脂肪酶测定试剂盒使用说明书
小鼠内皮脂肪酶(EL)酶联免疫分析 试剂盒说明书
小鼠内皮脂肪酶(EL)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:6.25ng/ml-400ng/ml最低检测限:1.56ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠EL,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中EL含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗EL抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗EL抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的EL呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent)1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)。
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
体液总脂肪酶(lipase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明
体液总脂肪酶(lipase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途体液总脂肪酶(lipase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物三丁酸二巯基丙醇受到脂肪酶水解,释放出巯基基团,使用Ellman试剂,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心改良、成功实验证明的。
其适用于各种动物和人体各种体液包括尿液、脑脊液、唾液、精液等样品脂肪酶的总活性检测。
产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性糖蛋白分子,催化不溶性脂质分子的酯键(ester bond)的水解。
在人体中,其来源于胰腺产生。
在消化系统中,脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG),产生1个分子甘油(glycerol)和3个分子游离脂肪酸分子(fatty acid)。
脂肪酶异常增高与胰腺炎、胰腺管阻塞、胰腺癌、肾病、唾液腺炎症、肠道阻塞等相关;异常降低则与胰腺中脂肪酶产生细胞的永久性损伤有关。
脂肪酶的活性检测是临床诊断的指标之一。
基于脂肪酶在水分子的参与下,催化三丁酸二巯基丙醇(dimercaptopropanol tributyrate;DMPTB或BALB)的水解,产生二巯基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并释放出巯基基团(-SH),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析脂肪酶的活性。
脂肪酶反应系统为:产品内容缓冲液(Reagent A)毫升反应液(Reagent B)毫升底色液(Reagent C)微升补充液(Reagent D)微升产品说明书1份保存方式保存反应液(Reagent B)和底色液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底色液(Reagent C)避免光照,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品制备恒温水槽:用于孵育反应比色皿或96孔板:用于反应和比色的容器分光光度仪或酶标仪:用于比色分析实验步骤一、样品准备1.准备好1.5毫升离心管2.移取1毫升液体(尿液/脑脊液/唾液/精液等)到离心管3.放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为700g(或3000RPM,例如eppendorf 5415)4.小心移取上清液到新的1.5毫升离心管5.即刻置于冰槽里备用或放进-70℃冰箱里保存6.(选择步骤)移取10微升进行蛋白定量测定(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-HL30030.1)二、测定准备1.准备好待测样品,置于冰槽里2.设定好分光光度仪(温度为37℃):波长412nm,间隔10分钟,读数4次(共30分钟),并置零3.缓冲液(Reagent A)室温下均衡温度三、背景对照测定1.移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿2.加入xx微升底色液(Reagent C)3.上下倾倒数次,混匀4.在37℃温度下孵育3分钟5.加入50微升待测样品(或100微克蛋白)(注意:样品须清澈)6.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)7.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(30分钟读数-0分钟读数)四、样品测定1.移取xx微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿2.加入xx微升反应液(Reagent B)3.加入xx微升底色液(Reagent C)4.上下倾倒数次,混匀5.在37℃温度下孵育3分钟6.加入50微升待测样品(或100微克蛋白)(注意:样品须清澈)7.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)8.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(30分钟读数-0分钟读数)五、计算样品活性[(样品读数-背景读数)X样品稀释倍数X 1(体系容量;毫升)]÷[0.05(样品容量;毫升)X 13.6(毫摩尔吸光系数)X 30(反应时间;分钟)]=单位/毫升÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=单位/毫克单位=微摩尔DMPTB/分钟六、酶标仪测定1.在96孔板上做好相应标记:背景对照和样品2.分别移取xx微升缓冲液(Reagent A)到所有孔里3.加入xx微升反应液(Reagent B)到样品孔里4.加入xx微升阴性液(Reagent D)到背景对照孔里5.分别加入xx微升底色液(Reagent C)到所有孔里6.轻轻摇动96孔板7.在37℃温度下孵育3分钟8.分别加入10微升待测样品(或20微克蛋白)到所有孔里(注意:样品须清澈,且pH为7.2)9.轻轻摇动96孔板10.即刻放进酶标仪检测,包括(0分钟初始读数和30分钟读数)11.活性计算注意事项1.本产品为20次(96孔板,包括20次样品和20次背景对照)和5次(比色皿,包括5次样品和5次背景对照)操作2.本产品检测范围是40至1600毫单位/毫升3.建议样品采集后3小时内制备完成4.操作时,须戴手套5.每次样品测定,需要背景测定一次6.样品须澄清,至关重要7.样品中避免含有EDTA、TWEEN20、NP40、巯基乙醇、DTT等,否则干扰检测8.孵育反应完成后即刻进行比色测定9.比色测定后,比色皿须清洗彻底10.建议待测样本的蛋白浓度为100微克/50微升(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒HL30030.1)11.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度12.酶活性单位浓度定义:在37℃下,pH 7.5的情况下,每单位酶在单位时间内(每分钟)水解1微摩尔三丁酸二巯基丙醇13.本公司提供系列医学生化检测试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定检测敏感。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求lepu
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中脂肪酶的活性。
1.1规格试剂1:2×60mL,试剂2:1×60mL;试剂1:2×60mL,试剂2:2×15mL;试剂1:3×40mL,试剂2:1×30mL;试剂1:2×60mL,试剂2:2×12mL;试剂1:2×60mL,试剂2:2×20mL;试剂1:1×45mL,试剂2:1×15mL;试剂1:1×4L,试剂2:1×1L;试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在570nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.9;2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.5。
2.4 分析灵敏度测试50U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0025 。
2.5 准确度在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。
2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过10%。
2.7 线性2.7.1在[5,500]U/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2[5,60)U/L区间内绝对偏差不超过±7.2U/L;[60,500]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定,相对极差不大于12%。
2.9 稳定性取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
人激素敏感性脂肪酶HSL酶联免疫分析ELISA试剂盒...
