蒸水;4最短40min,建议60min以保证反应充分。
六、计算方法1.绘制标准曲线以没食子酸应用液浓度0,10,20,30,40,50μg/mL为横坐标,以分光光度计测得的吸光值为纵坐标,在坐标纸上或利用EXCEL绘制标准曲线。
总酚的测定方法 国标
总酚的测定方法国标
《食品工业用总酚测定(GB/T 5009.11-2017)》是中国国家标准中规定的总酚测定方法,具体实施方法如下:
仪器和试剂:
1.紫外可见分光光度计:波长范围在200~640 nm 之间,波长选择器精度在±1 nm以内。
2.量筒:500 mL。
3.恒温槽:温度稳定度不超过±0.2℃。
4.聚四氟乙烯(PTFE)过滤器:孔径为0.45 μm。
5.乙醇:96% 。
6.乙酸:99% 。
7.苏丹Ⅲ:优级。
8.硫酸:1+1 (V/V)。
9.对甲酚:0.01 mol/L。
10.氯化铵:1 mol/L。
11.硝基苯:优级。
样品处理:
从样品中称取1 g,加入50 mL 95% 乙醇并振荡1 min,使用PTFE 过滤器过滤,将滤液收集于量筒中,定容至50 mL 。
操作步骤:
1.根据试样的吸光度值设定工作曲线,测定标准品对应的吸光度值。
2.将样品移入用量筒配制的乙醇中搅拌均匀,过滤后用苏丹三染色。
3.测定各样品、对照品和空白品的吸光度值,并根据工作曲线计算出总酚含量。
计算公式:
总酚(%)= A×V1×n(1-m/100)/V2×W
其中,
A——样品吸光度;
V1——样品配制容积;
n——对甲酚标准溶液的浓度(mol/L),与能量因数K的比值;m——样品干燥失重率(%);
V2——乙醇的体积;
W——样品质量(g)。
总多酚标准
总多酚标准
总多酚是植物中一类重要的生物活性物质,具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。
在食品、医药、保健品等领域中,总多酚的含量是一个重要的质量指标。
因此,测定总多酚的含量对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
总多酚的测定方法有多种,其中较为常用的是Folin-Denis法和紫外-可见分光光度法。
这些方法的基本原理是利用酚类物质在特定条件下能够与某些试剂发生化学反应,生成具有颜色的化合物,通过测定该化合物的吸光度值,即可推算出样品中总多酚的含量。
在测定总多酚时,需要注意以下几点:
1. 样品处理:样品需要经过适当的处理,如破碎、提取、浓缩等,以便能够获得准确的测定结果。
2. 试剂选择:不同的测定方法需要使用不同的试剂,选择合适的试剂对于保证测定结果的准确性至关重要。
3. 操作规范:操作过程中需要严格遵守实验规程,确保每一步操作的规范性和准确性。
4. 结果解释:根据测定结果,需要对实验数据进行合理的解释和统计分析,以便能够得出正确的结论。
总之,总多酚的测定需要选择合适的测定方法、严格遵守操作规程、对实验数据进行合理的解释和统计分析,才能得出准确的测定结果。
这对于保障产品质量和消费者健康都具有重要意义。
福林酚比色法测定酸浆宿萼中总多酚含量
( S c h o o l o f P u b l i c H e a l t h , J i l i n M e d i c a l U n i v e r s i t y , J i l i n 1 3 2 0 1 3 , J i l i n , C h i n a )
Ab s t r a c t :T h e o p t i mu m c o n d i t i o n o n d e t e r mi n i n g t o t a l p o l y p h e n o l s c o n t e n t i n ห้องสมุดไป่ตู้ a l y x p hy s a l i s b y Fo l i n - c i o c a h e u
De t e r mi n at i o n o f To t al Po l y ph e n o l s i n Ca l y x Ph y s a l i s b y Fo l i n -c i o c a l t e u Me t ho d
Z H A N G Y a n g - t i n g , X I Y a n - l i , G E Ho n g  ̄u a n , F E N G X i a o - y u , M A H o n g - b o
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2 0 1 6年 1 2月 第3 7卷第 2 3期
F o o d R e s e a r c h A n d D e v e l o p m e n t
食品研究与并发
检测 分 析
DOI : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 5 - 6 5 2 1 . 2 0 1 6 . 2 3 . 0 3 2
总酚含量测定-多酚含量测定-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制:取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10mg.用甲醇溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制:精确称取待测样品10mg.用甲醇2溶解并定容到10mL,得1mg/mL的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品,绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水,视样品的溶解性而度。
