西地兰对心肌收缩力的影响
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西地兰对心肌收缩力的影响
西地兰对心肌收缩力的影响
西地兰对心肌收缩力的影响
西地兰对心肌收缩力的影响
【原理】西地兰,又名毛花苷C,是治疗急性心力衰竭时最常用的洋地黄类强心药。
其具有较强的加强心肌收缩力的作用。
目前被广泛接受的机制学说是该药物直接作用于心
肌Na,K-ATP酶,使酶失活,Na泵出减少,从而使质膜两侧Na浓度差减小,降低了Na-Ca
交换(Na进Ca出)的驱动力,造成胞内Ca
2++++++2++2+2+增加,Ca浓度增加又引发了一系列的生化反应,最终导致心肌收缩力增强,即
正性肌力作用。
但高剂量的易导致中毒(Ca浓度过高),出现心动过缓和心律失常等。
本实验是利用离体蛙心灌流的方法,观察西地兰的强心作用和过量后的中毒症状。
【目的】1、观察药物西地兰对离体蛙心收缩力的影响;2、掌握离体蛙心的实验操作
过程。
【实验对象】蟾蜍
【实验器材】蛙类手术器械一套。
生物信号采集处理系统,张力换能器,铁支架,双
凹夹,试管夹,蛙心插管,蛙心夹,滴管,丝线。
【药品】西地兰(0.02mg/ml)、任氏液
【实验步骤和观察项目】
一、离体蛙心的准备 2+
1、用探针捣毁脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。
用镊子夹起皮肤,然后将胸部剑
突软骨下方的皮肤剪出一个“v”字形切口,暴露出剑突。
用镊子夹起剑突下端,在肌肉
层上剪出“v”形切口。
再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨,并把左右两侧胸骨完全剪掉,眼
科剪仔细剪开心包膜,暴露心脏。
2、仔细识别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。
3、结扎血管在左右主动脉下穿一根线备用,用玻璃分针将心尖向上翻至背面,以备
用线将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎,将心脏恢复至原位。
在左主动脉远心端穿线结
扎并在左右主动脉下穿根线备用。
4、蛙心插管提起左主动脉远端缚线,用眼科剪在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一“v”形切口,将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉,插至动脉圆锥时,略向后退,在心室收缩时沿心室后壁方向下插,经主动脉窦插入心室腔内。
若插管成功进入心室,管内液体会随着心室搏动而上下移动。
用左右主动脉下的备用线结扎插管,并将结扎线固定在插管侧面的小突起上。
5、游离心脏提起插管,在结扎线远端分别剪断主动脉左右分支,剪断左右肺动脉和前后腔静脉,将心脏离体。
用滴管吸尽插管内的余血,加入新鲜任氏液反复冲洗数次,直至液体完全澄清。
保持灌流液面高度恒定(1—2ml),即可进行下面的实验。
6、仪器连接用试管夹将制备好离体蛙心固定于支架上,在心脏舒张期用蛙心夹夹住心尖部,并连接到张力换能器上(勿让心脏受到过度牵拉)。
将张力换能器的输出线与生物信号采集处理系统相连。
1、描记未用西地兰处理的蛙心收缩曲线
2、观察西地兰的影响
(1)在插管内任氏液中滴加0.02ml西地兰注射液,观察心跳曲线变化并记录。
待效应明显后,吸出灌流液,用新鲜任氏液换洗数次,直至心跳曲线恢复正常。
(2)然后分别以0.01ml为梯度依次递增西地兰溶液的滴加量并重复上述操作,对比观察全部心跳曲线,讨论分析结果。
1、蛙心插管一定要插入心室。
切勿用力过大,插入过深,损伤心肌,手指不要碰到心脏,以免造成心肌缺血影响后面实验。
2、结扎静脉时,要远离静脉窦(起博点),以避免结扎住静脉窦。
3、换液时,插管内液面应保持相同高度,保证心脏前后负荷相同。
加药时用吸管充分混匀。
4、每个实验观察项目都应有前后对照,并注意避免通过滴管造成所用试剂之间的相互污染。
5、固定换能器时,头端应稍向下倾斜,以免自心脏滴下的液体流入换能器。