紫外可见分光光度法
紫外-可见分光光度法(Ultraviolet-Visibl
实验注意事项
确保分光光度计的波长准确性和稳定性，定期进行校准。
在测量过程中，避免强光直接照射样品池，以免影响测 量结果。
选择合适的空白溶液，以消除干扰物质的影响。
对于不同浓度的待测溶液，应进行适当稀释或浓缩，以 适应样品池的容量和分光光度计的测量范围。
03 实验结果分析
数据处理与分析
数据整理
绘制光谱图
环境因素等。
误差传递
02
对实验数据进行误差传递分析，了解误差对实验结果的影响程
度。
提高精度措施
03
提出提高实验精度的方法和措施，如选用高精度仪器、规范操
作流程、多次测量取平均值等。
04 应用领域
化学分析
01
02
03
物质定性分析
通过紫外-可见光谱的特征 峰，可以确定物质的结构 和组成，有助于对未知物 质进行鉴定。
物质定量分析
通过测量物质在紫外-可见 光谱特定波长下的吸光度， 可以计算出物质的浓度， 实现定量分析。
络合物组成分析
络合物在紫外-可见光谱中 表现出特殊的吸收峰，通 过分析这些吸收峰可以推 断络合物的组成和结构。
生物分析
生物大分子分析
如蛋白质、核酸等，可 以通过紫外-可见光谱研 究其构象变化和相互作 用。
紫外-可见分光光度计
用于测量物质在紫外-可见光谱区的吸收光 谱，确定物质的特征波长和吸光度。
移液管和吸管
用于准确移取一定量的待测溶液。
样品池
用于盛放待测溶液，通常有石英和玻璃两种 材质。
滤纸、试纸或离心管
用于过滤或分离待测物质。
实验操作流程
2. 设置分光光度计
打开分光光度计，预热30分钟， 设置测量波长范围、扫描速度等 参数。
第一章 紫外-可见分光光度法
➢ *跃迁：可以发生在任何具有不饱和键的 有机化合物分子中，其最大摩尔吸光系数max 很大。
➢ n*跃迁：发生在含有杂原子（O、N、S、P 、卤素等）的不饱和化合物中，其最大摩尔吸 光系数max 比较小。
二、常用术语
➢ *生色团：分子中可以吸收光子产生电子跃迁的基团 。含有键的不饱和基团
➢ *助色团：有些基团本身没有生色作用，但却能增强 生色团的生色能力，即它们与生色团相连时，会使其 吸收带最大吸收波长发生红移，并且增加其强度。通 常是带有非键电子对的杂原子的饱和基团，如-OH、 -NH2、-OR、-SH、-SR、-Cl、-Br、-I等。
不需参比液(消除了由于参比池的不同和制备空白溶液等产生 的误差)、克服了电源不稳而产生的误差，灵敏度高。
（4）光多道二极管阵列检测分光光度计
具有快速扫描的特点
可在0.1秒内获得190～ 820nm范围的全光光谱。 用于追踪化学反应的反应 动力学研究。 操作简单，只需将样品放 入无盖开放式样品室，并 点击“开始”即可。
音：
1 暗噪音：检测器与放大电路等各部件不确定性引起。
2 讯号噪音：亦称讯号散粒噪音 电子跃迁的不相等性
测量光强的不确定性
c 0.434K 1 1 c lgT T
➢ 当相对误差 c/c 最小时，求得T=0.368 或 A=0.4343。即当 A=0.4343 时，误差最小！
➢ 通常可通过调节溶液浓度或改变光程l 来控制 A 的读数在 0.2~0.7 范围内。
2. 杂散光 从单色器得到的单色光中与所需波长相 隔较远的光。
3. 散射光与反射光 使透光强度减弱 ，吸光度值偏高。
4. 非平行光 使l 增大影响测量值
（三）透光率测量误差T
由于光源不稳定性、读数不准等带来的误差。
紫外可见分光光度法
由图可见ΔT =1%, T 在20%～ 65%之间时, 浓度相对误差较小, 此为 最佳读数范围。
所以要求选择适宜的吸光度范围 （0.2-0.7）, 以使测量结果的误差最 小。
2024/10/5
措施: （a）控制溶液的浓度；（b） 选择不同厚度的比色
2024/10/5
2
溶液颜色与光吸收的关系
