动物传染病实验室诊断技术
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具有重要的生理功能。细胞膜的半渗透性能允许可溶性物质通过；膜上的载体蛋白能选择性地运输
营养物质，排除代谢产物，从而维持细菌的内外交换。细胞膜如受到损伤细菌将死亡。
任务一 细菌的形态与构造
3、细胞质
细胞质是一种无色透明、均匀的黏稠胶体，外有细胞膜包围。主要分是水、蛋白质、核酸、脂类及
少量多糖和无机盐类。细胞质中含有许多酶系统，是细菌进行新陈代谢的主要场所。细胞质中还含
壁干重的50%。革兰氏阴性菌细胞壁较薄（10~15nm)，但结构较复杂，在1~2层肽聚糖结构外侧，
尚有其特殊组分﹣外膜，约占细胞壁干重的80%。革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁结构显著不同，导
致这两类细菌在染色性、抗原性、致病性及对药物的敏感性等方面有很大差异。
2、细胞膜
是典型的单位膜结构，厚8~10 nm ，外侧紧贴细胞壁，某些革兰氏阴性菌还具有细胞外膜。细胞膜
用 O : K : H 、 O : K 、 O : H 表示。但即使在同一地区，其优势血清型也不尽相同。
本菌抵抗力弱，常用的化学消毒剂数分钟即可将其灭活，如5%~10％的漂白粉、3％的来苏儿、5％
的石炭酸等均可迅速将其杀死。
任务四 重要的动物细菌介绍
二、沙门氏菌
沙门氏菌属于肠杆菌科沙门氏菌属。本菌为两端钝圆的中等大小杆菌，革兰氏染色为阴性，大多数
任务三 细菌的非培养检测
（四）动物接种试验
动物试验是细菌检验中常用的基本技术，有时为了证实所分离的细菌是否有致病性，可进行动物接
种试验，通常选择对该种细菌最敏感的动物进行人工感染，最常用的是本动物接种和易感动物接种。
将病料用适当的途径进行接种，然后根据对不同动物的致病力、症状和病变特点来帮助诊断。当实
阴性。本菌为兼性厌氧菌，对糖类发酵能力强。在普通培养基上生长良好，形成圆形、光滑、突起、
半透明、中等大小菌落；在麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌
落；在 SS 琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。部分致病性大肠杆菌在绵羊血平板上呈
B 溶血。
大肠杆菌根据菌体抗原（ O )、鞭毛抗原（ H )、荚膜抗原（ K ）的不同，可分成不同的血清型，
血清型。目前已发现有2500种以上的血清型，多数都为肠道沙门氏菌。沙门氏菌能够产生很强的内
毒素，引起动物发热、黏膜出血、白细胞增多和中毒性休克。其中肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌
和猪霍乱沙门氏菌可使人发生食物中毒。
本属细菌对干燥、腐败、日光等因素具有一定的抵抗力，在外界条件下可生存数周或数月。对化学
消毒剂抵抗力不强，一般常用消毒剂和消毒方法均能达到消毒目的。
一般是细菌在适宜的生长条件下培养8~18 h 时形态比较典型，在不利环境或菌龄老时常出现不规
则的多形性。因此，观察细菌的大小和形态，应选择适宜生长条件下的对数期为宜。
细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质，各种细菌都有，是细
菌的基本结构；荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢，仅某些细菌具有，为其特殊结构。
细菌分离培养的方法很多，最常用的是平板划线接种法，另外还有倾注平板培养法、斜面接种法、
穿刺接种法、液体培养基接种法等，内容详见实训操作2-3。
任务三 细菌的非培养检测
（一）细菌免疫学检测
免疫学检测技术是指利用抗原和抗体高度特异性结合的原理和方法，检测分析各种样品中的目标物
质，以监测机体免疫机能和诊断某些疾病的体外检测方法。免疫学检测是微量检测方法，灵敏、特
