药物半数致死量 LD50的测定jy
普鲁卡因半数致死量_LD50的测定
普鲁卡因产生毒性作用的原理: • 普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产生
全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制， 初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为神经 错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。
• 患者可因呼吸衰竭而死亡。
LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、 加权机率单位法(Bliss法)、寇氏法、序贯法等。 •Bliss法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组无 严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是目 前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐，故现 多采用计算机程序计算。 •改良寇试法简便而计算较为精确。
• 3. 用改良寇试法和bliss法计算普鲁卡因的LD50 和95%可信限。
抓好后将小鼠保持头低位
• 改良寇试法 • Bliss法
• 基本要求 • 1.反映情况符合或接近对数正态分析。 • 2.相邻两计量比值相等。 • 3.各组动物数相等或相近。 • 4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最 好再80%~120%范围内。
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程 度。
• 实验动物：小白鼠50只，体重18～２２g，♀♂各 半。 • 实验器材：计算机、电子秤、注射器、小鼠笼。 • 实验药品：1%普鲁卡因，苦味酸溶液（标记）
• 1.体重相近（20±2g）。 • 2.健康，雌雄各半。 • 3.怀孕雌鼠剔除不用。
分组方式：
组号
1* 2*
鼠号
12
51
45
34
23
……
3* 4* 5*
345
23 4
123
51
2
45
1
半数致死量的测定
4、精确配制一号药液
应取原液的量：
40＊5％＝x＊25％ x＝8ml
取原液8ml加入32ml水（一号药液） 从中取出每组药液量供一组使用， 在加入等量生理盐水，从中取出每 组药液量供二组使用，依此类推。
四、试验
［方法］ 一、预试
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
首先用原液尼克刹米（25%）10倍稀释
液的一系列药液以不同容量各试4鼠，进而 2ml / 10g ＝6ml。
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
半数致死量的测定
半数致死量（LD50）测定 [Bliss法]
(综合性实验)
[目的]
1.掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤 2.掌握用Bliss法计算药物的半数致死量。
[原理]
将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔 注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致 死量。
[材料]
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 药物：25%尼克刹米、生理盐水 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
则可逐渐递增或递减剂量，找到4/4和0/4剂 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
＝每组药液量／（1－K） 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
量即（Dm，Dn）。（0.2X0.7=0.14ml， ＝10＊30g＊ 0.
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
1、每组均取10只小鼠，腹腔注射尼克刹米按照不况。（40分）
2012--药物半数致死量(有效量)测定
【实验方法与步骤】
预试：目的是找到0％（Ｄmin）和100％（Ｄmax） 死亡的大致剂量范围。给药量：0.2ml/10g体重。
正式实验：在此剂量范围内安排５～６个对数剂 量实验组，便于用对数剂量对死亡数百分率作图 和计算数据。
➢ 本实验备有：50, 40 ,32, 25.6 ,20.5,16.4 五个剂量 组(组间公比=0.8)；昆明小鼠120只雌雄各半。
质反应量效关系曲线与 药物安全性的评价
质反应实验中，以对数剂量为横坐标、反应百分率为纵坐标 绘图，形成一条对称的“S”形曲线。
半数有效量（ED50）：50％的实验动物有效时对应的剂量。 半数致死量（LD50）：50％的实验动物死亡时对应的剂量。
药物安全性的评价 治疗指数（TI）= LD50/ED50 安全系数（SF）＝ LD5/ED95 可靠安全系数（CSF）＝ LD1/ED99 三者数值大，说明药物安全性好。
如增加记录起效和维持时间，翻正反射消失的深度 可获得对量效关系和个体差异的更深刻认识。
Bliss法计算软件界面
Bliss法运算图形结果输出
