生物制药复习题(有答案)

《生物技术制药》习题（课后作业）
一、下列概念：
⑴生物制药：
⑵生物药物：包括生物技术药物，天然生化药物，微生物药物，海洋药物和生物制品。

(3)生物技术制药：采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品。

(4)生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。

（5）现代生物技术：以现代生命科学为基础, 把生物体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的设计，定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到某种目的)之综合性科学技术。

（6）基因表达：⒈转录：在RNA聚合酶的催化下以DNA为模板合成mRNA的过程。

2、翻译：以mRNA为模板,tRNA作为运载工具,将活化的氨基酸在核糖体上合成蛋白质的过程
（7）质粒的分裂不稳定：基因工程菌分裂时产生一定比例不含质粒的子代菌的现象,即重组分子从受体细胞中逃逸。

（8）质粒的结构不稳定：DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。

重组DNA分子某一区域发生变异，导致表观生物学功能的丧失；
（9）显微注射：显微注射就是借助光学显微镜的放大作用，利用显微操作仪，直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞或卵母细胞中，然后生产动物个体的技术。

经过显微注射DNA发育而成的动物中，有少数整合了被注射的DNA分子，成为转基因动物。

（10）悬浮细胞：
（11）补料分批培养：是指分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。

（12）连续培养
行下去的一种培养方法。

（13）接触抑制：细胞在生长分裂时达到相互接触而停止分裂的现象,称为接触性抑制
（14）单克隆抗体：由一个抗原决定簇刺激的、单一的B细胞和骨髓瘤细胞融合增殖后所产生的、高度均一的抗体。

（15）多克隆抗体：一种抗原具有多个抗原决定簇,每个抗原决定簇都能刺激一个B细胞产生一种抗体。

这样所获得的免疫血清是多种抗体的混和物。

（16）人-鼠嵌合抗体：人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。

（17）改型抗体：CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体。

（18）单域抗体：即为VH，约为完整分子的1/12。

它只由一个结构域构成，故称单域抗体。

单域抗体尽管亲和力有所降低，但仍保持着原单抗的特异性。

（19）模板替换
（20）表面重塑
（21）补偿替换
（22）定位保留
（23）双功能抗体：是指能同时识别2种抗原的抗体。

1种为对应肿瘤相关抗原。

另1种为对应效应成分。

（24）最小识别单位：约为完整分子的1/80-1/70大小，一般由一个CDR构成，它也保持着抗体的特异性。

（25）抗体融合蛋白：抗体的一部分被非抗体序列替代，所形成的融合蛋白具有新的特性,称之为抗体融合蛋白。

（26）免疫粘附素：将人抗体恒定区(主要是Fc段)N-端连接于人细胞表面的受体分子或细胞粘附分子上，在真核细胞中表达出正确折叠的融合抗体蛋白分子，这种分子可同时发挥抗体的效应功能及其它相应的效应功能，这种分子被称为免疫粘附素(immunoadhension)或新效能抗体。

（27）免疫毒素：免疫毒素（immunotoxin)是以植物毒素或细菌毒素为毒性分子，以抗体或细胞因子为载体分子的一类蛋白质，是一种新型的抗肿瘤导向性药物
（28）催化抗体：天然抗体体现的是结合活性，而酶发挥的是催化活性。

如何把这两者的特点集为一体，从而使抗体也能成为具有催化活性的物质，同时也能使酶与有关的抗原结合。

即催化抗体
（29）噬菌体抗体库：通过PCR将全套人抗体重链和轻链V区基因克隆出来，并在噬菌体表面表达、分泌，经筛选后获得特异
性抗体。

（30）悬浮培养：细胞悬浮于培养基中生长或维持。

（31）贴壁培养：
（32）生源
（33）固定化酶：是指限制或者固定于特定空间位置的酶，具体来说，就是指经过物理、化学方法处理，使酶变成不易随水流失的固定化催化剂。

（34）固定化细胞：是指固定在水不溶性载体上，在一定的空间范围进行生命活动（生长、繁殖和新陈代谢等）的细胞。

(35)生物制品：
的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。

（36）内核
（37）分子剪裁
二. 问答题(作业题)
第一章（绪论）：
1、生物技术可分为哪几个发展阶段
１传统生物技术阶段
２近代生物技术阶段
３现代生物技术
2、生物技术制药的特征。

