铅笔芯微电极的制备及其在电化学法测定抗坏血酸中的应用_何凤云

化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第21卷，第1期2012年1月V ol.21，No.1Jan. 201214doi:10.3969/j.issn.1008-6145.2012.01.004铅笔芯微电极的制备及其在电化学法测定抗坏血酸中的应用*何凤云,吴立剑,杨丽君,邵秀丹,刘欢（南京晓庄学院生物化工与环境工程学院，南京　211171）摘要　研究了一种用铅笔芯制作的微电极的电化学行为，并利用这种电极进行抗坏血酸含量的测定。

结果表明：在5.0×10–5～1.0×10–2 mol ／L 的浓度范围内，抗坏血酸的氧化峰电流与其浓度呈线性关系，相关系数r 2=0.999 3，检出限为2.5×10–5 mol ／L （S ／N =3）。

对2.5×10–3 mol ／L 抗坏血酸溶液平行测定6次，测定结果的相对标准偏差为4.7%。

该电极用于维生素C 片中抗坏血酸含量的测定，加标回收率为94.8%～99.8%。

关键词　铅笔芯微电极；抗坏血酸；循环伏安法中图分类号：O657.15 文献标识码：A 文章编号：1008-6145(2012)01-0014-03Prearation of Pencil Lead Microelectrode and its Applycation in the Determination of Ascorbic Acidby Electrochemical MethodHe Fengyun ， Wu Lijian ， Yang Lijun ， Shao Xiudan ， Liu Huan（School of Biochemical and Environmental Engineering, Nanjing Xiaozhuang University ， Nanjing 211171， China ）Abstract Pencil lead microelectrode was prepared and then it was applied to the determination of ascorbic acid （AA ）. The results showed that ascorbic acid concentration was linear with oxidation peak current in the range of 5.0×10–5–1.0×10–2 mol/L under the optimum condition, r 2=0.999 3. The detection limit was 2.5×10–5 mol/L （S /N =3). The relative standard deviation was 4.7% for six times parallel determination of 2.5×10–3 mol/L ascorbic acid. The pencil lead microelectrode can be applied to the analysis of ascorbic acid with recovery of 94.8%–99.8%.Keywords pencil microelectrode; ascorbic acid; cyclic voltammetry维生素C 又叫抗坏血酸（AA ），广泛存在于食品、药物及人体中，是参与人体生理代谢不可或缺的一种有机化合物，在细胞的电子传递过程中起着重要作用。

目前，检测AA 的主要方法有光度分析法［1］、荧光分析法［2］、化学发光法［3］、电化学分析法［4，5］及高效液相色谱法［6，7］等，这些方法有的需要较昂贵的设备［6，7］，有的操作较繁琐［1，3］。

电化学分析法以仪器简单、选择性强、线性范围广、检出限低等特点而被广泛应用，但目前多采用大电极。

有研究表明［8］，在电化学分析中，有效导电面积十分微小的微电极可以降低AA 的过电位，提高测定的灵敏度，增加电极的稳定性和重现性。

各种未掺杂或掺杂修饰的微电极的研究很多［8–11］，但铅笔芯电极对于抗坏血酸的测定尚未见报道。

笔者发现，利用铅笔芯制作的微电极可以有效降低AA 的过电位，将其用于AA 含量的测定，方法简单，成本低，测量结果准确。

1　实验部分1．1　主要仪器与试剂电化学工作站：CHI660C 型，上海辰华仪器公司；电子分析天平：AUY120型，日本岛津公司；抗坏血酸：AR ，国药集团化学试剂有限公司；维生素C 片剂：100 mg ／片，湖北华中药业有限公司；六氰合铁酸钾：AR ，广东光华化学厂有限公司；抗坏血酸待测溶液：均由1 mol ／L KCl 新配；实验用水为二次去离子水。

