灰分测定法

杂质限量的控制
杂质限量： 药物中所含杂质的最大允许量 通常用百分之几或百万分之几表示
杂质限量的控制
1.限量检查法（对照法） 取一定量与被检杂质相同的纯物质或其
他对照品配制成标准溶液，与一定量供试药 物的溶液，在相同处理条件下，比较反应结 果，确定杂质限量是否超过规定所含杂质的 最大允许量。
配制供试液的试剂
磁皿
蒸干
醋酸盐缓冲液2mL+15mL水
微热溶解
水
25mL
乙管
范围：供试品需灼烧破坏， 取灼残渣项下遗留的残渣， 经处理后在酸性溶液中显 色的重金属限量检查
重金属检查法
硫化钠法（第三法）
+ 标准铅溶液25mL+ Nhomakorabea供试品溶液
25mL
+
氢氧化钠5mL 及水20mL
+
5d硫化钠试液
适用：检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生 成沉淀）的药品中的重金属
铁盐——Fe3+转化HFeCl62-，用乙醚提取而除去，再将酸
性溶液加氨试液使呈碱性后，用氰化钾作为微量铁盐的掩蔽剂， 再加硫化钠试液测定。(应用氰化钾试液时应特别注意安全， 用完不得倒入酸缸中!)
为消除试剂夹杂重金属，对照溶液应取同样量试液在坩锅或 瓷皿中蒸干后，依法检查。在配制供试品溶液时，如使用盐酸 超过1ml(或与盐酸1ml相当的稀盐酸)，使用氨试液超过2ml， 以及用硫酸与硝酸进行有机破坏，或加入其它试剂进行处理者
例：黄连上清丸中重金属检查
例：黄连上清丸中重金属检查
杂质限量的控制
2.灵敏度法 在供试品溶液中加入试剂，观察有无正反应 如：肉桂油中重金属检查:肉桂油10ml，加
水10ml与盐酸1滴，振摇后，通硫化氢饱和， 水层与油层均不应变色
杂质限量的控制
3.比较法 准确测定杂质的含量，与规定限度进行比较，
要求符合规定。通常运用在紫外可见分光光 度法、旋光度法等
中 药 制 剂 一 般 杂 质 检 查
灰分测定法
中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化， 则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残 留，由此所得灰分为“生理灰分”，即 总灰分。
总灰分加盐酸处理，得到不溶于盐酸的 灰分，称为酸不溶性灰分。
灰分测定法
重金属检查法
注意事项
3.供试液有颜色时的处理： 稀焦糖液，调整标准溶液 若稀焦糖溶液无法达到要求，加其他对测
定无干扰的试液
稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖5g，置瓷蒸发皿或 瓷坩锅中，加热炒成棕黄色糊状，用水溶解后 25ml，贮于滴瓶中备用
重金属检查法
注意事项
4.其他离子干扰：
高铁盐——抗坏血酸或盐酸羟胺，还原为亚铁离子
Bi2+、Cd2+、Cu2+、 Co2+、Fe3+、Hg2+、 Ni2+、Pb2+、Zn2+
代表
重金属检查法
基本原理
CH3CSNH2+H2O pH3.5 CH3CONH2+H2S↑
Pb2++S2-→PbS↓
重金属检查法
分类
检查方法: 第一法：硫代乙酰胺法（酸法） 第二法：炽灼后硫代乙酰胺法 第三法：硫化钠法（碱法）
示例3
灰分测定法
检查方法
灰分测定法
检查方法
灰分测定法
注意事项
1.测定前先将供试品称取适量粉碎，使其能通过2 号筛，将粉末混合均匀后再取样。 2.如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或 10％硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，然后置水浴上 蒸干，得到残渣再按上面所说的方法炽灼至坩埚 内容物完全灰化。
砷盐检查法
古蔡法--注意事项
6.醋酸铅棉花的作用：试剂或锌粒中若含有S2-供试 品溶液中若含有S2-、SO42-、S2O32-等离子时，在酸 性条件下可生成硫化氢，也能使溴化汞试纸染色 (硫化汞)。应用醋酸铅棉花使硫化氢生成硫化铅除 去。
H2S+Pb(CH3COO)2→PbS↓+2CH3COOH
砷盐检查法
AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3 2As(HgBr)3+ AsH3→3As(HgBr)2 As(HgBr)3+ AsH3→3HBr+As2Hg3
(黄色) (棕色) (黑色)
砷盐检查法
