人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

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人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法检测范围:96T8pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素(CCK)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素(CCK)水平。

用纯化的人胆囊收缩素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素(CCK),再与HRP标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素(CCK)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素(CCK)浓度。

标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

乙酰胆碱酯酶试剂盒说明书

乙酰胆碱酯酶试剂盒说明书

乙酰胆碱酯酶试剂盒说明书人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CHAc含量。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CHAc抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CHAc抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的CHAc呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品): 2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成10 ng/ml,5 ng/ml,2.5ng/ml,1.25 ng/ml,0.625 ng/ml,0.312 ng/ml,0.156 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。

如配制5 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 10 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3. 样品稀释液:1×20ml。

4. 检测稀释液A:1×10ml。

5. 检测稀释液B:1×10ml。

6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。

肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒使用说明

肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒使用说明

肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)测定试剂盒使用说明微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC1145规格:100管/96样产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL蒸馏水溶解。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。

使用前37℃温育2min。

产品说明:CK(EC2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。

自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

操作步骤:一、粗酶液提取1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。

2.血清样本:直接测定。

二、测定操作表1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至340nm。

2.操作表空白管测定管酶液(μL)60工作液(μL)150150H2O(μL)15090混匀,取200μL于微量石英比色皿/96孔板中,测定管调零,测定340nm的初始值A1,37℃反应3min,分别测定1min,2min,3min时的吸光值A2,计算时取平均值,△A=A2-A1。

注意:空白管只需测定一次。

三、CK活性计算公式a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下(1)按组织蛋白含量计算酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmolNADPH为一个酶活单位。

CCK-8的步骤

CCK-8的步骤

人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CCK-8含量。

实验原理用纯化的CCK-8抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的CCK-8抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的CCK-8呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。

每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50 pmol/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成50 pmol/L,25 pmol/L,12.5 pmol/L,6.25 pmol/L,3.12 pmol/L,1.56 pmol/L,0.78 pmol/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 pmol/L。

如配制25 pmol/L 标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )50 pmol/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、样品稀释液:1×20ml。

4、检测稀释液A:1×10ml。

5、检测稀释液B:1×10ml。

6、检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如:10 检测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。

7、检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。

cck8说明

cck8说明
淆。混匀时要轻轻充分混匀,避免起泡。为保证实验结果的准确请使用微量吸管,并 校准微量加液器。请依据所需的量精确配制,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液 A 时,一次不要小于 10 ),以避免造成浓度误差。 4、 请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液 A 工作液和检测溶液 B 工作液。 5、 浓洗涤液中如有结晶析出,请先温育至室温,轻轻混匀,至到结晶完全溶解再进行配 制。
试剂盒的储存及有效期
所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检 测溶液 A 以及 96 孔板保存于-20 。开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20 ,避 免潮湿。有效期为 6 个月。
实验原理
本试剂盒应用竞争抑制酶标免疫分析法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗体包被
微孔板,制成固相抗体,往包被抗体的微孔中同时加入酶标的抗原和待测抗原,被测抗原 与酶标记抗原对特异性抗体进行竞争结合。经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过 氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测标本浓度越高, 标记抗原和抗体的结合就越受到抑制,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品 中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
TMB底物
1 × 9ml
浓洗涤液(30 x)
1 × 20ml
试剂名称 96孔板覆膜 标准品稀释液 检测稀释液A(2 x) 检测稀释液B(2 x) 终止液 使用说明书
数量 4 1 × 20ml 1 × 6ml 1 × 6ml 1 × 6ml 1
本试剂盒未提供但需自备的设备及试剂
1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2、单道和多道微量加液器及吸头 3、稀释样品的 EP 管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器

CCK-8的步骤

CCK-8的步骤

人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CCK-8含量。

实验原理用纯化的CCK-8抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的CCK-8抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的CCK-8呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。

