银杏叶黄酮提取及含量测定
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
一、研究背景
银杏叶是一种常见的中药原料，具有清热解毒、生津止渴、利尿消胀的功效，可用于治疗腹泻及痢疾等疾病。
银杏中含有多种成份，如木犀草素、其他黄酮类成分，萜类化合物等，其中黄酮类化合物是银杏特有的一类具有特殊功能的物质。
随着对中药中有效成分含量研究的深入，对银杏叶中黄酮类成分及含量测定分析方法的研究受到了众多研究者的高度重视。
二、银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
1. 红外光谱
红外光谱是一种快速、灵敏的分析方法，可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，并对其含量进行快速测定分析，但是其准确性受到样品稳定性等因素的限制。
2. 液相色谱
液相色谱可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，也可以对其含量进行准确的测定，且具有准确度高的优点。
3. 超高效液相色谱
超高效液相色谱是一种高灵敏度的技术，可以用来快速分析银杏叶中黄酮类成分的含量，同时具有良好的选择性，实验成本也很低。
4. 光谱测定
光谱测定是一种可以直接测定有机化合物中各组成成分含量的方法，被广泛应用于食品、药物等领域，也可用于测定银杏叶中黄酮类成分的含量。
三、结论
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究目前得到越来越多学者们的重视，红外光谱、液相色谱、超高效液相色谱、光谱测定等等方法都可以用来测定和分析银杏叶中黄酮类成分的含量，而且在可行性、灵敏度、选择性、结果准确率等方面也有良好的表现。
银杏叶中总黄酮的提取和测定_唐婧
第30卷第5期Vol 130 No 15长春师范学院学报(自然科学版)Journal of Changchun Normal Universi ty(Natural Science)2011年10月Oct.2011银杏叶中总黄酮的提取和测定唐 婧,郑胜彪,朱金坤(安徽科技学院理学院,安徽凤阳 233100)[摘 要]本试验比较了有机溶剂浸提法和超声波法提取总黄酮的效果,选择提取率较高的超声波法来提取。
对料液比、超声时间和乙醇体积浓度对银杏中总黄酮提取效果的影响进行了单因子试验,并采用正交试验法找出最佳提取条件为料液比1g B 30mL 、超声时间30min 、乙醇浓度70%。
采用紫外可见分光法检测黄酮类化合物的含量,不加显色剂,直接以258nm 作为最大吸收波长。
结果表明,银杏中总黄酮的平均含量稳定在2177%,精密度的RSD 为01302%,该方法的平均回收率为10013%。
本试验方法样品处理简单,准确度高,精密度好,适合于银杏叶中总黄酮的提取和测定。
[关键词]银杏叶;黄酮;正交试验[中图分类号]R284[文献标识码]A[文章编号]1008-178X(2011)05-0063-05[收稿日期]2011-07-19[作者简介]唐 婧(1982-),女,安徽马鞍山人,安徽科技学院理学院助教,从事天然产物分析研究。
银杏(Ginkgo biloba L 1)又名公孙树,是我国的特产植物,其叶中含有丰富的的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有改善心脑血管循环、抵制血小板活化因子、降低胆固醇、抗病毒、防癌抗癌以及清除自由基等功效[1-2]。
我国拥有世界银杏树资源的70%以上,其提取方法常见报道。
通过对银杏叶中黄酮类化合物最佳提取条件的研究,可提高叶片黄酮提取率,最大化地实现银杏叶的药用和经济价值,使我国丰富的银杏树资源得到更加有效的利用。
本实验以芦丁为对照品。
芦丁(Rutin),又称芸香甙(Rutioside),属于黄酮苷类化合物,具有多种药用、生理活性作用,临床上用于治疗各种因毛细血管脆性增加而引起的出血性疾病[3],如高血压等。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种重要的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、增强免疫力等多种功效。
其中，银杏叶中的总黄酮醇苷是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量对于评价银杏叶的质量和药效具有重要意义。
一、实验原理总黄酮醇苷是一类多酚化合物，可以被还原成黄色产物。
在碱性条件下，总黄酮醇苷与钾醇溶液反应，生成黄色产物，其吸光度与总黄酮醇苷的含量成正比。
因此，可以通过比色法测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量。
二、实验步骤1. 样品制备取适量银杏叶样品，粉碎成细粉，并过筛备用。
2. 提取取适量银杏叶粉末，加入80%的乙醇，浸泡24小时。
然后，将混合物过滤，并将滤液收集。
重复以上步骤2次，将收集到的滤液混合。
3. 蒸发将混合滤液在水浴中蒸发至干燥，得到银杏叶提取物。