生物技术医药产业是产业化、商品化的高新技术产业之一。

行业进入壁垒高：高技术，高投入，政府直接干预。

高风险。

长周期。

高收益---‘四高一长’的特点
第二章：
1、生物药物有哪些特性？
1.药理学特性
⑴治疗的针对性强，疗效高：生理生化机制合理，疗效可靠。

举例:（细胞色素C：治疗缺氧性疾病）
⑵药理活性高：ATP直接供能，效果确切、显著
⑶毒副作用小，营养价值高
生物药物主要有:蛋白质、核酸、糖类、脂类
⑷生理副作用常有发生：免疫反应、过敏反应
2.原料的生物学特性：（1）原料中有效成分含量低，杂质多（2）原料的多样性（3）原料的易腐蚀性
3.在生产制备中特殊性：(1)提取纯化工艺复杂(2)稳定性差(3)易变质腐败(4)注射用药的特殊要求
4.检验的特殊性：(1)理化性质指标(2)生物活性指标(3)安全性指标
2、生物药物原料的选择、预处理与保存方法有哪些？
(1)原料选择
原则：有效成分含量高、新鲜
(2)原料的预处理与保存
预处理:就地采集后去除结缔组织、脂肪组织等不用的成分，将有用成分保鲜处理；收集微生物原料时，要及时将菌体与培养液分开，进行保鲜处理。

保存: ①冷冻法-40度速冻
②有机溶剂脱水法，常用丙酮，适用于原料少而价值高、有机溶剂对活性物质没有破坏作用的原料
③防腐剂保鲜法，常用乙醇、苯酚。

适用于液体原料，如发酵液，提取液。

3、生物药物的分离纯化方法有哪些？
分离：稀释倒平皿法平板划线法单细胞挑取法利用选择培养基分离法
纯化：1.若是你不知道你所要纯化的微生物的特征，最简单的不知道它的菌落特征和形态大小，那现根据你要分离菌的特性，找适合的初筛培养基，找到你要纯化的菌。

