中药配方颗粒汤剂与饮片汤剂等效性比较研究-四物汤
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• 四物汤具有补血调血的功效， • 故选择失血性动物贫血模型进行药效学
对比研究。
实验动物分组
空白对照（生理盐水）
模型对照（生理盐水） 雌雄小鼠
低（临床等效剂量） 传统饮片汤剂 中（2倍低剂量）
高（4倍低剂量） 实验组
低（临床等效剂量） 配方颗粒汤剂 中（2倍低剂量）
高（4倍低剂量）
动物模型制备及处理
16
65
27
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35
48
40
30
50
0
流动相组成（％）
甲醇
0.05%磷酸
0
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5
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四物汤2种汤剂指纹图谱比较
DAD1 A, Sig=280,20 Ref =of f (SWT\SWT00122.D) mAU
160
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4
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• 小鼠分组后，除空白对照组外，其他各组小 鼠眼眶静脉从放血约0.5ml，同时测定血常 规，次日开始给药，每天灌胃一次，连续 10天，并于失血后24h、第5天和第10天分 别采血测定。
统计学处理
• 色谱柱：Diamonsil C18 (250×4.6 mm，5 μm)； • 流动相：水-甲醇-0.05%磷酸，梯度洗脱； • 柱温：35℃； • 检测波长：280 nm； • 流速：1 mL ·min-1； • 进样量：10 μL。
指纹图谱梯度洗脱时间程序
时间（min）
水
0
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3
85
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75
主要有效成分比较—芍药苷含量测定
mAU 70
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芍药苷
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对照品
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14 min
mAU
70
60
12.303
源自文库50
供试品
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四物汤HPLC色谱图
主要有效成分比较—5-羟甲基糠醛、没食子酸含 量测定
• 色谱条件
• 色谱柱： Diamonsil C18 （4.6×250 mm，5 μm ）； • 流动相：乙腈-水-0.05%磷酸（8:92:10） ； • 检测波长：280 nm； • 柱温：30℃；流速：1 mL ·min-1； • 进样量：10 μL。
中药配方颗粒汤剂与饮片汤剂 等效性比较研究
中药饮片改革形式
中药流浸膏 袋泡剂 中药超微颗粒 中药配方颗粒
最受关注 前景看好
中药配方颗粒的优势
克服中药饮片诸多弊端
– 方便性（免煎、服用、携带） – 剂量准确、改善药房从业人员工作环境 – 储存时间长 – 节约仓库面积
质量可控 节约药材
5-羟甲基糠醛 阿魏酸 芍药苷 没食子酸
主要有效成分比较—阿魏酸含量测定
• 色谱条件 • 色谱柱：C18（Diamonsil 250×4.6mm，5μ） • 流动相：甲醇-水-0.05%磷酸（40:50:10） • 检测波长：327 nm；
• 柱温：35℃； 流速：1.0 mL·min-1
• 进样量：10 μL。
主要有效成分比较—5-羟甲基糠醛、没食子酸含量测定
mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 0 mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 0
2 1
对照品 HPLC色谱图
2.5
5
7.5
10
12.5
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四物汤 HPLC色谱图
2.5
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传统饮片汤剂指纹图谱
13
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DAD1 A, Sig=280,20 Ref =of f (SWT\SWT00104.D)
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min
1 没食子酸，2 5-羟甲基糠醛
2种汤剂各成分测定结果
样品
传
1
统2
饮
片
3
汤 平均
剂 RSD
配
1
方2
颗 粒
3
汤 平均
剂 RSD
阿魏酸 （mg /副）