人激素敏感性脂肪酶(HSL)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中激素敏感性脂肪酶(HSL)的活性。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人激素敏感性脂肪酶(HSL)水平。
用纯化的人激素敏感性脂肪酶(HSL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入激素敏感性脂肪酶(HSL),再与HRP标记的激素敏感性脂肪酶(HSL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的激素敏感性脂肪酶(HSL)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人激素敏感性脂肪酶(HSL)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:900U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求jiuqiang
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清或血浆中脂肪酶的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 试剂成分试剂成分见表2。
表2 试剂成分注:不同批号的校准品、质控品赋值有差异。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为橘黄色到橘红色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品微黄色粉末状物质,复溶后为淡黄色或黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A570nm下测定空白吸光度应≤ 0.8000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验:在[5,300]U/L区间内,线性相关系数r≥0.975,在[5,50]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±7.5U/L,在(50,300]U/L 区间内测定的相对偏差应不超过±15%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为100 U/L时,其吸光度变化率在0.0150~0.0450之间。
2.6 线性区间在[5,300]U/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[5,50]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±7.5U/L,在(50,300]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±15%。
2.7 测量精密度2.7.1重复性对高、低浓度的血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于5%。
2.7.2批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.8 瓶间差校准品、质控品的瓶间差应≤10%。
2.9 稳定性2.9.1 效期稳定性试剂在2℃~25℃密封避光保存,校准品、质控品在2℃~8℃密封避光保存,有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内,分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1项,结果应符合各项目的要求。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求danda
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中脂肪酶的活性。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1规格规格1(试剂1:15ml×1;试剂2:5ml×1);规格2(试剂1:30ml×1;试剂2:10ml×1);规格3(试剂1:60ml×1;试剂2:20ml×1);规格4(试剂1:60ml×2;试剂2:20ml×2);规格5(试剂1:60ml×3;试剂2:20ml×3);校准品(选配):规格1(0.3ml×1;1水平);规格2(0.5ml×1;1水平);规格3(1.0ml×1;1水平);质控品(选配):规格1(0.3ml×2;2水平);规格2(0.5ml×2;2水平);规格3(1.0ml×2;2水平);1.2组成试剂盒组成见表1表1 脂肪酶测定试剂盒组成2.1外观试剂盒外观应整洁,液体无渗漏,文字符号标识清晰;试剂1为无色透明液体,试剂2为无色至橙黄色透明液体,不得有沉淀和絮状物。
校准品和质控品为无色至淡黄色液体。
2.2 装量每瓶不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度用指定的空白样品测试试剂(盒),在光径1cm下,在波长570nm处测定试剂空白吸光度A≤0.50;试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.010A。
2.4分析灵敏度试剂测定50U/L被测物,吸光度变化率△A/min≥ 0.005。
2.5线性范围2.5.1在[4,300]U/L内,相关系数R≥0.990。
2.5.2[4,100] U/L内,线性绝对偏差不超过±10U/L;在(100, 300)U/L内,线性相对偏差不超过±10%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试(50±10) U/L 和(150±30)U/L的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求aipuyi
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:本试剂适用于体外定量测定人血清或血浆中脂肪酶活性。
1.1规格试剂1(R1):4×70ml 试剂2(R2):1×70ml试剂1(R1):4×50ml 试剂2(R2):2×25ml试剂1(R1):2×64ml 试剂2(R2):2×16ml试剂1(R1):2×80ml 试剂2(R2):1×40ml试剂1(R1):4×45ml 试剂2(R2):1×45ml试剂1(R1):1×64ml 试剂2(R2):1×16ml2.1外观2.1.1包装完整,标签清晰;2.1.2试剂1为无色透明溶液、无悬浮物、无沉淀物;试剂2为橘红色微乳液。
2.2净含量试剂盒内液体的装量应不低于标示值。
2.3试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度用试剂盒测定空白样本,记录试剂盒在570nm波长条件下,试剂空白吸光度A应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂吸光度变化率(△A/min)应不超过0.035。
2.4分析灵敏度测定50U/L样本时,吸光度变化率(△A/min)应符合:0.010~0.150。