如
划平板，直到长出当个菌落，并且在镜下没有杂菌即可；或者挑菌稀释涂布得到当个菌落也行。

4、蛋白质、核酸、和氨基酸类药物的分离纯化方法？
1,蛋白质类：
⑴沉淀法原理是使蛋白质胶体颗粒的表面水化膜或表面电荷破坏，从而使蛋白质沉淀。

常用：盐析法、有机溶剂沉淀法、等点电沉淀法、靶物质结合沉淀法(抗原-抗体)等。

⑵按分子大小分离方法：有超滤法、透析法（膜分离法）、凝胶过滤法、超速离心法等。

⑶按分子所带电荷进行分离的方法：氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质，具有等电点。

在远离等电点的pH时便会带正电荷或带负电荷。

包括离子交换层析法、电泳法、等电聚焦等。

⑷亲和层析法：大部分生物活性物质都有其作用的靶物质。

如酶和底物、抗原和抗体、激素与受体等，它们之间有特异的亲和作用。

利用该性质进行的特异层析分离技术称为亲和层析。

专一性强。

2，核酸类：主要方法有：提取法和发酵法
⑴提取法生产DNA和RNA主要技术是先提取核酸与蛋白质复合物,再解离核酸与蛋白质,然后分离RNA与DNA。

⑵发酵法主要用于生产单核苷酸。

3，糖类：
⑴提取方法：非降解法和降解法
非降解法:适用于从含一种粘多糖的动物组织中提取粘多糖。

溶剂为水和盐溶液。

降解法:适用于从组织中提取结合比较牢固的粘多糖。

碱降解、酶降解。

⑵分离方法：常用的分离方法：沉淀法；离子交换层析法
①乙醇沉淀法：4～5倍体积的乙醇可以使任何结缔组织中的粘多糖完全沉淀。

②离子交换层析法：粘多糖的聚阴离子能很好地被阴离子交换吸附剂吸附和分离。

例如Dowex I-X2离子交换树脂、DEAE -离子交换纤维素。

用NaCl进行梯度洗脱。

4，氨基酸类：
⑴氨基酸的生产方法
①蛋白质水解法:
酸水解：水解完全L-型氨基酸,色氨酸破坏。

碱水解：产生消旋作用。

酶水解：不完全
②发酵法:需特异菌株
③化学合成法:得到D,L-型氨基酸
④酶促合成法:工艺简单、转化率高、易提纯。

⑵氨基酸的分离方法
①沉淀法：依溶解度差异沉淀特殊试剂沉淀
②吸附法：氨基酸对吸附剂吸附力的差异进行分离
③离子交换法：氨基酸属于两性电解质，常用强酸型阳离子交换树脂。

5、人体来源类药物的特点是什么？
⒈特点：⑴安全性好⑵效价高疗效可靠⑶稳定性好
第三章：
1、基因工程制药的基本过程是什么？
基因工程技术是将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。

⒈目的基因和载体的获得
⒉构建DNA重组体
⒊DNA重组体转入宿主菌
⒋构建工程菌
⒌工程菌发酵
⒍表达产物的分离纯化
⒎产品的检验等
2、目的基因的获得的方法？
克隆真核基因常用方法：逆转录法和化学合成法。

一、逆（反）转录法（酶促合成法）
逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA，再反转录成cDNA，然后进行cDNA的克隆表达。

二、化学合成法
较小的蛋白质或多肽的编码基因可以用化学合成法合成。

必须知道目的基因的核苷酸顺序或目的蛋白质的氨基酸顺序。

用化学法合成目的基因DNA不同部位的两条链的寡核苷酸短片段，再退火成为两端形成粘性末端的DNA双链片段，然后将这些双链片段按正确的次序进行退火使连接成较长的DNA片段，再用连接酶连接成完整的基因。

3、逆转录法获得目的基因的过程是什么？
⒈mRNA的纯化
⒉cDNA第一链的合成
⒊cDNA第二链的合成
⒋cDNA的克隆
⒌将重组体导入宿主细胞
⒍cDNA文库的鉴定
⒎目的cDNA克隆的分离和鉴定
4、基因表达的宿主细胞分类？
宿主细胞分为两大类：
第一类为原核细胞：常用有大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等；
第二类为真核细胞：常用有酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞等。

5、大肠杆菌的表达特点
表达基因产物形式多样:细胞内不溶性表达(包含体)、细胞内可溶性表达、细胞周质表达等,少数情况分泌到细胞外。

真核生物的目的蛋白在原核细胞中主要是包含体、融合蛋白、寡聚型外源蛋白、整合型外源蛋白、分泌型外源蛋白等。

大肠杆菌中的表达不存在信号肽，产品多为胞内产物，提取困难。

6、大肠杆菌高效表达外源基因的基本策略？
(1)优化表达载体；
(2)提高稀有密码子的表达频率；
(3)构建目的基因高效表达受体菌；
(4)提高外源基因表达产物的稳定性；
(5)优化工程菌的发酵过程。

7、如何提高大肠杆菌表达产物的稳定性？
表达产物的稳定性；组建融合蛋白；把基因产物搬运到胞浆周质空间；位点特异性突变，改变真核蛋白质中二硫键位置；
采用蛋白酶缺陷型大肠杆菌。

调节细胞的代谢负荷；优化工程菌株的培养条件。

8、影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？
外源基因的剂量；外源基因的表达效率：启动子的强弱；核糖体结合位点的有效性；SD序列和起始密码的间距；密码子的组成；
9、影响目的基因在酵母菌中表达的因素？
⑴外源基因的拷贝数
⑵外源基因的表达效率①启动子（组成型和诱导型）②分泌信号的效率③终止序列的影响
⑶外源蛋白的糖基化
⑷宿主菌株的影响①菌体生长力强②菌体内源蛋白酶要较弱③菌体性能稳定④分泌能力强
10、质粒不稳定产生的原因及提高质粒稳定性的方法是什么？
遗传不稳定产生的机制：
(1)受体细胞中的限制修饰系统对外源重组DNA分子的降解；
(2)外源基因的高效表达干扰受体细胞正常生命活动；
(3)重组质粒在受体细胞分裂时不均匀分配；
(4)受体细胞中内源性的转座子元件促使重组分子缺失重排。

