尿足细胞及其标志蛋白podocalyxin测定对2型糖尿病肾病的诊断价值

尿足细胞及其标志蛋白podocalyxin测定对2型糖尿病肾病
的诊断价值
杨伏猛;刘倩;王彦;周彦;吴惠毅
【摘要】目的探讨尿足细胞及其标志蛋白(podocalyxin,PCX)测定对2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值.方法选取160例临床确诊为2型糖尿病的患者,依据尿清蛋白(Alb)/肌酐(Cr)比值(UACR)将患者分为正常清蛋白尿组(NA)、微量清蛋白尿组(MA)和大量清蛋白尿组(LA);选取同期体检健康者50人作为对照组.用流式细胞术检测尿中足细胞,ELISA法检测尿中PCX含量,两者之间相关性采用pearson相关分析.结果 NA组、MA组、LA组以及健康人对照组尿足细胞检测结果分别为(0.96±0.36)、(3.09 ±0.86)、(5.53±1.44)和(0.65±0.31) units/μL,尿PCX检测结果分别为(0.62±0.13)、(1.49±0.47)、(2.19±0.47)和(0.46±0.08) ng/μmol Cr,糖尿病患者尿足细胞及PCX显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),且随着病程进展而升高.Pearson相关分析结果表明,尿足细胞和PCX呈正相关(r=0.86,P＜0.01).在NA患者中,足细胞及PCX阳性率分别为51.9％、73.1％,差异有统计学意义(P＜0.05);两者联合检测阳性率为76.9％.结论糖尿病患者肾损伤时尿足细胞和PCX明显增加,两者联合检测对于2型糖尿病肾病早期诊断具有重要价值.
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】2016(034)005
【总页数】4页(P378-381)
【关键词】糖尿病肾病;足细胞;足细胞标志蛋白
【作者】杨伏猛;刘倩;王彦;周彦;吴惠毅
【作者单位】江苏大学医学院,江苏镇江213000;连云港市第二人民医院检验科,江
苏连云港222000;连云港市第二人民医院检验科,江苏连云港222000;连云港市第
二人民医院检验科,江苏连云港222000;连云港市第二人民医院检验科,江苏连云港222000;连云港市第一人民医院检验科,江苏连云港222000
【正文语种】中文
【中图分类】R446
糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)的
主要并发症之一，是导致终末期肾脏衰竭的主要原因。

在DN发生、发展过程中，足细胞被证实发生了功能和结构的损伤，在DN患者中，肾小球足细胞的密度和
数量发生显著下降[1]。

足细胞(podocyte)位于肾小球毛细血管壁最外层，参与肾
小球血液滤过屏障的形成，主要维持肾小球的滤过膜结构和正常功能。

当足细胞受到损伤时，会在形态方面发生明显的变化，严重时甚至从基底膜脱落而随尿液排出[2]。

Podocalyxin(PCX)是足细胞标志蛋白，位于足细胞的胞膜顶端，伴随着足细胞的损伤而出现在尿液中[3]。

研究表明，尿清蛋白在DN早期诊断方面具有一定
的局限性，尿液中可能存在一些更敏感的标志物先于尿清蛋白的出现[4]。

DN早
期诊断标志物研究一直是国内外研究的热点。

研究表明，尿沉渣中足细胞及其标志蛋白PCX检测可以反映糖尿病患者早期肾损伤，但两种结果对于DN诊断有何差
别的研究甚少。

为此，我们同时检测尿足细胞及其标志蛋白PCX，探讨其对DN
诊断价值。

DN早期,肾脏最主要病理学改变是肾小球基底膜增厚和系膜基质的扩张，足细胞
参与组成了肾小球滤过屏障，肾小球渗透性的增加会导致足细胞的损伤，糖尿病和
肾小球滤过屏障的损害有着密切的联系，它会引起足细胞的损伤和丢失，最终导致肾小球渗透性的增加，导致蛋白尿的出现，也是屏障受损和糖尿病肾病的特征性标志[6]。

