复方苦参注射液关键工艺研究
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第 36 卷第 6 期 2011 年 3 月
Vol. 36，Issue 6 March，2011
复方苦参注射液关键工艺研究
刘晓谦1，2 ，王锦玉1，2 ，仝燕1，2 ，王瑞珍3 ，张彦霞3 ，王智民1，2* ，张启伟1，2
( 1. 中国中医科学院 中药研究所，北京 100700; 2. 中药质量控制技术国家工程实验室，北京 100700; 3. 山西振东制药股份有限公司，山西 长治 047100)
［摘要］ 目的: 为实现中药大品种的技术升级，进行复方苦参注射剂关键生产工艺的优化和示范性研究。方法: 以总生 物碱( 苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱) 和大泽米苷含量为指标，采用正交试验设计对关键工艺( 渗漉及活性炭脱色 工序) 进行优化，采用单因素法对影响醇沉的参数进行优化研究。结果: 复方苦参注射液渗漉提取的最佳工艺为 0. 8% 醋酸，4 倍量浸泡，2 倍量渗漉，流速 5 mL·min － 1 ·kg － 1 ，浸泡时间 9 h; 醇沉工艺为醇沉 3 次，醇沉浓度依次为 60% ，80% ，90% ; 活性 炭用量为 6‰，于 60 ℃ 加热 20 min。结论: 优化的复方苦参注射液渗漉工艺简单，不仅缩短了生产周期、减少了二次污染的潜 在风险，而且降低了醋酸的用量，保证了成品的酸不溶性灰分不超标，同时还更好地保留有效成分。
Agilent 1100 型高效液相色谱仪( 四元泵，二级 管阵列检测器) 及色谱工作站，Agilent 1260 型高效 液相色谱仪( 四元泵，二级管阵列检测器) 及色谱工 作站，KQ-250B 型超声波清洗器( 250 W，40 KHz) 。
苦参碱对照品 ( 批号 110805-200508 ) ，氧化苦 参碱对照品( 批号 110780-200506) ，槐定碱对照品 ( 批号 110784-200303 ) ，氧 化 槐 果 碱 对 照 品 ( 批 号
2. 4 浸泡时间考察 称取处方量药材 200 g( 苦参 140 g，白土苓 60
g) ，加入 4 倍量 0. 8% 醋酸。分别于 1，3，5，7，9，11， 13，15，24 h 移取 10 mL 浸泡液，同时补加等量新鲜 浸泡液，见图 1。
漉液的含固量。以总生物碱含量、大泽米苷含量、总 固量 3 个指标的综合评分对结果进行方差分析，结 果见表 3。权重系数分别为 0. 4，0. 3，0. 3，总分计算 公式见式 1。方差分析结果见表 4。
t / min
0. 00 25. 00 25. 01 35. 00
表 1 大泽米苷含量测定梯度洗脱程序
乙腈 /%
2 2 5 5
0. 2% 磷酸溶液 /%
98 98 95 95
流速 / mL·min － 1
0. 5 0. 5 1. 5 1. 5
2. 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二
磷减压干燥至恒重的大泽米苷对照品适量，加水溶 解，制成每 1 mL 含大泽米苷 20 μg 的溶液。 2. 2. 3 样品溶液的制备 精密量取渗滤液 1 mL 置 10 mL 量瓶中，加纯水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤 膜( 0. 45 μm) 滤过，取续滤液，即得。 2. 2. 4 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品 溶液各 5，10，15，20，25，35，45 μL 注入高效液相色 谱仪，记录峰面积，以进样量 X( μg) 为横坐标，峰面 积平均积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方 程。大泽 米 苷 在 0. 099 7 ～ 0. 897 μg 线 性 关 系 良 好，回归方程为 Y = 12. 496X( r = 1. 000 0) 。 2. 2. 5 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液 5 μL，连续进样 6 次，记录色谱峰的峰面积。大泽米 苷的峰面积 RSD 0. 15% ，表明仪器的精密度良好。 2. 2. 6 重复性试验 取批号为 20101113 的渗滤液 6 份，按上述方法进行制备并进行检测，记录各色谱 峰的峰面积。大泽米苷峰面积 RSD 1. 6% ，表明方 法重复性良好。 2. 2. 