斐林试剂和双缩脲试剂

斐林试剂和双缩脲试剂
新版高中《生物》教材中有“生物组织中可溶性还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定”实验。

可溶性还原糖用斐林试剂鉴定，蛋白质用双缩脲试剂鉴定。

斐林试剂与双缩脲试剂都是由甲液（NaOH ）和乙液（4CuSO ）组成，但参加鉴定反应时，却是以不同的反应物出现。

不明白它们参与的反应，很容易把两者混淆，甚至误认为就是同一种试剂。

斐林试剂是指新制的()2OH Cu 悬浊溶液。

还原性糖与新制的()2OH Cu 在加热煮沸条件
下，能生成砖红色的O Cu 2沉淀。

实验过程中，必须先把甲液（NaOH ）和乙液（4CuSO ）等量混合，让其反应生成()2OH Cu 后，才能加入到含还原性糖组织液中。

如果先后或者分别把NaOH 和4CuSO 溶液加入到含还原性糖组织液中，组织液中的有机酸会与NaOH 迅速反应，使反应物中没有()2OH Cu 或()2OH Cu 不足，从而使还原性糖与氢氧化铜的反应不能进行或现象不明显，影响了还原性糖的鉴定。

双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与+2Cu 反应，生成红紫色的络合物。

所有的蛋白质均有此显色反应。

双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂。

它是NaOH 和4CuSO 两种溶液。

在实验过程中，先在含蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH 溶液，混合均匀后，再滴几滴4CuSO 溶液（量较少）。

即先后加入NaOH 和4CuSO 溶液。

如果在NaOH 中滴几滴4CuSO 溶液混合后，再加入到含蛋白质的溶液中，混合液中就没有+2Cu ”，显色反应就不会发生。

资料来源 《生物学教学》2003.3。