1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线(以连苯三酚为例,平行测三次)(以连苯三酚为例,A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998,线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间)。
【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;(2)Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 mol/L。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法是一种测定多酚含量的方法,其原理如下:
多酚在福林酚的存在下,发生氧化反应,生成吸收波长为760nm的异色体,异色体的强度与多酚的含量成正比关系。
因此,可以通过测定异色体的吸光度来确定样品中多酚的含量。
具体操作步骤如下:
1.将待测的样品与福林酚溶液混合。
2.按照一定比例加入Na2CO3溶液,使样品呈现碱性pH。
3.在30℃下加入定量的氢氧化钾溶液,使福林酚启动氧化反应。
4. 取样品溶液,通过分光光度计测定其在760nm处的吸光度。
5.用标准多酚物质制成的浓度梯度溶液测定其对应的吸光度,建立标准曲线。
6.根据标准曲线计算样品中多酚的含量。
此方法简便易行、操作简单,广泛应用于食品、药物、化妆品等领域中对多酚含量的测定。
Folin_酚法测定水果及其制品中总多酚含量的条件
1.3.2 总多酚的提取 取试样适量( 葡萄酒吸取 2 mL,
葡萄和柿子称取 2 g 匀浆 , 其他水果称取 5 g 匀浆 ) , 用 80 mL 蒸馏水洗入 100 mL 容量瓶中 , 至 100 ℃沸 水浴中保温 30 min, 取出 , 冷却 , 定容 , 过滤 , 滤液备 用。
果 树 学 报 2008 , 25 ( 1 ) : 126~ 131
Journal of Fruit Science
Folin- 酚法测定水果及其制品中 总多酚含量的条件
李 静 1, 聂继云 1, 2*, 李海飞 1, 徐国峰 1, 王孝娣 1, 毋永龙 1, 王贞旭 1
( 1 农业部果品及苗木质量监督检验测试中心 , 辽宁兴城 125100 ; 摘
收稿日期 : 2007- 08- 17 接受日期 : 2007- 11- 06
基金项目 : 农业部行业标准制订项目“ 水果、 蔬菜及制品中单宁含量的测定” ( 农财发 [2005]58 号 ) 作者简介 : 李静 , 女 , 助理研究员 , 在读硕士研究生。 Tel: 0429- 3598183 , E- mail : lijing1044@126.com
1.1.3
FD 显色剂 称取 100.0 g 钨酸钠和 20.0 g 磷 钼酸 , 溶于 200 mL 蒸馏水 , 加入 50 mL 磷酸 , 加热回
mg/L 没食子 酸 、 1 mL 显 色 剂 及 2.0 mL 7.5% 碳 酸 钠 溶液 ( FD 法 ) 或 3.0 mL 7.5% 碳酸钠溶液 ( FC 法 ) , 于 10 mL 离心管中 , 用蒸馏水定容 , 充分显色 , 进行 600~ 1 000 nm 波长扫描, 观察峰形。 c) 准确度比较 : 通 过添加回收率比较分析 2 种方法的准确度。
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚李巨秀,王柏玉【摘要】摘要:以桑椹为原料,没食子酸为标准物质研究了用福林-酚比色法测定桑椹提取液中多酚类物质含量的最适反应条件。
结果表明,当福林-酚试剂与质量分数为12%的Na2CO3溶液体积比为1:2、反应温度20℃、反应时间2h时,总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系,测定方法的平均回收率为97.63%,相对标准偏差(RSD)为4.5%。
该方法具有所用试剂量少、操作方便、灵敏度高、精密度高、稳定性高等优点,适宜桑椹样品总多酚含量的测定。
【期刊名称】食品科学【年(卷),期】2009(030)018【总页数】4【关键词】桑椹;Folin-Ciocaileu;比色;总多酚含量桑椹(Fructus mori L.)为桑科植物桑的果实,富含多酚类化合物,是桑椹中一类重要的生物活性物质,其主要成分是花色苷[1-2]。
据大量研究报道,多酚化合物具有清除自由基、抗动脉硬化、降血脂、防止衰老和肿瘤等功能[3-6],已经成为当前功能性食品研究的热点。
近年来对于苹果、葡萄、茶叶等的多酚物质的研究较多和深入[7-9],而对桑椹多酚研究的报道较少。
陕西有大面积的桑椹种植区,研究桑椹中的多酚化合物,对提高桑椹经济价值,增加桑蚕业的附加值具有一定的推动作用。
多酚含量的测定方法有高锰酸钾法、酒石酸分光光度法、原子吸收法、紫外分光光度法等。
各种方法都有局限性,有的操作繁杂、费时,有的测定结果的重复性差,有的测定的误差大、灵敏度差,只能在很小的范围内加以采用[10-12]。
本工作通过乙醇提取桑椹果实中的多酚化合物,以没食子酸为标准物采用福林-酚法测定桑椹中多酚类物质的含量,分别研究最佳吸收波长、显色剂、显色时间和温度,并对分析方法的精密度实验、稳定性实验和加标回收率等进行评价,以期寻找操作简单、分析准确度高、速度快的桑椹多酚的分析方法,为桑椹果的开发利用提供得科学依据。
1 材料与方法1.1 材料与试剂桑椹于2008年采摘于西北农林科技大学桑蚕研究所,分装于保鲜袋中,放置于-30℃冰箱中保藏。