古蔡法—基本原理
五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为砷化 氢，但生成砷化氢比三价砷慢。三价砷生成砷化 氢在2小时内已反应完全，而五价砷在同时间内 仅十分之二起反应。
同一种中药材，在无外来掺杂物（泥土、沙石等 杂质）时，有一定的总灰分含量范围。
规定中药的总灰分限度，对于保证中药的品质和 洁净程度有一定意义
由于在酸中钙盐等无机物可溶而泥土、砂石等不 溶解，酸不溶性灰分的测定更能准确表明其中泥 土砂石等杂质的掺杂含量
灰分测定法
示例1
灰分测定法
示例2
灰分测定法
供试品中砷的限度各有不同，可按规定，改变供 试品的取用量，来与标准砷斑比较。但不宜改变 标准砷的量(如未指明时，一般常以2ml标准砷液)， 来与供试品比较，因为标准砷斑过深或过浅都会 影响比色的准确性。
砷盐检查法
古蔡法--注意事项
2.反应液的酸度及各种试液用量：反应液的酸度相当 于2mol/L的盐溶液。KI：2.5％，SnCl2：0.3％，锌粒： 2g。
重金属检查法
示例1
重金属检查法
示例2
重金属检查法
示例3
重金属检查法
示例4
重金属检查法
示例5
重金属检查法
注意事项
1.方法灵敏度：标准铅溶液的用量以 20μg(即相当于标准铅溶液2ml)时加硫代乙 酰胺试液，最适于目视法观察，<1Oμg，太 浅，>30μg,太深
2.反应条件：配制pH＝3.5的醋酸盐缓冲液用 pH计。硫代乙酰胺2mL，2min;过滤法：硫代 乙酰胺1mL，10min;
重金属检查法
硫代乙酰胺法（第一法）
纳氏比色管
甲
管 乙
+标准铅溶液+醋酸盐缓冲 25mL 液2mL+水or规定的溶剂
管 25mL +供试品溶液+。。。。
丙
+供试品溶液
管 25mL +标准铅溶液+。。。。
+ 硫代乙酰胺2mL， 摇匀，放置2min， 置白纸上，自上向 下透视，乙管浅于 甲管
范围：供试品不经有机破怀，在酸性溶液中显色的 重金属限量检查
砷盐检查法
用于药品中微量砷限量检查的方法
古蔡法 二乙基二硫代氨基甲酸银法
砷盐检查法
示例
砷盐检查法
古蔡法—基本原理
锌+酸———初生态氢+微量砷盐——— 挥发性砷化氢+溴化汞或氧化汞试纸—— 黄色或棕黄色砷斑
砷盐检查法
古蔡法—基本原理
Zn+2HCl→ZnCl2+H2↑ AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2O AsO33-+4Zn+11H+→AsH3↑+4Zn2++4H2O
砷盐检查法
古蔡法—基本原理
溶液中的碘离子，与反应中产生的锌离子能形成 络合物，使生成砷化氢的反应不断进行。 4I-+Zn2+→ZnI42-
氯化亚锡与碘化钾存在，还可抑制锑化氢生成， 在试验条件下，100μg锑存在不致干扰测定。
砷盐检查法
古蔡法—基本原理
氯化亚锡的作用可在锌粒表面形成锌锡齐(锌锡的 合金)起去极化作用，使锌粒与盐酸作用缓和，放 出氢气均匀，使产生的砷化氢气体一致，有利于 砷斑的形成，增加反应的灵敏度和准确度。 Sn2++Zn→Sn+Zn2+
重金属检查法
注意事项
5.中药制剂中重金属检查的前处理：
中药材及中药制剂的重金属与有机物结合存在
一般都需要先行炽灼破坏，温度控制在500～ 600℃，以免重金属损失
加硝酸加热处理后将亚硝酸除尽，因其
可
氧化硫化氢析出硫，影响比色检查
使供试品溶液的pH仍为3.5左右
重金属检查法
注意事项
6.标准铅溶液新鲜配制 ：防止硝酸铅水解而造成误 差，玻璃仪器均不得含有铅
杂质限量的计算
杂质限量

杂质最大允许量 样品量
100 %
V×C L＝ —————×100%
S
杂质限量的计算
例：阿胶砷盐检查(标准溶液法）
阿胶中砷盐的检查：取本品2.0g，加氢氯 化钙1g，混合，加少量水，搅匀，干燥后 先用小火灼使炭化，再在500～600℃炽灼 使完全灰化，放冷，加盐酸3ml与适量的水 使溶解成20ml，分取溶液10ml，加盐酸 4ml与水14ml，依法检查其砷盐。其中标 准砷溶液(每1ml相当于1μg的AS)，取用量 为2ml。计算阿胶控制砷盐的限量是多少？
重金属检查法
概念:
指在一定条件下的溶液中，能与硫代乙酰胺或硫化 钠作用显色的金属杂质
弱酸性条件下(pH3～3.5) 与硫代乙酰胺：
Ag+ 、 As3+ 、 As5+ 、 Bi3+ 、 Cu2+ 、 Cd2+、Co2+、Hg2+、Ni2+、Pb2+、 Sb2+、Sn2+、Sn4+
碱性溶液中与硫化钠：