7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10 μL，分别于配制后的 0，3，6，9，12，15，24，48，72，96， 120 h 测定峰面积积分值，大泽米苷的 24 h 及 5 d 内 峰面积的 RSD 分别为 0. 46% ，0. 56% ，表明处理后 的样品 5 d 内稳定性良好。 2. 2. 8 加样回收率 精密吸取已测定含量的渗滤 液 6 份，分别按样品含量的 80% ，100% ，120% 精密 加入大泽米苷对照品溶液，按同样的方法制备供试 品溶液，在相同的色谱条件下，测定大泽米苷含量， 计算回收率和 RSD，测得大泽米苷低、中、高 3 个浓 度的平均回收率为 101. 1% ，101. 3% ，99. 9% ; RSD 分别为 0. 97% ，0. 93% ，0. 38% 。结果表明，该方法 回收率良好。 2. 3 复方苦参注射液渗漉提取工艺条件的优化 2. 3. 1 试验设计 以醋酸溶液浓度( A) 、用量( B) 、 渗漉速度( C) 为考察因素，每个因素设置 3 个水平， 见表 2。在平行操作条件下按照 L9 ( 34 ) 正交设计表 进行试验。 2. 3. 2 方法 称取处方量药材( 苦参 1. 4 kg，白土 苓 0. 6 kg) ，用相应浓度的 4 倍量酸水浸泡 24 h，按 正交设计表相应流速渗漉，同时，以与渗漉速度等速 的流速补加酸水至酸水用量与设计方案相同。收集 渗漉液，按 2. 1. 3，2. 2. 3 项下方法制备样品溶液，检 测渗漉液中总生物碱及大泽米苷含量，同时测定渗
第 36 卷第 6 期 2011 年 3 月
Vol. 36，Issue 6 March，2011
标，峰面积平均积分值为纵坐标，绘制标准曲线，苦 参碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱的回归方程 分别 为 Y = 682. 6X － 13. 94 ( r = 0. 999 8 ) ，Y = 844. 1X － 25. 93( r = 0. 999 9) ，Y = 828. 9X － 5. 184( r = 0. 999 8) ，Y = 1 573X － 38. 54( r = 0. 999 7) ; 线性 范围分别为 0. 050 4 ～ 0. 604，0. 372 ～ 4. 46，0. 049 2 ～ 0. 590，0. 049 8 ～ 0. 598 μg。 2. 1. 5 精密度试验 分别精密吸取上述对照品溶 液各 5 μL，连续进样 6 次，记录各色谱峰的峰面积。 苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱峰面积的 RSD 分别为 1. 9% ，0. 92% ，1. 9% ，1. 0% 。结 果 表 明仪器的精密度良好。 2. 1. 6 重复性试验 取批号为 20101113 的渗滤液 5 份，按上述方法进行制备并进行检测，记录各色谱 峰的峰面积。苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐 果碱 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1. 8% ，1. 4% ，1. 6% ， 1. 4% 。结果表明方法重复性良好。 2. 1. 7 稳定性试验 取同一样品溶液，分别于配制 后的 0，4，8，12，16，24 h 进样，记录各色谱峰的峰面 积。苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱峰面 积的 RSD 分别为 0. 84% ，1. 4% ，1. 8% ，1. 4% 。结 果表明常温下 1 d 内能保持较好的稳定性。 2. 1. 8 加样回收率试验 精密吸取测定含量的渗 滤液 6 份，精密加入适量的苦参碱、槐定碱、氧化苦 参碱、氧化槐果碱，按同样的方法制备样品溶液，在 相同的色谱条件下，苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧 化槐 果 碱 的 平 均 回 收 率 分 别 为 99. 5% ，99. 2% ， 100. 2% ，99. 9% ; RSD 分别为 1. 6% ，1. 4% ，1. 8% ， 1. 6% 。结果表明该方法回收率良好。 2. 2 大泽米苷含量测定方法 2. 2. 1 色 谱 条 件 Venusil MP C18 色 谱 柱 ( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ; 流动相乙腈-0. 2% 磷酸溶液， 洗脱梯度见表 1。检测波长 215 nm，柱温 25 ℃ 。
