课件：双向琼脂扩散试验
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3．加样：于中央孔加入10μl兔抗人IgG（Ab），周 围孔依次加入生理盐水、倍比稀释的人血清 （Ag），每孔10μl。
4．将琼脂板平放于湿盒内，置37℃温箱中24h，观 察结果。
1:16 0
1:10 Ab 1:80
1:20 1:40
• 生理盐水孔为阴性对照，与中间孔空之间 无沉淀线。
• 周围孔（1:10、1:20、1:40 、1:80、 1:160） 的人血清）与中央孔（兔抗人IgG）之间是 否可出现清晰的乳白色沉淀线。
定时间后在两孔之间相遇并生成白色沉淀 线.
1．人血清。 2. 兔抗人 IgG 。 3．1%琼脂糖溶液。 4．其他：加样器、打孔器、湿盒、恒温
箱等。
1．制备琼脂板：标记载玻片，置于水平台上，吸管 吸取4.5ml 1%琼脂糖溶液均匀浇在载玻片上，注 意勿产生气泡。
2. 打孔：待琼脂糖完全凝固后，将琼脂板置于图样 上，用打孔器打孔（梅花孔中1周6，双排孔上下 各6），孔间距为5mm。
• Ab的效价以出现白色沉淀线的Ag的最高稀 释度表示。
ABC DEF
Ag Ab
A: 浓度Ag、Ab及分子量近似； B：浓度Ag、Ab近似，分子量Ag ＜ Ab ； C：浓度Ag、Ab近似，分子量Ag ＞ Ab ； D：浓度Ag＞Ab，分子量近似； E：浓度Ag＞Ab，分子量Ag＜Ab ； F：浓度Ag＜Ab，分子量Ag＞Ab ；
• 掌握双向琼脂扩散试验的原理 • 掌握抗体效价的测定方法及抗原抗体
性质的分析方法 • 了解双向琼脂扩散实验的应用
• 沉淀反应是可溶性抗原与相应抗体在 电解质存在的条件下发生特异性结合 所出现的沉淀现象。
+
可溶性抗原
相应抗体
沉淀物
可溶性抗原与相应抗体在含适量电解质
的琼脂糖凝胶板的对应孔中各自向四周自 由扩散,若两者分子比例适当,则在扩散的一
Ag1与Ag2完全相同； Ag1中与Ag2部分相同； Ag1与g2完全不同；
“1” 为单一抗原抗体系统。 “n” 为多个抗原抗体系统。
• 1.检测未知抗原或抗体 • 2.抗体效价滴定 • 3.抗原性质分析 • 4.抗原或抗体纯度鉴定
4．将琼脂板平放于湿盒内，置37℃温箱中24h，观 察结果。
1:16 0
1:10 Ab 1:80
1:20 1:40
• 生理盐水孔为阴性对照，与中间孔空之间 无沉淀线。
• 周围孔（1:10、1:20、1:40 、1:80、 1:160） 的人血清）与中央孔（兔抗人IgG）之间是 否可出现清晰的乳白色沉淀线。
定时间后在两孔之间相遇并生成白色沉淀 线.
1．人血清。 2. 兔抗人 IgG 。 3．1%琼脂糖溶液。 4．其他：加样器、打孔器、湿盒、恒温
箱等。
1．制备琼脂板：标记载玻片，置于水平台上，吸管 吸取4.5ml 1%琼脂糖溶液均匀浇在载玻片上，注 意勿产生气泡。
2. 打孔：待琼脂糖完全凝固后，将琼脂板置于图样 上，用打孔器打孔（梅花孔中1周6，双排孔上下 各6），孔间距为5mm。
• Ab的效价以出现白色沉淀线的Ag的最高稀 释度表示。
ABC DEF
Ag Ab
A: 浓度Ag、Ab及分子量近似； B：浓度Ag、Ab近似，分子量Ag ＜ Ab ； C：浓度Ag、Ab近似，分子量Ag ＞ Ab ； D：浓度Ag＞Ab，分子量近似； E：浓度Ag＞Ab，分子量Ag＜Ab ； F：浓度Ag＜Ab，分子量Ag＞Ab ；
• 掌握双向琼脂扩散试验的原理 • 掌握抗体效价的测定方法及抗原抗体
性质的分析方法 • 了解双向琼脂扩散实验的应用
• 沉淀反应是可溶性抗原与相应抗体在 电解质存在的条件下发生特异性结合 所出现的沉淀现象。
+
可溶性抗原
相应抗体
沉淀物
可溶性抗原与相应抗体在含适量电解质
的琼脂糖凝胶板的对应孔中各自向四周自 由扩散,若两者分子比例适当,则在扩散的一
Ag1与Ag2完全相同； Ag1中与Ag2部分相同； Ag1与g2完全不同；
“1” 为单一抗原抗体系统。 “n” 为多个抗原抗体系统。
• 1.检测未知抗原或抗体 • 2.抗体效价滴定 • 3.抗原性质分析 • 4.抗原或抗体纯度鉴定