光径对三角褐指藻生长及油脂产量的影响_赵萍
温度影响三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步探讨
营养条件对三角褐指藻生长和油脂积累的影响
营养条件对三角褐指藻生长和油脂积累的影响作者：符茹,黄长干,王海英来源：《湖北农业科学》2011年第11期摘要：研究了培养基中添加乙酸钠、尿素以及Ｆｅ３＋对三角褐指藻（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ）生长和油脂积累的影响。
结果表明，培养基中添加乙酸钠作为碳源的兼养生长模式对三角褐指藻的生长和油脂含量的增加有明显的促进作用（Ｐ＜０．０５），在乙酸钠浓度为５．０ｇ／Ｌ时得到最大生物量为１．２８ｇ／Ｌ，是对照的１．７倍；而在乙酸钠浓度为０．５ｇ／Ｌ时油脂含量达到最大（２８．９０％），是对照的１．９倍；培养基中添加适当浓度的尿素作为氮源，可以显著地提高三角褐指藻的生长速率（Ｐ＜０．０５），但对生物量和油脂含量没有显著影响（Ｐ＞０．０５）；培养基中Ｆｅ３＋浓度的增加对三角褐指藻的生长速率、生物量及油脂积累均没有显著影响（Ｐ＞０．０５）。
关键词：三角褐指藻；乙酸钠；尿素；Ｆｅ３＋；生物量；比生长速率；油脂积累中图分类号：Ｑ９４９．２７文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）11－2292-03ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎｓｏｎＧｒｏｗｔｈａｎｄＯｉｌＡｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆＰｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍＦＵＲｕ１，２，ＨＵＡＮＧＣｈａｎｇ－ｇａｎ２，ＷＡＮＧＨａｉ－ｙｉｎｇ１（１．ＫｅｙＬａｂｆｏｒＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓａｎｄＢｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｓｏｕｔｈ－ｃｅｎｔｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｗｕｈａｎ４３００７４，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＥｆｆｅｃｔｓｔｏｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｏｉｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎＰｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｕｓｉｎｇｍｉｘｏｔｒｏｐｈｉｃｃｕｌｔｕｒｅｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙａｄｄｅｄｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅ，ｕｒｅａａｎｄＦｅ３＋．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅ was ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｇｒｏｗｔｈａｎｄｏｉｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｔｈｅｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅａｓａｃａｒｂｏｎｓｏｕｒｃｅ，ａｎｄｔｈｅｍａｘｍｉｕｍｂｉｏｍａｓｓａｐｐｅａｒｅｄａｓ１．２８ｇ／Ｌｗｈｅｎｕｓｅｄｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｗｉｔｈ５．０ｇ／Ｌｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅａｎｄｓｈｏｗｅｄ１．７ｔｉｍｅｓｔｏｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ．ＴｈｅｍａｘｉｍｕｍｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔｉｎＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍｃｅｌｌｓｗａｓ２８．９０％ｗｉｔｈ０．５ｇ／Ｌｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅ，ａｎｄｗｈｉｃｈｗａｓ１．９ｔｉｍｅｓｔｏｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ．Ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｒａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｈｅｎｕｓｅｄｔｈｅｕｒｅａａｓｔｈｅｎｉｔｒｏｇｅｎｓｏｕｒｃｅ（P＜0.05），ｂｕｔｔｈｅｂｉｏｍａｓｓａｎｄｔｈｅｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍｗｅｒｅｎｏｔｏｂｖｉｏｕｓｌｙｃｈａｎｇｅｄ（P＞0.05）．Ｔｈｅｒｅ waｓｎｏｅｆｆｅｃｔｔｏｔｈｅｇｒｏｗｔｈｒａｔｅ，ｂｉｏｍａｓｓａｎｄｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍｂｙａｄｄing Ｆｅ３＋ｉｎｃｕｌｔｕｒｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ；ｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅ；ｕｒｅａ；Ｆｅ３＋；ｂｉｏｍａｓｓ； specific ｇｒｏｗｔｈｒａｔｅ；ｏｉｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ由于全球经济一体化的不断发展，对化石能源的需求和消耗迅猛增长，因此发展替代能源是保障能源安全和自然平衡的重大战略举措。