Folin-Ciocalteus法测定马铃薯中的总多酚
Folin-Ciocalteus法测定马铃薯中的总多酚李静;聂继云;毋永龙【摘要】An improved UV spectrophotometry method was developed for analysis of total polyphenols in potato. Folin-Ciocalteus method for total polyphenols determination in potato was studied. After a series of optimization experiments, the best determination procedure of Folin-Ciocalteus method was put forward, that is, 5.0 mL water, 1.0 mL coloration reagent, and 3.0 mL 7.5%sodium carbonate solution were added orderly into 1.0 mL extraction of sample or standard gal ic acid,then blended, and measured at 765 nm after coloration for 2 h. Under this procedure, relative standard deviation of the method was 7.7%, and average recovery rate was 100%-108%.This method is applicable to conventional laboratory determination of total polyphenols in potato.%本文建立了紫外分光光度计法准确测定马铃薯中的总多酚。
总酚含量测定-多酚含量测定-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制:取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10mg.用甲醇溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制:精确称取待测样品10mg.用甲醇2溶解并定容到10mL,得1mg/mL的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品,绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水,视样品的溶解性而度。
1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线(以连苯三酚为例,平行测三次)(以连苯三酚为例,A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998,线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间)。
【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;(2)Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 mol/L。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
Folin酚比色法测定多酚含量-操作流程图-李熙灿-Xican Li
福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Fl os Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制:取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10mg.用甲醇溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制:精确称取待测样品10mg.用甲醇2溶解并定容到10mL,得1mg/mL的样品液。
【测定方法与操作流程图】【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品,绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水,视样品的溶解性而度。
图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线(以连苯三酚为例,平行测三次)(以连苯三酚为例,A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998,线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间)。
植物总多酚含量测定方法
福林酚试剂氧化多酚中-OH基团并使其显蓝色,蓝色的深浅与多酚的含量成正相关,没食子酸一般在该方法中被默认为标准物质,采用没食子酸溶液制作标准曲线,然后将多酚含量表示为等价没食子酸的量,即可求得待测样品中总多酚含量。
二.实验仪器:分光光度计三.实验试剂试剂一:酚试剂25mL×1瓶试剂二:显色液 200mL ×1瓶试剂三:1.0mg/mL没食子酸标准溶液 20mL×1瓶四.溶液配制试剂一使用液:将试剂用双蒸水10×稀释,制备成酚应用液,每次测试需使用 2.5mL,根据样品数量计算好,用多少配制多少。