每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50 pmol/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成50 pmol/L,25 pmol/L,12.5 pmol/L,6.25 pmol/L,3.12 pmol/L,1.56 pmol/L,0.78 pmol/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 pmol/L。

如配制25 pmol/L 标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )50 pmol/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、样品稀释液:1×20ml。

4、检测稀释液A:1×10ml。

5、检测稀释液B:1×10ml。

6、检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如:10 检测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。

7、检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。

人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法检测范围:96T8pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素(CCK)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素(CCK)水平。

用纯化的人胆囊收缩素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素(CCK),再与HRP标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素(CCK)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素(CCK)浓度。

试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

人缓激肽(BK)酶联免疫吸附测定试剂盒说明书

人缓激肽(BK)酶联免疫吸附测定试剂盒说明书

人缓激肽(BK)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中缓激肽(BK)含量。

实验原理用纯化的BK抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的BK抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的BK呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。

每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为6,000pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成6,000pg/ml,3,000pg/ml,1,500pg/ml,750pg/ml,375pg/ml,188pg/ml,94 pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。

如配制3,000pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)6,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、样品稀释液:1×20ml。

4、检测稀释液A:1×10ml。

5、检测稀释液B:1×10ml。

6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。

临用前以检测稀释液B1:100稀释。

稀释方法同检测溶液A。

8、底物溶液:1×10ml/瓶。

Rebamipide_胆囊收缩素1型(CCK1)受体抑制剂_90098-04-7_Apexbio

Rebamipide_胆囊收缩素1型(CCK1)受体抑制剂_90098-04-7_Apexbio
产品说明书
化学性质
产品名: Cas No.: 分子量: 分子式:
Rebamipide 90098-04-7 370.79 C19H15ClN2O4
产品名: Rebamipide 修订日期: 6/30/2016
化学名: SMILES: 溶解性: 储存条件: 一般建议:
运输条件:
生物活性
2-[(4-chlorobenzoyl)amino]-3-(2-oxo-1H-quinolin-4-yl)propanoic acid
ApexBio Technology
产品仅用于研究, 不针对患者销售,望谅解。 每个产品具体的储存和使用信息显示在产品说明书中。ApexBio 产品在推荐的条件下是稳定 的。产品会根据不同的推荐温度进行运输。许多产品短期运输是稳定的,运输温度不同于长 期储存的温度。我们确保我们的产品是在保持试剂质量的条件下运输的。收到产品后,按照 产品说明书上的要求进行储存。
Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
靶点 : 信号通路: 产品描述: Rebamipide 参考文献:
特别声明
C1=CC=C2C(=C1)C(=CC(=O)N2)CC(C(=O)O)NC(=O)C3=CC=C(C=C3)Cl
>ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ0.3mg/mL in DMSO
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For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37°C and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be stored below -20°C for several months.

CCK8中文说明书

CCK8中文说明书

Cell Counting Kit-8产品编号产品名称包装500次C0038 Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)产品简介:Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1)。

细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。

对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

图1. WST-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent,即电子耦合试剂)WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。

首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。

其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。

再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。

另外,WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽,灵敏度更高。

WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。

本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。

本试剂盒检测非常便捷。

试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作。

无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。

不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。

可以用于大批量样品的检测。

酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

胆囊收缩素的主要作用

胆囊收缩素的主要作用

胆囊收缩素的主要作用李丽;司军强;赵磊【期刊名称】《农垦医学》【年(卷),期】2006(028)004【摘要】胆囊收缩索(Cholecystokinin,CCK)是192g年由Ivy和Oldberg 发现并命名的一种能引起胆囊收缩的胃肠道多肽激素,随后发现CCK还广泛存在于中枢及外周神经系统,并以神经递质或神经调制的形式发挥重要的生理作用,因而它已成为一种典型的脑肠肽。

CCK具有多种生理功能,如:在胃肠道的主要生理作用是促进胰酶分泌和胆囊收缩,并可协同促胰液素促进胰液HCO3-分泌,能松弛Oddi扩约肌,降低下食管扩约压力,减缓胃排空,增强小肠和结肠运动等多方面功能。