Bliss法运算数据结果输出
【注意事项】
1. 本实验为定量药物效价测定，要求较高的 精确性，在实验过程中要求实验者做到尽可 能的精确程度。
2. 为了减少误差，需严格控制除药物剂量外 的所有非处理因素，如最好由一人给药。
实验的观察指标：
ＬＤ50：规定的观察时间内记录动物的死亡 数为指标，记录并统计动物的死亡率。 ＥＤ50：以翻正反射消失作为判断动物睡眠 的指标。把受试小白鼠轻轻地置于仰卧位， 如果在半分钟内不能翻正，即认为小白鼠处 于睡眠状态。记录并统计动物睡眠发生率。
【实验试剂与器材】
小鼠罩 重量称 注射器（1.0ml）及针头 戊巴比妥钠 苦味酸（标记动物号用）
药物的安全性评价及半数致死量的测定
【目的和原理】解药物半数致死量（LD50）测定的原理、方法、计算过程、意义。
LD50属质反应的资料类型，其实验结果只有质的区别，而无具体的测量值。
其数据是通过计数（即数阳性反应的个数）而取得的，通常以百分率（%）或小数来表示。
LD50是药物引起半数实验动物死亡的剂量。
LD50是衡量药物的急性毒性大小与效应力强弱的重要指标，是评价药物优劣的重要参数。
LD50越大表示毒性越小。
与LD50意义相近的还有半数有效量（ED50）。
ED50是引起半数实验动物产生阳性效应的剂量。
它是衡量药物效应力强弱的重要指标，ED50越小，药效越强。
LD50和ED50比值称为药物的治疗指数（TI）。
通常以此指标表示药物的安全性大小，越大越安全，但有些药物仅用TI又不能完全表示出药物安全性之大小。
因此，安全性还参考1%的致死量（LD1）与99%（ED99）有效量之比值或5%致死量（LD5）与95%有效量（ED95）之比值。
LD50的测定方法可分为两大类，即序贯实验法与分组实验法。
其计算方法可有20多种，其中以Bliss 法，在数理上最为严谨，结果很精密，但步骤多，计算繁复，对学生负担重。
点斜计算法（综合法），是一种计算简便，精确性好，又可计算全部参数的一种计算法，优于其他优化法。
序贯法，用动物少是此法最大优点，但它只是应用于作用出现快的药物，本实验重点介绍此种计算法。
【实验动物】小白鼠，体重18-24g，雌雄各半，实验前禁食12小时，不禁水【实验器材和药品】小鼠笼，大镊子，天平，量筒，注射器（1ml），0.01%硝酸士的宁【实验步骤和观察项目】1. 实验步骤（1）预实验：①探索剂量范围：先找出100%与0%的致死量（或阳性反应的剂量）为实验的上下限剂量（Dmax 和Dmin）。
取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax；如降低一剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
盐酸普鲁卡因半数致死量_LD50的测定
启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处理选项， 再进入半数有效量选项。
一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关 数据。
单击“计算”按钮，计算LD50等参数。
【注意事项】
给药剂量准确 小鼠腹腔注射 脱臼处死实验用过小鼠
【思考题】
1.测定LD50有何药理意义？
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
C母 D 等容注射量
药液配制的具体步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体 重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
C母
D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
【实验材料】
实验动物：小白鼠，体重18～２２g，♀♂各半，
实验前禁食12h,不禁水。
实验器材：计算机（BL-410机能实验系统）、电 子秤、注射器、小鼠笼。
实验药品：盐酸普鲁卡因 （Procaine hydrochloride）
【实验步骤】
预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂
(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
盐酸普鲁卡因产生毒性作用的原理:
盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产
生全身性毒性反应，主要表现为枢神经系统先兴奋后抑
制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为
神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。
常见的药物半数致死量(LD50)的测定
常见的药物半数致死量(LD50)的测定1. 阿司匹林阿司匹林作为一种常见的解热镇痛药，其LD50值为每千克体重250500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服阿司匹林的LD50值约为每千克体重200400毫克。
2. 青霉素青霉素是一种广泛应用的抗生素，但其对某些动物（如小鼠、大鼠）的LD50值较高，约为每千克体重500010000单位。
需要注意的是，青霉素的毒性因物种而异，对人类的毒性较低。
3. 地高辛地高辛是一种用于治疗心脏病的药物，其LD50值为每千克体重13毫克。
在犬体内的实验显示，地高辛的LD50值约为每千克体重0.52毫克。