例:需要进行38次测试,则可配制40次使用量:40×2.5mL=100mL,量取10mL试剂一加入90mL双蒸水,充分混匀即可。
试剂三使用液:分别采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL试剂三于100mL容量瓶中,采用双蒸水定容至刻度,摇匀,制成浓度分别为10,20,30,40,50μg/mL的没食子酸应用液。
习惯用使用移液器的老师也可先在15mL离心管中分别加入9.9,9.8,9.7,9.6,9.5mL双蒸水,再采用移液器分别移取100,200,300,400,500 μL 试剂三于相应的离心管中,充分颠倒混匀,制成浓度分别为10,20,30,40,50μg/mL的没食子酸应用液。
五.实验步骤(1)分别取2.5ml试剂一使用液于标准管和测定管中,在测定管中加入0.5ml样品溶液,再取0.5ml试剂三使用液于标准管中,分别将标准管和测定管中的溶液混合均匀,室温静置5分钟,使两个管中的溶液充分反应。
(2)分别在静置后的标准管和测定管中加入2ml试剂二,充分混匀,室温静置60min,使用1cm光径比色皿,765nm处采用分光光度计测定吸光度。
1.必须做标准管,以绘制标准曲线;2.步骤(1)中室温静置3-8分钟均可,但标准管和所有测定管反应时间应保持一致;3.步骤(2)中若加入试剂二后样品颜色较深,可做对照管,对照管将试剂二改为双蒸水;4.步骤(2)中室温静置最短40min,建议60min以保证反应充分。
植物提取物中总多酚测定方法的优化研究
量安全溯源分析方法的新路径。
[参考文献][1]K.R udi ,K.N at er s t ad,S.M .D r om t or p,H.H ol o.D et ect i on of vi abl e and dead Li s t er i a m onocyt ogenes on gouda l i ke chees es by r eal t i m e PC R [J ].Let t er s i n A ppl i ed M i cr obi ol ogy,2005,40(4).[2]B er r ada H ,Sor i ano J M ,Pi c óY ,M a 觡es J .Q uant i f i cat i on of Li s t er i am onocyt ogenes i ns al ads by r eal t i m e quant i t at i ve PCR.[J ].I nt er nat i onal j our nal of f ood m i cr obi ol ogy,2006,107(2).[3]F.Sanger ,S.N i ckl en,A.R.C oul s on.D N ASequenci ng wi t hChai n-Ter m i nat i ng I nhi bi t or s [J ].Pr oceedi ngs of t he N at i onal A cadem y of Sci ences of t he U ni t ed St at es of A m er i ca,1977,74(12).[4]J oe s .J ef f er Fr eder i ck Spr i nger B r i ef s i n m ol ecul ar s ci ence Li br ar y of congr es s cont r ol [2017][5]R ot hber g J onat hanM ,H i nzW ol f gang,R ear i ckToddM ,Schul t zJ onat han,M i l es ki W i l l i am ,D avey M el ,Leam on J ohn H ,J ohns on K i m ,M i l gr ewM ar k J,Edw ar ds M at t hew ,H oon J er em y,Si m ons J an F,M ar r an D avi d,M yer s J as on W ,D avi ds on J ohn F,B r ant i ng A nni ka,N obi l e J ohn R ,Puc Ber nar d P,Li ght D avi d,Cl ar k Tr avi s A ,H uber M ar t i n,Br anci f or t e J ef f r ey T,St oner I s aac B,C aw l ey Si m on E ,Lyons M i chael ,Fu Y ut ao,H om er N i l s ,Sedova M ar i na,M i ao X i n,R eed B r i an,Sabi na J ef f r ey,Fei er s t ei n Er i ka,Schor n M i chel l e,A l anj ar y M .A n i nt egr at eds em i conduct or devi ceenabl i ngnon-opt i cal genom es equenci ng.[J ].N at ur e,2011,475(7356).多酚类物质是指分子结构中有若干个酚性羟基的植物成分的总称,被称为“第七类营养素”,其存在于一些常见的植物性食物中,且以类黄酮、酚酸、儿茶素、花青素、槲皮素以及白藜芦醇等酚类化合物最为常见[1-3]。
多酚(Total phenolic)测定方法(F-C)