当一束太阳光照射某一溶液时, 太阳光中某一颜色的光 被吸收, 其互补色光透过溶液, 刺激人的眼睛, 使人感觉到它 的颜色。
实例:
1)高锰酸钾吸收绿光显紫 红色；
2)重铬酸钾吸收蓝光显黄 色；
3)邻菲罗啉铁溶液吸收蓝 绿光显红色。
2024/10/5
可见光波长及其互补光
(如国产710型，730型)； 3.双波长双光束分光光度计
(如国产WFZ800-5型）
2024/10/5
20
紫外可见分光光度的使用
2024/10/5
21
2024/10/5
22
721分光光度计操作步骤
➢ 1.预热仪器。为使测定稳定, 将电源开关打开, 使仪器预热20min, 为了防止光电管疲劳, 不要连续光照。预热仪器和不测定时应将比 色皿暗箱盖打开, 使光路切断。
ε: 摩尔吸收系数，单位L·mol -1·cm-1。（讲解78页 例题）
摩尔吸收系数越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测
定该物质的灵敏度越高。
ε > 105: 超高灵敏；
ε = (6～10）×104 : 高灵敏；
ε < 2×104
: 不灵敏。
2024/10/5
10
吸光度的加和性
第四章紫外-可见分光光度法
（三）有机化合物的紫外、可见光谱
1. 饱和烃及其取代衍生物 σ→σ*、n→σ* 2. 不饱和烃及共轭烯烃 σ→σ*、π→π* 3. 羰基化合物 n→σ*、π→π*和n→π* 4. 苯及其衍生物 E1带、 E2带、 B带 5. 稠环和杂环
当l以cm，c以mol/L为单位时，k称为摩尔吸 光系数，用ε表示，它比a更为常用，ε的单位 为L mol-1 cm-1，即： A = ε c l
当l以cm，c以百分浓度g/100mL为单位时，k 称为比吸光系数，用A1cm1%表示 ε = 0.1 M A1cm1%
用比吸光系数的表示方法特别适用于摩尔质 量未知的化合物。
（二）配位场跃迁
1. f-f跃迁
镧系和铜系元素的离子对紫外和可见光的吸收是 基于内层f电子跃迁而产生的，其吸收光谱是由一些狭 窄的特征吸收峰组成，且这些吸收峰不易受金属离子 所处的配位环境的影响。
2. d-d跃迁
过渡金属离子的d轨道在受到配位体场的作用时 产生分裂。d电子在能级不同的d轨道间跃迁，吸收紫 外或可见光产生吸收光谱。这种光谱的吸收带比较 宽，吸收峰强烈地受配位环境的影响。
光。
3. 吸收池
功能：盛放分析试样（一般是液体）
4. 检测器 功能：检测光信号，测量单色光透过溶
液后光强度变化的一种装置。 5. 信号显示系统
6. 紫外一可见分光光度计的类型
(1) 单波长单光束分光光度计
缺点：测量结果受电源波动的影响较大， 误差较大。
(2) 单波长双光束分光光度计
一个环外双键
5nm
同环二烯 39nm 一个β烷基 12nm 三个γ+烷基 54nm
紫外可见分光光度法
AsO3H2
OH OH
H2O3As
NN
NN
HO3S
SO3H
可用于测定铀、钍、锆等，
三 显色条件的选择：
显色条件主要包括显色剂用量、 显色反应的酸度、显色温度和显 色时间等，
1 显色剂用量：
显色反应就是将待测组分转变成有 色化合物的反应,其反应一般可用下式 代表：
1 显色剂用量：
显色反应一般可用下式代表： M＋R = MR
紫
TiO H2O2 2+
黄
VO H2O2 3+ Nb2O3 SO4 2 H2O2
红橙 黄
λmax /nm 480 460
405 420 670～820 670～820 660 420
620 500 580 420
400～450 360
2．有机显色剂：
显色剂
测定元素
反应介质
λmax /nm
ε
/ L/ mol·cm
其不足之处是价格昂贵，
第四节 紫外可见分光光度法条件选 择
一、显色条件的选择 一 显色反应 在光度分析中将试样中的待测组分转 变成有色化合物的反应叫显色反应，