4. 吗啡吗啡是一种强效镇痛药，其LD50值为每千克体重300500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服吗啡的LD50值约为每千克体重400600毫克。
5. 苯巴比妥苯巴比妥是一种镇静催眠药，其LD50值为每千克体重200500毫克。
在小鼠体内进行的实验显示，苯巴比妥的LD50值约为每千克体重300400毫克。
需要注意的是，LD50值并非绝对固定，它受实验条件、给药途径、动物种类等多种因素影响。
因此，在评估药物安全性时，应以实际实验结果为准，并结合其他毒性指标进行综合分析。
同时，我们还需关注药物在人体内的实际毒性，以确保用药安全。
当然，让我们继续探讨药物半数致死量(LD50)的测定，并补充一些额外的信息。
6. 氯霉素氯霉素是一种广谱抗生素，其对小鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
然而，氯霉素的毒性在不同物种间存在差异，例如在猫体内的LD50值较低，约为每千克体重50毫克，这表明猫对氯霉素更为敏感。
7. 哌甲酯（利他林）哌甲酯是一种用于治疗注意力缺陷多动障碍（ADHD）的药物，其LD50值为每千克体重190毫克（大鼠口服）。
需要注意的是，哌甲酯的毒性作用可能与其药理作用相似，因此在用药时需严格控制剂量。
8. 硫酸亚铁硫酸亚铁是一种常用的补铁药物，其对大鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
药物半数致死量的测定实验报告
药物半数致死量的测定实验报告摘要：
本实验通过对小白鼠进行药物半数致死量的测定，得出该药物
的LD50值为Xmg/kg，进而评估该药物的毒性和安全使用范围。
实验结果表明，本药物可达到治疗效果且安全使用。
引言：
药物毒性评价是新药开发的重要环节。
药物的毒性评价能够帮
助我们了解药物的毒性情况并确定安全使用范围，为药物的进一
步发展提供支持和保证。
LD50值是表明药物毒性的重要指标之一，是用来测量半数小白鼠死亡剂量的药物浓度，本实验旨在通过测
定药物的LD50值来评估药物的毒性。
材料与方法：
本实验使用小白鼠进行实验。
将小白鼠随机分成多次实验的不
同浓度组（mg/kg），每组分别注射药物。
注射完药物后，每组实
验小白鼠的死亡数和存活数记入实验记录表格中。
根据实验结果
绘制药物剂量-死亡率图，并计算出药物的LD50值。
结果：
在本实验中，我们测定出该药物的LD50值为Xmg/kg。
根据药物剂量-死亡率图可得出，当药物浓度为Xmg/kg时，小白鼠的死亡率达到50%。
讨论：
本实验结果表明，该药物的LD50值为Xmg/kg，表明该药物的毒性较低且安全使用范围在其LD50值以下。
这也为该药物的临床应用提供了科学依据。
同时，我们也需要意识到药物的毒性评价是一项复杂的工作，在实际应用中还需要综合考虑其他因素，以确保药物的安全有效使用。
结论：
通过本次实验测定，我们得出该药物的LD50值为Xmg/kg，表明该药物的毒性较低且安全使用范围在其LD50值以下。
该药物可达到治疗效果且安全使用。
药物半数致死量(LD50)的测定
写出实验报告
生理科学实验的实验设计
医学实验研究的基本程序 实验设计的三大要素 实验设计的三大原则 实验设计的纲要
医学实验研究的基本程序
⑴立题 ⑵建立假说 ⑶实验设计 ⑷实验准备
医学实验研究的基本程序
⑸预备实验 ⑹正式实验 ⑺结果的分析处理 ⑻撰写论文
因的作用。
对照原则
例二：家兔失血性休克及其抢救
空白对照组 单纯失血组 失血+抢救组 失血+右旋糖酐组 失血+NaHCO3组 失血+山莨菪碱组
两组比较证明休克 是由于失血引起。 两组比较证明休克 恢复是抢救的结果。
组间比较分析何种 抢救措施更好。
实验设计的三大原则
对照
医学科 学研究
随机 重复
随机分配：实验对象分配到各 组的机会均等。
实验设计书格式
题目（居中） 设计者（居中） 专业、班别（居中） 指导老师（居中） 1．实验目的 2．立题依据（包括参考文献） 3．实验方案
(1)实验材料 (2)实验分组 (3)观察指标 (4)实验方法与步骤 4．创新点 5．实验结果预测
实验设计书评分标准
1.设计内容为学生原创，有创新性 2.设计依据充分，阐述相关理论知
2
0.25
LD50= lg-1 [Xm-i(Σp-0.5)] =lg-1[2.3522-0.0457(3.375-0.5)]
序贯法
取10只小鼠编号、称重 从最大剂量开始给药(尼可刹米0.1ml/10g) ，
观察10min. 若死亡，则下一只小白鼠降低一级 剂量，若没死亡，则用高一级剂量，依次类推， 直至10只小白鼠全死. 记录结果 计算X·R、∑（X·R） 按公式计算尼可刹米的半数致死量
药物急性毒性实验
药物急性毒性实验实验⼀药物急性半数致死量（LD50）的测定【⽬的】了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定⽅法和计算过程。
【原理】LD50是指在⼀群动物中能使半数动物死亡的剂量。
由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值⼤多在50％质反应的上下呈正态分布。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，⽽在50％质反应处曲线斜率最⼤，因此这⾥的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能⽐较准确地反映药物毒性的⼤⼩。
【实验材料】1、动物：⼩⽩⿏，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁⾷12⼩时，不禁⽔。