11、主要基因工程表达体系（大肠杆菌、酵母和哺乳动物）比较？
1：真核基因在大肠杆菌中的表达形式
（1）以融合蛋白的形式表达药物基因
以原核多肽和真核蛋白结合在一起称融合蛋白。

优点：操作简便，表达蛋白在菌体内稳定，易实现高效表达；
缺点：只能作抗原用
⑵以非融合蛋白的形式表达药物基因
非融合蛋白指在大肠杆菌中表达的蛋白质以真核蛋白的mRNA的AUG为起始，在其氨基端不含细菌多肽序列。

优点：保持原有蛋白活性；
缺点：易被蛋白酶破坏。

此外，N端常带甲硫氨酸，容易引起人体免疫反应。

⑶分泌型表达药物基因
优点：在周质中稳定，有活性，不含甲硫氨酸残基；
缺点：产量不高，信号肽不被切割。

2.酵母表达系统的优点
(1)最简单的真核模式生物，基因组小，遗传背景清楚。

(2)基因表达调控机制比较清楚，遗传操作相对简单。

(3)具备真核蛋白翻译后加工功能。

(4)不含特异病毒、不产生内毒素，安全。

(5)繁殖迅速，技术成熟，成本低廉。

(6)产物分泌到细胞外，简化分离纯化工艺。

3、动物细胞中的基因表达
哺乳动物细胞外源基因表达产物可由重组转化的细胞分泌到培养液中，使产物易纯化。

基因产物糖基化接近天然产物。

细胞生长慢，生产率低，条件刻苛，费用高，培养液浓度较小。

表达的外源细胞均为传代细胞表达产物是否致癌尚有疑问。

12、转基因动物的操作原理与方法？
第四章：
1、动物细胞的生理特点？
⒈细胞的分裂周期长
⒉细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象。

⒊正常二倍体细胞的生长寿命是有限的。

⒋动物细胞对周围环境十分敏感，培养难度大。

⒌动物细胞对培养基的要求高。

6.动物细胞蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同
2、生产用动物细胞的获得？
⒈原代细胞:是直接取自动物组织器官,经过粉碎消化而获得的细胞悬液（109/g）。

组织中单一细胞比例小需要大量动物，费钱费力。

鸡胚细胞、原代兔肾细胞、鼠肾细胞、、淋巴细胞。

⒉二倍体细胞系:原代细胞经过传代筛选克隆，从多种细胞成分的组织中，挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株(WI-38、
MRC-5、2BS)。

⒊转化细胞系：通过某个转化过程形成的，常由于染色体断裂变成异倍体，失去正常细胞特点，而获得无限增殖能力。

转化可以是自发的、人工的。

也可从肿瘤组织中建系。

4. 融合细胞系：指两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的过程。

如仙台病毒融合法和聚乙二醇（PEG)融合法以及电融合法
5. 重组工程细胞系
3、简要叙述动物细胞的培养条件和培养基对动物细胞培养的影响。

细胞体外培养基本条件:
①设备、器材、溶液无菌
②营养充足，防止有害物质
③适量的氧气
④随时清除代谢有害物质（如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等）
⑤良好的生存外环境，pH、渗透压
⑥及时分种，保持合适的密度
4、简要叙述动物细胞大规模培养的方法？
⒈悬浮培养
让细胞自由的悬浮于培养基内生长繁殖。

细胞密度一般较低，主要设备是通气搅拌罐式生物反应器和气升式生物反应器
⒉贴壁培养
让细胞贴附在某种基质上生长繁殖的培养方法。

需要合适的贴附材料和足够的面积，培养条件不易均一，限制了扩大培养，常用设备是固定床式生物反应器
⒊贴壁-悬浮培养
⑴微载体培养
可创造相当大的贴附面积，细胞与载体自由悬浮在培养基内
葡聚糖类、聚苯乙烯类、胶原类
5、请画出气升式反应器的简图，并说说溶氧浓度和PH值是如何控制的？
在气升式生物反应器中，溶氧的控制可以通过自动调节进入空气的速率来实现；PH值可通过在进气中加入二氧化碳或加入氢氧化钠来控制。