物为标准。在一定条件下，各种细菌的大小是相对稳定的，并具有明显的特征，可作为鉴定细菌种
类的依据之一。
任务一 细菌的形态与构造
2、细菌的基本形态
细菌虽然有各种各样的形态，但基本形态有球菌、杆菌和螺旋菌三种。细菌的繁殖方式是简单的二
分裂。细菌分裂后，其菌体排列方式不同，有些细菌分裂后彼此分离，单个存在；有些细菌分裂后
光型（ Fg )、橘红色荧光型（ Fo ）和无荧光型（ Nf )。 Fg 型菌对猪、牛、羊等有强大毒力，对禽类的毒力
较弱； Fo 型菌对禽类有强大毒力，对畜类毒力较弱； Nf 型菌对畜禽的毒力都很弱。在一定条件下， Fg 型
和 Fo 可以发生相互转变。
根据菌落形态，本菌可分为黏液型（ M )、平滑型（ S ）和粗糙型（ R ), M 型禾型含有荚膜物质。
原体、立克次氏体、螺旋体。狭义上则专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的细菌。它
们形体微小，结构简单，具有坚韧的细胞壁和原始核质，除核糖体外无其他细胞器。本任务中的细
菌是指狭义上的细菌。
不同种类的细菌形态大小不一，同一种细菌的形态受菌龄和环境因素的影响也有差异，如生长的程
度、 pH 、培养基成分和培养时间等因素对细菌的形态影响很大。
彼此仍通过原浆带相连，形成一定的排列方式。
（1）球菌呈球形或近似球形，根据球菌分裂的方向和分裂后的排列状况，可将其分为如下几种。
①双球菌：沿一个平面分裂，分裂后菌体成对排列。如脑膜炎球菌、肺炎链球菌。
②链球菌：沿一个平面分裂，分裂后3个以上的菌体呈短链或长链排列。如猪链球菌。
③葡萄球菌：沿多个不同方向的平面做不规则分裂，分裂后菌体堆集成葡萄串状。如金黄色葡萄球
形性。
任务一 细菌的形态与构造
二、细菌的基本结构
1、细胞壁
细胞壁位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围，其组成较复杂，并随不同细菌而异。革兰氏阳
性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的共有组分为肽聚糖，但各自有其特殊组分。
肽聚糖是细菌细胞壁中的主要组分，为原核细胞所特有，又称黏肽或胞壁质。革兰氏阳性菌的细胞
壁较厚（20~80 nm )，除含有15~50层肽聚糖结构外，尚含有大量的磷壁酸或磷壁醛酸，约占细胞
任务一 细菌的形态与构造
一、细菌的形态
1、细菌的大小细菌的个体很微小，需用光学显微镜放大上百倍乃至数千倍才 ·能看到。细菌的测量
单位是微米（μ m )。一般球菌的直径为0.8~1.2μ m ，杆菌长为1~10μ m 、宽为0.2~1.0μ m ，螺
旋菌长为1~50μ m 、宽为0.2~1.0μ m 。细菌大小是以生长在适宜的温度和培养基中的青壮龄培养
菌。
此外，还有单球菌、四联球菌和八叠球菌等。
任务一 细菌的形态与构造
（2）杆菌菌体一般呈正圆柱形，也有近似卵圆形的，其大小、长短、粗细都有显著差异。菌体多
数平直，少数微弯曲；两端多数为钝圆，少数平截。有的杆菌菌体短小、两端钝圆、近似球状，称
为球杆菌，如布鲁氏菌；有的杆菌一端较另一端膨大，使整个杆菌呈棒状，称为棒状杆菌，如化脓
应，从而检出微量细菌内毒素的存在。目前国内外广泛用于内毒素败血症、菌尿症、革兰氏阴性菌
脑膜炎等的快速早期诊断和部分药品细菌内毒素限度的检验，具有快速、简便、灵敏的特点。其作
用原理尚不十分清楚，一般认为是变形细胞中的凝固酶原经内毒素激活转化成具有活性的凝固酶。
在凝固酶的作用下，变形细胞中的凝固蛋白原转变成凝固蛋白，凝固蛋白相互聚合形成凝胶。
移植培养。不同的细菌在一定的培养基中有其特定的生长现象，如在液体培养基中的均匀混浊、菌
环、菌膜或沉淀，在固体培养基上形成菌落、菌苔等。细菌菌落的形态、大小、色泽、气味、透明
度、黏稠、边缘结构和有无溶血现象等，均因细菌的种类不同而异，根据菌落的这些特征，即可初
步判定细菌的种类。
将分离到的病原菌进一步纯化，可为进一步的生化试验鉴定和血清学试验鉴定提供纯的细菌。