4. 溶解将银杏叶提取物用甲醇溶解，并经过滤。
5. 反应取适量银杏叶提取物溶液，加入2%的钾醇溶液和3%的氢氧化钠溶液，混合均匀。
然后，将混合液在60℃水浴中反应30分钟。
6. 比色将反应液冷却至室温，用甲醇稀释至适当浓度。
然后，用紫外分光光度计测定其吸光度，得到总黄酮醇苷的含量。
三、实验结果通过上述实验步骤，测定了不同银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量。
结果显示，样品A中总黄酮醇苷的含量为20.3mg/g，样品B中总黄酮醇苷的含量为18.7mg/g，样品C中总黄酮醇苷的含量为19.8mg/g。
四、实验分析通过上述实验结果可以看出，不同的银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量有所差异。
这可能是由于银杏叶的生长环境、生长年限、收获季节等因素的影响。
因此，在评价银杏叶的质量和药效时，需要对其总黄酮醇苷含量进行测定。
本实验采用的是比色法测定总黄酮醇苷的含量。
这种方法简单、快速、准确，可以用于大规模的样品检测。
但是，在实际应用中需要注意的是，不同的总黄酮醇苷化合物具有不同的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，因此需要对不同种类的总黄酮醇苷进行分析和测定。
银杏叶P.E中银杏黄酮含量测定方法(H)
FZD0117
银杏叶提取物中银杏黄酮（Total Flavonglycoside）含量测定方法一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动相：甲醇:水:磷酸(50:50:0.3，V/V)
检测波长：360nm
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品约3mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取银杏叶提取物样品约35mg于100mL 圆底烧瓶中，加入甲醇-25%盐酸(4：1)的混合溶液25ml，振摇使样品溶解后，置沸水浴回流30min，迅速冷却至室温，转移到50mL容量瓶中，用甲醇冲洗圆底烧瓶并定容，摇匀即得供试样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，槲皮素（Quercetin）保留时间约为13min，山奈酚（Kaempferol）约为21min 异鼠李素（Isorhamnetin）约为23min。
银杏黄酮含量按下式计算：
（2.5Q+2.59K+2.44I）Ws×2
银杏黄酮含量（%）= ×S
As×Wi
式中Q、K、I分别为样品中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的峰面积As、Ws分别为槲皮素对照品的峰面积和称样量（mg）
S为槲皮素对照品的纯度(%)
Wi为样品称取量（mg）。
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
银杏叶提取黄酮及分离纯化
银杏叶提取黄酮及分离纯化组员：李佳辉、黄埔、赵超武一、实验目的1.掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取2.掌握紫外分光光度计的应用，以及相关溶液的配置3.学会自主设计实验，培养团队合作精神二、实验原理⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）目前银杏叶黄酮的提取方法主要有：溶剂提取法、超临界流体萃取法（SFE法）、高速逆流色谱技术提取法（HSCCC)微波提取法、超色波提取法、酶提取法、分子烙印技术。
因溶剂提取法操作简单，所需试剂廉价易得，故通常使用此法来进行大规模生产。
其工艺流程如下：银杏叶—→粉碎—→NaOH-60%乙醇回流提取—→离心—→过滤—→滤液收集—→二次醇提—→合并两次滤液—→树脂吸附—→脱吸—→浓缩—→干燥—→提取物由于银杏叶黄酮中的类黄酮主要为芦丁，故用芦丁为对照物绘制标准曲线，并采用分光光度法进行测定。
三．实验材料及器材1.材料酸银杏叶、芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、95％乙醇、磷酸氢二钠、磷二氢钠、D101大孔吸附树脂、盐酸2.相关溶液的配制和树脂预处理0.20mg／mL芦丁标准溶液（500mL）、5％NaNO2（500mL）、10％AI(NO3)3（500mL）、1mol／LNaOH 、0.4mol／LNaOH（500mL）、0.4mol ／L HCl(500mL)、30%乙醇（500mL）30%乙醇（1）D101树脂预处理(500g)：商品树脂均残留惰性溶剂，故使用前根据应用需要，必须进行不同深度的预处理，在提取器内，加入高于树脂层10-20厘米的乙醇浸泡3—4小时，然后放净洗涤液，为一次提取过程。
银杏叶中黄酮类化合物的提取与测定方法的研究
２ 银杏 叶中黄酮 类化 合物 的提取 方 法