［关键词］ 复方苦参注射液; 渗漉工艺; 醇沉工艺; 脱色; 正交设计; 生物碱; 大泽米苷; HPLC
复方苦参注射液由苦参、白土苓制备而成，具有 清热利湿、凉血解毒、散结止痛之功效，临床主要用 于抗癌、缓解癌痛及出血、提高人体免疫功能等［1］， 因其疗效确切，本产品 2010 年的年销售额突破 5 亿 元，并呈快速增长的趋势，为了深入开展中药大品种 的技术升级和产品改造，本文以复方苦参注射液为 研究对象，以有效成分生物碱 ( 苦参碱、氧化苦参 碱、槐定碱、氧化槐果碱) 以及来源于白土苓的大泽 米苷为多成分质量评价指标，对其关键生产工艺，如 渗漉工艺、醇沉工艺及活性炭脱色工艺等进行优化 和科学评价，以期为大品种改造提供一种可借鉴的、 基于过程深入理解的研究模式。 1 材料
Y = 0. 4 × 100Ai / Amax + 0. 3 × 100Bi / Bmax + 0. 3 × Ci / Cmax ( 1)
其中 Ai 为任意次试验的总生物碱提取量，Amax 为生物碱提取量的最大值，Bi 为任意次试验的大泽 米苷提取量，Bmax 为大泽米苷提取量的最大值，Ci 为 任意次试验的总固量，C max 为总652-200301) 均购于中国药品生物制品检定所; 大泽米苷对照品( 自制，纯度 ＞ 98% ) ，苦参药材( 批 号 Q100613，山 西 沁 县 ) ; 白 土 苓 药 材 ( 批 号 20100325，贵州安顺) 。乙腈为色谱纯，水为高纯水， 其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2. 1 生物碱含量测定方法 2. 1. 1 色谱条件［2］ ALLTIMA AMINO 色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-3% 磷酸溶液-无 水乙醇( 80∶ 10∶ 10) ; 检测波长 220 nm，柱温 30 ℃ ， 流速 1. 0 mL·min － 1 。 2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二 磷减压干燥至恒重的苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、 氧化槐果碱对照品适量，分别加乙腈-无水乙醇( 80∶ 20) 溶解，制成每 1 mL 含苦参碱 0. 05 mg，槐定碱 0. 05 mg，氧化苦参碱 0. 15 mg，氧化槐果碱 0. 05 mg 的对照品溶液。 2. 1. 3 样品溶液的制备 精密量取渗漉液 1 mL， 置分液漏斗中，加入浓氨试液约 1 mL，用 42 mL 三 氯甲烷分 3 次萃取( 15，15，12 mL) ，收集三氯甲烷 液，蒸干，残渣加无水乙醇适量使溶解，并转移至 10 mL 量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤 膜( 0. 45 μm) 滤过，取续滤液，即得。 2. 1. 4 线性关系的考察 分别精密吸取上述对照 品溶液各 1，2，4，6，8，10，12 μL 注入 HPLC，每个体 积进样 2 次，记录峰面积，以进样量 X ( μg) 为横坐
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第 36 卷第 6 期 2011 年 3 月
Vol. 36，Issue 6 March，2011
表 2 复方苦参注射液渗漉提取工艺试验因素水平
水平
1 2 3
A 醋酸溶液浓度
/%
0. 5 0. 8 1. 0
B 用量 /倍
5 6 8
C 渗漉速度 / mL·min － 1 ·kg － 1
2. 75 3. 50 5. 00
［稿件编号］ 20110228011 ［基金项目］ 国家“重大新药创制”科技重大专项( 2009ZX09308003，2009ZX09301-005，2008ZX09202-009) ［通信作者］ 王智民，研究员，研究方向中药化学与中药质量控制， Tel / Fax: ( 010) 84014128，E-mail: zhmw123@ 263. net ［作者简介］ 刘晓谦，博士研究生，研究方向中药制剂和质量控制
net作者简介刘晓谦博士研究生研究方向中药制剂和质量控制复方苦参注射液由苦参白土苓制备而成具有清热利湿凉血解毒散结止痛之功效临床主要用于抗癌缓解癌痛及出血提高人体免疫功能等因其疗效确切本产品2010年的年销售额突破5元并呈快速增长的趋势为了深入开展中药大品种的技术升级和产品改造本文以复方苦参注射液为研究对象以有效成分生物碱苦参碱氧化苦参以及来源于白土苓的大泽米苷为多成分质量评价指标对其关键生产工艺如渗漉工艺醇沉工艺及活性炭脱色工艺等进行优化和科学评价以期为大品种改造提供一种可借鉴的基于过程深入理解的研究模式
