5种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究
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收稿日期：2019-04-19 基金项目：南通市卫生和计划生育委员会科研课题专项（WKZL2018
084） 作者简介：郭新颖（1986-），女，工程师，主要从事理化检验工作。 通信作者：陆 娟。
单、试剂便宜，可为开拓现代食药用途、开发功能性 保健1.1 仪器与试剂
GUO Xin-ying，SHI Yu-kun，CHEN Feng，LU Juan （Nantong Center for Disease Control and Prevention, Nantong 226007, China） Abstract :Objective A new fluorescence detection method was established for the indirect determination of
抗氧化活性，其中以五倍子最佳。
关键词：羟自由基；荧光强度；抗氧化；中药
中图分类号：R284.1
文献标识码：A
Study on scavenging free radicals and antioxidant activity in vitro for 5 kinds of traditional Chinese medicine extracts*
F96 型荧光分光光度计 （上海棱光技术有限公 司）；930 型荧光光度计 （上海第三分析仪器厂）； FA2004 型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）。
5.0×10-5mol·L-1 曙红 B 溶液（上海新中化学试 剂厂）；5.0×10-4mo·l L-1 FeSO4 溶液（批号 20140630 国 药集团化学试剂有限公司）；2.0×10-3mol·L-1 硫脲溶 液（批号 96-12-02 上海试剂一厂）；2.0×10-3mol·L-1 抗坏血酸溶液 （批号 L-8754-50 Sigma 试剂公司）； 0.002% H2O2 溶液 （批号 10011218 国药集团化学试 剂 有 限 公 司）；1.0 ×10-4mol·L-1 H2SO4 溶 液 （批 号 20061204 上海试剂四厂昆山分厂）。
以上溶液均为分析纯，实验用水为超纯水。
2019 年第 9 期
郭新颖等：5 种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究 *
75
1.2 实验方法
1.2.1 羟自由基的检测 分别取 2 支 10mL 比色管， 一支按顺序加入 1.8mL 曙红 B 溶液，1.0mL H2SO4 溶 液，1.0mL FeSO4 溶液，1.2mL H2O2 溶液；另一支加入 等量的曙红 B 与 H2SO4 溶液作为试剂参比，分别加入 水定容至 10mL 刻度线处，摇匀，放置 6min。在荧光 光度计上测定反应体系的荧光强度，计算其与空白 参比体系的荧光强度的差值，通过测定·OH 形成前 后溶液的荧光强度差值，确定·OH 产生量。 1.2.2 羟自由基清除率的测定 在上述 Fenton 体 系中加入一定量抗坏血酸和硫脲试剂作为·OH 的 抗氧化清除剂，则·OH 清除率（R%）可表示为：
them is Chinese gall.
Key words:hydroxyl radical；fluorescence intensity；antioxidation；traditional Chinese medicine
羟自由基（hydroxyl radical,·OH）作为生物体内 活性氧毒性最强、危害最大的一种自由基，在人体新 陈代谢过程中产生，与衰老、肿瘤、水污染等密切相 关。因此，羟自由基的产生、清除、检测与研究对生命 科学和环境科学具有重要意义。天然抗氧化剂具有 天然、高效、低毒的特点，中药作为一种天然自由基 清除剂，对人类健康的贡献备受关注。由于中药的抗 辐射损伤通过抗氧化作用实现，从中药中寻找自由 基消除剂成为现代医药和保健行业的研究热点。目 前，研究物质抗自由基的方法主要有分光光度法[ 1 ]、 化学发光法[ 2 ]、电子自旋共振法[ 3 ]和高效液相色谱 法[ 4，5 ]等，但有的方法仪器昂贵，难以普遍适用和基 层推广。本文通过荧光光度法测定羟自由基的产生， 将其应用于中药抗氧化活性的测定。该方法设备简
traditional Chinese medicine has antioxidation which can react with ·OH to reduce the fluorescence intensity of the
reaction system. Conclusion The extracts of 5 kinds of Chinese herbs have some antioxidant activity, and the best of
antioxidant activity of traditional Chinese medicine extracts. Methods Hydroxyl radicals were produced by Fenton
reaction.·OH can rapidly oxidized Eosin B, resulting in its fading and fluorescence intensity. Results The extract of
Sum 288 No. 9
化学工程师 Chemical Engineer
20210919年年第第9 9期期
DOI：10.16247/ki.23-1171/tq.20190974
工
程
师 园
5 种中药提取物清除自由基的
地
体外抗氧化活性研究*
郭新颖，史玉坤，陈 峰，陆 娟
（南通市疾病预防控制中心，江苏 南通 226007）
摘 要：目的 研究建立间接测定中药提取物抗氧化活性的荧光检测新方法。方法 利用 Fenton 反应产