有核糖体、质粒、间体、异染颗粒等内含物。
4、核质
细菌是原核型微生物，不具有典型核结构，没有核膜、核仁，只有核质，不能与细胞质截然分开，
存在于细胞质的中心或边缘区，呈球形、哑铃型、带状或网状等形态。核质是由双股 DNA 反复回
旋盘绕而成，含细菌的遗传基因，控制细菌的各种遗传性状。
任务二 细菌的分离培养
正常情况下各种细菌的外形和排列方式相对稳定并具有特征性，可作为细菌分类和鉴定的依据之一。
通常在适宜的环境下细菌呈典型的形态，但当环境条件改变或在老龄培养物中，会出现各种与正常
形态不一样的个体，称为衰老型或退化型。这些衰老型的细菌重新处于正常的培养环境中可恢复正
常形态。但也有些细菌，即使在最适宜的环境条件下，其形态也很不一致，这种现象称为细菌的多
任务三 细菌的非培养检测
2、细菌外毒素的测定
细菌外毒素是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质，产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌
以及少数革兰氏阴性菌，如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒梭菌、金黄色葡萄球菌等。外毒素的测定
可用于待检菌的鉴定，同时可区分产毒株与非产毒株。
主要方法有：体内毒力试验，如破伤风毒素试验。体外毒力试验，如 ELEK 平板毒力测定。
放线菌；有的杆菌菌体有侧枝或分枝，称为分枝杆菌，如结核分枝杆菌；也有的杆菌呈长丝状。杆
菌的排列方式也有单在（单杆菌）、成对（双杆菌）、成链（链杆菌）与不规则（菌丛）等。
（3）螺旋菌菌体呈弯曲状，根据弯曲程度和弯曲数，又可分为弧菌和螺菌。
①弧菌：菌体只有一个弯曲，呈弧状或逗点状。如霍乱弧菌。
②螺菌：菌体有两个或两个以上弯曲，捻转呈螺旋状。如空肠结肠弯曲杆菌。
动物传染病实验室诊断技术
模块一
细菌学诊断技术Βιβλιοθήκη 模块二病毒学诊断技术
模块三
血清学诊断技术
模块四
分子生物学诊断技术
模块五
实训操作
模块一 细菌学诊断技术
任务1
细菌的形态与构造
任务2
细菌的分离培养
任务3
细菌的非培养检测
任务4
重要的动物细菌介绍
任务一 细菌的形态与构造
细菌是单细胞原核型微生物。广义上泛指各类原核细胞型微生物，包括细菌、放线菌、支原体、衣
细菌内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂 A ，是革兰氏阴性细菌细胞壁的产物，一般不释放，
仅在细菌死亡自溶或与其他细胞黏附时，才表现其毒性。细菌内毒素测定主要用于确诊动物是否发
生革兰氏阴性细菌感染。另外，还可用于检测注射用液和生物制品有无内毒素污染，常用试验法检
测。
鲎试验原理：利用一种低温海洋动物的血液变形细胞溶解物（简称 AC ）与细菌内毒素产生凝集反
在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的基本技术之一。从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的
方法称为分离；纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由一个细胞分裂、繁殖而产生
的后代。分离培养的目的在于从被检材料中，或者从污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。细菌分
离培养应先从被检材料或病料中分离培养单个菌落，然后钩取可疑菌落进行纯培养，再将纯培养物
任务四 重要的动物细菌介绍
三、多杀性巴氏杆菌
多杀性巴氏杆菌为两端钝圆、中央微凸的短杆菌，革兰氏染色阴性，有荚膜，不产生芽孢。病变组织或体液涂
片，用瑞氏、姬姆萨或美蓝染色镜检，呈两极浓染，但用培养物所做的涂片，两极着色则不明显。
