sf9细胞冻存方法

sf9细胞冻存方法
SF9细胞是一种昆虫表达系统中常用的细胞系。

下面是一种常
见的SF9细胞冻存方法：
1. 在培养皿中培养SF9细胞至高密度（通常为培养皿80-90%
的细胞覆盖度）。

2. 用DPBS（无钙无镁的磷酸盐缓冲液）洗涤细胞一次，以去
除培养基和细胞碎片。

3. 使用酶解液（例如Trypsin-EDTA）将细胞从培养皿中解离。

根据细胞的密度，可以使用适当的溶菌酶/胰酶酶解细胞。

4. 加入同等体积的冻存培养基（通常为细胞培养基中含有20-50%的人血清、10%的二甲基亚砜（DMSO）和1-2%的低浓度抗生素的培养基）。

5. 轻轻混合并将混合液转移到冻存管中。

6. 使用-80℃冰箱或液氮罐冷却细胞冻存过程。

最好将细胞冻
存在气相中且不接触液氮。

7. 冻存细胞超过12小时后，将冻存管从液氮中转移到-150℃
以上的长期液氮储存罐中。

使用这种冻存方法，SF9细胞可以在-70℃至-80℃下保存6个
月至1年以上。

为了确保细胞质量，建议每6个月检查一次细胞的生长和表达能力。

请注意，在冻存细胞前，确保培养细
胞没有被细菌、真菌等污染，以避免污染的细胞冻存在长期储存中。