Vol. 36，Issue 6 March，2011
复方苦参注射液关键工艺研究
刘晓谦1，2 ，王锦玉1，2 ，仝燕1，2 ，王瑞珍3 ，张彦霞3 ，王智民1，2* ，张启伟1，2
( 1. 中国中医科学院 中药研究所，北京 100700; 2. 中药质量控制技术国家工程实验室，北京 100700; 3. 山西振东制药股份有限公司，山西 长治 047100)
［摘要］ 目的: 为实现中药大品种的技术升级，进行复方苦参注射剂关键生产工艺的优化和示范性研究。方法: 以总生 物碱( 苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱) 和大泽米苷含量为指标，采用正交试验设计对关键工艺( 渗漉及活性炭脱色 工序) 进行优化，采用单因素法对影响醇沉的参数进行优化研究。结果: 复方苦参注射液渗漉提取的最佳工艺为 0. 8% 醋酸，4 倍量浸泡，2 倍量渗漉，流速 5 mL·min － 1 ·kg － 1 ，浸泡时间 9 h; 醇沉工艺为醇沉 3 次，醇沉浓度依次为 60% ，80% ，90% ; 活性 炭用量为 6‰，于 60 ℃ 加热 20 min。结论: 优化的复方苦参注射液渗漉工艺简单，不仅缩短了生产周期、减少了二次污染的潜 在风险，而且降低了醋酸的用量，保证了成品的酸不溶性灰分不超标，同时还更好地保留有效成分。
Agilent 1100 型高效液相色谱仪( 四元泵，二级 管阵列检测器) 及色谱工作站，Agilent 1260 型高效 液相色谱仪( 四元泵，二级管阵列检测器) 及色谱工 作站，KQ-250B 型超声波清洗器( 250 W，40 KHz) 。
苦参碱对照品 ( 批号 110805-200508 ) ，氧化苦 参碱对照品( 批号 110780-200506) ，槐定碱对照品 ( 批号 110784-200303 ) ，氧 化 槐 果 碱 对 照 品 ( 批 号
2. 4 浸泡时间考察 称取处方量药材 200 g( 苦参 140 g，白土苓 60
g) ，加入 4 倍量 0. 8% 醋酸。分别于 1，3，5，7，9，11， 13，15，24 h 移取 10 mL 浸泡液，同时补加等量新鲜 浸泡液，见图 1。
漉液的含固量。以总生物碱含量、大泽米苷含量、总 固量 3 个指标的综合评分对结果进行方差分析，结 果见表 3。权重系数分别为 0. 4，0. 3，0. 3，总分计算 公式见式 1。方差分析结果见表 4。
t / min
0. 00 25. 00 25. 01 35. 00
表 1 大泽米苷含量测定梯度洗脱程序
乙腈 /%
2 2 5 5
0. 2% 磷酸溶液 /%
98 98 95 95
流速 / mL·min － 1
0. 5 0. 5 1. 5 1. 5
2. 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二
磷减压干燥至恒重的大泽米苷对照品适量，加水溶 解，制成每 1 mL 含大泽米苷 20 μg 的溶液。 2. 2. 3 样品溶液的制备 精密量取渗滤液 1 mL 置 10 mL 量瓶中，加纯水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤 膜( 0. 45 μm) 滤过，取续滤液，即得。 2. 2. 4 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品 溶液各 5，10，15，20，25，35，45 μL 注入高效液相色 谱仪，记录峰面积，以进样量 X( μg) 为横坐标，峰面 积平均积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方 程。大泽 米 苷 在 0. 099 7 ～ 0. 897 μg 线 性 关 系 良 好，回归方程为 Y = 12. 496X( r = 1. 000 0) 。 2. 2. 5 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液 5 μL，连续进样 6 次，记录色谱峰的峰面积。大泽米 苷的峰面积 RSD 0. 15% ，表明仪器的精密度良好。 2. 2. 6 重复性试验 取批号为 20101113 的渗滤液 6 份，按上述方法进行制备并进行检测，记录各色谱 峰的峰面积。大泽米苷峰面积 RSD 1. 6% ，表明方 法重复性良好。 2. 2. 7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10 μL，分别于配制后的 0，3，6，9，12，15，24，48，72，96， 120 h 测定峰面积积分值，大泽米苷的 24 h 及 5 d 内 峰面积的 RSD 分别为 0. 