三角褐指藻光合与生长参数测量方法的研究
Ａ ＳｔｕｄｙｏｎＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔＭｅｔｈｏｄｓｏｆＰｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄＧｒｏｗｔｈ ＰａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆＰｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ
陈禹先，佟少明，侯和胜
（辽宁师范大学生命科学学院，辽宁省植物生物工程重点实验室，辽宁 大连 １１６０８１）
摘 要 ：三 角 褐 指 藻 是 生 产 生 物 柴 油 的 优 势 藻 种 ，监 测 其 光 合 和 生 长 参 数 是 利 用 它 们 生 产 生 物 柴 油 的 关 键 环
节 。本 研 究 通 过 细 胞 计 数 对 细 胞 生 长 量 进 行 监 测 ，利 用 多 激 发 波 长 调 制 叶 绿 素 荧 光 仪 （ＭｕｌｔｉｃｏｌｏｒＰＡＭ）、Ｎａｎｏ Ｄｒｏｐ紫外分光光度计与荧光分光光度计分别检测叶绿素荧光参数、培养基中硝酸盐含量、细胞叶绿素荧光强度 与 中 性 脂 相 对 含 量 。结 果 显 示 细 胞 密 度 与 叶 绿 素 荧 光 强 度 只 有 在 生 长 期 才 具 有 线 性 关 系 ，达 到 稳 定 期 后 ，叶 绿 素荧光强度显著性下降，此时与细胞密度不成比例；ＰＳＩＩ最大光化学量子效率 Ｆｖ／Ｆｍ 与叶绿素荧光值比生长速 率呈正相关，在整个培养阶段 Ｆｖ／Ｆｍ 的变化趋势呈现两次上升与下降的过程；光化学淬灭系数 ｑＬ在培养过程中 呈上升趋势，而相对电子传递速率 ｒＥＴＲ与实际光合效率 Ｙ（ＩＩ）均呈现先升后降的趋势；培养基中硝酸盐含量消 耗到一定程度后保持恒定，不再降低；细胞中性脂相对含量在藻细胞接种 １天后稍下降，随后持续上升，并在培 养基硝酸盐含量 不再 下降 后继续 增 加。 本 研 究 中 光 合 与 生 长 参 数 测 量 得 到 的 相 关 数 据，以 及 培 养 基 硝 酸 盐 含 量和细胞 中性脂 相对 含量 测量方 法的 建 立 ，可 以 为 三 角 褐 指 藻 实 验 室 培 养 及 其 代 谢 产 物 积 累 的 研 究 提 供 必 要 的研究基础与检测手段。
(完整版)三角褐指藻户外高密度培养技术研究毕业论文
本科毕业设计（论文）题目：三角褐指藻户外高密度培养技术研究学院轻工与食品学院专业食品科学与工程（糖工程）学生姓名魏峰指导教师魏东教授提交日期2013年06月03日摘要三角褐指藻（Phaeodactytuum tricornutunm）是一种常用的海水经济硅藻，生长迅速，易于培养，富含丰富的多不饱和脂肪酸，特别是二十碳五烯酸（C20:5，EPA），是水产动物养殖的优质饵料。
目前，三角褐指藻的户外高密度培养技术仍处于研发阶段。
为探究不同条件（环境条件和营养盐）对三角褐指藻生长以及其脂肪酸组成和含量的影响，本研究用单一变量法分别对其培养条件进行对比优化实验。
主要结果如下：（1）选用不同盐度的培养基对三角褐指藻进行户外高密度培养，盐度设定为3个梯度，20‰、25‰、30‰。
结果表明，在盐度为20‰条件下，三角褐指藻的生长状况要优于其他两种盐度，其OD值最高为0.998、细胞密度最高为6.0⨯106个/mL、细胞干重最高为177.78mg/L。
对脂肪酸的测定结果表明，25‰盐度下三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（124.95mg/g），20‰盐度与25‰盐度基本相同（123.12mg/g），而30‰盐度最低（105.67mg/g）。
（2）在20‰盐度下，通入CO2控制培养基的不同pH值，对三角褐指藻进行户外高密度培养。
pH值设定为3个梯度，7.5、8.0、8.5。
结果表明，控制pH8.0，三角褐指藻的生长状况要远好于其他两种pH值，其OD 值最高为 1.045、细胞密度最高为 5.8⨯106个/mL、细胞干重最高为166.39mg/L。
对脂肪酸的测定结果表明，pH值为8.5时三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（145.91mg/g），pH值为8.0的稍低（134.92mg/g），pH 值7.5的脂肪酸含量最低（109.76mg/g）。
（3）在20‰盐度、pH 8.0条件下，分别选用碳酸氢铵和尿素作为氮源对三角褐指藻进行户外高密度培养。
盐度对三角褐指藻生长及有机质积累的影响
盐 度对 三 角褐 指 藻 生 长 及 有 机 质 积 累 的影 响
赵 萍， 邹 宁 ， 院 ， 山东 烟 台， ２ ６ ４ ０ ２ ５ ）
摘要： 以三角褐指藻为材料 ， 探究盐度对该藻生长 、 总脂等有 机质含量 的影响 ， 探讨有利 于油脂生产 的盐度条 件 。结果显示 ， 盐度变化对三角褐指藻生物量和有机质积 累均 有显著影 响。在盐度 ７ ０ ％ ０ 的海 水 中培养 的细胞 ， 其 比生长速率 比正常海水 盐度 （ ３ ５ ％ ｖ ） 培养组降低了 ８ ． ２ ％ 。正 常海水盐 度下 ， 生物量及总脂含量最 高 ， 分别达１ ． ９ ２ ｇ ／
尿素浓度对三角褐指藻的生长及其脂肪酸组成的影响
是 自然 界 中少 数具 有 合 成 Ｅ Ａ和 Ｄ Ａ 能力 的生 Ｐ Ｈ 物 ，某些 微 藻 不 仅 含有 较 高 的多 不 饱 和 脂 肪 酸 （ Ｕ Ａ ）还 有 生长快 、 Ｐ Ｆ ｓ， 适应 性强 、 单位 面积 产量 高 等优 点 ， 有较 大 的 开发 和利 用 潜力 。其 中 ， 角 具 三
入带 螺 帽 的水解 管 内 ， ０３ｍＬ正十 九 酸 内标 液 加 ． （． ｇ Ｌ 和 ２ｍ Ｈ １ Ｃ ３ Ｈ 混 合液 （ 积 比为 ０ ／ ） ＬＣ Ｃ３ Ｈ Ｏ ４ 一 体
酸 （ Ｐ 和二 十 二 碳六 烯 酸 （ Ｈ 能有 效 地 防 治 Ｅ Ａ） Ｄ Ａ） 心脑血 管疾病 ， 营养 和医学 上具 有重 要作 用 。在 在
摘 要 ：用 不同尿 素 浓度 的 叉培 养基 对三 角
祸 糯 滦 ｈｅ ｄ ｅ ｌｍ ｔｃｒｕｕ 进 行 培 Ｐ ａｏ ａｔ ｕ ｉｏｎ ｔｍ） ｙ ｒ
１ ． 培 养 条 件 ： 养 基 采 用 中 国 科 学 院 水 生 生 物 ２ 培
（ ０ １ ｃ 。 照培 养基 中不 添加 尿素 ， 余 浓度 分 ２ ± ）Ｃ 对 ｊ 其