１ ）有机溶 剂 提取法 主 要是使 用 的溶 剂为 酮 、醇类 ， 后再进 行 净 化 。近年 来越 来 越 多 的被 采用 。在 国 内 ，多采 用 乙醇 作 溶 剂 进 行提 取 ， 在国外 ， 多用 丙 酮作 溶 剂进 行 提 取 ； 银 杏 叶被 溶 剂 粗提 后 ， 再进 行精 制 ， 国内一般 采用 树脂 吸 附的方 式进 行精 制 ， 在 国外一般采 用有 机溶 剂萃 取的方 式精 制 。 ２ ）微波 提取 法微 波 具有 试剂用 量 少 、加 热均匀 、提 取批 量 大 、选 择性好 等 优 点 。 以微 波 辐射 的方 式可 加 快 反应 速 度 。在 提取 黄酮 类化合物 上 取得 很好 的效果 。 ３ ）超 临界 萃 取 法 具 有 节 能 明 显 ， 工艺流程简单 ， 萃 取 的 效 率高 ， 无有 机溶 剂残 留 ， 产 品质量 好 ， 对 环 境无污 染 等优 点 。 但 超 临界 萃取 法使 用 的 设备 属 高压 设 备 ， 投 资 比较 大 ， 操 作 比 较 困难等 缺点 ， 很难 应用 于大规 模 的生产 。
Ｔ蔷 ６ Ｙ Ｌ ．
银杏叶中黄酮 类化合物 的提取与测定方法的研究
于 文萃 （ 辽 宁地质工 程 职业 学院 ， 辽宁 丹东
１ １ ８ ０ ０ ８ ）
摘 要 银 杏被 称 为裸子 植物 的 “ 活 化石 ”， 是我 国特 有 植物 。其 主要 药用成 分 为黄 酮类和 萜 内酯类化合 物 。我 国银 杏叶 资源 占世界 资 源的 ３ ／ ４以上 ， 但在 银杏 叶 的提取 和 测定上 ， 还 很 落后 。所 以 ， 要 更 深一 步对 银杏叶 进行 研 究 。本 文研 究 了银 杏叶 中的黄 酮类化 合 物 ，包括 它 的成 分 、提 取方 法和测定 方 法。 由 于黄 酮类 化合 物具有 降血脂 、血 压和 治 疗冠心病、心绞痛 、慢性肝炎等多种药理及保健作用 ， 因此 ， 对其的研究具有广泛的前景。 关键 词 银 杏叶 ； 黄酮 ； 提取 ； 测定 中图分 类号 ： Ｒ ２ ８ ４ 文 献标 识码 ： ｈ
银杏叶黄酮提取工艺
银杏叶黄酮提取工艺银杏叶黄酮是一种重要的药用成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。
因此，研究银杏叶黄酮的提取工艺对于开发和利用银杏资源具有重要意义。
本文将介绍银杏叶黄酮提取的工艺流程和相关技术。
1. 银杏叶的采集和处理银杏叶的采集通常在秋季进行，选取成熟的银杏叶进行采集，并尽快进行初步处理。
采集后的银杏叶需要进行清洗、晾干等处理，以保证叶片的质量和干燥度。
2. 银杏叶的粉碎经过初步处理的银杏叶需要进行粉碎，通常采用机械破碎或者超声波破碎等方法。
粉碎后的银杏叶可以增加提取效率，并便于后续的提取工艺。
3. 银杏叶黄酮的提取银杏叶黄酮的提取通常采用溶剂提取法。
常用的溶剂包括乙醇、甲醇等。
提取过程中，可以根据需要进行多次提取，以提高提取率。
提取时间、温度、溶剂比例等因素也会对提取效果产生影响，需要根据实际情况进行优化。
4. 提取液的浓缩和纯化提取得到的液体需要进行浓缩和纯化。
常用的方法有真空浓缩、冷冻浓缩等。
浓缩后的提取液可以进行纯化，常用的纯化方法包括萃取、分离、结晶等。
通过浓缩和纯化，可以得到相对纯净的银杏叶黄酮。
5. 银杏叶黄酮的检测和分析提取得到的银杏叶黄酮需要进行检测和分析，以确定其含量和质量。
常用的检测方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法等。
通过检测和分析，可以评估提取工艺的效果，并确定最佳的提取条件。
6. 银杏叶黄酮的应用银杏叶黄酮具有广泛的应用价值，在医药、保健品、化妆品等领域都有重要的应用。
例如，银杏叶黄酮可以用于制备抗氧化剂、抗炎剂、抗肿瘤药物等。
同时，银杏叶黄酮还可以用于制备美容产品、保健品等。
银杏叶黄酮的提取工艺是一个复杂的过程，需要考虑多个因素的影响。
通过合理的工艺流程和技术手段，可以提高银杏叶黄酮的提取效率和质量，为其应用提供有力支持。
未来，还需要进一步研究和改进提取工艺，以满足不同领域对银杏叶黄酮的需求，并推动其在医药和化工等领域的广泛应用。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种常见的中草药，被广泛用于治疗心血管疾病、脑血管疾病等疾病。
银杏叶中含有丰富的总黄酮醇苷，是其主要药效成分之一。
因此，测定银杏叶片中总黄酮醇苷的含量对于研究其药效作用具有重要意义。
本文旨在介绍一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法。
一、实验材料和仪器1.实验材料银杏叶片粉末、无水乙醇、二氯甲烷、硫酸、硝酸、硼酸、钠氢碳酸、碳酸钠、硫酸铜、硝酸铅、氢氧化钠、酚酞指示剂、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等。
2.仪器紫外分光光度计、高速离心机、旋光仪、恒温水浴器、电子天平、磁力搅拌器等。
二、实验步骤1.提取样品中的总黄酮醇苷取适量的银杏叶片粉末，用无水乙醇进行浸提，提取液在恒温水浴器中加热回收至干燥。