1．2　铅笔芯微电极的制备切取适当长度的毛细管（管内径约0.5 mm ）作为微电极的绝缘壳，依次在12，6.5，2.6 μm 的砂纸上打磨平滑，取约4 cm 长的铜丝从尖端插入毛细管作为导线，用粘合剂将铅笔芯和铜丝固定在毛细管内，待铅笔芯和铜丝固定后，在称量纸上打磨平滑，*江苏省大学生创新训练计划项目（2160081）；南京晓庄学院科研项目（2010KYYB19）联系人：何凤云；E-mail:hefengyun1976@ 收稿日期：2011-10-2315何凤云，等：铅笔芯微电极的制备及电化学测定抗坏血酸铅笔芯电极即制备完成。

1．3　实验方法最初制备的电极不宜直接用于测定，需放入1mol／L的KCl溶液中以自制的微电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极在– 0.2～0.8 V以100 mV／s的扫速下进行多次循环伏安扫描，直到获得稳定的循环伏安图为止。

实验考察了不同种铅笔芯制备的微电极的电化学行为，通过循环伏安法测定了微电极在1 mmol/LK3Fe(CN)6（以1 mol／L的KCl为支持电解质）溶液中的ΔE p，通过比较不同电极传递电子能力的差异，最终选择合适的工作电极。

利用循环伏安法考察了扫描速度、富集电位和富集时间对实验的影响。

每次测定后，将微电极置于空白支持电解质中，在– 0.2～0.8 V电位区间以100 mV／s循环扫描8次即可除去吸附在微电极表面的残留物，保持电极的重现性，实现连续测定(实验均需在室温下进行)。

2　结果与讨论2．1　不同电极对电子传递的差异对用不同铅笔芯材料制备的微电极进行试验，分别将制备好的铅笔芯微电极和玻碳电极放到1 mmol/L K3Fe(CN)6（以1 mol／L的KCl为支持电解质溶液）溶液中扫描，观察循环伏安图，比较不同电极的电位差，结果见表1。

表1　铁氰化钾探针在玻碳电极和不同铅笔芯微电极的峰电位差电极平均电位差ΔE p／mV玻碳电极（GCE）2B微电极HB微电极80 85 150由表1可知，用2B铅笔芯制作的微电极平均电位差接近于玻碳电极，因此可以用2B铅笔芯制作的微电极来研究AA的电化学行为。

2．2　扫描速度对峰电流的影响使用2B铅笔芯微电极在50～400 mV／s扫描速度范围内对2.5×10–3 mol／L的AA在1 mol／L 的KCl溶液中进行循环伏安扫描，得到不同扫描速度下的循环伏安图,图1为氧化峰电流与扫描速度的关系。

由图1可见，氧化峰电流I p与扫描速度呈良好的线性关系（I p=5.938 8v+1.602 9，r2=0.990 8），表明AA在2B铅笔芯微电极上的电极反应过程受吸附控制。

当扫描速度为100 mV／s时，信噪比最好，故实验选择扫描速度为100 mV／s。

图1　氧化峰电流与扫描速度的关系2．3　富集电位和富集时间的影响实验证明，富集电位对AA在微电极上的电化学氧化过程几乎不影响。

在开路条件下，当AA的浓度为2.5×10–3 mol／L时，富集时间在10～80 s范围内，氧化峰电流随着富集时间的延长而逐渐增大；当富集时间大于80 s后，峰电流变化趋于平稳，因此实验设定80 s为最佳富集时间。

2．4　线性方程和检出限配制浓度为0， 2.5×10–2， 5.0×10–2， 7.5×10–2，0.1，0.2，0.5，0.75，1.0，5.0，7.5，10 mmol／L系列抗坏血酸标准工作溶液，按实验方法进行测定。

在上述优化实验条件下，AA的浓度在5.0×10–2～10 mmol／L范围内与氧化峰电流（μA）呈良好的线性关系，线性回归方程为I=0.833 9c+0.049 5，r2=0.999 3，以3倍信噪比计算检出限为2.5×10–5 mol／L。

