人冠状动脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶3与白细胞介素1β的相关性

人冠状动脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶3与白细胞介素
1β的相关性
张清华;夏爱祥;蒋知新;黄平;方效民;王志津;宋成运;赵婷
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2007(011)014
【摘要】目的:观察人冠状动脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶3与炎症因子白细胞介素1β的关系.方法:实验于2005-05/2006-08在解放军第三○五医院老年病中心实验室完成.人冠状动脉平滑肌实验用5～7代的细胞,按2.5×108 L-1密度接种于25 cm2的培养瓶中,24 h后换液,生长接近80%融合时进行如下处理:①20μg/L 质量浓度白细胞介素1β培养0,2,4,8,24,36 h后收集上清夜和细胞.②不同质量浓度(0,5,20,40 μg/L)白细胞介素1β处理6 h后收集上清液和细胞.采用细胞总RNA TR lZol试剂提取RNA,在紫外分光光度计确定总RNA的浓度和纯度,并在12 g/L 的琼脂糖凝胶中电泳,凝胶成像分析RNA的质量.应用实时荧光定量聚合酶链反应的方法检测细胞内基质金属蛋白酶3基因的表达量.结果:①细胞总RNA质量及纯度:每份样品取4μL稀释至400μL测定其A260nm/A280nm吸光度比值均在1.8～2.0之间,说明所提RNA纯度较高;电泳图片上可见RNA清晰的18 S和28 S 的条带,无弥散,说明RNA质量较好.②目的基因的表达量:同剂量白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量在2 h时开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量在实验剂量范围内随着白细胞介素1β的剂量加大呈上升趋势(r=0.904,P=0.000),20μg/L 和40μg/L白细胞介素1β作用下,基质金属蛋白酶3基因的表达量差异无显著性(P=0.154),其余各剂量间基质金属蛋白酶3基因的表达量差异均有显著性(P＜
0.05).结论:炎症因子白细胞介素1β能促进冠状动脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标记物基质金属蛋白酶3的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的作用机制之一.
【总页数】4页(P2617-2620)
【作者】张清华;夏爱祥;蒋知新;黄平;方效民;王志津;宋成运;赵婷
【作者单位】解放军第三○五医院,老年病中心,北京市,100017;解放军第三○五医院,老年病中心,北京市,100017;解放军第三○五医院,中心实验室,北京市,100017;解放军第三○五医院,内六科,北京市,100017;解放军第三○五医院,老年病中心,北京
市,100017;解放军第三○五医院,内六科,北京市,100017;解放军第三○五医院,内六科,北京市,100017;解放军第三○五医院,内六科,北京市,100017
【正文语种】中文
【中图分类】R543.3
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