在中枢神经系统发挥神经递质的作用,参与了痛觉感受、食欲调节、记忆等生理过程,亦有调节垂体激素释放的作用,与惊恐、焦虑、癫痫等病理表现有关;同时,CCK还具有控制中枢呼吸节律及调节心血管紧张的作用。

目前关于CCK的研究十分活跃,本文就CCK的主要作用作一综述。

【总页数】4页(P298-301)【作者】李丽;司军强;赵磊【作者单位】石河子大学医学院生理学教研室,新疆,石河子,832002;石河子大学医学院生理学教研室,新疆,石河子,832002;石河子大学医学院生理学教研室,新疆,石河子,832002【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.脾虚证模型大鼠血清中血管活性肠肽和胆囊收缩素的变化及四君子汤的干预作用[J], 张海燕;陈君千;张望;黄绍刚;黄穗平2.中枢八肽胆囊收缩素:阿片样作用抑抗阿片作用 [J], 周岩;韩济生3.胆囊收缩素对心血管系统的调节作用 [J], 王思月4.八肽胆囊收缩素对缺氧缺血性细胞损伤模型的干预作用 [J], 刘瑛;周江堡5.基于脑肠轴理论胆囊收缩素在消化系统和中枢神经系统的作用研究进展 [J], 张新宁;李学军;孟繁兴;陈路;武洋;高燕洁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

检测试剂盒使用方法

检测试剂盒使用方法

检测试剂盒使用方法检测试剂盒是一种用于检测特定物质的工具,广泛应用于医疗、科研和环境监测等领域。

正确的使用方法对于获得准确的检测结果至关重要。

下面将介绍检测试剂盒的使用方法,希望能帮助您正确操作。

首先,使用前需要仔细阅读产品说明书。

产品说明书中通常包含了产品的基本信息、使用方法、注意事项等内容,对于正确使用检测试剂盒非常重要。

在阅读产品说明书时,需要特别注意存储条件、使用注意事项、样品处理方法等内容。

其次,准备样品和试剂。

在进行检测之前,需要准备好待测样品和相应的试剂。

样品的准备需要按照产品说明书中的要求进行,通常包括样品的采集、处理和稀释等步骤。

试剂的准备也需要按照产品说明书中的要求进行,包括试剂的稀释、混合和搅拌等步骤。

接下来,进行检测操作。

在进行检测操作时,需要按照产品说明书中的操作步骤进行,严格控制操作的时间、温度和试剂用量等参数。

在操作过程中,需要注意避免气泡的产生、避免试剂的污染和避免样品的损失等情况。

然后,进行结果解读。

在完成检测操作后,需要按照产品说明书中的要求进行结果的解读。

通常包括比色板的读数、光度计的测量和结果的计算等步骤。

在结果解读过程中,需要注意避免人为误差的产生,确保结果的准确性。

最后,进行数据分析和报告。

在获得检测结果后,需要进行数据分析和报告。

数据分析通常包括结果的统计和比较,以及结果与标准值的对比等内容。

在报告编写过程中,需要清晰、准确地呈现结果,并对结果进行科学、客观的解释。

总之,正确的使用方法对于获得准确的检测结果至关重要。

希望本文介绍的检测试剂盒使用方法能够帮助您正确操作,获得准确可靠的检测结果。

如果在使用过程中遇到问题,建议及时联系厂家或专业人士寻求帮助。

祝您检测顺利!。

CCK-8中文说明书

CCK-8中文说明书

人胆囊收缩素(CCK-8)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

用抗人CCK-8 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CCK-8与单抗结合,加入生物素化的抗人CCK-8,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,CCK-8浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CCK-8浓度。