别 为 ０ １ ， ． ３９，． ｍｏ Ｌ， ５个 梯度 ， ， ． ２１，． ８０ｍ ｌ 共 ０ ／ 每 个 梯 度 做 ３个平 行 。 间歇光 照 １ １１ 光 照 强 ２｝ ２ｈ， ： 度 为３５ ０ｌ。每天 定时摇 动进 行培 养 。 ０ ｘ
１３ 生 长 的 测 定 ： 天 用 血 球 记 数 板 计 数 。 ． 每
研 究 所 提 供 的 又 培 养 基 配 方 ， ａ Ｏ ．５ｇ Ｌ， Ｎ Ｎ ００ ／
ＫＨＰ ３ ２ ． ５ｇ Ｌ，柠 檬 酸铁 （ ％）． ｍＬ ２ Ｏ ・Ｈ Ｏ ００ ／ ０ １ ０１ ／ Ｌ 尿素 ００ ／ ， Ｂ × ０ ／ Ｖ ｌ × ０ ／ ， ． ｇ Ｌ Ｖ １ １ ｇ Ｌ， Ｂ２ １ ｇ Ｌ， ３ ２ ２
尿素浓度对三角褐指藻的生长及其脂肪酸组成的影响
研 究对该 藻的生长和脂肪酸组成 的影 响。结果表 明 ，尿 素的添加 明显提 高三角褐指 藻的细胞 密度 ， 生长随尿素浓度增加 （ ８０ ｏ １ ０ ．ｍｍ ｌ ）而增加 。二 十碳五 烯酸 （ Ｐ ／ Ｅ Ａ） 和 多不饱 和 脂肪 酸 （ Ｕ Ｐ．
Ｆｓ Ａ ）含量随尿素浓度增加 先上升后 下降，在 ２ １ ｏ Ｌ时 Ｅ Ａ的含 量最 高，达 到 １． ％ 。综合 ． ｍｍ ｌ ／ Ｐ ９１ 生物量与 Ｅ Ａ和 Ｐ Ｆ ｓ Ｐ Ｕ Ａ 产量 ，叉培养基 中以尿素浓度 为 ２ １ ｍ ｌＬ为 宜，此时的 细胞 密度较 高。 ．ｍ ｏ ／
ｖｓｎ ［ ］ ｍ ｒ ａ ｏ ｉｙｏ Ｃ ｅ ｉａ Ｅ ｇ ｅｒ ｇ ９ ３ ９ １ ｉ ｏ Ｊ ，Ａ ｅ ｃｎＳｃｅ ｆ ｈｍ ｃｌ ｎｉ ｅｉ ，１６ ，８ ：３ ｉ ｔ ｎ ｎ
［ ］许景文 ．炭 素纤维与活性炭纤维 ［ ］ ８ Ｊ ．离子交换 与吸附 ，１９ ，７ （ ） ６６ ９１ １ ：５ －５
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广西水产科技
内扩 散 吸附 和吸 附平衡 三个 阶段 。
．
立在微孔 吸 附容积充 填理 论 的 ＤＲ方程 ， — 线 性 相关 系数 ＞ ．９ 。 Ｏ ９５ （ ） 由 △日、ＡＧ值 可 知 Ａ Ｆ对苯 酚 的 ４ Ｃ 吸附 是 自发 的放热反 应 ，属 于物理 吸附 。
点 ，具有 较大开 发和利用 的潜力 。三角褐 指
藻 （ ｈ ｅｄ ｃ ｔｕ ｒｏｎ ｔｍ） 含 有 较 高 Ｐ ａｏａｔ ｕ ｍ ｔｃｒｕｕ ｙ ｉ
的 Ｅ Ａ，被广泛地 应用 于水产饵料 。 Ｐ
取 ４ｍｇ 干藻 粉 ，放人 带 螺 帽 的水 解 ０ 冻 管 内 ，加 ０３ ｌ 十九 酸 内标 液 （． ｇＬ ．ｍ 正 Ｏ４／ ） 和 ２ ｌＨ ＩＣ ， Ｈ 混合 液 （ 积 比为 ２ ｍＣ Ｃ３ Ｈ Ｏ － 体 ：
不同氮源对三角褐指藻生长和脂类含量的影响
不同氮源对三角褐指藻生长和脂类含量的影响摘要：研究了不同氮源及浓度对三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）的生长、总脂及脂肪酸组成的影响。
结果表明，三角褐指藻在氮源缺乏时生长缓慢，表现出油脂积累的特性。
以初始浓度大于3.9 mmol/L的氯化铵作为氮源，可以促进三角褐指藻生物量和油脂含量的同步增长。
高浓度的尿素有利于三角褐指藻的生长，但达到8.0 mmol/L时脂肪含量下降。
不同浓度硝酸钠都促进三角褐指藻的生长，但不能促进脂肪的积累。
脂肪酸组成分析表明，单不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例为45%～50%，受各种氮源变化的影响较小，可为生物柴油提供较好的流动性。
氮源的添加有利于二十碳五烯酸（EPA）和多不饱和脂肪酸（PUFAs）的合成，当氯化铵浓度为3.9 mmol/L时，EPA和PUFAs占总脂肪酸的比例达到最大，分别为20.4%和26.7%。
关键词：氮源；三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）；生长；脂肪；脂肪酸组成Abstract：Effects of different nitrogen sources and their concentrations on the growth，total lipids and fatty acids composition of Phaeodactylum tricornutum were studied. The results showed that P. tricornutum growed poorly in cultures without addition of any nitrogen source，but accumulated lipids effectively. The biomass and lipid content of P. tricornutum were promoted simultaneously with more than 3.9 mmol/L of initial ammonium chloride in medium；8.0 mmol/L of urea enhanced the biomass of algae while decreased the lipid content；in the range of tested concentration，sodium nitrate promoted growth of algae and depressed the accumulation of lipid. The fatty acids composition analysis showed that monounsaturated fatty acid（MPUAs）accounted for 45%～50% of the total fatty acids and was less affected by nitrogen sources，thus provided better mobility for biodiesel. The synthesis of C20∶5（n-3）（EPA）and polyunsaturated fatty acid （PUFAs）were increased with addition of nitrogen sources. With 3.9 mmol/L of ammonium chloride，the ratio of EPA and PUFAs to total fatty acids was the highest，20.4% and 26.7%，respectively.Key words：nitrogen sources；Phaeodactylum tricornutum；growth；lipid content；fatty acids composition微藻具有光合作用效率高、环境适应能力强、生长周期短、生物产量高等特点，被认为是最有前途的新型生物柴油原料之一[1，2]。