指一些中药制剂中单 独存在的杂质，在制备 过程或贮存中可能产生 的某一杂质，而非其他 制剂均能产生的。在药 典中列入个别制剂的检
查项下。
杂质的来源
中药材原料中带入 在生产制备过程中引入 贮存过程受外界条件的影响而使理化性
质改变而产生
杂质的分类
中药材原料中的杂质
来源与规定相同，但其性状或部位与规定不符 来源与规定不同的物质（地道药材） 无机杂质，如砂石、泥块、尘土等
取一定量的供试品加入等量的无砷氢氧化钙混匀后加水湿润供干在小火上小心炽灼注意不便内容物溅出至烟雾除尽移入高温炉中在500600炽灼至灰化砷成为非挥发性的亚砷酸钙取出放冷加蒸馏水5ml再缓缓加入盐酸5ml及浓溴液数滴置水浴上加热至溶液中的红色溴驱尽滴加氯化亚锡试液数滴再全部转入测砷瓶中一般不含硫的检品可不加浓溴液只需加盐酸5ml即转入测砷瓶中依法测定作空白试验校正
砷盐检查法
古蔡法--检查方法
古蔡法—检查方法
A：100mL标准磨口锥形瓶 B：中空的标准磨口塞，上连导气管C C：导气管（外径8mm,内径6mm) D ：具孔的有机玻璃塞 E：中央具有圆孔的有机玻璃旋塞盖
步骤：在导气管C中装入醋酸铅棉花 60mg,再于旋塞D的顶端平面上放一片溴 化汞试纸，盖上旋塞E并旋紧，即得。
加入碘化钾、酸性氯 化亚锡还原剂，将五价 砷还原为三价砷
碘化钾被氧化生成I2， 以氯化亚锡来还原，使 反应液中维持有碘化钾 的还原剂存在。
AsO43-+ 2I-+ 2H+→AsO33- +I2 + H2O AsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O I2十SnCl2 + 2HCl→2HI十SnCl4
3.反映温度与时间：25～40℃，45min
4.锌粒的影响：锌粒大小与反应速度快慢有关，药典 规定所用锌粒应无砷，以能通过一号筛的细粒（约 2mm)为宜，如使用的锌粒较大时，用量应酌情增加， 反应时间应增长为1小时。
砷盐检查法
古蔡法--注意事项
5.汞试纸的选择：用定性滤纸，所显砷斑色调较暗， 深浅梯度不规律。用国产定量滤纸质地较疏松者， 所得砷斑色调鲜明，梯度规律，因此必须选用质量 较好，组织疏松的中速定量滤纸。 溴化汞试纸一般 宜新鲜配置。
古蔡法--注意事项
砷盐检查法
古蔡法--检查方法
古蔡法—检查方法
检查法： 取供试品溶液，置A瓶中，照标准砷 斑得制备操作。将生成得砷斑与标 准砷斑相比，不得加深。
砷盐检查法
古蔡法--注意事项
1.方法灵敏度：本法灵敏度约为0.75μg(以As计)， 砷斑色泽的深度随砷化氢量而定。药典中规定砷 斑为2μgAs(即取2ml标准砷液)形成的色斑。
砷盐检查法
古蔡法--检查方法
古蔡法—检查方法
标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶 液2mL，置A瓶中，加盐酸5mL与水 21mL，再加碘化钾试液5mL与酸性氯 化亚锡试液5滴，在室温放置10min后， 加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气 管C密塞于A瓶上，并将A瓶置25～ 40℃水浴中反应45min，取出溴化汞 试纸，即得。
7.注意硫化钠的纯度：与硫化钠试液的稳定性有很大 关系，采用分析纯硫化钠配制，贮存棕色瓶中可保持 1～2个月
8.含Pb2+的中性或弱酸性溶液一般不应经滤纸过滤： 因滤纸能吸附Pb2+ ，必要时可加入对酚酞呈微碱性 的饱和醋酸铵溶液，温热后用直径较小的定量滤纸滤 过。
重金属检查法
注意事项
9.如供试品本身能生成不溶性硫化物时，影响重金 属的检查，可加入适当掩蔽剂
重金属检查法 炽重灼金后属硫检代查乙法酰胺法（第二法）
供试品 炭化
盐酸2mL + 放冷
放冷
+
硫酸0.5～ 1.0mL
氧化氮蒸气 蒸干 除尽
低温加热至 硫酸除尽
+
硝酸0.5mL
水浴蒸干 + 水15mL + 氨试液至对酚肽指示液显中性
+
微热溶解
醋酸盐缓冲液2mL
25mL
甲管
重金属检查法
炽灼后硫代乙酰胺法（第二法）
杂质的定义
指在中药制剂中不具有治疗作用， 当超过一定限度时，有可能危害人体健 康或影响药物质量的物质。
一般杂质检查 特殊杂质检查
杂质的分类
一般杂质
特殊杂质
指在自然界中分布较 广泛，在多种药材的采 集、收购、加工以及制 剂的生产或贮存过程中 容易引入的杂质，如酸、 碱、水分、氯化物、硫 酸盐、铁盐、重金属、 砷盐等。(药典）