临床基础检验学:尿液有形成分分析仪检验
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(1)红细胞: 直径大约为8.0μm,没有细胞核和线粒体, 常部分溶解成小红细胞碎片,呈现明显的大 小不等。 在Fl-Fsc散点图中,分布区域的特点为Fl极 低和Fsc大小不等。
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(2)白细胞: 直径大约为10μm,有细胞核,因此有高强度 的前向荧光和前向散射光强度。
镜检法的缺点
❖ 费时费力 ❖ 重复性差 ❖ 客观性不够(人员之间的差异大) ❖ 实验室间结果不具可比性 ❖ 难以标准化
显微镜检查的影响因素
❖ 镜检一滴沉渣的液量不同 ❖ 盖片或计数板的差异 ❖ 视野数目和位置的差异 ❖ 成份识别上的人员差异 ❖ 显微镜视野大小的差异
显微镜检查的影响因素
❖ 标本在分析前形态改变 ❖ 标本混匀不当 ❖ 离心的尿量不同 ❖ 离心速度和时间不同 ❖ 尿沉渣重悬的液量不同 ❖ 尿沉渣重悬的方法不同
1:组成 2:染色原理 3:有形成分检测
1:组成
⊕光学检测系统 ⊕液压系统(机) ⊕电阻抗检测系统
2:染色原理(基于流式)
所用染料: 菲啶(ding)与羧花氰,有着共同的特性:
⊕与细胞结合速度快 ⊕背景荧光低 ⊕荧光强度与细胞和染料的结合程度成正比
2:染色原理
菲啶:使细胞核酸成分DNA着色,在480nm光波 激发时,产生610nm的橙黄色光波。
二、全自动尿液有形成分分析仪 (数字影像拍摄技术) (影像分析术+自动粒子识
别系统)
一、全自动尿液有形成分分析仪 (流式细胞技术)
(一):检测原理 (二):检测参数 (三):方法学评价 (四):质量保证 (五):临床意义
(一):全自动尿液有形成分分析仪 (流式细胞技术 )检测原理
设计思路与显微镜检测原理迥然不同
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(6)真菌和精子: 出现在Fl-Fsc散点图中。
用于区分:有核细胞和无核细胞,如白细胞 与红细胞,病理管型与透明管型等。
2:染色原理
羧花氰: 穿透能力强,与细胞膜、核膜和线
体的脂质成分结合,在460nm光波激发时,产 生505nm的绿色光波。 主要用于:
区分细胞大小,如上皮细胞与白细胞等
3:有形成分检测
定量的尿液标本经稀释、加温和染色 后,喷射入鞘液流动池。
不同检验员间镜检结果的差异
实验室 检验员
RBC
WBC
EC
Cast Bact
1
10-15/HPF
+
+
+
A
2
7-10/HPF
+
+
-
3
3-5/HPF
+
+
-
1
10-15/HPF
+
-
-
B
2
5-7/HPF
+
-
-
3 50-70/HPF 3-5/HPF
+
-
-
不同离心条件上清液中RBC的残留量
RBC count (/mL)
主要分布在Fscw-Flw散点图左上角。
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(5)管型:出现在Fscw- Flw散点图中。 ⊕透明管型由于管型体积大和不含内含物, 有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光 脉冲宽度; ⊕病理管型体积与透明管型相似,但含有线 粒体和细胞核,所以有极高的前向散射光脉 冲宽度和荧光脉冲宽度。
500
Sample 1
450
Sample 2
400
Sample 3
350
Sample 4
300
Sample 5
250
200
150
100
50
0
原液
400G, 5min 500G, 5min 500G, 15min
全自动尿液有形成分分析仪分类
一、全自动尿液有形成分分析仪 (流式细胞技术)(流式细胞术+电阻抗原理)
出现在Fl-Fsc散点图中。
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(3)细菌: 体积小但含有DNA,所以前向散射光强度要比 红细胞、白细胞弱,荧光强度比红细胞强但 比白细胞弱,出现在Fl-Fsc及Fscw-Fl散点图 中。
3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图
(4)上皮细胞: 种类较多且大小不等,但不管何种类型的上 皮细胞均有细胞核。
⊕ 荧光脉冲宽度(FIW):主要反映细胞染 色质的长度。
3:有形成分检测
⊕ 前向散射光强度(Fsc):主要反映细胞大 小。 ⊕前向散射光脉冲宽度(Fscw):主要反映细 胞长度。 ⊕电阻抗大小:主要与细胞体积成正比。
(二):检测参数
1:定量参数 2:标记参数 3:Fl—Fsc、Fscw—Flw等散点图 4:红细胞的信息 5:其他信息
样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动池 时,被鞘液包围,使有形成分以单个纵列的 形式,沿中心竖轴线依次通过流动池,快速 通过氩激光检测。
Biblioteka Baidu
3:有形成分检测
每个有形成分(颗粒)被氩激光光束照射, 产生不同程度的荧光强度。
荧光强度与有形成分和染料的结合程度成正 比。
3:有形成分检测
仪器将捕捉到的 荧光强度(Fl) 前向荧光脉冲宽度(Flw)
二 尿液有形成分分析仪检验
珍惜每一滴尿 所包含的信息
肾 脏
尿液检验的整体化问题
化学成分 定性筛选
LIS系统
整体化报告
物理检查 理学结果
细胞管型 形态确认
有形成分---分析实验方法
1. 传统离心法 2. 不离心直接用血球计数池滴量尿定量计数
法
3. 标准镜检法 4. 尿沉渣工作站 5. 流式细胞技术尿液有形成分分析仪 6. 数字影像拍摄技术尿液有形成分分析仪
前向散射光强度(Fsc) 前向散射光脉冲宽度(Fscw)
电阻抗等信号(DC)
3:有形成分检测
转变成电信号,进行分析、综合识别和计算 得到细胞大小、长度、体积和染色质长度等
资料;
并做出红细胞、白细胞、细菌、管型等的散 点图及定量报告,最后得到每个尿液标本的 直方图 和散射图。
3:有形成分检测
⊕ 荧光强度 (Fl):主要反映细胞染色质的 强度。
1:定量参数
⊕红细胞(RBC/µl) ⊕白细胞(WBC/µl) ⊕上皮细胞(epithelial cell,EC/µl) ⊕管型(cast,CAST/µl) ⊕细菌(bacterium,BACT/µl) ⊕电导率(Conductivity,mS/cm)
2:标记参数
⊕病理管型(pathologic cast,Path. CAST) ⊕小圆上皮细胞(small round cell,SRC) ⊕类酵母细胞(YLC) ⊕结晶(X-TAL) ⊕精子(sperm,SPERM)