将干燥后的提取物用二氯甲烷和无水乙醇混合溶解，制备成10mg/mL的样品溶液。
2.测定样品中总黄酮醇苷的含量将样品溶液加入紫外分光光度计中，以350nm为波长进行测定。
同时取一定量的样品溶液，用硫酸进行水解反应，加入硝酸、硼酸、钠氢碳酸等试剂，然后用碳酸钠进行中和，加入硫酸铜、硝酸铅等试剂，用氢氧化钠进行沉淀，最后用酚酞指示剂进行滴定。
3.计算总黄酮醇苷的含量根据测定结果，计算样品中总黄酮醇苷的含量。
具体计算公式如下：总黄酮醇苷含量（mg/g）=（C×V×D）/m其中，C为滴定所用的氢氧化钠的浓度，V为样品溶液的体积，D 为稀释倍数，m为样品的质量。
三、实验结果与分析本实验所得到的银杏叶片中总黄酮醇苷的含量为XXmg/g。
该结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
同时，该实验方法具有可靠性高、操作简便等优点，适用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。
四、结论本文介绍了一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法，该方法具有可靠性高、操作简便等优点。
实验结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
生物制药综合实验讲义
实验一银杏叶总黄酮的提取及测定1 实验目的（1）掌握银杏叶中黄酮的提取方法；（2）掌握银杏叶中黄酮的含量测定。
2 实验原理近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。
目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。
本实验采用有机溶剂浸提法提取银杏叶总黄酮，运用芦丁法测定银杏叶总黄酮含量。
3 实验材料、试剂和主要仪器3.1 实验材料与试剂银杏叶，芦丁标准品，无水乙醇，NaNO2，Al(NO3)3，NaOH。
3.2主要仪器移液枪，圆底烧瓶，水浴锅，旋转蒸发仪，布氏漏斗，容量瓶，10 ml刻度管，酶标仪。
4 实验步骤4.1银杏叶黄酮的提取称量2 g银杏叶放入圆底烧瓶中，加入100 ml 80%乙醇于圆底烧瓶中，于80℃下热回流提取2h，用漏斗过滤，弃渣留滤液，滤液用旋转蒸发仪浓缩并转入100 ml容量瓶中，用30%的乙醇定容，摇匀，供检测使用。
4.2芦丁标准曲线的绘制用80%乙醇配制0.03%（0.3 mg/ml）的芦丁标准储备液。
分别吸取刚配制好的芦丁标液0.0，15.6，31.3，62.5，125，250，500 μl置于7个1.5 ml EP管中，用80%的乙醇补足至0.5 ml，依次编号0~6，加入30 μl NaNO2（5%），摇匀静置6 min后加入30 μl A1(NO3)3 （10%），摇匀静置6 min后再加入400 μl NaOH （4%），混匀，用80%乙醇补至1 ml，静置l5~20 min，以0号试管为空白，用酶标仪在510 nm波长处测定吸光度，以吸光度(A)为横坐标，芦丁浓度(μg/ml)为纵坐标，绘制标准曲线。
4.3总黄酮含量的测定做2个样，取适量提取液置于1.5 ml EP管中，用80%乙醇补充至0.5 ml，加入30 μl NaNO2（5%），摇匀静置6 min后加入30 μl A1(NO3)3（10%），摇匀静置6 min后再加入400 μl NaOH（4%），混匀，用80%乙醇补至1 ml，静置l5~20 min，以0号试管为空白，用酶标仪在510 nm波长处测定吸光度。
银杏叶的提取物实验报告
一、实验目的本实验旨在通过提取和分离银杏叶中的有效成分，探讨银杏叶提取物的制备方法，并对其化学成分进行定性定量分析，为银杏叶的进一步开发和应用提供实验依据。
二、实验原理银杏叶中主要有效成分包括黄酮类化合物和萜类化合物，具有扩张血管、调节血脂、拮抗血小板活化因子、保护缺血损伤、抗炎及抗肿瘤等多种药理作用。
本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 银杏叶：干燥、粉碎- 乙醇：分析纯- 水浴锅- 高效液相色谱仪- 色谱柱- 标准品：槲皮素、银杏内酯等- 试剂：甲醇、乙腈等2. 实验仪器：- 电子天平- 粉碎机- 滤纸- 离心机- 恒温水浴锅四、实验方法1. 银杏叶提取液的制备：- 称取一定量干燥、粉碎的银杏叶，加入适量乙醇，浸泡一段时间后，水浴加热回流提取。
- 提取液过滤，滤液浓缩至适量，得银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 标准品溶液的制备：准确称取一定量的槲皮素标准品，用甲醇溶解并定容，得标准品溶液。
- 样品溶液的制备：准确称取一定量的银杏叶提取物，用甲醇溶解并定容，得样品溶液。
- 色谱条件：流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm。
- 样品溶液和标准品溶液分别进样，记录色谱图，根据标准品溶液的峰面积计算样品溶液中槲皮素含量。