血清琼脂上生长的菌落在 45°折射光下观察时，根据菌落表面有无荧光及荧光的颜色，可分为 3个型，即蓝色荧
无荚膜、有鞭毛，仅鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛，不产生芽孢。一般沙门氏菌在普通
营养培养基上生长良好，需氧及兼性厌氧，鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌生长
贫瘠，形成较小的菌落。在肠道杆菌鉴别或选择性培养基上，大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色
菌落。
沙门氏菌根据其菌体抗原（ O )、鞭毛抗原（ H )、荚膜抗原（ K ）和菌毛抗原成分不同分为许多
验动物死亡或经过一定时间后剖检，观察病理变化，并采取病料进行涂片检查和分离鉴定。
实验动物接种常用于分离和鉴定病原微生物、测定细菌的毒力、制备免疫血清等。常用方法为皮下
注射、皮内注射、肌内注射、腹腔注射、静脉注射和脑内注射等。
任务四 重要的动物细菌介绍
一、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）
大肠埃希氏菌又称大肠杆菌，中等大小，有鞭毛，无芽孢，一般无荚膜，单个或成对排列，革兰氏
根据荚膜（ K ）抗原结构的不同，可将本菌分为 A 、 B 、 D 、 E 、 F 共5个血清根据菌体（ O ）抗原分类，
可将本菌分为12个血清型；利用耐热抗原做琼脂扩散验，将本菌分为 16个菌体型。一般将 K 抗原用英文大写
字母表示，将 O 抗原和耐抗原用阿拉伯数字表示。
本菌对物理和化学因素的抵抗力比较弱。普通消毒药常用浓度对本菌都有良好杀菌力，但克辽林对本菌的杀菌
异。随着方法和技术的改进，免疫学检测方法已渗入工业、农业、食品、医药等各个领域。
（二）细菌分子生物学诊断技术
细菌的分子生物学检测技术主要有 DNA 探针、聚合酶链式反应和生物芯片技术。
任务3 细菌的非培养检测
（三）细菌毒素检测
细菌毒素分为细菌内毒素和细菌外毒素两种。
任务三 细菌的非培养检测
1、细菌内毒素的测定
营养物质，排除代谢产物，从而维持细菌的内外交换。细胞膜如受到损伤细菌将死亡。
任务一 细菌的形态与构造
3、细胞质
细胞质是一种无色透明、均匀的黏稠胶体，外有细胞膜包围。主要分是水、蛋白质、核酸、脂类及
少量多糖和无机盐类。细胞质中含有许多酶系统，是细菌进行新陈代谢的主要场所。细胞质中还含
壁干重的50%。革兰氏阴性菌细胞壁较薄（10~15nm)，但结构较复杂，在1~2层肽聚糖结构外侧，
尚有其特殊组分﹣外膜，约占细胞壁干重的80%。革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁结构显著不同，导
致这两类细菌在染色性、抗原性、致病性及对药物的敏感性等方面有很大差异。
2、细胞膜
是典型的单位膜结构，厚8~10 nm ，外侧紧贴细胞壁，某些革兰氏阴性菌还具有细胞外膜。细胞膜
用 O : K : H 、 O : K 、 O : H 表示。但即使在同一地区，其优势血清型也不尽相同。
本菌抵抗力弱，常用的化学消毒剂数分钟即可将其灭活，如5%~10％的漂白粉、3％的来苏儿、5％
的石炭酸等均可迅速将其杀死。
任务四 重要的动物细菌介绍
二、沙门氏菌
沙门氏菌属于肠杆菌科沙门氏菌属。本菌为两端钝圆的中等大小杆菌，革兰氏染色为阴性，大多数
任务三 细菌的非培养检测
（四）动物接种试验
动物试验是细菌检验中常用的基本技术，有时为了证实所分离的细菌是否有致病性，可进行动物接
种试验，通常选择对该种细菌最敏感的动物进行人工感染，最常用的是本动物接种和易感动物接种。
将病料用适当的途径进行接种，然后根据对不同动物的致病力、症状和病变特点来帮助诊断。当实
阴性。本菌为兼性厌氧菌，对糖类发酵能力强。在普通培养基上生长良好，形成圆形、光滑、突起、
半透明、中等大小菌落；在麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌
落；在 SS 琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。部分致病性大肠杆菌在绵羊血平板上呈
B 溶血。
大肠杆菌根据菌体抗原（ O )、鞭毛抗原（ H )、荚膜抗原（ K ）的不同，可分成不同的血清型，
血清型。目前已发现有2500种以上的血清型，多数都为肠道沙门氏菌。沙门氏菌能够产生很强的内
毒素，引起动物发热、黏膜出血、白细胞增多和中毒性休克。其中肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌
和猪霍乱沙门氏菌可使人发生食物中毒。
本属细菌对干燥、腐败、日光等因素具有一定的抵抗力，在外界条件下可生存数周或数月。对化学
消毒剂抵抗力不强，一般常用消毒剂和消毒方法均能达到消毒目的。
一般是细菌在适宜的生长条件下培养8~18 h 时形态比较典型，在不利环境或菌龄老时常出现不规
则的多形性。因此，观察细菌的大小和形态，应选择适宜生长条件下的对数期为宜。
细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质，各种细菌都有，是细
菌的基本结构；荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢，仅某些细菌具有，为其特殊结构。
细菌分离培养的方法很多，最常用的是平板划线接种法，另外还有倾注平板培养法、斜面接种法、
穿刺接种法、液体培养基接种法等，内容详见实训操作2-3。
任务三 细菌的非培养检测
（一）细菌免疫学检测
免疫学检测技术是指利用抗原和抗体高度特异性结合的原理和方法，检测分析各种样品中的目标物
质，以监测机体免疫机能和诊断某些疾病的体外检测方法。免疫学检测是微量检测方法，灵敏、特
物为标准。在一定条件下，各种细菌的大小是相对稳定的，并具有明显的特征，可作为鉴定细菌种
类的依据之一。
任务一 细菌的形态与构造
2、细菌的基本形态
细菌虽然有各种各样的形态，但基本形态有球菌、杆菌和螺旋菌三种。细菌的繁殖方式是简单的二
分裂。细菌分裂后，其菌体排列方式不同，有些细菌分裂后彼此分离，单个存在；有些细菌分裂后
光型（ Fg )、橘红色荧光型（ Fo ）和无荧光型（ Nf )。 Fg 型菌对猪、牛、羊等有强大毒力，对禽类的毒力
较弱； Fo 型菌对禽类有强大毒力，对畜类毒力较弱； Nf 型菌对畜禽的毒力都很弱。在一定条件下， Fg 型
和 Fo 可以发生相互转变。
根据菌落形态，本菌可分为黏液型（ M )、平滑型（ S ）和粗糙型（ R ), M 型禾型含有荚膜物质。
原体、立克次氏体、螺旋体。狭义上则专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的细菌。它
们形体微小，结构简单，具有坚韧的细胞壁和原始核质，除核糖体外无其他细胞器。本任务中的细
菌是指狭义上的细菌。
不同种类的细菌形态大小不一，同一种细菌的形态受菌龄和环境因素的影响也有差异，如生长的程
度、 pH 、培养基成分和培养时间等因素对细菌的形态影响很大。
彼此仍通过原浆带相连，形成一定的排列方式。
（1）球菌呈球形或近似球形，根据球菌分裂的方向和分裂后的排列状况，可将其分为如下几种。
①双球菌：沿一个平面分裂，分裂后菌体成对排列。如脑膜炎球菌、肺炎链球菌。
②链球菌：沿一个平面分裂，分裂后3个以上的菌体呈短链或长链排列。如猪链球菌。
③葡萄球菌：沿多个不同方向的平面做不规则分裂，分裂后菌体堆集成葡萄串状。如金黄色葡萄球
形性。
任务一 细菌的形态与构造
二、细菌的基本结构
1、细胞壁
细胞壁位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围，其组成较复杂，并随不同细菌而异。革兰氏阳
性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的共有组分为肽聚糖，但各自有其特殊组分。