第五章：
1、单克隆抗体的不足？
2、小分子抗体的优点？
可以用细菌发酵生产，成本低;
分子小，穿透力强;
不含Fc，没有Fc带来的效应;
在体内循环的半衰期短，易清除，利于解毒排出;
易于与毒素或酶基因连接，便于直接获得免疫毒素或酶标抗体等。

3、叙述改造的鼠源性单克隆抗体的类型及结构特点？
人一鼠嵌合抗体与鼠单抗相比，免疫原性大大降低，利于在人体内应用，嵌合抗体独特的抗体亲和力保持得很好，但因鼠单抗可变区的存在，应用时仍有较强的人抗鼠抗体反应。

4、噬菌体表面展示文库技术的要点？
（1）从免疫或未被免疫的B细胞中PCR扩增抗体全套基因片段
（2）随机克隆入相应载体形成组合文库
（3）将基因组合文库插入噬菌体编码膜蛋白的基因 g3或g8 的先导系列的紧靠下游
（4）外源基因表达多肽以融合蛋白形式展示在外壳蛋白N端
（5）用固相化抗原经“亲和结合一洗脱一扩增”数个循环直接、方便、简捷、高效地筛选出表达特异性好、亲和力强的抗体噬菌体库。

（6）筛选到的噬菌体再将基因g3或g8切除后，转入大肠杆菌，
（7）使翻译出的抗体分泌到细菌的周质腔内，形成游离的抗体片段，经过纯化即可获得目的抗体。

5、噬菌体抗体库技术的特点与优点？
特点：1、模拟天然全套抗体库
抗体文库 1011库容，能包含B细胞全部克隆。

建库的外源基因来自人外周血、骨髓或脾脏的淋巴细胞提取的mRNA反转录形成的cDNA扩增，使用的通用引物采自多个人体，具有人的种属普遍性。

VH和VL随机重组增加抗体的多样性。

2、避开了人工免疫和杂交瘤技术
由于抗体库的大容量和极高的筛选效率，使得可以调出任意抗体基因，用基因工程方法制备抗体，因而能避免使用人工免疫动物和细胞融合技术。

3、可获得高亲和力的人源化抗体
在噬菌体抗体库中，VH和VL基因的随机重组模拟了体内抗体亲和力成熟过程，所用抗体基因又都是来自人体，因此产生的抗体必然都是高亲和力的。

该项技术的优点:
将抗体的基因型和表型紧密联系起来;
可绕过杂交瘤技术，不需要复杂的基因工程技术;
抗体基因筛选的范围广;
技术稳定、可靠、生产周期短;可规模化生产;
适用范围广，既可用于抗体制备，也适用于其它蛋白如激素、酶、药物、随机多肽等的生产。

不经过细胞融合及动物免疫等步骤
6、抗体诊断试剂的类型？
一、血清学鉴定用的抗体试剂：用已知抗体来鉴定未知的抗原型
1、鉴定病原菌的抗体试剂
2、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的反向被动血凝诊断试剂
二、免疫标记技术用的抗体试剂
1、荧光抗体诊断试剂
2、免疫酶抗体诊断试剂
（1）免疫组化用抗体诊断试剂：
（2）酶免疫测定用抗体诊断试剂：
3、放射免疫用抗体诊断试剂
三、导向诊断药物
第六章：
1、酶和细胞的固定化方法？
细胞：1）载体结合法
（2）交联法
（3）包埋法
（4）选择性热变性法
酶：1、载体结合法
（1）物理吸附法
（2）离子结合法
（3）共价键结合法
2、交联法
3、包埋法
（1）凝胶包埋法（网格法）（2）微囊化包埋法（半透膜包埋法）（3）纤维包埋法
2、固定化酶的特点？
（1）酶活力的变化----受载体和固定化方法影响，经过固定化之后，酶的活力大都下降。