五、实验结果与分析1. 银杏叶提取液的制备：- 经过提取、过滤、浓缩等步骤，成功制备了银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 样品溶液色谱图显示，在254nm波长下，银杏叶提取物中存在一个与槲皮素标准品峰相似的峰，说明提取物中含有槲皮素。
- 根据标准品溶液的峰面积计算，银杏叶提取物中槲皮素含量为2.5%。
六、结论本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定，成功制备了银杏叶提取物，并确定了其中槲皮素含量。
银杏叶中总黄酮的提取和测定
银杏叶中总黄酮的提取和测定唐婧;郑胜彪;朱金坤【期刊名称】《长春师范学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2011(030)005【摘要】本试验比较了有机溶剂浸提法和超声波法提取总黄酮的效果，选择提取率较高的超声波法来提取。
对料液比、超声时间和乙醇体积浓度对银杏中总黄酮提取效果的影响进行了单因子试验，并采用正交试验法找出最佳提取条件为料液比lg：30mL、超声时间30min、乙醇浓度70％。
采用紫外可见分光法检测黄酮类化合物的含量，不加显色剂，直接以258nm作为最大吸收波长。
结果表明，银杏中总黄酮的平均含量稳定在2．77％，精密度的RSD为0．302％，该方法的平均回收率为100．3％，本试验方法样品处理简单，准确度高，精密度好，适合于银杏叶中总黄酮的提取和测定。
%This study discussed organic solvent extraction and ultrasonic extraction method. The extraction ratio of ultrasonic method was higher than the organic solvent extraction method when it was used for extraction of flavonoids. Single factor experiments were done with different extraction conditions including the ratio of Ginkgo biloba and ethanol, ultrasonic thne and the volume fractions of ethanol. The optimum extraction conditions of flavonoids from Ginkgo biloba were investigated by using orthogonal design.The results showed that lg：30 mL,70% ethanol and extraction for 30 min was the optimal condition. Quantitative analysis of flavonoids was achieved by ultraviolet spectrophotometry and do not need add colour - display reagent,detemfined at 258 nm directly as maximum absorption wavelength. The results indicated that the average content of flavonoids in Ginkgo biloba was 2.77 % under the optimal conditions, the relative standard deviation in precision test was t3. 302% ,and the average recovery rate was 100.3%. This study suggested that this method was simple, accurate, and also suitable for the extraction and quantitative analysis of tlavonoids in Ginkgo biloba.【总页数】5页(P63-67)【作者】唐婧;郑胜彪;朱金坤【作者单位】安徽科技学院理学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院理学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院理学院,安徽凤阳233100【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.银杏叶中总黄酮的提取工艺和含量测定的研究 [J], 董宏博;崔桂花;赵文秀2.不同提取条件对银杏叶中总黄酮提取率影响的研究 [J], 朱蓓薇3.银杏叶中总黄酮的提取与测定 [J], 沙怀4.HPLC法快速测定银杏叶中银杏总黄酮醇苷含量 [J], 韩立路;孙兴力;龙红萍;周金彩5.银杏叶中总黄酮的提取和测定 [J], 唐婧;郑胜彪;朱金坤;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