氮源及其浓度对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的影响
收稿日期:2003 03 30;修订日期:2004 03 20基金项目:国家自然科学基金项目资助(30070852)作者简介:蒋汉明(1976 ),男,安徽广德人,硕士,从事微藻多不饱和脂肪酸调控的研究。
感谢黄俊辉在脂肪酸分析上给予的帮助通讯作者:高坤山,ks gao@stu edu c n氮源及其浓度对三角褐指藻生长和脂肪酸组成的影响蒋汉明1高坤山1,2(1 汕头大学海洋生物研究所,汕头 515063;2 中国科学院水生生物研究所,武汉 430072)摘要:为了研究氮源的类型和浓度对微藻脂肪酸组成的影响,用含有不同浓度NO 3-、NH 4+、NH 2CONH 2的培养基,对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutu m )进行了培养,并测定了其生长和脂肪酸组成。
结果表明,培养基中不添加氮源时,三角褐指藻生长缓慢,但多不饱和脂肪酸(PUFAs)和C 18脂肪酸(C 18 0,C 18 2(n -6),C 18 3(n-6))占总脂肪酸的比例较高;氮浓度较低(<1 8mmol/L )时,三角褐指藻以NH 4+为氮源,生长较快;氮浓度较高(>3 5mmol/L)时,以NH 2CONH 2为氮源,生长较快。
以NH 4+或NH 2CONH 2为氮源时,EPA(Eicosapentaenoic acid)和PUFAs 占总脂肪酸的比例随着其浓度的增加而上升;而以NO 3-为氮源时,EPA 和PUFAs 随着NO 3-浓度增加先上升后下降,最适NO 3-浓度为1 8mmol/L,此时的EPA 占总脂肪酸的比例为16 7%。
EPA 占干重(w/w)的比例,不管是哪种氮源,均随着氮浓度的增加而升高,但是在0 9 3 5mmol/L 之间,3种氮源间EPA 含量差异不显著。
当氮源浓度为7 0mmol/L 时,以NH 2CONH 2为氮源,EPA 和PUFAs 含量最高,分别为2 6%和4 4%。
盐度对三角褐指藻生长及有机质积累的影响
盐度对三角褐指藻生长及有机质积累的影响赵萍;邹宁;孙东红;邵明伟【摘要】以三角褐指藻为材料,探究盐度对该藻生长、总脂等有机质含量的影响,探讨有利于油脂生产的盐度条件.结果显示,盐度变化对三角褐指藻生物量和有机质积累均有显著影响.在盐度70‰的海水中培养的细胞,其比生长速率比正常海水盐度(35‰)培养组降低了8.2％.正常海水盐度下,生物量及总脂含量最高,分别达1.92g/L和29.98％,且总脂单位体积产量极显著(p＜0.01)地高于其他各组,藻油产量高达47.67mg· L-1·d-1.在盐度17‰时,多糖含量最高,达5.5％.在盐度70‰时,蛋白质含量最高,达17.82％.【期刊名称】《中国油料作物学报》【年(卷),期】2013(035)002【总页数】4页(P217-220)【关键词】三角褐指藻;盐度;总脂;微藻油;蛋白质;多糖【作者】赵萍;邹宁;孙东红;邵明伟【作者单位】鲁东大学生命科学学院,山东烟台,264025;鲁东大学生命科学学院,山东烟台,264025;鲁东大学生命科学学院,山东烟台,264025;鲁东大学生命科学学院,山东烟台,264025【正文语种】中文【中图分类】Q949.93微藻是一类古老低等，在陆地、海洋、淡水湖泊等分布广泛的光合自养植物，能够利用无机小分子大量合成蛋白质、油脂(主要是甘油三酯)、多糖、色素等物质，使其在医药工业、食品工业、动物饲料、环境检测、环境净化、生物技术、可再生能源制造等领域具有很好的开发前景。
近年来，全球范围内的能源危机与环境问题日益加剧，与环境友好的可再生能源成为各国研究者们关注的焦点。
生物柴油是一种新兴的可再生生物质能，硫化物等有害气体排放量低，生物降解率高达98%，降解速度快，且可直接添加至柴油机中使用。
生物柴油在欧美、巴西等国家已经开始部分取代化石燃料市场，生物柴油在我国的研究与应用正蓬勃发展。
传统生产生物柴油的原料多为菜籽、大豆和棕榈等油料农作物，在国家“不能与粮争地”、“不能与人争粮”、“不能与人争油”、“不能污染环境”的“四不”政策下，微藻被认为是能够替代化石燃料的最有希望和前途的原料。
紫外辐射对小球藻光合性能及油脂积累的影响
紫外辐射对小球藻光合性能及油脂积累的影响紫外辐射对小球藻光合性能及油脂积累的影响引言小球藻(algae)是一类单细胞藻类生物，具有极高的生物多样性和广泛的分布。
它们是海洋和淡水生态系统中最重要的生物之一，对生态系统的稳定性和功能具有至关重要的作用。
光合作用是小球藻生长和生存所必需的过程，而紫外辐射则被认为是光合生物体受到的主要环境胁迫因素之一。
本文将探讨紫外辐射对小球藻光合性能和油脂积累的影响。
光合性能受紫外辐射的影响小球藻的光合性能受到紫外辐射的不同波长和强度的影响。
紫外B波段(280-320nm)和紫外A波段(320-400nm)是最具生物影响的部分。
研究发现，紫外辐射可以引起小球藻细胞膜的氧化损伤，导致细胞膜透性的改变和细胞膜脱落，从而降低光合作用速率和生物量积累。
此外，紫外辐射还会影响光合色素的产生和积累，降低光合色素的丰度和光能利用效率。
油脂积累受紫外辐射的调控小球藻生物量中的油脂是一个重要的能量和碳源。
研究发现，紫外辐射对小球藻的油脂积累具有显著的影响。
一些实验证实，适当的紫外辐射可以促进小球藻细胞内油脂的积累。
紫外辐射可以刺激油脂合成途径的活性，增加油体数量和大小，从而提高油脂的积累。
然而，高强度和长时间暴露在紫外辐射下会导致小球藻细胞产生过氧化物的蓄积，破坏膜结构并抑制油脂积累。
因此，在调控油脂积累的过程中，紫外辐射的剂量和时间应当得到精确控制。
小球藻对紫外辐射的适应性小球藻对紫外辐射具有一定的适应性和耐受性。
通过长期暴露在辐射不同剂量和波段的紫外辐射下的培养实验，一些小球藻株已经表现出了一定的适应性。
这些适应性表现在细胞膜的稳定性和抗氧化能力的提高，光合色素的调整以及油脂合成途径的改变。
适应性的产生是小球藻在长期进化过程中对环境压力的选择适应的结果，这一适应性为小球藻在紫外环境中的生存提供了一定的保障。