试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(Coated Wells)96孔酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate)12ml10×标本稀释液(Sample Buffer)12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer)50ml标准品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMB Solution)12ml第一抗体工作液(Biotinylated12ml 终止液(Stop Solution)12ml Antibody)准备试剂与收集血样1. 收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成80ng/ml的溶液。

设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。

在第一管中加入80ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。

如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。

第八管为空白对照。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

胆囊收缩素(CCK)及其受体与胆囊胆固醇结石相关性研究进展

胆囊收缩素(CCK)及其受体与胆囊胆固醇结石相关性研究进展
胆囊 收缩 素( C C K) 由十二指肠 和空肠 上段 的粘膜层 中间细 胞分 泌。C C K存在着多种 生物活性分 子形式 , 它们均含有 生物活 性的C 一末端 四肽 , 区别在于 N 一端不 同长度 的延 伸。C C K广泛 分 布 于中枢神经 系统 、 消化系统 、 循环血液及 一些组织器 官 中, 以自 分泌 、 旁分泌 、 内分泌 和神 经末 梢释放等形式 发挥多种重要 生物学 功能, 其中 C C K收缩 胆囊 的生 理作用最 大 , 通 过与胆囊 平滑肌 细 胞膜上 的 C C K受体结合 而发挥作用 。 C C K受体是 细胞膜上 的一类糖蛋 白, 属 G蛋偶 联受体超 家族 。 根据对 C C K的亲和力不同‘ , 可将 C C K受体分为两种亚型即: C C K — A 受体和 C C K ~ B受体。研究表明 , C C K — A受体主要表达于胆囊平滑
障 碍在胆 固醇 结石 的形成 中也 起着 重要 的作 用 1 。胆囊 收缩 素
细胞 信号 转导途 径 , 主要 可能存 在 由 G蛋 白介导 的 c a 2 十 一 C a M 和
D A G — P K C两种途 径 】 。动 物 和人体 实验 均表 明 , 大剂 量外 源性 C C K通 过 C a z  ̄ _ C a M途 径 发 挥 收缩 胆囊 功 能 , 生理剂量的 C C K 主要 通 过 P KC途 径 。C C K与 C C K — A受 体 特 异 性 结 合 后 , 导致
发 症 提 供 新 的理 论 依 据。
关键 词: 胆 囊收缩素( C C K) ; 受体 ; 胆 囊胆 固醇结石 中图分 类号 : R 5 7 5 . 6 2 文献标识码 : A DO I : 1 0 . 3 9 6 9  ̄ . i s s n . 1 6 7 1 . 3 1 4 1 . 2 0 1 3 . 0 2 . 0 3 0

(完整版)CCK8实验原理与步骤

(完整版)CCK8实验原理与步骤

(完整版)CCK8实验原理与步骤CCK8实验1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。

将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。

2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。

4、向每孔加入10μl CCK8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μl 0.1M的HCL 溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。

24小时内测定,吸光度不会发生变化。

PS:1% w/v SDS溶液配制方法:组份浓度:10% (W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml 的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至7.23.将溶液定容至100ml后,室温保存。

注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。

当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

活力计算:细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100A(加药):具有细胞、CCK8溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和CCK8溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0加药):具有细胞、CCK8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力CCK-8 可以用于细胞增殖和毒性分析。

其基本原理为:该试剂中含有WST-8,它在电子载体(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒染料,生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,因此可以用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