肽聚糖是细菌细胞壁中的主要组分，为原核细胞所特有，又称黏肽或胞壁质。革兰氏阳性菌的细胞
壁较厚（20~80 nm )，除含有15~50层肽聚糖结构外，尚含有大量的磷壁酸或磷壁醛酸，约占细胞
任务一 细菌的形态与构造
一、细菌的形态
1、细菌的大小细菌的个体很微小，需用光学显微镜放大上百倍乃至数千倍才 ·能看到。细菌的测量
单位是微米（μ m )。一般球菌的直径为0.8~1.2μ m ，杆菌长为1~10μ m 、宽为0.2~1.0μ m ，螺
旋菌长为1~50μ m 、宽为0.2~1.0μ m 。细菌大小是以生长在适宜的温度和培养基中的青壮龄培养
菌。
此外，还有单球菌、四联球菌和八叠球菌等。
任务一 细菌的形态与构造
（2）杆菌菌体一般呈正圆柱形，也有近似卵圆形的，其大小、长短、粗细都有显著差异。菌体多
数平直，少数微弯曲；两端多数为钝圆，少数平截。有的杆菌菌体短小、两端钝圆、近似球状，称
为球杆菌，如布鲁氏菌；有的杆菌一端较另一端膨大，使整个杆菌呈棒状，称为棒状杆菌，如化脓
应，从而检出微量细菌内毒素的存在。目前国内外广泛用于内毒素败血症、菌尿症、革兰氏阴性菌
脑膜炎等的快速早期诊断和部分药品细菌内毒素限度的检验，具有快速、简便、灵敏的特点。其作
用原理尚不十分清楚，一般认为是变形细胞中的凝固酶原经内毒素激活转化成具有活性的凝固酶。
在凝固酶的作用下，变形细胞中的凝固蛋白原转变成凝固蛋白，凝固蛋白相互聚合形成凝胶。
移植培养。不同的细菌在一定的培养基中有其特定的生长现象，如在液体培养基中的均匀混浊、菌
环、菌膜或沉淀，在固体培养基上形成菌落、菌苔等。细菌菌落的形态、大小、色泽、气味、透明
度、黏稠、边缘结构和有无溶血现象等，均因细菌的种类不同而异，根据菌落的这些特征，即可初
步判定细菌的种类。
将分离到的病原菌进一步纯化，可为进一步的生化试验鉴定和血清学试验鉴定提供纯的细菌。
有核糖体、质粒、间体、异染颗粒等内含物。
4、核质
细菌是原核型微生物，不具有典型核结构，没有核膜、核仁，只有核质，不能与细胞质截然分开，
存在于细胞质的中心或边缘区，呈球形、哑铃型、带状或网状等形态。核质是由双股 DNA 反复回
旋盘绕而成，含细菌的遗传基因，控制细菌的各种遗传性状。
任务二 细菌的分离培养
正常情况下各种细菌的外形和排列方式相对稳定并具有特征性，可作为细菌分类和鉴定的依据之一。
通常在适宜的环境下细菌呈典型的形态，但当环境条件改变或在老龄培养物中，会出现各种与正常
形态不一样的个体，称为衰老型或退化型。这些衰老型的细菌重新处于正常的培养环境中可恢复正
常形态。但也有些细菌，即使在最适宜的环境条件下，其形态也很不一致，这种现象称为细菌的多
任务三 细菌的非培养检测
2、细菌外毒素的测定
细菌外毒素是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质，产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌
以及少数革兰氏阴性菌，如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒梭菌、金黄色葡萄球菌等。外毒素的测定
可用于待检菌的鉴定，同时可区分产毒株与非产毒株。
主要方法有：体内毒力试验，如破伤风毒素试验。体外毒力试验，如 ELEK 平板毒力测定。
放线菌；有的杆菌菌体有侧枝或分枝，称为分枝杆菌，如结核分枝杆菌；也有的杆菌呈长丝状。杆
菌的排列方式也有单在（单杆菌）、成对（双杆菌）、成链（链杆菌）与不规则（菌丛）等。
（3）螺旋菌菌体呈弯曲状，根据弯曲程度和弯曲数，又可分为弧菌和螺菌。
①弧菌：菌体只有一个弯曲，呈弧状或逗点状。如霍乱弧菌。
②螺菌：菌体有两个或两个以上弯曲，捻转呈螺旋状。如空肠结肠弯曲杆菌。
动物传染病实验室诊断技术
模块一
细菌学诊断技术Βιβλιοθήκη 模块二病毒学诊断技术
模块三
血清学诊断技术
模块四
分子生物学诊断技术
模块五