46% ，0. 56% ，表明处理后 的样品 5 d 内稳定性良好。 2. 2. 8 加样回收率 精密吸取已测定含量的渗滤 液 6 份，分别按样品含量的 80% ，100% ，120% 精密 加入大泽米苷对照品溶液，按同样的方法制备供试 品溶液，在相同的色谱条件下，测定大泽米苷含量， 计算回收率和 RSD，测得大泽米苷低、中、高 3 个浓 度的平均回收率为 101. 1% ，101. 3% ，99. 9% ; RSD 分别为 0. 97% ，0. 93% ，0. 38% 。结果表明，该方法 回收率良好。 2. 3 复方苦参注射液渗漉提取工艺条件的优化 2. 3. 1 试验设计 以醋酸溶液浓度( A) 、用量( B) 、 渗漉速度( C) 为考察因素，每个因素设置 3 个水平， 见表 2。在平行操作条件下按照 L9 ( 34 ) 正交设计表 进行试验。 2. 3. 2 方法 称取处方量药材( 苦参 1. 4 kg，白土 苓 0. 6 kg) ，用相应浓度的 4 倍量酸水浸泡 24 h，按 正交设计表相应流速渗漉，同时，以与渗漉速度等速 的流速补加酸水至酸水用量与设计方案相同。收集 渗漉液，按 2. 1. 3，2. 2. 3 项下方法制备样品溶液，检 测渗漉液中总生物碱及大泽米苷含量，同时测定渗
第 36 卷第 6 期 2011 年 3 月
Vol. 36，Issue 6 March，2011
标，峰面积平均积分值为纵坐标，绘制标准曲线，苦 参碱、氧化苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱的回归方程 分别 为 Y = 682. 6X － 13. 94 ( r = 0. 999 8 ) ，Y = 844. 1X － 25. 93( r = 0. 999 9) ，Y = 828. 9X － 5. 184( r = 0. 999 8) ，Y = 1 573X － 38. 54( r = 0. 999 7) ; 线性 范围分别为 0. 050 4 ～ 0. 604，0. 372 ～ 4. 46，0. 049 2 ～ 0. 590，0. 049 8 ～ 0. 598 μg。 2. 1. 5 精密度试验 分别精密吸取上述对照品溶 液各 5 μL，连续进样 6 次，记录各色谱峰的峰面积。 苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱峰面积的 RSD 分别为 1. 9% ，0. 92% ，1. 9% ，1. 0% 。结 果 表 明仪器的精密度良好。 2. 1. 6 重复性试验 取批号为 20101113 的渗滤液 5 份，按上述方法进行制备并进行检测，记录各色谱 峰的峰面积。苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐 果碱 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1. 8% ，1. 4% ，1. 6% ， 1. 4% 。结果表明方法重复性良好。 2. 1. 7 稳定性试验 取同一样品溶液，分别于配制 后的 0，4，8，12，16，24 h 进样，记录各色谱峰的峰面 积。苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱峰面 积的 RSD 分别为 0. 84% ，1. 4% ，1. 8% ，1. 4% 。结 果表明常温下 1 d 内能保持较好的稳定性。 2. 1. 8 加样回收率试验 精密吸取测定含量的渗 滤液 6 份，精密加入适量的苦参碱、槐定碱、氧化苦 参碱、氧化槐果碱，按同样的方法制备样品溶液，在 相同的色谱条件下，苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、氧 化槐 果 碱 的 平 均 回 收 率 分 别 为 99. 5% ，99. 2% ， 100. 2% ，99. 9% ; RSD 分别为 1. 6% ，1. 4% ，1. 8% ， 1. 6% 。结果表明该方法回收率良好。 2. 2 大泽米苷含量测定方法 2. 2. 1 色 谱 条 件 Venusil MP C18 色 谱 柱 ( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ; 流动相乙腈-0. 2% 磷酸溶液， 洗脱梯度见表 1。检测波长 215 nm，柱温 25 ℃ 。
［关键词］ 复方苦参注射液; 渗漉工艺; 醇沉工艺; 脱色; 正交设计; 生物碱; 大泽米苷; HPLC