结论紫外辐射对小球藻的光合性能和油脂积累具有复杂的影响。
适当的紫外辐射可以调节小球藻的光合调节机制，并促进油脂积累。
利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法[发明专利]
![利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/12b22588fc0a79563c1ec5da50e2524de518d0f4.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810229289.2(22)申请日 2018.03.20(71)申请人 中国科学院烟台海岸带研究所地址 264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号(72)发明人 崔玉琳 初金玲 秦松 (74)专利代理机构 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002代理人 李颖 周秀梅(51)Int.Cl.C12N 1/38(2006.01)C12N 1/12(2006.01)C12P 7/64(2006.01)C12R 1/89(2006.01)(54)发明名称利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法(57)摘要本发明属于生物技术领域，具体的说是一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法。
向培养至对数生长期接近稳定期的三角褐指藻液中加入添加剂进行激素诱导，而后在23-25℃、光强30-35μmoL ·m -2·s -1、光暗比12h/12h条件下培养6天，即实现油脂的积累；其中，添加剂为茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸中的一种或几种的组合，添加剂的添加量为每升藻液中13-15mg茉莉酸甲酯、5-7mg脱落酸和1-3mg水杨酸。
本发明方法简单易行、成本低、无污染、稳定高效。
采用本发明方法调控后获得的藻体油脂含量高，增加迅速，可以作为工业化生物产油原料。
权利要求书1页 说明书4页 附图2页CN 108342349 A 2018.07.31C N 108342349A1.一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法，其特征在于：向培养至对数生长期接近稳定期的三角褐指藻液中加入添加剂进行激素诱导，而后在23-25℃、光强30-35μmoL ·m -2·s -1、光暗比12h/12h条件下培养6天，即实现油脂的积累；其中，添加剂为茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸中的一种或几种的组合，添加剂的添加量为每升藻液中13-15mg茉莉酸甲酯、5-7mg脱落酸和1-3mg水杨酸。
三角褐指藻作为饲料蛋白质的开发前景研究
子 天平上 称其准 确重量 。将 ３ 样 品于鼓 风干燥 组
箱 中 １ ５℃ ， ２ｈ 冷却称 重 。 ０ 烘 后
大培养 一周左 右 。
１ ２ 培 养液 ． 培养 液选 择 Ｆ ２培 养 液 。海水 为 取 白海 边 ／ 的天然海 水 ， 滤 后 加 入 Ｆ ２所 需 的 药 品 ， 菌 过 ／ 灭
《 北渔业 》Ｏ ０年 第 １ 河 ２１ ２期 （ 第 ２ ４期 ） 总 ０ 马斯 亮蓝 法测定其含 量 。 ３ ． ６ 降到 ２ ． ２ 。 ４ ２／ ９下 ５ １
∞ 强 加
ｏ研 究与探讨
２ 实验结果
２ １ 藻泥处 理 ．
３ 讨 论
柏
加
啉
从 图 １可 以看 出 ， 三角 褐 指 藻 的培 养 过 程 在 中， 随着生长 速度 的加快 ， 藻体体 内的蛋 白质处 于
一
般 静置 一夜 ， 二天倒 去上清 ， 到藻泥 。 第 得
养殖饵料 生产 和高价值 活性 产物开 发利用 的优质
经济微 藻 ， 具有 非常好 的开 发利用前 景 。
１ ４ ２ 藻 液 的 处理 将 藻 泥 摇 匀 ， 量 筒 量 取 ．． 用
５ ０ｍＬ藻 泥于离 心 管 中 ， 共量 取 ６组 。于 离 心机 中以 ３５ ０ｒ ｍｉ 心 １ ｉ 。倒 去 上 清 ， 入 ０ ／ ｎ离 ５ｒ ｎ ａ 加 蒸 馏水 洗涤 离心两 次后 备用 。 将 离心 管 中 的 藻 泥 移 至 １ ０ ｍＬ小 烧 杯 中 ０
染 问 题 ， 聚糖 的 絮 凝 效 果 和 安 全 问 题 是 最 好 壳
的 。将 壳 聚 糖溶 于 ０ ５ 稀 乙 酸 溶 液 中 ， 成 ２ ） ． 配
ｇ Ｌ的 壳聚糖溶 液 。用 ０ ０ ８ｇ Ｌ的浓 度进 行 絮 ／ ． ０ ／
光照对眼点拟微绿球藻和三角褐指藻生长及总脂的影响
光照对眼点拟微绿球藻和三角褐指藻生长及总脂的影响王付冬;桑敏;李爱芬;张成武【摘要】研究了不同光照强度及单、双侧光照对眼点拟微绿球藻(Nannochloropsis oculata)和三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的生长、总脂及叶绿素a的影响.结果表明:眼点拟微绿球藻的生物量随光照强度的增加而升高,相同光照强度下单侧光照优于双侧;三角褐指藻的生物量受光照强度及单、双侧光照的影响不明显.眼点拟微绿球藻的总脂含量随光照强度的升高先增加后减少;三角褐指藻的总脂含量随光照的增强呈上升趋势.两种藻的叶绿素a含量随藻体总脂含量的升高而降低.综合考虑,眼点拟微绿球藻较三角褐指藻进行油脂生产更有优势.