实训操作
模块一 细菌学诊断技术
任务1
细菌的形态与构造
任务2
细菌的分离培养
任务3
细菌的非培养检测
任务4
重要的动物细菌介绍
任务一 细菌的形态与构造
细菌是单细胞原核型微生物。广义上泛指各类原核细胞型微生物，包括细菌、放线菌、支原体、衣
细菌内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂 A ，是革兰氏阴性细菌细胞壁的产物，一般不释放，
仅在细菌死亡自溶或与其他细胞黏附时，才表现其毒性。细菌内毒素测定主要用于确诊动物是否发
生革兰氏阴性细菌感染。另外，还可用于检测注射用液和生物制品有无内毒素污染，常用试验法检
测。
鲎试验原理：利用一种低温海洋动物的血液变形细胞溶解物（简称 AC ）与细菌内毒素产生凝集反
在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的基本技术之一。从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的
方法称为分离；纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由一个细胞分裂、繁殖而产生
的后代。分离培养的目的在于从被检材料中，或者从污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。细菌分
离培养应先从被检材料或病料中分离培养单个菌落，然后钩取可疑菌落进行纯培养，再将纯培养物
任务四 重要的动物细菌介绍
三、多杀性巴氏杆菌
多杀性巴氏杆菌为两端钝圆、中央微凸的短杆菌，革兰氏染色阴性，有荚膜，不产生芽孢。病变组织或体液涂
片，用瑞氏、姬姆萨或美蓝染色镜检，呈两极浓染，但用培养物所做的涂片，两极着色则不明显。
血清琼脂上生长的菌落在 45°折射光下观察时，根据菌落表面有无荧光及荧光的颜色，可分为 3个型，即蓝色荧
无荚膜、有鞭毛，仅鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛，不产生芽孢。一般沙门氏菌在普通
营养培养基上生长良好，需氧及兼性厌氧，鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌生长
贫瘠，形成较小的菌落。在肠道杆菌鉴别或选择性培养基上，大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色
菌落。
沙门氏菌根据其菌体抗原（ O )、鞭毛抗原（ H )、荚膜抗原（ K ）和菌毛抗原成分不同分为许多
验动物死亡或经过一定时间后剖检，观察病理变化，并采取病料进行涂片检查和分离鉴定。
实验动物接种常用于分离和鉴定病原微生物、测定细菌的毒力、制备免疫血清等。常用方法为皮下
注射、皮内注射、肌内注射、腹腔注射、静脉注射和脑内注射等。
任务四 重要的动物细菌介绍
一、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）
大肠埃希氏菌又称大肠杆菌，中等大小，有鞭毛，无芽孢，一般无荚膜，单个或成对排列，革兰氏
根据荚膜（ K ）抗原结构的不同，可将本菌分为 A 、 B 、 D 、 E 、 F 共5个血清根据菌体（ O ）抗原分类，
可将本菌分为12个血清型；利用耐热抗原做琼脂扩散验，将本菌分为 16个菌体型。一般将 K 抗原用英文大写
字母表示，将 O 抗原和耐抗原用阿拉伯数字表示。
本菌对物理和化学因素的抵抗力比较弱。普通消毒药常用浓度对本菌都有良好杀菌力，但克辽林对本菌的杀菌
异。随着方法和技术的改进，免疫学检测方法已渗入工业、农业、食品、医药等各个领域。
（二）细菌分子生物学诊断技术
细菌的分子生物学检测技术主要有 DNA 探针、聚合酶链式反应和生物芯片技术。
任务3 细菌的非培养检测
（三）细菌毒素检测
细菌毒素分为细菌内毒素和细菌外毒素两种。
任务三 细菌的非培养检测
1、细菌内毒素的测定