显色反应常用的有两大类： 一类是配位反应； Fe3＋＋3SCN－=Fe SCN 3； 另一类是氧化还原反应， Mn2＋＋S2O82-= MnO4－＋SO42在这两类反应中,用得较多的是配 位反应， 此外还有：吸附显色反应、多元配 合物显色体系
透镜或凹面反射镜 、色散元件、聚焦
元件和出射狭缝，
800
λ1
600
500 白光
入射狭缝 准光器
λ
400
棱镜 聚焦元件2 出射狭缝
单色器的核心部分是色散元件， 色散元件主要是棱镜和光栅，
紫外—可见分光光度法
（三）溶剂对吸收光谱的影响
1.对最大吸收波长的影响 溶剂极性增大， *红移， n*蓝移。
产生*跃迁的基团， 激发态的极性比基态强， 溶剂化作用使激发态能 量降低，吸收峰红移。
产生n*跃迁的基团， 基态时n电子会与极性 溶剂形成氢键，n轨道 能量降低，吸收峰蓝移。
11
溶剂对亚异丙酮紫外吸收光谱的影响。
3、*跃迁 吸收峰一般接近或大于200 nm，其特征是摩尔吸光 系数大，一般max104，为强吸收带。如乙烯（蒸气） 的最大吸收波长max为162 nm(孤立）。丁二烯为 217nm（离域）。
5
4、n*跃迁 虽然所需跃迁能量最小，但n轨道和*
轨道重叠少，跃迁机率很小。其特点是谱带强度弱， 摩尔吸光系数小，通常小于100，属于禁阻跃迁。
共轭体系 最大吸收波长红移，但摩尔吸收系数
显著变化。 1,3-丁二烯 217nm, 20 900 Lmol-1cm-1
*
碳氧双键与烯键
220nm, 15 000 Lmol-1cm-1
的共轭
CH3CH=HCHO 322nm, 28 Lmol-1cm-1
170nm
280nm
n*
8
助色团是指带有非键电子对的基团，如184OnHm、 5-O0R0、00 -LNmHRo、l-1-cSmH-、1 -Cl、 -Br、-I等，它们本身不能吸收大 204于nm200n7m40的0光L，m但ol-是1c当m它-1 们与生 色团相连时，会使生色团的吸收 254峰nm向长2波00方L向m移ol动-1，cm并-1且增加其 吸收强度。
1
2
§2 紫外—可见吸收光谱
一、有机化合的紫外-可见吸收光谱 （一）电子跃迁类型
3
4
紫外可见分光光度法
在夏天参加户外活动时，假如天气晴朗，就应该注 意保护皮肤，不然，暴露在火辣辣太阳之下旳皮肤， 数小时后就会出现红肿、瘙痒、发烧、刺痛症状，数 后来出现蜕皮现象，这表白太阳光中有一种光线能伤 害生物细胞。科学家研究证明，这种光线是紫外线。
根据可见光、紫外光与物质分子旳相互作用建立了 紫外-可见分光光度法，
仪器简朴
操作简便
价格低廉
测定迅速
第一节 概述
课堂活动
1．紫外-可见光旳波长范围是
A．200~400nm
B．400~760nm
C．200~760nm
D．360~800nm
2．下列论述错误旳是
A．光旳能量与其波长成反比
B．有色溶液越浓，对光旳吸收也越强烈
C．物质对光旳吸收有选择性 D．光旳能量与其频率成反比
第一节 概述
一、物质对光旳选择性吸收
单色光: 单一波长旳光束 复合光: 具有多种波长旳光束 电磁波谱: 以波长大小顺序排列旳电磁波谱图
波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500mm 1cm 1m
光谱 射线 X射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电波
措施 光谱法
分光光度法 光谱法
第三节 紫外-可见分光光度计
二、紫外-可见分光光度计旳光学性能
1．测光方式 3．狭缝或光谱带宽 5．波长精确度 7．波长反复性 9．光度反复性
2．波长范围 4．杂散光 6．吸光度范围 8．测光精确度 10．辨别率
第三节 紫外-可见分光光度计
三、紫外-可见分光光度计旳类型 1.可见分光光度计 721型
0.7范围内。若吸光度读数不在此范围，可 采用哪些措施进行调整?