2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。
3、器械：⼩⿏笼，天平，注射器（1mL），电⼦计算器。
【⽅法和步骤】（⼀）预备实验1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（D m及D n）。
⽅法是先取出⼩⿏9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或⽂献资料定出）给药，如3只⼩⿏全死则降低剂量⼀半，如全不死则增加剂量⼀倍，如部分死亡，则按2：1的⽐例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，⼀般分5-8个剂量组。
计算各组剂量：要求各组剂量按等⽐级数排列，在找出D m及D n和确定组数后，可按下列公式求出公⽐r：r再按公⽐计算各组剂量D1,D2,D3,D4,D5……D m，其中D1=D n=最⼩剂量，D2=D1?r; D3=D2?r; D4=D3?r; D5=D4?r; ……D G=D G-1?r。
r值⼀般以1.7~1.15之间为宜。
计算举例：已知某药在致死毒性实验中，Dm=187.5 mg/kg; Dn=76.8 mg/kg, 确定组数G=5，求r及各组剂量。
先代⼊公式求r=1.25，再计算各组剂量D1=Dn=76.8 mg/kg,D2=76.8?1.25=96 mg/kg, 依次计算D3，D4，及D G(D5)分别为120，150，187.5 mg/kg。
药物半数致死量(LD50)的测定分析
【注意事项】
1. 要对实验动物进行随机化分组。 2. 各组给药浓度千万不能搞错，给药
剂量要准确。 3. 注意选择正确的给药部位，进针的
深浅要一致。
LD50 、ED50的意义
· 反映药物急性毒性大小和药理作用的强弱 · 药物之间急性毒性大小和效价强度的比较 · 评价药物的安全性 · 其它药学参数的测定 · 申报新药过程中必须具备的药效学资料
1. 10只小鼠，称重编号
2. 按表从最大剂量开始给药(i . p .尼可刹米0.1ml/10g) 观察10min
3. 若死亡，则下一只小白鼠降低一级剂量，若没死亡， 则用高一级剂量，依次类推，直至10只小白鼠全部 做完
4. 列表，计算出结果
➢表 尼可刹米的LD50实验用表
剂量(mg/kg) 实验结果
实验结果的处理、打印、分析
实验设计书
题目（居中） 设计者（居中） 专业、班别（居中） 指导老师（居中）
一、 二、 三、
1. 2. 3. 4. 四、 五、
实验目的 立题依据 (附2～3条参考文献) 实验方案 实验材料 实验分组 观察指标 实验方法与步骤 创新点 实验结果预测
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1000 + +
700
-+ +
+
490
- + -+
343
-
SF R 20 2 31 4 22 4 10 1
X*R
6 11.38 10.76 2.535
LD50=lg-1(30.675/11)
=102.79
【实验后处理】
1. 完成表8-1和8-2。利用公式分别求出 盐酸普鲁卡因和尼可刹米的LD50。
药物半数致死量测定
士的宁半数致死量（LD50）测定操作版【目的】1．掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤；2．掌握按改良寇氏法计算LD50的方法。
【原理】半数致死量是衡量药物毒性大小的重要标志，LD50表示能使全部实验动物半数死亡的剂量，是以动物死亡或存活作为质反应指标。
LD50与毒性呈负相关。
当剂量取对数值时，曲线呈近似两端对称的S型，对称点位于LD50。
LD50处斜率最大，灵敏度最高；曲线两端平坦，在1%或100% 附近灵敏度最差，剂量不易确定。
对称点附近量效关系呈直线关系，即该段范围内效应百分率／比与对数剂量呈正比关系。
（见右图）测定LD50的方法有多种，但以改良的寇氏法计算简便，结果较准确，比较常用。
对于毒性低的药物测不到LD50，则按最高可用的浓缩浓度、以最大给药容积给药，即最大给药量，如能导致实验动物死亡，可检测其最小致死量和最大耐图质反应量效关系曲线受量，否则即以最大给药量反映其安全性。
【材料】动物：小鼠，雌雄兼用，18～22g。
药品：士的宁溶液（0.125mg／mL）。
器材：鼠笼，JY4001电子秤，1.0mL注射器，试管，试管架。
【方法】1．预实验：取小鼠8～12只，分成4～5组，腹腔注射不同浓度的士的宁，摸索出可致小鼠大多数死亡的最小剂量（D m）及大多数小鼠不致死亡的剂量（D n）。
即找出引起0％到100％死亡率剂量的所在范围。
（参考剂量：D m为0.125mg／mL，0.1mL／10g）2．正式实验：以预实验所获得的D m和D n确定正式实验组数及组间剂量比（分5个剂量组，按1：0.8组间等比）。
每组取10只小鼠，雌雄各半，随机分为5组。
药液按等比稀释，腹腔注射，给药容量都为0.1mL ／10g。
给药后观察30分钟。
（正式实验观察7～14天，并设阴性对照组）3．汇总实验结果，计算士的宁LD50及其95％可信限。
【结果】表士的宁小鼠半数致死量测定实验结果组别剂量（mg／kg）动物数（n）死亡数（n）死亡率12345LD50=log-1[X m-i×（Σp-0.5）]LD50的95％可信限=log-1（X50±1.96S X50）LD50的平均可信限=LD50±（LD50的95%可信限的高限-低限）／2S X50=i×[（Σp-Σp2）／（n-1）]1／2注：【计算中通常以“10”为底】X m为最大剂量组的对数值，i为相邻两剂量比值的对数（高剂量组作分子）；p为各组死亡率，Σp为各组死亡率总和；X50为lgLD50，S X50为X50（lgLD50）的标准误差。
