日落黄褪色光度法检测h2o2-fe(ⅱ)羟自由基

日落黄褪色光度法检测h2o2-
fe(ⅱ)羟自由基
随着人们对自由基研究的日渐深入，发现损害人体健康的自由基几乎都与活性氧自由基有关，它对人体的损害本质是一种氧化过程，·OH氧化性强，易与蛋白、糖和氨基酸等进行反应，损伤细胞，引发各种疾病。

对其的检测和抑制一直以来都受到人们的关注。

文章利用Fenton反应中加色素日落黄(FCF)，产生的羟自由基(·OH)氧化日落黄发生减色效应。

加入抑制·OH的还原剂，测定日落黄吸光度的变化间接测定羟自由基的产生量。

对抗坏血酸，盐酸羟胺在不同溶剂中的抗羟基自由基氧化性能进行了比较，为羟自由基(·OH)的检测，药剂的选择提供科学依据。

1试验部分
1．1仪器与试剂
TU一1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用有限责任公司)；HH—S恒温水浴锅(金坛市恒丰仪器厂)；722s可见分光光度计(美国VARIAN公司)；pHS一2ST数显酸度计(上海天达仪器)；XS电子天平(瑞士普利赛斯)。

日落黄(天津多福源实业)：配制O．3mmlo／L的的溶液；H：0：(体积分数30％，使用时适当稀释)；3．8mmol／LEDTA—Fe(II)溶液；三酸缓冲溶液；抗氧化剂溶液：抗坏血酸和盐酸羟胺分别配成1．0mg／mL的溶液；所用试剂均为分析纯。

1．2试验方法
10mL比色管中，顺次加3mL三酸缓冲溶液(pH=2．00)，
3．8mmol／LEDTA—Fe(II)溶液0．7mL，2．0mL0．3mmol／L
日落黄标准溶液，0．6％H：O：溶液0．7mL，蒸馏水定容且30℃水浴中恒温30min，722S分光光度计上测A~-480nm处的吸光度A伽。

H2O：加入前FCF溶液的吸光度为A0，H：0：加入后的吸光度为A，吸光度的变化△A；A。

A来表示·OH的产生量。