第四节 分析条件旳选择
紫外可见光分光光度法
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。
因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。
物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。
因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。
用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
紫外可见分光光度法
所需能量降低，吸收峰长移。
n电子能量不变， π*轨道的能级提高，使得 n→π*跃迁所需能量增大，吸收峰短移
5.芳香族化合物 （1）苯和取代苯 苯：最简单的芳香族化合物，具有环状共轭体系， π→π*跃迁可产生E1、E2和B。B带的精细结构 在极性溶剂中消失。 取代苯：苯环上有取代基使得苯的三个带 都长移，吸光系数增大，B带的精细结构 也因取代基的变化而变得简单
max(正己烷) max(氯仿)
max(甲醇)
max(水)
pp*
np*
230
329
238
315
237
309
243
305
结论：当溶剂极性增大时
n→π*跃迁紫移，
π→π*跃迁红移，
当溶剂极性增大时
n<p
n→π*跃迁紫移， π→π*跃迁红移，
C
n
O
p p
由苯环中三个乙烯的环状共轭结构的p → p*引起，分 为E1(λ＝180 nm =4.7×104)，E2(λ＝200 nm ≈7000) 带。
苯和取代 苯在异丙 烷溶液中 的紫外吸 收图谱
苯与乙酰苯紫外光谱图
双键羰基与苯环共扼,使得： (1) K带强；苯的 E2 带与 K 带 合并，红移； (2)取代基使B带简化
2.孤立助色团和生色团的饱和有机化合物 （1）孤立助色团
发生n→ơ* 跃迁，所需能量小于ơ→ơ*跃 迁所需能量，故吸收峰长移。
杂原子的电负性越小和离子半径越大，n电子能级 越高，n →ơ*跃迁所需能量小，吸收峰波长越长。
（2）孤立生色团化合物 发生n→ơ* 、 n→π* 、π→π*跃迁，孤立π→π*跃迁 吸收峰在150～180nm间。 醛和酮有三个吸收峰
紫外-可见分光光度法
单色器质量的优劣，主要决定于 色散元件的质量。色散元件常用棱镜 和光栅。
3 吸收池
吸收池又称比色皿或比色杯，按材 料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前 者不能用于紫外区。 吸收池的种类很多，其光径可在 0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池 最为常用。
4 检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光 信号转变为电信号。现今使用的分光光度 计大多采用光电管或光电倍增管作为检测 器。 5 信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计， 电位调节指零装置，以及自动记录和数用 基本结构:
光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 ↑ 样品
1 光源
在紫外可见分光光度计中，常用的光 源有两类：热辐射光源和气体放电光源
热辐射光源用于可见光区，如钨灯和 卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如 氢灯和氘灯。
2 单色器
单色器的主要组成：入射狭缝、出射 狭缝、色散元件和准直镜等部分。
4 要点与注意事项 4.1 开机前将样品室内的干燥剂取出， 仪器自检过程中禁止打开样品室盖。 4.2 比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为 宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。 测定时应保持比色皿清洁，池壁上液 滴应用滤纸擦干，切勿用手捏透光面。 测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