2．5　精密度试验对2.5 mmol／L的AA标准工作溶液平行测定6次，氧化峰电流测定结果的相对标准偏差为4.7%，说明电极具有良好的重现性，试验结果见表2。

表2　精密度试验结果（n=6）氧化峰电流／μA平均值／μA RSD／%2.123　2.207　2.1242.135 4.72.084　2.097　2.1732．6　样品测定及加标回收试验取5片维福佳维生素C含片（标含维生素C：100 mg／片），研碎，称取少量，用1 mol／L KCl溶解，定量稀释，按测定方法测得维生素C含量的平均值为96.63 mg／片。

然后用标准加入法进行回收试验，结果见表3。

表3　回收试验结果（n＝3）样品序号标示量／mmol·L－1加入量／mmol·L－1测得量／mmol·L－1回收率／%1 1.250 1.000 2.19894.82 1.250 1.000 2.24899.83 1.250 1.000 2.20395.3由表3可知，回收率为94.8%～99.8%，平均回收率为96.63％，表明方法的准确度较高。

该方法与化学分析计量 2012年，第21卷，第1期16荧光法［2］和高效液相色谱法相比［7］相比，回收率略低。

2005版药典规定维生素C药片的含量为标示量的90%～110%，因此该方法回收率符合药片维生素C检验的要求。

3　结语利用自制的铅笔芯电极通过循环伏安法检测维生素药片溶液中抗坏血酸的含量，测定结果精密度与准确度高，该法可用于维生素药片中抗坏血酸含量的测定。

参考文献［1］　张建夫，陈亚红，田丰收，等.酶催化动力学光度法测定抗坏血酸［J］.光谱实验室，2010，27(1):213–216.［2］　孙振艳，赵中一，郭小慧，等.荧光分析法测定维生素C［J］.化学分析计量，2006，15(4):18–20.［3］　吴雄志，王立红，吕晓惠.鲁米诺–溴酸钾体系增敏化学发光法测定抗坏血酸［J］.分析试验室，2010，29(6):101–104.［4］　陈小印，王宗花，张菲菲，等.聚对氨基苯磺酸／碳纳米管复合膜修饰电极对尿酸与抗坏血酸的同时测定［J］.分析测试学报，2010，29（1）:6–11.［5］　邓培红，张军，黎拒难.多壁碳纳米管修饰碳黑微电极同时测定多巴胺和抗坏血酸［J］.分析试验室，2009，28(1):92–95.［6］　刘文海，范洁，刘丽莉.HPLC法测定5种果汁中抗坏血酸的含量［J］.安徽农业科学，2009，37(4):1 412–1 413.［7］　金黎明，姜波，郝苗.高效液相色谱法测定果珍中维生素C含量［J］.化学分析计量，2008，17(3):19–20.［8］　邓培红，张军，陈静波.亚铁氰化钾修饰碳黑微电极测定抗坏血酸［J］.衡阳师范学院学报，2005，26(6):45–47.［9］　匡云飞，邹建陵，邓培红，等.碳黑微电极快速测定果蔬中Vc含量［J］.衡阳师范学院学报（自然科学），2003，24(6):45–47.［10］　张军，邓培红，匡云飞，等.二茂铁修饰碳黑微电极同时测定多巴胺和抗坏血酸［J］.分析试验室，2004，23:67–69.［11］　孙逊，高永峰，王琦，等.一种修饰微电极的制备及其在维生素C 测定中的应用［J］.分析试验室，2009，28(11):21–24.中国环境监测总站重大仪器专项获批中国环境监测总站在北京召开了国家重大科学仪器专项课题“基于质谱技术的全组分痕量重金属分析仪器开发和应用示范项目”启动会，中国环境监测总站党委书记陈斌同志、各项目成员单位的法人代表及子课题负责人参加了会议，科技部相关人员参加了项目启动仪式。