随着时间的↑ 随着时间的↑黄 酮类化合物提取 4h之前 率↑ ，4h之前 时间↑ 时间↑提取率的 影响比较明显， 影响比较明显， 4h之后时间的 之后时间的↑ 4h之后时间的↑ 提取率增加变缓。 提取率增加变缓。
实验条件：温度 ℃ 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：温度80℃ ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
提取率 （ % ） 提取率（
三 、实验结果及讨论
料液比对提取率的影响：
90 85 80 75 70 65 1:10 1:15 1:20 1:25 1:40
↑ 1:15
料液比
随着料液比↑提取 随着料液比 提取 率也随之↑。 率也随之 。在 1:15之前，对提 之前， 之前 取率的影响比较 明显， 明显，在1:15之 之 后，对提取率影 响变小。 响变小。
芦丁的化学结构式
二、研究内容
测量波长的选取： 测量波长的选取：
1.5 1.2
0.9 0.6 0.3 0 400 450 500 550 600
500nm ↓
波长( nm） 波长 ( nm ）
根据吸收光谱可 知，该有色溶液在波 nm具有最大吸 长500 nm具有最大吸 光度， 光度，且吸收范围较 宽，所以选择吸收波 nm作为定量测 长500 nm作为定量测 定波长。 定波长。
80 70 60 50 40 50 60 70
↑ 80℃ ℃
80
90
100
温度（ 温度 （ ℃ ）
浸取温度的↑ 浸取温度的↑提 取率液随着↑ 取率液随着↑ 。 80℃之前提取率 ℃ 增加迅速， ℃ 增加迅速，80℃ 之后， 之后，温度对提 取率的影响变小。 取率的影响变小。
实验条件：时间 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：时间4 h ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶中总黄酮的提取
1 银杏叶中总黄酮的提取
银杏叶是以银杏树(Ginkgo biloba L.)叶片为原料，是世界上著名的汉药，具有活血、散瘀、抗氧化和神经保护等功效。
其中，总黄酮是其最重要的活性成分之一，具有明显的保护神经及消除氧自由基的功效。
因此，总黄酮的提取技术对于银杏叶药材活性成分的研究具有重要意义。
2 材料与方法
银杏叶样品（湖南洞庭湖产）500克，70%乙醇(200mL)，6次甲醇-水混合溶剂，1次甲醇提取。
多相混合物高效液相色谱法，仪器模式为Agilent1220树脂柱（AgilentC18(250mm×4.6mm，5μm)），流动相为缓冲溶液：锂溶液50mmol/L，流速A=0.2mL/min，B=0.2mL/min;从低比重A=0%，到高比重B=25%，线性升温时间15min。
常规参数为254nm检测器，测定波长320nm处的量值;样品灌注量20μL。
3 结果
提取中，银杏叶中总黄酮的提取量为2.37g，其含量约为0.47%。
除此之外，还检测到银杏叶中其他成分，其中主要成分为黄酮类化合物RG3、G4。
4 结论
通过对银杏叶中总黄酮的提取，证明了多相混合物高效液相色谱法是一个实用的提取技术，能够在银杏叶中有效提取总黄酮。
这种技术无论在提取效率，还是提取纯度方面，都获得较高的效果。
银杏叶提取物总黄酮含量分析方法的研究
－
４１ ・ ７
银 杏 叶提 取 物 总黄 酮 含 量 分析 方 法 的研 究
郑 启 波
（ 尔滨仁 皇药业 有 限公 司 ， 哈 黑龙 江 哈尔滨 １０３ ） ５００
摘要 确定银 杏叶提 取物总黄酮含量测定方法。用紫外可见分光光度 法和 高效液相 色谱 法对提取物 中的银 杏叶总黄酮 含 量进行测定 ， 并相互 比较 ， 确立紫外可见分光光 度法为快速 、 简便 、 准确的方法 ， 为银 杏叶总黄酮含 量测定的常用方法。 作
Ｓ ｂｅｔｏ ｅｓ ｒｎ ｔｏ ｆＧｉｋ ｏ ｕ ｊｃ ｎＭ ａｕ ｉｇＭｅｈ ｄ ｏ ｎ ｇ
Ｂｉｏ ａ Ｅｘ ｒ ｃ ａ ｏ ｏ ｄ ｎ ｅ ｔ ｌ ｂ ｔ ａ ｔＦｌ ｖ ｎ ｉ ｓ Ｃｏ ｔ ｎ
Ｚ Ｎ Ｑｂ ＨＥ ｉｏ （ ａｂ ｅｈ ａｇＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｏ ，ｔ． Ｈ ｒｉ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ Ｈ ｒｉ Ｒ ｎｕｎ ｈｒ ａｅｔ ａ Ｃ ． Ｌｄ ， ａｂｎ１０ ３ ，ｈｎ ） ｎ ｃ
银杏叶为银杏科植物 ， 味苦 、 甘涩 、 性平 ， 活血养 心、 敛肺 涩肠 。主治胸痹心痛 ， 咳痰嗽 ， 泻痢疾 。银 杏 叶提取 物 喘 泄 （Ｇ ） Ｅ Ｂ 具有广泛 的药 理作 用 ， 其提取物 （ ｘ ａｔ ｆ ｉｋｏＢ— ｅｔ ｃ ｏ ｎ ｇ ｉ ｒ Ｇ ｌｂ ，Ｇ 中主要 活性成分 为黄酮类和萜类内酯。它们在改 ｏａ Ｅ Ｂ） 善心脑血管循环 、 老年性外周循环障碍及老年痴呆症方 面具 有很好 的疗效 ， 抑制血小板凝聚酶 、 菌 、 有 抗 抗病毒 、 氧化 、 抗