足细胞参与构成了肾小球毛细血管壁的外层，对大分子的渗透性起着决定
性的作用，足细胞表面的标志蛋白PCX是一种带有高负电荷的糖蛋白，其主要作
用是防止足细胞足突的坍塌，当肾小球发生病变时，可伴有足细胞的脱落，并随尿液排出。

因此，可在尿中对足细胞及其碎片(以PCX标记)进行检测[5]。

Dalla等[7]发现在糖尿病微量清蛋白尿阶段，肾小球足细胞密度已经减少，到了大量蛋白尿阶段，其密度下降更为显著。

近期研究发现，在患有糖尿病的动物模型中，足细胞的自噬在维护溶酶体的自稳方面起着关键性作用，当足细胞丢失所造成的功能受损时，会导致DN出现大量蛋白尿[8]。

本研究利用足细胞及其标志蛋白PCX
的特性，通过流式细胞技术检测足细胞，实验结果表明，在DN的早期，脱落的
足细胞已经可以在尿中测出，伴随着疾病的进展，尿中足细胞的数量也随之增加。

因此，该指标对于DN的早期诊断具有重要的临床价值。

Habara等[9]利用人PCX单克隆抗体和荧光激活细胞分类器进行尿中PCX表达呈阳性成分的检测，结果证明尿中PCX表达阳性成分越多，肾小球的损害越为严重。

我们采用ELISA法测定尿中PCX,结果表明，在DN早期尿PCX显著高于健康人
对照组(P<0.05)，随着DN进展，其含量不断升高。

尿足细胞和PCX相关分析结果显示，两者呈正相关(r=0.86，P<0.01)。

在NA组患者，尿足细胞及PCX阳性率分别为51.9%、73.1%，后者明显高于前者，差异有统计学意义(P<0.05)，PCX 具有更高的诊断灵敏度，提示PCX在DN早期诊断价值要优于尿足细胞。

造成差
异产生的原因可能包括：(1)在DN早期，足细胞首先发生结构和功能的损伤，其
标志蛋白PCX位于足细胞的包膜顶端，而PCX的出现可能先于整个足细胞的脱落；
(2)损伤的足细胞脱落进入尿液中，容易破坏形成碎片，其稳定性可能没有标志蛋
白PCX稳定；(3)不同标记抗体造成的差异等。

Asao等[10]应用免疫荧光法测定
尿足细胞和ELISA法测定PCX在成人IgA肾病患者中的表达水平并进行了相关性研究，发现两个指标无相关性(r=0.27，P=0.05)，相关系数低于本研究结果，分析其原因可能是免疫荧光法检测结果受到主观影响因素较多，结果误差较大。

在肾脏疾病的起始阶段，肾小球的病变要先于肾小管的损害,研究发现，在DN的早期，已经出现了肾小管的损害[11-12]。

Hara等研究结果表明，尿中PCX的含量与β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、NAG等肾小管损伤的标志物具有一定的相关性,在正常蛋白尿的糖尿病患者中，有53.8%的患者尿PCX出现了升高，说明在DN的早期诊断中，尿PCX的敏感性要高于尿微量清蛋白,Hara等推测，在DN 早期，可能由于炎症的刺激，包括高糖状态，引起了肾小球和肾小管的损害[1]。

Hara检测PCX阳性率低于本研究结果，其原因我们推测一是选择的研究对象群体存在差异，另外一点是我们研究的病例数相对较少。

对NA组患者联合检测尿足细胞及PCX结果表明，其阳性率可提高到76.9%，结果提示，尿足细胞及PCX对DN早期诊断存在一定差异，联合检测有助于DN早期诊断。

综上所述，在糖尿病患者，单一检测尿足细胞的阳性率要低于PCX，两者联合检测可以有效提高诊断敏感性，尿足细胞及PCX可以作为DN早期诊断的生物学标志物而应用于临床。