4.3 测定时，禁止将试剂或液体物质放在 仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因 将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。 4.4 如果仪器不能初始化，关机重启。 4.5 如果吸收值异常，依次检查：波长设 置是否正确（重新调整波长，并重新调 零）、测量时是否调零（如被误操作，重 新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波 段时，要用石英比色皿）、样品准备是否 有误（如有误，重新准备样品）。
2.1.2 按数字[1]键进入%T/ABS（透过率/吸 光度测定）子菜单，选中对应的数字键来 设定测定条件：①NUM WL(设定测试波长 的数目，最多可设定6个不同波长)；②WL Setting （设定测试波长具体数值）③ Data Mode( 选择测定吸光度或透光率 ) ，设定完 毕后点击 [Enter] 键确定，所有项目设定完 毕后按数字[0] 键确定，等待仪器调整至准 备状态。
紫外可见分光光度法
01
02
03
增色效应指由于基团取代或溶剂的影响，使紫外吸收强度增加; 减色效应指由于基团取代或溶剂的影响，使紫外吸收强度减小。
4.增色效应和减色效应：
指吸收曲线随波长变短而强度增加，直至仪器测量极限时测得的吸收。
5.末端吸收：
指吸收曲线在下降或上升处有停顿，或吸收稍微增加或降低的峰，是由于主峰内隐藏有其它峰。
与样品分子形成氢键。如溶剂与羰基形成氢键，则n→π*的吸收峰蓝移。改变溶剂的极性，会引起吸收带形状的变化。
例如，当溶剂的极性由非极性改变到极性时，精细结构消失，吸收带变向平滑。
因此，在测定紫外、可见吸收光谱时，应注明在何种溶剂中测定。与已知化合物紫外光谱作对照时也应注意所用的溶剂是否相同。选择溶剂紫外光谱法分析时，必须正确选择溶剂。选择溶剂时注意下列几点：
2.助色团
指化合物的结构改变或溶剂效应等引起吸收峰向短波方向移动，称为蓝移，反之则称为红移。
某些有机化合物经取代反应引入含有未共享电子对的基团（ -OH、 -OR、 -NH2、-SH 、-Cl、-Br、-SR、- NR2 ）之后，吸收峰的波长将向长波方向移动，这种效应称为红移效应。 在某些生色团如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波长会向短波方向移动，这种效应称为蓝移（紫移）效应。如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3。
R1=R2=R3=R4=H
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。
同环双键，张力大，双键扭曲
松香酸 左旋海松酸
在环体系中:
λmax=235nm,ε=16100 λmax=270nm,ε=7100
B: λmax = 214+3x5+1x5=234(234) nm
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1、什么是透光率？什么是吸光度？什么是百分吸光系数和摩尔吸光系数
2、举例说明生色团和助色团，并解释长移和短移。
4、电子跃迁有哪几种类型？跃迁所需的能量大小顺序如何？具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱？紫外吸收光谱有什么特征？
5、以有机化合物的基团说明各种类型的吸收带，并指出各吸收带在紫外—可见吸收光谱中的大概位置和各吸收带的特征。
6、紫外吸收光谱中，吸收带的位置受哪些因素影响？
8、用紫外光谱法定量，测量最适宜的吸光度范围为0.2-0.7的依据是什么？为什么用高精度的仪器此范围可以扩大？
11、简述用紫外分光光度法定性鉴别未知物的方法。
13、说明双波长消去法的原理和优点。
怎样选择λ1λ2？
15、为什么最好在λmax处测定化合物的含量？
2、Lambert-Beer定律是描述与和的关系，它的数学表达式是
3、紫外-可见分光光度法定性分析的重要参数是和；定量分析的依据是
4、在不饱和脂肪烃化合物分子中，共轭双键愈多，吸收带的位置长移愈多，这是由于
6、可见--紫外分光光度计的光源，可见光区用灯，吸收池可用材料的吸收池，紫外光区光源用灯，吸收池必须用材料的吸收池
10、分光光度法的定量原理是定律，它的适用条件是和，影响因素主要有、。
11、可见-紫外分光光度计的主要部件包括、、、、和5个部分。