6.41 6.29 6.46 6.39 1.36％ 4.55 4.59 4.64 4.59 0.95％
芍药苷 （mg /副）
23.76 21.02 24.75 23.18 8.35％ 61.11 61.99 62.48 61.86 1.12％
传统饮片汤剂 中药配方颗粒汤剂
综合比较
化学成分
主要药效
临床疗效
四物汤2种汤剂综合比较
一、化学成分 1、主要有效成分： 阿魏酸、芍药苷、 5-羟甲基糠醛、没食子酸 2、指纹图谱 二、主要药效 三、临床疗效
四物汤 传统汤剂与颗粒汤剂比较
• 四物汤处方
• 熟地 15g • 当归 10g • 川芎 10g • 白芍 15g
40
中药配方颗粒汤剂指纹图谱
50
min
50
min
四物汤饮片汤剂和配方颗粒汤剂主要比较结果
• 1、 指纹图谱比较：两者的指纹图谱非常相似，相似度 >0.98。
• 2、 主要有效成分比较：中药配方颗粒汤剂与传统饮片汤 剂中阿魏酸、没食子酸含量基本相当，芍药苷、5-羟甲基糠 醛含量差异。
四物汤2种汤剂主要药效比较
5-羟甲基糠醛 （mg /副）
5.77 4.84 4.57 5.06 12.4 0.76 0.78 0.78 0.77 2.06
没食子酸 （mg /副）
21.70 20.13 20.84 20.89 3.75 22.51 23.01 22.62 22.71 1.16
四物汤2种汤剂指纹图谱比较研究
• 色谱条件
中药配方颗粒相关争议焦点
传统饮片汤剂
配方颗粒汤剂
“混合煎煮”的方药 VS “ 单提混冲”的方药 两者是否具有等效性？
化学成分 主要药效 临床疗效
3 方面比较研究
复方筛选
研究单位：中南大学湘雅医院 研究目的：中药配方颗粒与饮片的中药复方汤剂的等效性 复方筛选：经典方剂
四物汤
研究思路
复方四物汤
主要有效成分比较—阿魏酸含量测定
mAU
11.233
40
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阿魏酸
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对照品
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0
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mAU
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供试品
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四物汤HPLC色谱图
主要有效成分比较—芍药苷含量测定
• 色谱条件 • 色谱柱：C18（Diamonsil 250×4.6mm，5μ） • 流动相：乙腈-水-0.05%磷酸（16:74:10） • 检测波长：230 nm • 流速：1.0 mL·min-1 柱温：35℃ • 进样量：10 μL。
对比研究。
实验动物分组
空白对照（生理盐水）
模型对照（生理盐水） 雌雄小鼠
低（临床等效剂量） 传统饮片汤剂 中（2倍低剂量）
高（4倍低剂量） 实验组
低（临床等效剂量） 配方颗粒汤剂 中（2倍低剂量）
高（4倍低剂量）
动物模型制备及处理
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流动相组成（％）
甲醇
0.05%磷酸
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四物汤2种汤剂指纹图谱比较
DAD1 A, Sig=280,20 Ref =of f (SWT\SWT00122.D) mAU
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• 小鼠分组后，除空白对照组外，其他各组小 鼠眼眶静脉从放血约0.5ml，同时测定血常 规，次日开始给药，每天灌胃一次，连续 10天，并于失血后24h、第5天和第10天分 别采血测定。
统计学处理
• 色谱柱：Diamonsil C18 (250×4.6 mm，5 μm)； • 流动相：水-甲醇-0.05%磷酸，梯度洗脱； • 柱温：35℃； • 检测波长：280 nm； • 流速：1 mL ·min-1； • 进样量：10 μL。
指纹图谱梯度洗脱时间程序
时间（min）
水
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主要有效成分比较—芍药苷含量测定
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芍药苷
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对照品
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供试品
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四物汤HPLC色谱图
主要有效成分比较—5-羟甲基糠醛、没食子酸含 量测定
• 色谱条件