2.5线性范围试剂盒线性范围在[3.0,300.0]U/L:线性相关系数r≥0.990;在[3.0,30]U/L线性范围内,绝对偏差不超过±3 U/L;在(30,300]U/L线性范围内,相对偏差不超过±10%。
2.6测量精密度2.6.1重复性用高、低2个水平的血清样品或质控品测试同一批号试剂盒,测试结果应符合CV≤10%。
2.6.2 批间差用3个不同批号的试剂盒测定同一份样本,测得结果极差R≤10%。
2.7准确度以选定的上市分析系统对照试剂作为比对方法进行方法学比对测试,比对结果应满足:a)在[3.0,300]U/L 范围内,线性相关系数r≥0.975;b)在[3.0,30]U/L 范围内,绝对偏差不超过±3 U/L;在(30,300]U/L范围内,相对偏差不超过±10%。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求shouyi
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中的脂肪酶的活性浓度。
1.1产品规格1.2产品组成试剂1:BICN缓冲液(pH8.0)50mmol/L,脱氧胆酸钠1.6mmol/L,氯化钙10mmol/L,共脂肪酶≥1mg/L。
试剂2:酒石酸缓冲液(pH4.0)10mmol/L,牛黄脱氧胆酸盐8.8mmol/L,1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油-3-戊二酸-(6-甲基试卤灵)酯0.27mmol/L。
2.1 外观试剂1为无色透明溶液,试剂2为黄色透明溶液;试剂盒各组分齐全、完整,液体无渗漏,包装标签文字符号清晰牢固不易脱落,外包装完整无破损。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示量。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、570nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.80。
2.4分析灵敏度测定80U/L脂肪酶时,吸光度变化率在(0.04±0.02)/min范围内。
2.5 准确度采用比对试验,相关系数r≥0.98;[3,30]U/L区间内,线性绝对偏差不超过±3U/L;(30,300]U/L区间内,线性相对偏差不超过±10% 。
2.6 精密度2.6.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数(CV)应不大于10.0%。
2.6.2 批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于10.0%。
2.7 线性区间试剂线性在[3,300]U/L(37℃)区间内:a) 线性相关系数|r|应不小于0.990;b) [3,30]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±3U/L;(30,300]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装试剂2~8℃避光保存有效期12个月,到效期后的样品检测试剂空白、分析灵敏度、准确度、重复性、线性区间应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒使用说明
脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒使用说明微量法货号:BC0555规格:100T/96S产品内容:试剂一:液体×1瓶,-20℃保存。
用前1d取出置于4℃充分解冻后混匀。
试剂二:粉剂×1瓶。
临用前加入440μL试剂四,充分溶解。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入440μL试剂四,充分溶解。
试剂四:液体×1瓶,4℃保存。
试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入840μL试剂四,充分溶解。
产品简介:FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。
FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm光吸收下降速率,计算FAS活性。
试验中所需的仪器和试剂:研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取:1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。
16000rpm,4℃离心40min,取上清置于冰上待测。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3分钟);然后16000rpm,4℃离心40min,取上清置于冰上待测。
二、FAS测定操作:1.分光光度计预热30min,调节波长到340nm,蒸馏水调零。
2.试剂四置于40℃水浴中预热30min以上。
3.空白管:在500μLEP管中依次加入20μL蒸馏水、4μL试剂二、4μL试剂三、164μL试剂四和8μL试剂五,迅速混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s和90s时吸光值,分别记录为A1和A2。
脂肪酶测定标准操作规程
血清脂肪酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:血清脂肪酶(缩写LPS)测定;组合项目申请:胰腺炎检测。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定1天,普通冰箱中(2~8℃)稳定7天。
-20℃可保存数月;-70℃至少可保存半年;应避免标本反复冻溶。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
抽血前3天内避免高脂饮食,24小时内不饮酒。
2.3.2如果使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。
EDTA、草酸盐、氟化钠、枸橼酸对酶有抑制作用。
2.1.5 抽血前最好停用影响血脂的药物(如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等)数天或数周,否则应记录用药情况。
3 方法原理采用1,2-邻-二月桂宗甘油-3-戌二酸-(6'-甲基试卤灵)-酯作为底物,OH-脂肪酶1,2-邻-二月桂宗甘油-3-戌二酸-(6'-甲基试卤灵)-酯 ----------1,2-邻-二月桂宗甘油 + 戌二酸 + 甲基试卤灵在570nm波长下,根据产物红色的甲基试卤灵生成速率测定脂肪酶的活性。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求北检·新创源
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中脂肪酶的活性。