CCK操作说明与检测步骤

CCK操作说明与检测步骤

CCK操作说明与检测步骤CCK(Cell Counting Kit)是一种常用的细胞计数试剂,用于细胞活力和细胞增殖的测定。

下面将详细介绍CCK操作说明及检测步骤。

操作说明:1.实验前准备:-将CCK试剂保持在-20℃保存,使用前将其充分解冻。

-准备好细胞培养液、细胞离心管、96孔板、吸管、无菌量筒等试剂和工具。

-卫生条件下操作,保持实验环境的洁净。

2.细胞处理:-收取培养中的细胞并离心以去除培养液。

-用细胞培养液洗涤细胞,避免细胞间的交叉污染。

-计算细胞浓度,使细胞悬液的浓度约为1×10^4-1×10^6个/毫升。

-按照实验需求,将细胞悬液均匀地分配到96孔板的每个孔中。

-将96孔板放入孵化器中培养适当的时间,使细胞附着并增殖。

K试剂添加:-取出已培养的96孔板,将培养液小心地倒掉。

-每个孔中加入100-200μL的细胞培养液,使其悬液浓度保持在约1×10^4-1×10^6个/毫升。

-根据实验需求,向每个孔中加入10μL-20μL的CCK试剂。

-轻轻摇晃孔板,确保CCK试剂充分与细胞混合。

4.反应时间:-将96孔板放回孵化器中,让细胞与CCK试剂反应适当的时间,通常为1-4小时。

-在反应期间,细胞的代谢活性将使CCK试剂转化为可发色的产物。

5.吸光度测定:-使用多功能微板阅读器或酶标仪,将反应孔板取出。

-使用吸管将孔板中的液体小心地转移到透明的96孔板上。

- 使用多功能微板阅读器或酶标仪,设置光学参数为450nm。

-读取每个孔的吸光度值,并记录下来。

6.结果分析:-根据吸光度值计算细胞活力或细胞增殖率。

- 可以使用以下公式计算细胞的活力或增殖率:Percent cell viability or proliferation = (实验孔中的吸光度-背景吸光度)/(对照孔中的吸光度-背景吸光度) × 100。

-将得到的结果进行统计分析和图形展示。

RANDOX质控血清使用说明

RANDOX质控血清使用说明

RANDOX控血清使用说明
[使用前准备]
1.小心打开瓶盖,避免内容物的损失
2 .每一瓶用5ml重蒸水复溶
3.轻轻晃动,使干粉充分溶解
4 .大约30分钟后,即可使用
5.注意不要剧烈摇动瓶子
[稳定性]
复溶后常温(25C)可稳定24小时;2-8 C可保存一周。

-20 C冰冻保存可达一个月以上注意:不要反复冻融
[注意事项]
1 . ALP的水平当超过稳定期时会升高,建议复融后1小时内进行检测(室温条件下)。

2.血清中胆红素对光敏感,注意避光保存。

3.总ACR前列腺ACP^醛缩酶项目稳定性可通过下面的措施得到提高:在每血清中加入一滴
(25-30 l ) 0.7M的醋酸溶液,室温下稳定2小时,2-8 C保存2天,冰冻条件下可保存一个月以上。

4.该质控血清不可做校正品用。

[备注]
原文说明书中列有各类生化分析仪的平均值(MEAN OF ALL INSTRUMENTS )和10余种仪器的详细数
值,请根据您的仪器对照查询。

以下是各项目方法学的中英文对照,具体数值请依据使用试剂盒的方法原理在原文说明书中查询。

胆囊收缩素拮抗剂的研究进展

胆囊收缩素拮抗剂的研究进展

胆囊收缩素拮抗剂的研究进展
Evans,BE
【期刊名称】《国外医药:合成药.生化药.制剂分册》
【年(卷),期】1990(11)6
【摘要】近年来,在胆囊收缩素(Cholecystokinin,CCK)拮抗剂的研究中已展现出多种可供口服的、有高度亲和力的非肽CCK拮抗剂,其中作用于外周的或CCK-A受体的药物有丙谷胺衍生物氯戊米特(lorglumide,CR-1409),loxiglumide(CR-1505)和苯二氮(?)MK-329(L-364718)。