• 色谱柱： Diamonsil C18 （4.6×250 mm，5 μm ）； • 流动相：乙腈-水-0.05%磷酸（8:92:10） ； • 检测波长：280 nm； • 柱温：30℃；流速：1 mL ·min-1； • 进样量：10 μL。
中药配方颗粒汤剂与饮片汤剂 等效性比较研究
中药饮片改革形式
中药流浸膏 袋泡剂 中药超微颗粒 中药配方颗粒
最受关注 前景看好
中药配方颗粒的优势
克服中药饮片诸多弊端
– 方便性（免煎、服用、携带） – 剂量准确、改善药房从业人员工作环境 – 储存时间长 – 节约仓库面积
质量可控 节约药材
5-羟甲基糠醛 阿魏酸 芍药苷 没食子酸
主要有效成分比较—阿魏酸含量测定
• 色谱条件 • 色谱柱：C18（Diamonsil 250×4.6mm，5μ） • 流动相：甲醇-水-0.05%磷酸（40:50:10） • 检测波长：327 nm；
• 柱温：35℃； 流速：1.0 mL·min-1
• 进样量：10 μL。
主要有效成分比较—5-羟甲基糠醛、没食子酸含量测定
mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 0 mAU 175 150 125 100 75 50 25 0 0
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对照品 HPLC色谱图
2.5
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四物汤 HPLC色谱图
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传统饮片汤剂指纹图谱
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DAD1 A, Sig=280,20 Ref =of f (SWT\SWT00104.D)
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1 没食子酸，2 5-羟甲基糠醛
2种汤剂各成分测定结果
样品
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汤 平均
剂 RSD
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方2
颗 粒
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汤 平均
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阿魏酸 （mg /副）
6.41 6.29 6.46 6.39 1.36％ 4.55 4.59 4.64 4.59 0.95％
芍药苷 （mg /副）
23.76 21.02 24.75 23.18 8.35％ 61.11 61.99 62.48 61.86 1.12％
传统饮片汤剂 中药配方颗粒汤剂
综合比较
化学成分
主要药效
临床疗效
四物汤2种汤剂综合比较
一、化学成分 1、主要有效成分： 阿魏酸、芍药苷、 5-羟甲基糠醛、没食子酸 2、指纹图谱 二、主要药效 三、临床疗效
四物汤 传统汤剂与颗粒汤剂比较
• 四物汤处方
• 熟地 15g • 当归 10g • 川芎 10g • 白芍 15g
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中药配方颗粒汤剂指纹图谱
50
min
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四物汤饮片汤剂和配方颗粒汤剂主要比较结果
• 1、 指纹图谱比较：两者的指纹图谱非常相似，相似度 >0.98。
• 2、 主要有效成分比较：中药配方颗粒汤剂与传统饮片汤 剂中阿魏酸、没食子酸含量基本相当，芍药苷、5-羟甲基糠 醛含量差异。
四物汤2种汤剂主要药效比较
5-羟甲基糠醛 （mg /副）
5.77 4.84 4.57 5.06 12.4 0.76 0.78 0.78 0.77 2.06
没食子酸 （mg /副）
21.70 20.13 20.84 20.89 3.75 22.51 23.01 22.62 22.71 1.16
四物汤2种汤剂指纹图谱比较研究
• 色谱条件
中药配方颗粒相关争议焦点
传统饮片汤剂
配方颗粒汤剂
“混合煎煮”的方药 VS “ 单提混冲”的方药 两者是否具有等效性？
化学成分 主要药效 临床疗效
3 方面比较研究
复方筛选
研究单位：中南大学湘雅医院 研究目的：中药配方颗粒与饮片的中药复方汤剂的等效性 复方筛选：经典方剂
四物汤
研究思路
复方四物汤
主要有效成分比较—阿魏酸含量测定
mAU
11.233
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阿魏酸
20
对照品
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四物汤HPLC色谱图
主要有效成分比较—芍药苷含量测定
• 色谱条件 • 色谱柱：C18（Diamonsil 250×4.6mm，5μ） • 流动相：乙腈-水-0.05%磷酸（16:74:10） • 检测波长：230 nm • 流速：1.0 mL·min-1 柱温：35℃ • 进样量：10 μL。