1.1 规格具体产品规格见下表:1.2 组成成分1.2.1 试剂的组成试剂1:BICINE 缓冲液≥50mmol/L牛磺脱氧胆酸≥3.4mmol/L去氧胆酸≥1.6mmol/L 氯化钙≥10mmol/L共脂肪酶≥1mg/L试剂2:1,2-邻-二月桂基甘油-3-戌二酸-(6'-甲基试卤灵)-酯≥0.20mmol/L酒石酸缓冲液≥9.5mmol/L牛磺脱氧胆酸≥8.8mmol/L稳定剂适量1.2.2 校准品的组成(选配)水平1:脂肪酶(20.0~60.0)U/L该校准品为血清基质冻干校准品水平2:脂肪酶(55.0~200.0)U/L该校准品为血清基质冻干校准品1.2.3 质控品的组成(选配)水平1:脂肪酶(20.0~60.0)U/L该质控品为血清基质冻干质控品水平2:脂肪酶(60.1~200.0)U/L该质控品为血清基质冻干质控品校准品、质控品有批特异性,具体靶值见靶值表。
2.1 外观2.1.1 外包装完整无破损;2.1.2 试剂1:无色澄清透明无杂质的液体;2.1.3 试剂2:黄色或橙色澄清无杂质的液体;2.1.4 校准品:白色或浅黄色冻干粉,复溶后为浅黄色溶液,无不溶物;2.1.5 质控品:白色或浅黄色冻干粉,复溶后为浅黄色溶液,无不溶物。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在主波长570nm、副波长700nm、37℃条件下,试剂空白吸光度不大于0.5;2.3.2 试剂空白吸光度变化率在主波长570nm、副波长700nm、37℃条件下,试剂空白吸光度变化率不大于0.01。
2.4 线性2.4.1 线性范围[20.0,200.0]U/L,相关系数r不小于0.990。
2.4.2 线性偏差(60.0,200.0]U/L线性范围内,相对偏差不超过±10%;[20.0,60.0]U/L线性范围内,绝对偏差不超过±6.0U/L。
脂肪酶(LPS)测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求sainuopu
脂肪酶(LPS)测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:用于体外定量测定人体血清中脂肪酶的活性。
1.1试剂盒包装规格试剂1:1×20ml,试剂2:1×10ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×30ml;试剂1:3×36ml,试剂2:3×18ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×30ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×15ml;;试剂1:3×40ml,试剂2:3×10ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×400ml;试剂1:1×8L,试剂2:1×4L;试剂1:2×30ml,试剂2:2×15ml。
校准品(选配,冻干品):1×5ml,1×3ml,1×1ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂:试剂1无色澄清液体;试剂2桔红色液体。
校准品:冻干品,溶解后无色至浅黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度:在37℃、570nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.5。
2.3.2试剂空白吸光度变化率:在37℃、570nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.015。
2.4 分析灵敏度测定活性为50U/L样本时,吸光度变化值(ΔA)应在(0.01,0.15)范围内。
2.5 线性范围在(4,200)U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.996。
在(20,200)U/L区间内线性相对偏差不大于±10%;(4,20]U/L区间内线性绝对偏差不大于±2U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于6%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于10%。
大鼠脂肪酶(Lipase)酶联免疫分析
大鼠脂肪酶(Lipase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T5U/L –150U/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中脂肪酶(Lipase)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂肪酶(Lipase)水平。
用纯化的大鼠脂肪酶(Lipase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酶(Lipase),再与HRP标记的脂肪酶(Lipase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂肪酶(Lipase)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠脂肪酶(Lipase)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
脂蛋白酯酶(LPL)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4415
微量法脂蛋白酯酶(LPL)活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4415规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体80mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支4℃保存试剂三液体20mL×1瓶4℃保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入1mL丙酮溶解备用;2、标准品:5μmol/mL对硝基苯酚标准溶液。
产品说明:脂蛋白酯酶(Lipoproteinlipase,LPL)是甘油三酯降解的降速酶,可催化甘油三酯水解为脂肪酸和单酸甘油酯,主要在肝脏实质细胞中合成,在脂质代谢和转运中发挥重要作用。
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰、丙酮和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。
10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样本:直接检测。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
湖南脂蛋白酯酶检测试剂盒说明书
湖南脂蛋白酯酶检测试剂盒说明书测定意义:
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶,可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯,以供组织氧化供能和贮存,并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理:
脂蛋白酯酶水解4、硝基苤棕榈酸酯产生4、硝基苯酚,在
400nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制:
试剂一:液体105mLx1瓶,4℃保存。
试剂二:液体4mLx1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体10mLx1瓶,4℃保存。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求meigaoyi
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)适用范围:用于体外定量检测人血清脂肪酶(LPS)活性。
1.1包装规格a) 试剂1:2×40ml,试剂2: 2×20ml;b) 试剂1:2×200ml,试剂2: 2×100ml;c) 试剂1:12×16ml,试剂2: 12×8ml;d) 试剂1:1×20ml,试剂2: 1×10ml。
1.2试剂主要组成成分试剂1主要组成成分BICIN缓冲液100mmol/l牛磺脱氧胆酸 34mmol/L氯化钠 40mmol/L试剂2主要成成分酒石酸缓冲液 9.5mmol/L共脂肪酶 500 U/L1,2-邻-二月桂宗甘油-3-戊二酸-(6-甲基试卤灵)-酯0.2mmol/L 2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.1.2 试剂1应为无色或淡粉色液体,无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.1.3 试剂2应为橙黄色液体,无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在570nm处测定试剂空白吸光度,应<0.5。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.01。
2.4 分析灵敏度测试500U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.05。
2.5 准确性与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本,样本浓度在(4,700)U/L范围内,其相关系数(r)≥0.975;测定浓度点在(4,100]U/L范围内绝对偏差不超过±15U/L;测定浓度在(100,700)U/L范围内相对偏差不超过±15%。
2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过5%。
2.7 线性2.7.1在(4,700)U/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 在(100,700)U/L区间内,相对偏差不超过±10%;在(4,100]U/L区间内,绝对偏差不超过±10U/L。
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)产品技术要求海丰
脂肪酶测定试剂盒(甲基试卤灵底物法)
适用范围:适用于体外定量测定人血清中脂肪酶的含量。
1.1 产品规格
1.2主要组成成分
2.1外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;
2.1.2试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;
2.1.3试剂2为黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2净含量
净含量不低于标示值。
2.3试剂空白
2.3.1 空白吸光度
测定待检试剂在主波长570nm、副波长700nm、37℃条件下:A≤1.0;
2.3.2 空白吸光度变化率
空白吸光度变化率△A/min≤0.01。
2.4 线性范围
(10,260)U/L范围内,相关系数r≥0.990;
(10,50]U/L范围内,绝对偏差不超过±5U/L;
(50,260)U/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。
2.5分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下,测定浓度为78U/L的样本,△A/min ≥0.02。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤10.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
与已上市产品比对:(10,260)U/L范围内,相关系数r≥0.990;(10,50]U/L范围内,绝对偏差不超过±5U/L;(50,260)U/L范围内,相对偏差不超过±10.0%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存,可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测, 检测结果应满足2.3、2.4和2.7的规定。
脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明
脂肪酶(LPS)活性试剂盒使用说明微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2345规格:100/96S产品内容:试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,室温保存。
试剂三:液体×1瓶,4℃保存。
标准品:液体×1瓶,10µmol/mL的标准溶液,室温保存。
临用前加入 3.168mL甲苯,充分溶解。
产品说明:LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。
LPS 广泛的存在于各种生物中。
血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
自备仪器和用品:研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取:1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。
16000rpm,4℃离心40min,取上清置冰上待测。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后16000rpm,4℃离心40min,取上清置冰上待测。
3.血清等液体:直接检测。
二、LPS测定操作:1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到710nm,蒸馏水调零。
2.试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。
3.空白管:取1.5mL离心管,依次加入130μL试剂一50μL试剂二和20μL蒸馏水,置于37℃震荡反应10min;加入300μL甲苯,反复震荡混匀10min,25℃,4000rpm离心10min;小心吸取上层溶液200μL,加入 1.5mL离心管中,再加50μL试剂三,反复震荡5min;25℃,4000rpm离心10min,小心吸取上层溶液150μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm处测定吸光值。