作用于胃泌素和中枢的或CCK-B受体的药物有苯二氮(?)L-365260等。

本文简要介绍此方面的研究情况。

【总页数】3页(P337-339)
【作者】Evans,BE
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R975
【相关文献】
1.胆囊收缩素-1受体拮抗剂右氯谷胺的研究进展 [J], 廖一静;徐文芳;李乾斌;麦曦
2.八肽胆囊收缩素及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠脑内CaMK Ⅱ蛋白表达的影响[J], 张雅静;文迪;杨胜昌;于峰;马春玲;丛斌
3.八肽胆囊收缩素及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠脑内[Ca2+]i和CaM活性的影响 [J], 张雅静;马兴友;文迪;杨胜昌;于峰;董玫;马春玲;丛斌
4.侧脑室注射八肽胆囊收缩素及其受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响 [J],
文迪;马春玲;丛斌;张雅静;杨胜昌;孟雁欣;于峰;倪志宇;李淑瑾
5.胆囊收缩素和胆囊收缩素受体拮抗剂 [J], 竹内正;戈之铮
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脑肠轴与功能性消化不良的关系

脑肠轴与功能性消化不良的关系

脑肠轴与功能性消化不良的关系汪江波;李峰【摘要】目的:脑肠轴对功能性消化不良的发生起着重要的作用,通过对功能性消化不良患者胃动素和胆囊收缩素的观察,探讨脑肠轴与功能性消化不良的关系。

方法35例FD患者和20例健康志愿者禁食后插入消化道动力测压管,分别于MMC的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期采静脉血,用胃动素检测试剂盒测量MTL值。

所有患者和健康志愿者禁食8~10h,空腹抽取静脉血2ml 后,进标准脂肪餐,每隔30min 抽取静脉血2ml,一共抽取5次,0、0.5、1、1.5和2h,胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒测量CCK水平。

结果 FD组各消化间期的血浆胃动素值均低于健康志愿组,其中消化Ⅱ期和消化Ⅲ期的胃动素差异有统计学意义(P<0.05和P<0.01);FD组进脂餐前后0、0.5、1.0、1.5和2h CCK 水平均显著高于正常健康志愿组,差异有统计学意义(P<0.01),FD组进脂餐后,CCK水平不断升高,1.5h达到峰值,2h开始下降。

正常健康志愿组进餐后,CCK水平也不断升高,1h达到峰值,1.5h开始下降。

结论胃动素和胆囊收缩素作为重要的脑肠肽,对功能性消化不良的产生起着至关重要的作用,FD患者的胃动素水平降低,胆囊收缩素增高。

【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2013(000)015【总页数】3页(P3382-3384)【关键词】脑肠轴;功能性消化不良;胃动素;胆囊收缩素;脑肠肽【作者】汪江波;李峰【作者单位】广西壮族自治区南溪山医院,广西桂林 541002;湖南中医药大学,湖南长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】R574.5功能性消化不良(FD)以上腹疼痛、腹胀、嗳气、恶心呕吐、食欲不振等为主要临床表现,症状持续或反复发作,经检查后,排除消化性溃肠、食管炎、消化道等器质性疾病,没有器质性疾病可以解释的消化不良疾病[1]。

FD发病率高,据统计,欧美国家FD发病率为19%~41%,占消化门诊就诊人数的20%~40%,我国FD在社会人群中患病率在10%~30%,占消化内科门诊的40%左右。

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人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法
检测范围:
8pg/ml-200pg/ml 使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素 (CCK)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素
(CCK)水平。

用纯化的人胆囊收缩
素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素
(CCK),
再与HRP 标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗 涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。

颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素 (CCK)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定 吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素 (CCK)浓度。

试剂盒组成
1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20 C 保存,但应避免反复冻融 2. 不能检测含 NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样 50此待测样品孔中先加样品稀释液 40此 然后再加待测样品10 U (样品最终稀释度为 5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37 C 温育30分钟。

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水 30倍稀释后备用
5.
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置
30秒后弃去,如此
96T
重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 4,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50 4,再加入显色剂B50U,轻轻震荡混匀,37 C避光显色
15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50 pl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止液后15
分钟以内进行。

操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用
完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(X n X 5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准^
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8 C。

2 .有效期:6个月。

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