HPLC法测定辐花中獐牙菜苦苷的含量(一)

HPLC法测定辐花中獐牙菜苦苷的含量(一)
作者：张秀桥,黄凤娇,陈家春,刘焱文
【摘要】目的建立辐花中獐牙菜苦苷含量测定的方法。

方法用高效液相色谱法,色谱柱为AlltimalC18(5μm,250mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长234nm,柱温30℃。

结果獐牙菜苦苷在 3.10～30.98μg范围内线性关系良好,相关系数为0.9991；平均回收率为98.0%,RSD＝2.66%(n＝6)。

结论该方法操作简便,分离度好,为建立其质量标准提供了实验依据。

【关键词】辐花；高效液相色谱法；獐牙菜苦苷；含量测定Abstract：ObjectiveToestablishamethodforcontentdeterminationofswertiamarininLo matogoniopsisalpina.MethodsHPLCmethodfordeterminationwasused.Chro matographiccolumn：AlltimalC18(250mm×4.6mm,5μm).Mobilephase：methanol-water(including0.05%H3PO4),andgradientelution.Flowrate：1mL/min.Wavelength：234nm.Columntemperture：30℃.ResultsThecalibrationcurveofswertiamarinwasingoodlinearityoverthe rangeof3.10～30.98(r=0.9991).Theaveragerecoverieswere98.0%,withRSD ＝ 2.66%(n＝6).ConclusionItisasimpleandsensitivemethodincontrollingthequalityofLoma togoniopsisalpina.
Keywords：Lomatogoniopsisalpina；HPLC；swertiamarin；determination
辐花来源于龙胆科辐花属植物LomatogoniopsisalpinaT.N.HoetS.W.Liu,主要产于西藏东北部、青海南部及四川等地,生于云杉林缘、阴坡草甸及灌丛草甸中。

辐花是国务院于1999年8月4日批准的《国家重点保护野生植物名录(第一批)》保护级别为Ⅱ级的品种之一。

为了变野生为家种,为建立其质量标准提供实验依据,本试验用HPLC法测定了辐花中獐牙菜苦苷(swertiamarin)的含量。

1仪器与试药
美国Agilent1100高效液相色谱仪(G1311A泵、柱温箱、G1316A紫外检测器、Shemstation色谱工作站),SartoriusBP211D分析天平。

药材采自四川省阿坝州金川县俄热,经华中科技大学同济医学院陈家春教授鉴定为龙胆科辐花属植物Lomatogoniopsis
alpinaT.N.HoetS.W.Liu。

对照品獐牙菜苦苷自提,HPLC归一法测定纯度>98%。

甲醇为色谱纯,水为重蒸水,均经0.45μm滤膜滤过。

2方法和结果
2.1色谱条件及系统适应性试验
色谱柱为AlltimalC18(250mm×4.6mm,5μm)。

流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,0～25min,甲醇由20%增至50%；25～35min,甲醇由50%增至60%；流速1mL/min。

检测波长234nm,柱温30℃。

理论塔板数均>104,对称因子0.95～1.05。

色谱图见图1。

2.2供试品溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备
分别精密称取对照品獐牙菜苦苷一定量,混合后用甲醇超声溶解并定容,制成浓度分别为1.549mg/mL的溶液,经0.45μm滤膜滤过,滤液作为对照品溶液。