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2010(035)006【总页数】5页(P71-75)【关键词】眼点拟微绿球藻;三角褐指藻;生物量;叶绿素a含量;总脂含量;单位体积总脂产量【作者】王付冬;桑敏;李爱芬;张成武【作者单位】暨南大学,水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广州,510632;暨南大学,水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广州,510632;暨南大学,水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广州,510632;暨南大学,水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】TQ642;P74Abstract:The effectsof different illumination and one-side versus two-side illumination on the growth, total lipid and chlorophyll a content ofNannochloropsis oculataandPhaeodactylum tricornutumwere studied.An increase of the illumination produced an increase of the biomass ofN annochloropsis oculata,and the t wo-side illumination was superior to one-side illuminalion under the same illumination;the biomass ofPhaeodactylurn tricornutumshowed little difference under the different illumination.The total lipid content ofNannochloropsis oculataincreased,and then decreased with the increase of illumination;the total lipid content ofPhaeodactylum tricornutumincreased with the increase of illumination.The chlorophyll a contents ofNannochloropsis oculataandPhaeodactylum tricor m utum reduced with the increase of total lipid content.The results showed that compared withPhaeodactylum tricornutum,Nannochloropsis oculata could be considered as feedstocks for lipid production.Key words:Nannochloropsis oculata;Phaeodactylumtricornutum;biomass;chlorophyll a content;total lipid content;lipid productivity石化燃料的日益匮乏和燃烧带来的环境污染等问题都将会影响人类的可持续发展,寻找绿色可再生能源是一项重要的战略任务[1]。
不同培养条件对三角褐指藻生长及其生物活性成分积累的影响
不同培养条件对三角褐指藻生长及其生物活性成分积累的影响张文源;高保燕;李爱芬;张成武【期刊名称】《海洋科学》【年(卷),期】2016(040)005【摘要】In this study, the effects of mL1 and ASW media containing NaNO3, CO(NH2)2, or NH4HCO3 on the growth and accumulation of bioactive compounds [fucoxanthin, chrysolaminaran, and eicosapentaenoic acid (EPA)] by the marine diatomPhaeodactylum tricornutum were investigated; and the total lipid content and fatty acid com-position were analyzed. The results showed that maximum biomass concentration in mL1 medium with urea as the nitrogen source was 3.7 g/L. Fucoxanthin content initially increased and then decreased during culture under dif-ferent conditions, and the highest quantities that accumulated were 13.27 mg/g (NaNO3), 13.23 mg/g (CO(NH2)2), and 13.89 mg/g (NH4HCO3) in mL1 medium and 13.2 mg/g (NaNO3), 14.92 mg/g (CO(NH2)2), and 13.6 mg/g (NH4HCO3) in ASW medium, indicating that the nitrogen source had a weak effect on fucoxanthin accumulation. Chrysolaminaran content increased gradually during the culture period, and the highest contents were 9.82 mg/g (NH4HCO3) in mL1 and 8.59 mg/g (NaNO3) in ASW on day 15. The total lipid content changed slightly under the different conditions, and the maximum values were 24.18% (NH4HCO3) in mL1 and 23.79% (NaNO3) in ASW, which were observed during the stationary phase.The fatty acid profiles were myristic acid (C14: 0), palmitic acid (C16: 0), palmitoleic acid (C16: 1), stearic acid (C18: 0), oleic acid (C18: 1), linoleic acid (C18: 2), eicosaenoic acid (C20: 1), tetracosanoic acid (C24: 0), and EPA (C20: 5). The EPA content decreased gradually as culture time was extended. Urea was the optimal nitrogen source to accumulate EPA.%以三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)为研究材料,比较了NaNO3、NH4HCO3和CO(NH2)2为氮源的两种培养基(mL1和 ASW培养基)对其生长和生物活性成分(岩藻黄素、金藻昆布糖和二十碳五烯酸(C20：5, EPA))时相积累的影响,同时分析了脂肪酸组成和总脂含量的变化。