复方苦参注射液由苦参、白土苓制备而成，具有 清热利湿、凉血解毒、散结止痛之功效，临床主要用 于抗癌、缓解癌痛及出血、提高人体免疫功能等［1］， 因其疗效确切，本产品 2010 年的年销售额突破 5 亿 元，并呈快速增长的趋势，为了深入开展中药大品种 的技术升级和产品改造，本文以复方苦参注射液为 研究对象，以有效成分生物碱 ( 苦参碱、氧化苦参 碱、槐定碱、氧化槐果碱) 以及来源于白土苓的大泽 米苷为多成分质量评价指标，对其关键生产工艺，如 渗漉工艺、醇沉工艺及活性炭脱色工艺等进行优化 和科学评价，以期为大品种改造提供一种可借鉴的、 基于过程深入理解的研究模式。 1 材料
Y = 0. 4 × 100Ai / Amax + 0. 3 × 100Bi / Bmax + 0. 3 × Ci / Cmax ( 1)
其中 Ai 为任意次试验的总生物碱提取量，Amax 为生物碱提取量的最大值，Bi 为任意次试验的大泽 米苷提取量，Bmax 为大泽米苷提取量的最大值，Ci 为 任意次试验的总固量，C max 为总652-200301) 均购于中国药品生物制品检定所; 大泽米苷对照品( 自制，纯度 ＞ 98% ) ，苦参药材( 批 号 Q100613，山 西 沁 县 ) ; 白 土 苓 药 材 ( 批 号 20100325，贵州安顺) 。乙腈为色谱纯，水为高纯水， 其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2. 1 生物碱含量测定方法 2. 1. 1 色谱条件［2］ ALLTIMA AMINO 色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-3% 磷酸溶液-无 水乙醇( 80∶ 10∶ 10) ; 检测波长 220 nm，柱温 30 ℃ ， 流速 1. 0 mL·min － 1 。 2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二 磷减压干燥至恒重的苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、 氧化槐果碱对照品适量，分别加乙腈-无水乙醇( 80∶ 20) 溶解，制成每 1 mL 含苦参碱 0. 05 mg，槐定碱 0. 05 mg，氧化苦参碱 0. 15 mg，氧化槐果碱 0. 05 mg 的对照品溶液。 2. 1. 3 样品溶液的制备 精密量取渗漉液 1 mL， 置分液漏斗中，加入浓氨试液约 1 mL，用 42 mL 三 氯甲烷分 3 次萃取( 15，15，12 mL) ，收集三氯甲烷 液，蒸干，残渣加无水乙醇适量使溶解，并转移至 10 mL 量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤 膜( 0. 45 μm) 滤过，取续滤液，即得。 2. 1. 4 线性关系的考察 分别精密吸取上述对照 品溶液各 1，2，4，6，8，10，12 μL 注入 HPLC，每个体 积进样 2 次，记录峰面积，以进样量 X ( μg) 为横坐
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第 36 卷第 6 期 2011 年 3 月
Vol. 36，Issue 6 March，2011
表 2 复方苦参注射液渗漉提取工艺试验因素水平
水平
1 2 3
A 醋酸溶液浓度
/%
0. 5 0. 8 1. 0
B 用量 /倍
5 6 8
C 渗漉速度 / mL·min － 1 ·kg － 1
2. 75 3. 50 5. 00
［稿件编号］ 20110228011 ［基金项目］ 国家“重大新药创制”科技重大专项( 2009ZX09308003，2009ZX09301-005，2008ZX09202-009) ［通信作者］ 王智民，研究员，研究方向中药化学与中药质量控制， Tel / Fax: ( 010) 84014128，E-mail: zhmw123@ 263. net ［作者简介］ 刘晓谦，博士研究生，研究方向中药制剂和质量控制
net作者简介刘晓谦博士研究生研究方向中药制剂和质量控制复方苦参注射液由苦参白土苓制备而成具有清热利湿凉血解毒散结止痛之功效临床主要用于抗癌缓解癌痛及出血提高人体免疫功能等因其疗效确切本产品2010年的年销售额突破5元并呈快速增长的趋势为了深入开展中药大品种的技术升级和产品改造本文以复方苦参注射液为研究对象以有效成分生物碱苦参碱氧化苦参以及来源于白土苓的大泽米苷为多成分质量评价指标对其关键生产工艺如渗漉工艺醇沉工艺及活性炭脱色工艺等进行优化和科学评价以期为大品种改造提供一种可借鉴的基于过程深入理解的研究模式