脐血CD34^+细胞体外诱导肝样细胞的研究

脐血CD34^+细胞体外诱导肝样细胞的研究
陈祎祺;蔡海波;谭文松
【期刊名称】《中国修复重建外科杂志》
【年(卷),期】2008(22)6
【摘要】目的探讨通过细胞因子及其组合体外诱导脐血CD34+细胞转分化成肝样细胞的效果。

方法采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(mononuclear
cell,MNC),从MNC中获得富集CD34+细胞。

选用人白血病抑制因子、制瘤素M、bFGF、aFGF、肝细胞生长因子、EGF及干细胞生长因子7种细胞因子,浓度分别
为10、10、10、10、20、20和50 ng/mL,设计了49种细胞因子组合,分别采用这些细胞因子组合体外培养脐血CD34+细胞,培养周期为28 d。

以新鲜脐血
CD34+细胞作为对照。

每7天检测诱导后细胞中细胞角蛋白
19(cytokeratin19,CK-19)、CK-18、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、人血清白蛋白(albumin,ALB)以及甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)的mRNA转录情况,并应用免疫荧光法、过碘酸-雪夫(periodic acid-schiff,PAS)染色与吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)染色法检测细胞分泌ALB、合成糖原以及解毒能力,以此判断是否存在脐血CD34+细胞体外向肝样细胞的转分化。

结果在经细胞因子诱导后的CD34+细胞中均可检测到人肝细胞所能表达的CK-19、CK-18和GS的mRNA条带,未能检测出肝细胞特征性的ALB与AFP的mRNA条带;而新鲜脐血CD34+细胞中以上5种蛋白的mRNA均未能检出。

免疫荧光染色观察示诱导前
后的细胞中均未能检测到ALB的表达,且均不能有效吞噬ICG染料。

PAS反应检测结果显示,经细胞因子诱导后的细胞紫红色糖原沉积区域较新鲜脐血CD34+细胞增
大,出现紫红色区域的细胞增多。

结论脐血CD34+细胞体外经细胞因子组合诱导后,虽有肝细胞相关蛋白mRNA表达,但未能转分化为肝样细胞。

【总页数】6页(P747-752)
【关键词】脐血CD34^+细胞;体外培养;肝样细胞;转分化;细胞因子
【作者】陈祎祺;蔡海波;谭文松
【作者单位】华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】Q813;R657.3
【相关文献】
1.多种生长分化因子体外联合诱导人脐血间充质干细胞向肝样细胞的分化 [J], 迟作华;张洹;陆琰
2.脐血单个核细胞体外诱导分化为肝样细胞的可行性 [J], 程军;马勇;魏伟;李俊峰
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