不同光径对两株土壤绿藻生长及脂类积累的影响
不同光径对两株土壤绿藻生长及脂类积累的影响展望;桑敏;李爱芬;张成武【期刊名称】《可再生能源》【年(卷),期】2010(028)003【摘要】以土壤绿藻1791和1792为试验材料,采用BG-11培养基,分析测定在Φ3×60,Φ6×60 cm两种光径条件下藻的生长和总脂含量.结果表明,两株绿藻在3 cm光径条件下培养获得的最终生物量干重都高于6 cm光径条件,绿藻1791在不同光径条件下的生长从第2天开始出现差异,3 cm试验组的最终于重为4.56g/L,6cm试验组为3.00 g/L.绿藻1792在培养4d后藻的生长出现差异,最终3 cm 试验组的干重为4.52g/L,6 cm试验组为3.88g/L.两株绿藻的叶绿素a含量在培养过程中呈现先上升后下降的趋势.绿藻1791在不同光径条件下的最终总脂含量都比1792的低,最高总脂含量均出现在3 cm光径试验组.在此条件下获得的最大总脂收获量分别为1.63 g/L和1.94g/L.【总页数】5页(P67-71)【作者】展望;桑敏;李爱芬;张成武【作者单位】暨南大学水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东,广州,510632;暨南大学水生生物研究中心,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】TK6;Q949.2【相关文献】1.不同硝酸钠浓度对多形拟绿球藻和模式拟绿球藻生长及脂类积累的影响 [J], 张敬键;展望;李爱芬;张成武2.不同氮浓度对一株产油绿球藻生长、脂类积累及脂肪酸r分布的影响 [J], 李涛;许瑾;吴华莲;王铭;向文洲3.不同浓度柠檬酸对2株绿藻生长及总脂含量影响 [J], 梁英;王玥;石伟杰;田传远;赖秋璇;王帅4.光径及氮浓度对缺刻缘绿藻生长、油脂和花生四烯酸积累的影响 [J], 印尤强;黄罗冬;胡强;张成武5.不同氮源及氮浓度对耐高盐真眼点藻生长、脂类积累及脂肪酸组成的影响 [J], 赵伟;李涛;吴华莲;陈浩;刘德海;向文洲;吴后波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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中国油脂
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油脂化学
光径对三角褐指藻生长及油脂产量的影响
赵 萍，邹 宁，谭 青，杜晓凤，孙东红
( 鲁东大学 生命科学学院，山东 烟台 264025)
摘要： 以三角褐指藻( Phaeodactylum tricornutum) 为原料，采用单因素实验研究 5、10、15、20 cm 4 种
图 1 光径对三角褐指藻生长的影响
由图 1 可以看出，反应器光径越小，最大细胞密 度值越高。虽然反应器表面的光照是持续且一致 的，但在一定体积的反应体系中，由于光线有限的穿 透力以及藻体之间的相互遮挡作用，使得藻细胞处 于光暗循环的环境中。在小光径的反应器中，藻细 胞通过运动得到光照时间的比例最大。而光径越 大，每个藻细胞接受的光照越少，生长代谢越缓慢。 从 20 cm 到 5 cm，光径缩小了 4 倍，而最高细胞密度 只增加了 34． 57% 。这说明，5 cm 光径反应器培养 的藻细胞得到的光照超过或接近光饱和点，光照过 剩，光能利用率和转化率降低。在培养开始的 1 ～ 3 d 内，10 cm 光径反应器中藻细胞的生长速度不低
图 2 光径对三角褐指藻生物量的影响
由图 2 可以看出，初始接种时，各实验组生物量 变化不明显。培养 2 ～ 6 d 时，藻细胞进入指数生长 期，生物量增幅较大。其中，5 cm 光径反应器中藻 细胞生物量明显高于其他反应器，生物量积累的趋 势是随光径增大而减小的； 15 cm 和 20 cm 光径反 应器中藻细胞生物量的差异较小，说明较低光照强 度的变化对三角褐指藻生物量的影响不大，这一结 论与王付东等［8］的报道一致。培养 6 d 之后，藻细 胞进入稳定期，生物量亦趋于稳定。
收稿日期： 2012 － 08 － 06； 修回日期： 2012 － 12 － 23 作者简介： 赵 萍（ 1987） ，女，在读硕士，研究方向为三角褐指 藻的培养及活性物质的提取（ E-mail） sally_z9024@ 126． com。 通信作者： 邹 宁，教授，博士（ E-mail） ningzou76@ 126． com。
藻种： 三角褐指藻，由鲁东大学藻类研究所经济 藻类种质库提供。
培养基： 培养基配方参考文献［4］。 反应装置： 直立平板气升式光生物反应器，光径 梯度设置为 5、10、15、20 cm，每个反应器的光照总 面积一致，为 0． 25 m2 。 培养条件： 自然散射光照，培养液温度保持在 （ 20 ± 1） ℃ ，反应器底部安装由玻璃条固定的多孔 通气管，连续通气培养，培养体系 pH 维持在 7． 2 ～ 8． 0。 1． 2 细胞密度及生物量的测定 培养过程中，每天定时取样，用分光光度计测定 波长 660 nm 处藻液吸光度（ A660 ） ，利用血球计数板 进行细胞计数，计数 3 次取平均值，计算细胞密度。 依次取稳定期的藻液 10、20、30、40、50 mL，分 别加海水 40、30、20、10、0 mL。每个样品测定 A660 后，放入电热鼓风干燥箱中 105 ℃ 烘干，然后用电子 天平称量藻细胞干重，每个样品设 3 个平行组。以 A660 为横坐标，藻细胞干重为纵坐标，做标准曲线。 根据标准曲线，计算藻细胞的生物量［4 － 5］。 1． 3 有机物质含量的测定 1． 3． 1 总脂含量的测定 采收处于稳定期的三角褐指藻藻细胞，使用医 用大型离心机 3 000 r / min 离心 15 min。去离子水 洗涤藻泥 2 ～ 3 次后，置于电热鼓风干燥箱内 65 ℃ 烘干至恒重。准确称取藻粉 0． 15 g 于具塞试管中， 加入 1 mL 去离子水，反复冻融 3 次破壁。向具塞试 管中加 入 5 mL 无 水 乙 醇，混 匀 后 水 浴 45 ℃ 提 取 2 h［6］，提取时用高速混匀器间歇振荡。上清液移至 离心 管 中，加 入 高 效 活 性 白 土，充 分 摇 匀 脱 色 后， 5 000 r / min 离心 5 min，将上清液移至恒重的称量 瓶。向沉淀中加入无水乙醇重复提取 3 次，合并上 清液，65 ℃ 蒸 脱 乙 醇，并 干 燥 至 恒 重，称 量 总 脂 质 量。实验 3 次，取平均值。 总脂含量 = 总脂质量 / 藻粉干重 × 100% 总脂单位体积产量 = 生物量 × 总脂含量