生·OH，·OH 迅速氧化曙红 B 使其褪色，荧光强度显著降低，依荧光强度减弱程度间接检测·OH 产生量。结果
中药提取物具有抗氧化性，可以与·OH 反应，使反应体系荧光强度降低。结论 5 种中药提取物均具有一定的
084） 作者简介：郭新颖（1986-），女，工程师，主要从事理化检验工作。 通信作者：陆 娟。
单、试剂便宜，可为开拓现代食药用途、开发功能性 保健1.1 仪器与试剂
GUO Xin-ying，SHI Yu-kun，CHEN Feng，LU Juan （Nantong Center for Disease Control and Prevention, Nantong 226007, China） Abstract :Objective A new fluorescence detection method was established for the indirect determination of
抗氧化活性，其中以五倍子最佳。
关键词：羟自由基；荧光强度；抗氧化；中药
中图分类号：R284.1
文献标识码：A
Study on scavenging free radicals and antioxidant activity in vitro for 5 kinds of traditional Chinese medicine extracts*
F96 型荧光分光光度计 （上海棱光技术有限公 司）；930 型荧光光度计 （上海第三分析仪器厂）； FA2004 型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）。
5.0×10-5mol·L-1 曙红 B 溶液（上海新中化学试 剂厂）；5.0×10-4mo·l L-1 FeSO4 溶液（批号 20140630 国 药集团化学试剂有限公司）；2.0×10-3mol·L-1 硫脲溶 液（批号 96-12-02 上海试剂一厂）；2.0×10-3mol·L-1 抗坏血酸溶液 （批号 L-8754-50 Sigma 试剂公司）； 0.002% H2O2 溶液 （批号 10011218 国药集团化学试 剂 有 限 公 司）；1.0 ×10-4mol·L-1 H2SO4 溶 液 （批 号 20061204 上海试剂四厂昆山分厂）。
以上溶液均为分析纯，实验用水为超纯水。
2019 年第 9 期
郭新颖等：5 种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究 *
75
1.2 实验方法
1.2.1 羟自由基的检测 分别取 2 支 10mL 比色管， 一支按顺序加入 1.8mL 曙红 B 溶液，1.0mL H2SO4 溶 液，1.0mL FeSO4 溶液，1.2mL H2O2 溶液；另一支加入 等量的曙红 B 与 H2SO4 溶液作为试剂参比，分别加入 水定容至 10mL 刻度线处，摇匀，放置 6min。在荧光 光度计上测定反应体系的荧光强度，计算其与空白 参比体系的荧光强度的差值，通过测定·OH 形成前 后溶液的荧光强度差值，确定·OH 产生量。 1.2.2 羟自由基清除率的测定 在上述 Fenton 体 系中加入一定量抗坏血酸和硫脲试剂作为·OH 的 抗氧化清除剂，则·OH 清除率（R%）可表示为：
them is Chinese gall.
Key words:hydroxyl radical；fluorescence intensity；antioxidation；traditional Chinese medicine
羟自由基（hydroxyl radical,·OH）作为生物体内 活性氧毒性最强、危害最大的一种自由基，在人体新 陈代谢过程中产生，与衰老、肿瘤、水污染等密切相 关。因此，羟自由基的产生、清除、检测与研究对生命 科学和环境科学具有重要意义。天然抗氧化剂具有 天然、高效、低毒的特点，中药作为一种天然自由基 清除剂，对人类健康的贡献备受关注。由于中药的抗 辐射损伤通过抗氧化作用实现，从中药中寻找自由 基消除剂成为现代医药和保健行业的研究热点。目 前，研究物质抗自由基的方法主要有分光光度法[ 1 ]、 化学发光法[ 2 ]、电子自旋共振法[ 3 ]和高效液相色谱 法[ 4，5 ]等，但有的方法仪器昂贵，难以普遍适用和基 层推广。本文通过荧光光度法测定羟自由基的产生， 将其应用于中药抗氧化活性的测定。该方法设备简
traditional Chinese medicine has antioxidation which can react with ·OH to reduce the fluorescence intensity of the
reaction system. Conclusion The extracts of 5 kinds of Chinese herbs have some antioxidant activity, and the best of
antioxidant activity of traditional Chinese medicine extracts. Methods Hydroxyl radicals were produced by Fenton
reaction.·OH can rapidly oxidized Eosin B, resulting in its fading and fluorescence intensity. Results The extract of
Sum 288 No. 9
化学工程师 Chemical Engineer
20210919年年第第9 9期期
DOI：10.16247/ki.23-1171/tq.20190974
工
程
师 园
5 种中药提取物清除自由基的
地
体外抗氧化活性研究*
郭新颖，史玉坤，陈 峰，陆 娟
（南通市疾病预防控制中心，江苏 南通 226007）
摘 要：目的 研究建立间接测定中药提取物抗氧化活性的荧光检测新方法。方法 利用 Fenton 反应产
生·OH，·OH 迅速氧化曙红 B 使其褪色，荧光强度显著降低，依荧光强度减弱程度间接检测·OH 产生量。结果
中药提取物具有抗氧化性，可以与·OH 反应，使反应体系荧光强度降低。结论 5 种中药提取物均具有一定的