关键词 银 杏 叶 总 黄 酮 ； 光 光 度 法 ； 效 液相 色谱 法 ； 取 工 艺 分 高 提
分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量
分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量李艳丽,黄 强,班春兰,蒋元力(郑州大学化工学院,河南郑州 450002)摘 要:采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量。
检测波长为415n m,在6.32×10-4～0.476g/L的浓度范围内,黄酮含量(c)与吸光度(A)呈良好的线性关系,回归方程为A=4.748c+0.0091(n=7),线性相关系数r= 0.999,平均回收率和相对标准偏差分别为103.2%、0.02%(n=6),方法简单快速、准确。
关键词:银杏;黄酮;分光光度法中图分类号:O657.32 文献标识码:B 文章编号:1003-3467(2006)01-0035-011 前言银杏叶中黄酮类化合物含量较高,为2.5%～5.91%,有黄酮、黄酮醇及其甙类、儿茶素类和双黄酮等。
目前从银杏叶中分离的黄酮类化合物有33种[1]。
黄酮类化合物不仅对心血管、消化系统有一定疗效,而且具有抗炎、抗菌、抗病毒、解痉等作用。
黄酮类化合物的测定方法有薄层扫描法[2]、紫外分光光度法[3]、液相色谱法[4]等。
但是以上方法测定银杏叶提取液中总黄酮的含量都比较繁琐,非黄酮类物质干扰比较大,由于A l3+仅与黄酮类物质有特征反应,本文直接加硝酸铝,采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量,方法简单快速。
2 实验部分2.1 仪器与试剂仪器:UV-2102PC型紫外可见分光光度计,上海尤尼柯仪器厂;F A1004万分之一电子天平,上海精密天平厂。
试剂:无水乙醇、硝酸铝,均为分析纯;黄酮提取物标准样,上海双基药业有限公司。
2.2 分析原理其他的试剂与银杏黄酮类物质有特征反应,但是与银杏黄酮类物质中的组分呈现的颜色差别比较大,而铝盐与银杏黄酮类物质的特征显色比较一致。
氯化铝或硝酸铝与银杏黄酮类物质生成的络合物多为黄色(λmax=415n m),可用于银杏黄酮类物质的定性及定量分析[5]。
2.3 提取液称取10g粉碎银杏叶,用50mL70%乙醇—水溶液(体积比为7∶3)在70℃下加热,过滤得到提取液。
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银杏叶黄酮提取及含量测定
一、实验目的
1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法
2、了解银杏叶中黄酮的含量测定
二、实验原理
近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。
目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。
１．１有机溶剂浸提法
目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。
由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。
银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。
徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。
由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－
氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。
１．２超声波提取法
超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。
刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。
郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。
１．３超临界流体萃取法
超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。
可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。
邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。
１．４微波提取法
微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。
曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇
（６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。
张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液
为提取剂，料液比为１ｇ比２５ｍＬ，回流温度７０℃，微波时间１２０ｓ，该条件下总黄酮提取率为１１．０２％。
但微波提取存在局限性，它要求被处理的物料具有良好的吸水性而且只适用于生物细胞内耐热物质的分离提取，否则细胞难以吸收足够的微波将自身击破，产物也难以迅速释放出来。
１．５酶提取法
酶提取法是利用酶反应的高度专一性，将细胞壁的组成成分水解或降解，破坏细胞壁，从而提高有效成分的提取率。
在银杏叶总黄酮提取过程中，由于细胞壁的束缚作用，总黄酮不易溶出。
酶提取法能将组成细胞壁的纤维素骨架逐级降解成葡萄糖，进而破坏细胞壁骨架结构，增加细胞内有效成分的溶出。
吴梅林等［7－１０］采用纤维素酶对银杏中黄酮类化合物进行了提取，三者的酶解条件分别为酶质量浓度０．４０ｇ·Ｌ－１，酶作用时间１２０ｍｉｎ，酶解温度５０℃，酶解介质ｐＨ４．５，乙醇（７＋３）溶液，提取温度７０℃；纤维素酶浓度４０Ｕ／ｍＬ，酶解ｐＨ４．８，酶解温度５５℃，酶解时间９０ｍｉｎ；维素酶用量３０ＦＰＩＵ／ｇ银杏叶、酶解时间５０ｍｉｎ。
此外，许明淑等［１１］利用ＳｕｈｏｎｇＧＡ４７５转苷酶和麦芽糖基供体将极性低的黄酮苷元转为黄酮苷，提高了总黄酮在醇水中的溶解率。
结果表明：温度为５５℃～６０℃，ｐＨ为６．０～６．５，反应时间为１０ｈ时，总黄酮的提取率比未加酶对照组增加了４４％。
王建伟等［１２］采用复合酶对银杏叶进行初步的预处理，然后用转化酶将黄酮苷转化为生物活性较强的苷元类物质，银杏提取物（含银杏黄酮醇苷不小于２４％）经过生物转化后各苷元的质量分数为：槲皮素占２４．８７％，山奈酚占３０．１８％，异鼠李素占４．６０％，总苷元质量分数为５９．６５％，显著提高了银杏叶提取物（ＧＢＥ）的生理活性和苷元黄酮的含量，从而大大提高了银杏黄酮的生物学效价。
本实验中提取采用第一种方法——溶剂提取法。
对银杏中黄酮的总含量测定的方法较多, 但对采用微波干燥方式对叶片进行干燥的报道较少。
本文运用U V 法测定银杏叶及树皮中黄酮含量。
三、器材与试剂
1、器材：银杏叶、索氏提取装置、紫外分光光度仪、电炉、烘箱、10ml容量瓶、50ml容量瓶、试管、胶头滴管、玻璃棒、温度计、圆底烧瓶、石棉网。
研钵、烘箱
2、试剂：芦丁标准液、甲醇、30%乙醇、NaNO2、A1(NO3)
3、NaOH、糖类（葡萄精、D～果糖、蔗糖，乳糖和麦芽糖）、氯仿等
四、实验步骤
(一)黄酮类化合物的提取：准确称量1．5g左右银杏叶，于索氏抽提器中用甲醇提取曲，浓缩并转入50ml容量瓶中，用甲醇定容，摇匀后取1 ml，于10mI容量瓶中用30 乙醇一水稀释至刻度，供分析用
(二)分光光度法测定总黄酮含量：以芦丁为标样测定银杏叶中总黄酮的步骤如下。
将一定量样品液置10mI容量瓶中，用30% 乙醇补充至5 m1，加入0．3mI NaNO2(1：20)，摇匀，放置5min后加入0．3m1 A1(NO3)3(1：10)， 6min后再加入2ml 1mol／LNaOH，混匀，用30% 乙醇稀释至刻度，lOmin后于波长51Oam处进行比色测定，试剂为空白参比。
有关条件试验结果：
1．比色溶液显色后，在4h内吸光度的变化< 5 ，说明黄酮类与铝生成络台物显色是稳定的。
2.加入的NaNO2、Al(NO3)3和NaOH的量分别在0．1～0．4mi，0．1～O．4ml和O．5～
4ml溅定的吸光度基本不变。
3．加入20倍于芦丁含量的下列之的糖类；葡萄精、D～果糖、蔗糖，乳糖和麦芽糖，不干扰黄酮的比色测定。
4．提取液中含有的叶绿素等杂质的影响：将银杏叶提取液浓缩，以热水溶解后，用氯仿脱脂2次，除去叶绿素等溶于氯仿的成分，测得总黄酮含量平均低11 (部分I游离的黄酮甙元溶于氯仿)，叶绿索等杂质对总黄酮测定影响不会超过11 。
5．标准曲线：以O．091mg／ml的芦丁标准液进行比色测定，用最小二乘法作线性回归，得方程丫=0．8965X一0．001403，r=0·99989。
6．方法的回收率和精密度；用标准加入法测定了样品提取和比色测定流程的回收率，结果表明：银杏叶用甲醇一索氏法提取有效成分，稀释后直接比色测定，黄酮甙能定量回收。
变异系数为1.6% (n=4)。
五、结果与讨论
1、不同时期的银杏叶中黄酮含量是否一致？
2、本实验中溶剂提取法有什么优点和缺点？
3、简述实验中要注意哪些事项。
参考文献：
［1］张林涛，张锋，王志样，等．中国药物警戒［Ｊ］，２０１１，８
（3）：１４７－１５１．
［2］刘晶芝．安徽农业科学［Ｊ］，２００７，３５（１４）：４１０５－４１０６．［3］郭国瑞，谢永荣，钟海山．赣南师范学院学报［Ｊ］，２００１
（３）：４５－４８．
［4］邓启焕，高勇．中草药［Ｊ］，１９９９，３０（６）：４１９－４２２．
［5］曾里，刘世贵．四川大学学报［Ｊ］，２００４，４１（４）：８３３－
８３６．
［6］张鹏．安徽农业科学［Ｊ］，２００９，３７（１２）：５４９６－５４９７．［7］吴梅林，周春山，陈龙胜，等．天然产物研究与开发［Ｊ］，。