多酚(Total phenolic)含量测定方法概要:本方法适应于紫锥菊、红景天等提取物中多酚含量的检测,不适应于葡萄耔、松树皮、绿茶提取物中多酚含量的检测。
一、仪器与试剂紫外-可见光分光光度计UV-2101PC。
10%碳酸钠溶液:取10g无水碳酸钠于90mL水中溶解后放置过夜,过滤备用。
F-C试剂:在1000mL圆底烧瓶中加入350mL水,再加入50gNa2WO4·H2O,12.5gNa2MoO4,25mL 85%H3PO4,50mL浓HCl,加入几粒沸石。
在电炉上加热回流10h,用50mL水冲洗冷凝管,加入75gLi2SO4·H2O,几滴Br2,开口煮沸15min,溶液最终颜色为黄色,无蓝与绿色痕迹。
冷却至室温后加水定容至500mL,过滤置棕色瓶中贮于冰箱保存备用。
二、溶液制备1.对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的没食子酸(或同时测定没食子酸中水分后按无水没食子酸等效计算)约75mg于50mL容量瓶中,加水溶解定容。
精密吸取上述溶液2mL于50mL容量瓶中,用水稀释至刻度即得对照品溶液。
2.样品溶液制备精密称取待测提取物样品适量于50mL容量瓶中,加水约30mL,超声振荡20min后,再加约10ml甲醇超声10min,放置至室温,用甲醇定容(需要时稀释,多酚浓度约为6mg/50ml~10mg/50ml)即得样品溶液。
溶液浑浊时应过滤。
三、样品测定分别精密吸取1、2、3mL对照品溶液、1ml样品溶液、1ml甲醇于100mL容量瓶中,加约60mL水混匀后加入5mLF-C试剂,于30秒后8分钟前加入25mL20%碳酸钠溶液,混匀,用水稀释至刻度,放置2h后在765nm处以试剂空白作参比测吸收值,以对照品瓶中多酚绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品瓶中多酚绝对量(mg)。
多酚含量(%) =(C×50×N)/W×100%C为由工作曲线计算的样品瓶绝对量;W为样品称样量(mg);N为稀释倍数注: 1.新制F-C试剂应校正标准曲线或重新绘制标准曲线。
啤酒中总酚的测定
啤酒中总酚的测定
啤酒中总酚的测定是非常重要的质量检测指标,具有重要的参考意义。
本文主
要介绍啤酒中总酚的测定方法和质量检测原理等内容。
啤酒的总酚含量是指啤酒样品中各种单酚、多酚或有机酸酯构成的总含量,如
黄酮类、烯酰胺类等。
总酚含量与啤酒口感、香气等直接相关,是啤酒质量中主要因素之一。
总酚含量的测定一般采用高效液相色谱法。
比色法是根据样品中总酚含量与染
料结合成染色体后,反映出来的自发色比色测定法。
把样品加入定量的染料溶液中,加热20min,释放总酚后进行测定。
测定时将
样品与0.2%酒石酸作内比色剂,在525 nm处读定,根据比色系数计算得出结果。
此外,还可以采用低压气相色谱法对啤酒中总酚进行测定,此种方法可以准确
测定样品中各种单酚、多酚或有机酸酯的含量。
但是,此方法花费时间长,操作较复杂,不实用。
总酚测定方法的稳定性较差,有可能会造成误差,所以在采样和测定时,应注
意控制样品的光照环境,并保持室温稳定。
以上就是啤酒中总酚的测定方法及原理的简要介绍,啤酒中总酚的测定不仅是
鉴定啤酒质量的一种重要检测,也是啤酒质量控制的标志性指标。
此外,在测定啤酒中总酚含量时一定要考虑因素,以免出现误差。
多酚含量测定方法
多酚提取方法:多酚含量的提取按照Chiou等(2007)年的方法进行,取1g果肉,0-4℃冰浴研磨,加入10ml 75%甲醇,然后放入离心管中,超声波处理15min,然后摇床摇动12h,10, 500g离心10min,取上清液,然后残渣加入10ml 75%甲醇重复提取2次,合并上清液,用50ml蒸馏烧瓶30℃低压蒸馏2h,然后用蒸馏水溶解定溶到10ml,用于多酚含量的测定。
多酚检测方法:色谱条件:C18柱((250×4.6 mm);波长:280;流速:1 mL min-1流动相:A:乙酸/水(1:50, v:v)B:乙腈/甲醇(10:15, v:v)设置梯度洗脱:0 min:90% A and 10% B10 min:80% A and 20% B15 min:70% A and 30% B25 min:60% A and 40% B30 min:50% A and 50% B40 min:50% A and 50% B.标样图谱:(自己做的数据)标准样品重量g 定容体积ml 稀释倍数浓度g/ml ug/ml 出峰时间gallic acid 0.0061 25 100 0.00000244 2.44 4.914546 (+)catechin 0.0067 25 40 0.0000067 6.7 12.91146 ferulic acid 0.0059 25 40 0.0000059 5.9 21.38777 chlerogenic 0.0063 25 100 0.00000252 2.52 11.72349 caffeic acid 0.0097 25 100 0.00000388 3.88 15.92295 香豆酸0.0048 25 100 0.00000192 1.92 22.75522 phlorizin 0.005 25 100 0.000002 2 27.58096。
[解析]总酚含量测定
一、测定方法概述1.依据酚类物质可以被高锰酸钾氧化的性质,高锰酸钾滴定法2.酚类化合物在碱性条件下可以与4-氨基安替比林反应生成红色染料,比色3.酚羟基可与酒石酸铁中的铁离子反应生成蓝色络合物比色4.酚类物质还原福林试剂生成蓝紫色物质,比色二、高锰酸钾滴定法测多酚此方法多应用在茶叶上原理:酚类物质可以被高锰酸钾氧化,烟叶中还有一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化,会使测定结果偏高。