半数致死量的测定及其测定原理
半数致死量的测定半数致死量（LD50）是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志。
它表示能使全部实验对象死亡半数的剂量或浓度。
由于生物间存在个体差异性，因此 LD50需用一批相当数量的实验对象进行实验方能测得，并且每种药物不同实验对象的 LD50值不相同。
测定 LD50的方法很多，如目测机率单位法、直线回归法、累计法及序贯法等。
由于寇氏法较常用，并有计算简便，结果较准确等特点，故专门介绍之。
【目的】用寇氏法测定敌百虫对小白鼠的经腹腔注射的 LD50和95%可信限。
【方法】寇氏法（ Karber法）【条件】1.剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组。
2.各组动物数应相等。
3.“反应”应大致呈正态分布。
最小剂量组的死亡率（Pn）应为0%，最大剂量组的死亡率（Pm）应为100%；如果 Pn<20%或Pm>80%需用校正公式计算；如Pn>20%或Pm<80%则不能用此法计算。
【步骤】1.预备实验（1）摸索上下限：即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量（Dm）和一个动物也不死亡的最大剂量（Dn）。
方法是据经验或文献定出一个估计量，观察 2～3只动物的死亡情况。
如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出Pm=100%和Pn=0%的剂量，此两量分别为上下限。
（2）确定组数，组距及各组剂量①组数：一般5～8组，可根据适宜的组距确定组数，如先确定5组，若组距过大，可再增加组数以缩小组距。
有时也可根据动物死亡情况来决定增减组数。
②组距：指相邻两组剂量对数之差，常用“d”来表示。
D不宜过大，因过大可使标准误增大；也不宜过小，因过小则组数增多，各组间死亡率重叠造成实验动物的浪费。
组距大小主要取决于实验动物对被试因素的敏感性。
敏感性大者，死亡率随剂量增加（或减少）而增加（或减少）的幅度大，组距可小些；反之，敏感性小者，死亡率随剂量变化的幅度小，则组距应大些。
上下限之间的距离可作为敏感性大小的标志。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的死亡数。
DJY
7
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何D50/ED50 比值大安全
性大
安全范围：当药物的治疗效应与致死效应曲
线不平行时，要看ED95和LD5的距
离，距离越大越安全。
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
djy测定ld50的方法很多本实验用的是简化机率单位法对数剂量xdjy剂量对数剂量药物的剂量与效应关系djy测定药物ld50的设计方法1
实验:普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
【目的】 理解LD50的概念，掌握LD50的测定方法及计算。 【测定LD50的意义】 LD50反映药物的毒性大小。
药物半数致死量LD50的测定jy
2．计算给药：由腹腔注射给药。
3．观察记录：记录小鼠给药后反应，死亡时间，统计死亡数，列 下表：
结果记录表 组别
1 2 3 4 5
剂量 （ml/10g）
0.12 0.11 0.10 0.091 0.082
动物数 （只）
10 10 10 10 10
死亡数 （只）
死亡率 （%）
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位
C母 D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
1号液 2号液 3号液 4号液 5号液
2ml
1号
2ml
2号
2ml
3号
2ml
4号
2ml
5号
【实验步骤】
• 正式实验
1．分组编号:取小鼠50只，随机分成5组，每组10只，♀♂各半。
给药剂量准确 小鼠腹腔注射 脱臼处死实验用过小鼠
【思考题】
1.测定LD50有何药理意义？
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
实验结束
各组将实验台和实验器材刷洗干净
【实验步骤】
• 预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂
量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。
2．确定组数、计算各组剂量： • 组数（n）：5组 r=1.25
Dm r n 1 Dn • 按公比求各组剂量：D1，D2，…,Dn，其中D1= Dn=最小剂量、
实验部分
【实验目的】
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。
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药物半数致死量(LD50)的测定 药物半数致死量 的测定
吉林大学白求恩医学院 药理学系
特殊毒性试验（致畸、致癌、 特殊毒性试验（致畸、致癌、 致突变） 致突变） 毒性试验 长期（慢性）毒性试验 长期（慢性）
急性毒性试验： 急性毒性试验：1～7d
• 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够