2013 年 第 38 卷 第 3 期
中国油脂
41
于甚至稍优于 5 cm 光径反应器中藻细胞的生长速 率； 而从第 4 天起，由于反应器内细胞密度高到一定 程度，使得每个细胞得到的平均光照下降到光饱和 点以下，从而使得 5 cm 光径反应器的最高藻细胞密 度高于 10 cm 光径反应器。 2． 2 光径对三角褐指藻生物量及产量的影响
的生长繁殖快得多，每年每公顷微藻的油脂产量可 达到 49． 4 ～ 197． 7 m3 ，是棕榈油产量的 7 ～ 31 倍［1］。 利用微藻生产生物柴油产业化的关键是优化微藻的 培养条件，从生理生化水平对微藻进行代谢调控来 提高油脂产量。
微藻作为自养生物，光对其生长与代谢有着重 要影响。国内现有文献的研究范围多集中于不同光 强对藻细胞的各种影响，事实上，光对藻细胞生长和 代谢的限制不仅局限于比较反应器表面的光照强 度，特别是在反应器高密度培养条件下，每个藻细胞 接受的光 照 是 间 断 的［2］，要 综 合 考 虑 到 藻 细 胞 密 度、藻细胞个体间的光暗循环以及藻体之间的混合
微藻是地球上生长繁殖最快速的物种之一，短 时间内就可以获得相对巨大的生物量； 同时，微藻含 有丰富的油脂类产物，某些种类的微藻油脂含量占 微藻总生物量的 50% ～ 80% 。因此，微藻是生产生 物柴油众多原料中最具竞争力的物种。微藻无处不 在，淡水、海水、生活污水中均有繁殖，最重要的是微 藻的生长不依赖紧张的土地资源，却能提供数倍甚 至数十倍于油料作物的油脂产量。微藻比陆生作物
文献标志码： A
文章编号： 1003 － 7969（ 2013） 03 － 0039 － 04
Effect of light － path on the growth and oil yield of Phaeodactylum tricornutum
ZHAO Ping，ZOU Ning，TAN Qing，DU Xiaofeng，SUN Donghong
（ College of Life Science，Ludong University，Yantai 264025，Shandong，China） Abstract： Effects of light － path（ 5，10，15，20 cm） on the growth of Phaeodactylum tricornutum and accumulation of organics in the cells were studied by single factor experiment． The cultural conditions of high biomass and high oil yield of microalgae were screened，and the relationships between the total lipid accumulation，protein content and polysaccharide were also described． The results showed that the highest biomass，total lipid and polysaccharide contents obtained were 1． 822 g / L，31． 54% and 15． 32% in the 5 cm light － path reactor，respectively． In the 10 cm light － path reactor，the protein content of the cell reached 26． 73% ，which was the highest among the four light － path reactors． The highest volumetric yield of total lipid，protein and polysaccharide obtained in the 5 cm light － path reactor were 2． 47，1． 92 and 2． 45 times higher than that in the 20 cm light － path reactor，respectively． Key words： Phaeodactylum tricornutum； light － path； total lipid； protein； polysaccharide； growth
பைடு நூலகம்
1． 3． 2 蛋白质含量的测定 取稳定期藻液 100 mL，测定 A660 ，计算生物量
后，4 000 r / min 离心 5 min，用去离子水洗涤 3 次后 收集藻泥，加适量去离子水反复冻融 3 次，离心得上 清液，定容至 50 mL。采用考马斯亮蓝法测定蛋白 质含量［7］。实验 3 次，取平均值。
质含量最高，为 26． 73% ; 5 cm 光径反应器培养的三角褐指藻总脂、蛋白质、多糖的单位体积产量均
最高，分别为 20 cm 光径反应器培养的 2． 47、1． 92 和 2． 45 倍。
关键词： 三角褐指藻; 光径; 总脂; 蛋白质; 多糖; 生长
中图分类号： TS222； TS254． 1
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CHINA OILS AND FATS
2013 Vol. 38 No. 3
效率［3］。本文 利 用 新 型 气 升 式 反 应 器 对 三 角 褐 指 藻进行培养，研究光径 （ 光反应器厚度） 对微 藻 生 长、总脂、蛋白质、多糖含量的综合影响，以期在全面 了解光径对三角褐指藻细胞内代谢影响规律的基础 上，归纳出最有利于其油脂生产的光径条件，为实际 生产提供理论参考依据。 1 材料与方法 1． 1 藻种及生长条件