在以暗噪音为主的检测器上，设△T=0.5%，则吸收度A的测量值在间，由于测量透光率的绝对误差小，使结果相对误差△c/c的值较小。
15、在分光光度法中，通常采用作为测定波长。
此时，试样浓度的较小变化将使吸光度产生变化
1、紫外-可见分光光度法的合适检测波长范围是( )
A.400-800 nm
B.200-400nm
C.200～800nm
D.10～200nm
2、下列说法正确的是( )o
A.按比尔定律，浓度C与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线
B.比尔定律成立的必要条件是稀溶液，与是否单色光无关
C.E称吸光系数，是指用浓度为1%(W/V)的溶液，吸收池厚度为lcm时所测得吸光度值
D.同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同
3、在乙醇溶液中，某分子的K带λmax计算值为385nm, λmax测定值388nm，若改用二氧六环及水为溶剂，λmax计算值估计分别为( ) (已知在二氧六环和水中的λmax校正值分别为-5和+8)
A .二氧六环中390nm，水中37 7nm
B.二氧六环中380nm，水中393 nm
C.二氧六环中383nm，水中396nm
D.二氧六环中393nm，水中380nm
6、1,3-丁二烯有强紫外吸收，随着溶剂极性的降低，其λmax将( )
A.长移
B.短移
C.不变化，但ε增强D．不能断定
8、在紫外-可见光谱分析中极性溶剂会使被测物吸收峰（）
A.消失
B.精细结构更明显
C.位移
D.分裂
12、符合比尔定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置将( )
A.向长波方向移动B．不移动，但峰高值降低
C. 向短波方向移动D．不移动，但峰高值升高
13、在紫外-可见分光光度计中常用的检测器为( )
A.二极管B．高莱池 C.真空热电偶D．光电倍增管
14、下列四种化合物中，在紫外光区出现2个吸收带的是( )
A.乙烯
B.1,4-戊二烯C．1,3-丁二烯D．丙烯醛
15、助色团对谱带的影响是使谱带( )
A．波长变长B．波长变短C．波长不变D．谱带蓝移
18、用等吸收双波长消去法测定a和b二组分的混合溶液，若只测定组分a，消除b组分的干扰吸收，则λ和λ2波长的选择应该是( )
1
A.在组分a的吸收光谱曲线上选择Aλ1=Aλ2
B. 在组分b的吸收光谱曲线上选择Aλ1=Aλ2
C.分别在组分a和组分b的吸收光谱曲线上选择A和A作为λ1和λ2
D.在组分a的吸收光谱曲线上选择A作为λ1，在组分b的吸收光谱曲线上选A作为λ2
19、当透光率的测量误差△T为0.5%时，分光光度计测量有色化合物的浓度相对标准偏差最小时的吸光度值为( )
A.0.368
B.0.334
C.0.443
D. 0.434
20、有色配位化合物的摩尔吸光系数与下述哪个因素有关？( )
A.比色皿厚度B．有色物浓度 C.吸收池材料D．入射光波长
22、某物质在某波长处的摩尔吸光系数(ε)很大，则表明( )
A.该物质对某波长的吸光能力很强
B.该物质浓度很大
C.光通过该物质的溶液的光程长
D.测定该物质的精密度很高
25、有一溶液遵守Lambert-Beer定律，在280nm处，当浓度为c时，吸光度为A，其浓度分别为下列几种情况时，哪种浓度的透光率最大？( )
A.0.5c
B. 1.5c
C.3c
D.4.5c
多选题
3、分光光度法测定中，使用比色皿时，以下操作正确的是( )
A.手捏比色皿的光面B．待测液注到比色皿的2/3高度处
C.比色皿液面下不得有气泡D．比色皿外的纤维可忽略
E.采用玻璃比色皿测紫外吸收
4、pH对比色法影响很大，这是因为酸度的改变可能影响( )
A.反应产物的稳定性B．被显色物的存在状态
C.反应产物的组成D．显色剂的浓度和颜色 E.以上都不正确
5、紫外-可见分光光度法中，选用λmax进行含量测定的原因是( )
A.与被测溶液的pH有关B．可随意选用空白溶液
C.浓度的微小变化能引起吸光度的较大变化
D.仪器波长的微小变化不会引起吸光度的较大变化
E.与溶剂的性质有关
判断题
1、在吸光光度法中，有色溶液稀释可使显色溶液的波长改变，但摩尔吸光系数不变（）
2、吸光光度法中溶液透光率与被测物质的浓度成正比( )
6、紫外-可见分光光度法，其他条件一定，ε越大，测定的灵敏度越高( )
7、分子结构中含有的双键越多，该物质的呈色越深( )。