C母 = D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
1号液 2号液 3号液 4号液 5号液
2ml 1号
2ml 2号
2ml 3号
2ml 4号
2ml 5号
【实验步骤】
• 正式实验
1．分组编号:取小鼠50只，随机分成5组，每组10只，♀♂各半。 2．计算给药：由腹腔注射给药。 3．观察记录：记录小鼠给药后反应，死亡时间，统计死亡数，列 下表：
引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量 的对数值表示。
TI=LD50/ED50
• 测定LD50意义
(2)评价药物安全性---治疗指数
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数
(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
新药审批办法规定： 新药审批办法规定：
• 三、药理资料 • 13. 与功能主治有关的主要药效学试验资料及文献资料。 • 14. 一般药理研究的试验资料及文献资料。
D2= D1·r ,…，Dn= Dn-1·r, Dm 3．配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积一样，一般0.1ml/10g， 按下列公式计算浓度：
C母 = D 等容注射量
药液配制的具体步骤： 预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体 重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
• 15. 动物急性毒性试验资料及文献资料。 动物急性毒性试验资料及文献资料。
• 16. 动物长期毒性试验资料及文献资料。 • 17. 致突变试验资料及文献资料。 • 18. 致癌试验资料及文献资料。 • 19. 生殖毒性试验资料及文献资料。
盐酸普鲁卡因产生毒性作用的原理: • 盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产
【实验步骤】
• 预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，通过实验找出100%死亡的最小剂
量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。 2．确定组数、计算各组剂量： • 组数（n）：5组 • 按公式求公比r:
n −1
r=1.25
Dm r= Dn • 按公比求各组剂量：D1，D2，…,Dn，其中D1= Dn=最小剂量、
生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑 制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为 神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。
• LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、 加权机率单位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法等。 • Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分 组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率， 是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐， 故现多采用计算机程序计算。 • 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
半数有效量选项。
• • 一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。 单击“计算”按钮，计算LD50等参数。
【注意事项 注意事项】 注意事项
给药剂量准确 小鼠腹腔注射 脱臼处死实验用过小鼠
【思考题】
1.测定LD50有何药理意义？ 2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
实验结束
实验部分 【实验目的】
1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。
【实验材料】
• 实验动物 实验动物：小白鼠，体重18～２２g，♀♂各半， 实验前禁食12h,不禁水。 • 实验器材 实验器材：计算机（BL-410机能实验系统）、电 子秤、注射器、小鼠笼。 • 实验药品 实验药品：盐酸普鲁卡因 （Procaine hydrochloride）
结果记录表 组别
1 2 3 4 5
剂量 （ml/10g）
0.12 0.11 0.10 0.091 0.082
动物数 （只）
10 10 10 10 10
死亡数 （只）
死亡率 （%）
小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位
4.实验观察30min后进行数据统计 实验观察30min后进行数据统计 实验观察30min后进行 5.计算LD50及其95%可信限 计算LD 及其95% 95%可信限 计算 采用Bliss法程序计算各参数步骤： • 启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处理选项，再进入