因此滴定须分两步进行:第一步滴定待测液中总还原性物质,第二步用明胶盐溶液将酚类物质沉淀后,测定待测液中其它还原性物质含量,二者之差就是样品中多酚含量。
但是绿原酸不能被沉淀,因此,此法不易用来测定烟草多酚。
0.1%靛红作指示剂。
酚类提取:采用沸水浴方法提取。
三、氨基安替比林比色法此方法用来测样品中挥发性酚类化合物,常常应用在食品,水等挥发酚的测定。
灵敏度最高高。
原理:酚类化合物在碱性溶液中,当有氧化剂铁氰化钾存在时,可以与4-氨基安替比林生成一种红色染料,用分液漏斗将红色染料萃取到氯仿层,在460nm处比色。
用苯酚作标准曲线,计算出样品中挥发性酚类物质含量。
1此方法酚的提取步骤比较麻烦:先在2.5mol/L硫酸溶液中加热回流1小时,将样品中中挥发酚提取出来。
通入水蒸气把酚蒸馏出来,收集并定容。
2苯酚腐蚀性强,为结晶体,不好秤取。
3蒸馏装置不能漏气,且所用的橡皮类物质需要事前用碱水浸泡,并水煮10min。
四、酒石酸比色法原理:酚类物质的羟基与酒石酸铁中的铁离子生成蓝色络合物,根据络合物溶液颜色深浅,在540nm处比色,可测出烟叶中酚类物质含量。
以儿茶酚或没食子酸乙酯作标准溶液。
可以用来测定烟草中的多酚。
此方法酚的提取与福林法测多酚提取步骤一样。
五、福林法测烟叶多酚/总酚1.原理; 在碱性条件下利用多酚的还原性,多酚可以将磷钨钼酸还原成蓝色,蓝色深浅与多酚含量城正相关,可以用分光广度计进行测定。
2.试剂和仪器:试剂:儿茶酚或没食子酸乙酯,钼酸钠,磷钨酸,Na2CO3仪器:水浴锅,721分光光度计,试管,三角瓶,漏斗,滤纸,移液管。
总多酚的测定
一、实验原理多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等,具体又可分为若干种。
多酚类物质含有酚羟基,有的还含有羧基,属于极性有机化合物,常用极性溶剂提取,如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。
由以上溶剂直接提取的多酚物质,实质为各种多酚的混合物(总多酚提取液),不同的原料中所含酚类物质的种类不同,需要进一步的分离鉴定。
常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有:酒石酸亚铁比色法、FD 法、FC 法、普鲁士蓝法等。
其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。
酒石酸亚铁分光光度比色法的原理:过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物,溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定,比如测定茶叶中茶多酚含量时,儿茶酚能较好地代表茶多酚,则以儿茶酚作标准物;而测定藤茶多酚时,则以没食子酸作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器材料:茶叶;仪器:水浴锅,分光光度计,三角瓶,容量瓶,吸管等;试剂:(1)酒石酸亚铁溶液:称取1.00g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5.00g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)混合后加蒸馏水溶解定容到1000mL(2)pH 7.5磷酸盐缓冲液:称取60.20g Na2HPO4·12H2O和5.00g NaH2PO4·12H2O混合后加蒸馏水溶解定容到1000ml。
三、操作步骤(一)标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。
为简化操作,可用在一定操作条件下吸光度值为1.00时,供试液中茶多酚的浓度为7.826 mg/mL”这一经验值,直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
1.福林试液的配制:取钨酸钠10g与钼酸钠2.5g,加水70ml、85%磷酸5ml 与盐酸10ml,置200ml烧瓶中,缓缓加热回流10小时,放冷,再加硫酸锂15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟,至溴除尽,放冷至室温,加水使成100ml。
谷红注射液中总多酚的含量测定
谷红注射液中总多酚的含量测定罗亦琨;郑艳秋;何昱【摘要】Objective To establish determination method for total polyphenols in Guhong Injection, and provide reference for internal quality control of Guhong Injection.[Methods]Using the Folin-Ciocalteu colorimetric method, according to the consistent degree of the maximum absorption wavelengths of hydroxysafflor yel ow A and kaempferol relative to Guhong Injection, we selected the appropriate reference and color reaction condition to content determination.