（2）底物特异性变化----小分子底物专一性没有明显改变，大分子底物难以接近酶分子，催化速度降低。

（3）最适PH值----受载体和反应产物性质的影响，酶经过固定化之后，其最适pH值会发生变化。

（4）最适温度----酶经过固定化之后，其空间结构更加稳定，因此，其最适温度也会提高。

（5）米氏常数----改变不显著。

（6）最大反应速度----会产生一定的差异。

（7）酶稳定性的变化
A、操作稳定性----当固定化酶的稳定半衰期达到1个月以上时，就具有工业应用价值。

B、贮藏稳定性----固定化的胰蛋白酶在20℃保存数月，其活性不变
C、对热稳定性----由于加热提高了反应速度，从而提高反应效率。

D、对蛋白酶的稳定性----大多数天然酶在经过固定化之后，它们对于蛋白酶的耐受力均有大幅度提高。

这在工业生产中是极为有利的。

3、固定化酶的性质有些什么变化？
（1）酶活力的变化----受载体和固定化方法影响，经过固定化之后，酶的活力大都下降。

（2）底物特异性变化----小分子底物专一性没有明显改变，大分子底物难以接近酶分子，催化速度降低。

（3）最适PH值----受载体和反应产物性质的影响，酶经过固定化之后，其最适pH值会发生变化。

（4）最适温度----酶经过固定化之后，其空间结构更加稳定，因此，其最适温度也会提高。

（5）米氏常数----改变不显著。

（6）最大反应速度----会产生一定的差异。

7）酶稳定性的变化
A、操作稳定性----当固定化酶的稳定半衰期达到1个月以上时，就具有工业应用价值。

B、贮藏稳定性----固定化的胰蛋白酶在20℃保存数月，其活性不变。

C、对热稳定性----由于加热提高了反应速度，从而提高反应效率。

D、对蛋白酶的稳定性----大多数天然酶在经过固定化之后，它们对于蛋白酶的耐受力均有大幅度提高。

这在工业生产中是极为有利的。

4、固定化细胞的特点？
（1）最适pH：细胞固定化后的最适pH变化无特定规律，需针对不同的细胞选择不同的固定化方法。

（2）最适温度：一般与游离细胞相同
（3）稳定性：一般比游离细胞高
5、固定化细胞的制备技术？
6、固定化酶活力的测定方法？
在酶促反应中，其底物或者产物具有光吸收、旋光、电位差、荧光等变化，可以使用分光光度计进行直接测定
7、固定化酶反应器的类型和选择依据？
根据进料、出料方式
间隙式间隙式搅拌罐反应器（少BSTR）
连续式连续流动搅拌罐式反应器(CSTR)
填充床反应器（最普遍PBR）
连续流动搅拌罐-超滤膜反应器
循环反应器(PCR) (CSTR/UF)
流化床反应器(FBR)
（二）反应器的选择依据
1.根据固定化酶的形状选择
溶液酶——BSTR
颗粒状、片状——CSTR、PBR
膜状、纤维状——PBR
颗粒小、易变形、易粘结——FBR
2.根据底物的物理性质
溶解性、浊液性——各种
颗粒状、胶状——CSTR、FBR、RCR
3.根据酶反应动力学特性选择
填充床式（平推流特性）——产物抑制酶
产物对反应抑制——PFR（PBR）
底物对酶抑制——CSTR
CSTR——催化反应速度随搅拌速度加快而增加
PFR——催化反应速度随流速加快而增加
4.根据外界环境对酶稳定性的影响选择
防止固定化酶脱落
5.根据操作要求及反应器费用选择
CSTR——补充原料等不中断，便宜
BSTR——溶液酶
PFR——转化率高
FBR——物质交换及热交换好，动力消耗大
RCR——转化率高，成本高
第七章：
1、制药微生物获得的方法？
符合要求的菌种一般可以从以下途径获得：
1、从菌种保存机构的已知菌种中分离；
2、从自然界中分离筛选；
3、从生产过程中分离筛选有益的菌种。

目的不同，筛选的方案也不同。

2、次级代谢产物的主要代谢调节机制？
1、初级代谢对次级代谢的调节
2、碳代谢物的调节
3、氮代谢物的调节
4、磷酸盐的调节
第八章：
1、蛋白质突变体的设计步骤
2、蛋白质设计原理
内核假设*
（1）内部密堆积，并且没有重叠。

（2）氢键都是最大满足的
（3）疏水及亲水基团需要合理地分布在溶剂可及表面及不可及表面。