[Rsults]With hydroxysafflor yel ow A as the standard, the content of total polyphenols in 10 batches of samples were 9.94, 9.55, 9.75, 9.67, 9.84, 10.03, 9.81, 9.52, 9.88,10.09mg·mL-1. The average recovery of total polyphenols was 98.11% and RSD was 1.68%(n=6). [Conclusion]The established Folin-Ciocalteu method is simple, accurate, sensitive, and is reliable for detecting total polyphenols in Guhong Injection.%[目的]建立谷红注射液中总多酚含量的测定方法,为谷红注射液内在质量的控制提供依据。
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一、实验原理
多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等,具体又可分为若干种。
多酚类物
质含有酚羟基,有的还含有羧基,属于极性有机化合物,常用极性溶剂提取,如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。
由以上溶剂直接提取的多酚物质,实质为各种多酚的混合物(总多酚提取液),
不同的原料中所含酚类物质的种类不同,需要进一步的分离鉴定。
常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有:酒石酸亚铁比色法、FD 法、FC 法、普鲁士蓝法等。
其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。
酒石酸亚铁分光光度比色法的原理:过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应
生成稳定的紫褐色络合物,溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚
时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定,比如测定茶叶中茶多酚含量时,儿茶酚能较好地代表茶多酚,则以儿茶酚作标准物;而测定藤茶多酚时,则以没食子酸作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器
材料:茶叶;
仪器:水浴锅,分光光度计,三角瓶,容量瓶,吸管等;
试剂:
(1)酒石酸亚铁溶液:称取1.00g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5.00g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)混合后加蒸馏水溶解定容到1000mL
(2)pH 7.5磷酸盐缓冲液:称取60.20g Na2HPO4·12H2O和
5.00g NaH2PO4·12H2O混合后加蒸馏水溶解定容到1000ml。
三、操作步骤
(一)标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用
标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。
为简化操作,可用在一定操作条件下吸光度值为1.00时,供试液中茶多酚的浓度为7.826 mg/mL”这一经验值,直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
1.福林试液的配制:取钨酸钠10g与钼酸钠
2.5g,加水70ml、85%磷酸
5ml与盐酸10ml,置200ml烧瓶中,缓缓加热回流10小时,放冷,再加硫酸锂
15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟,至溴除尽,放冷至室温,加水使成100ml。
滤过,滤液作为贮备液。
置棕色瓶中,于冰箱中保存。
临用前,取贮备液2.5ml,加水稀释至10ml,摇匀,即得。
用10mL乙醇溶液溶解0.5000g 没食子酸,定容至100mL,分别移取3.0mL到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。
加入福林-薛卡多(Folin-Ciocalteu)试剂显色,在765nm波长下测定吸光度。
每个浓度做三个平行试验,取平均值,根据标准曲线。
取样品溶液1mL,按照上述的制作方法,测定其吸光度,每个样品做三个平行试验,取平均值,计算样品中的多酚含量。
反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原,生成蓝色的化合物,颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关,在波长760 nm 左右有最大吸收。
2. 酒石酸亚铁比色法。
其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。
茶多酚的含量。
茶多酚标准曲线的绘制。
分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。
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