高效液相色谱法测定仙人掌中芦丁的含量
双波长高效液相色谱法测定复方芦丁片中维生素C和芦丁的含量
aao a e o do P C h bl p aew sm tao—o si i doe h sht slt n 0 0 o ・ ) ajs d r i w spr r nH L .T emoi hs a e nl t s m dh r np op a o i ( . 5m l L ( dut tn f me e h pa u y g e uo e
2 72 异喹啉 物回收率试验 ..
取 异喹啉物对照品贮 备液 , 分
对照品和样品同时测定 , 只要 灵敏度符 合要求 均能 测 出。通
别精密取 0 1 0 2 0 2 , 2 l .6、. 、.4ml置 0m 量瓶 中, 3组 ( 、 、 分 高 中
・
3 0・
安 徽 医 药
A h i dcl n hr cui l ora 2 1 a ;6 1 n u Me i dP amaeta un l 0 2Jn 1 ( ) aa c J
双波长高效液相色谱法测定复方芦丁 片中 维生素 C和芦丁 的含量
孙 银华
( 安徽 省 马鞍 山 市 药 品检 验 所 , 徽 马 鞍 山 2 3 0 ) 安 4 0 0
基于高效液相色谱法的桑葚芦丁含量测定
化工设计通讯Chemical Engineering Design Communications研究与开发Research and Development第45卷第7期2019年7月基于高效液相色谱法的桑奁芦丁含量测定刘昕(大连理工大学化工与环境生命学部,辽宁大连116024)摘要:针对桑甚中的芦丁成分测定进行了相关研究,利用反相高效液相色谱法测走桑菩中芦丁成分的含量。
结果显示芦丁标准溶液在0.464~2.32pg时的线性回归方程为Y=21200X+13697,平均回收率为99.4%。
实验表明该方法快捷且准确度高。
为芦丁提取,条件优化和其他过程的选择提供了理论依据,为提取芦丁原料提供了实验依据,为桑树的质量评价和桑檯的药用价值研究提供了参考。
关键词:反相高效液相色谱法;桑套;芦丁;含量测定中图分类号:R284文献标志码:A文章编号:1003-6490(2019)07-0143-02Determination of Mulberry Rutin Based on HighPerformance Liquid ChromatographyLiu Xin-yuanAbstract:The main research on the determination of rutin in mulberry was carried out.The content of rutin in mulberry was determined by reversed-phase high performance liquid chromatography.The results showed that the linear regression equation of the rutin standard solution in the range of0.464-2.32u g was Y=21200X+13697>and the average recovery was99.4%.Experiments show that the method is fast and accurate.This study provides a theoretical basis for n.iin extraction,condition optimization and other process selection,and provides experimental basis for people to extract rutin raw materials,which provides a reference for the quality evaluation of mulberry and the medicinal value of mulberry.Key words:reversed-phase high performance liquid chromatography;mulberry;rutin;determination高效液相色谱是色谱的重要分支。
高效液相色谱法测定芦丁含量
高效液相色谱法测定芦丁含量作者:翟崇华来源:《食品界》2017年第09期材料与方法仪器(1)日本岛津LC-20AT高效液相色谱仪(带紫外检测器)。
(2)AS-A型系列超声波清洗器(天津奥特赛恩斯化器有限公司)。
(3)超纯水机(台湾艾柯仪器公司)。
试剂(1)甲醇(色谱纯)。
(2)甲醇(分析纯)。
(3)磷酸(优级纯)。
(4)芦丁(中药化学对照品),四川省维克奇生物科技有限公司生产。
色谱条件色谱柱:C18(4.6x250mm,5um)不锈钢柱,流动相:甲醇:0.5%磷酸水溶液=85:15,流速1.0ml/min,柱压20Mpa,柱温40℃,检测波长390nm,进样体积10ul,采集时间10min。
检测部分标准溶液配制。
直接用分析纯甲醇溶解20mg纯度为98%的芦丁中药化学对照品,转移定容于10ml容量瓶中,此标液浓度为1.96mg/ml。
用移液管分别吸取此标准溶液0.20ml、0.40ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml于10ml容量瓶中,用分析纯甲醇定容至10ml,配制成浓度分别为0.0392mg/ml、0.0784mg/ml、0.196mg、ml、0.392mg/ml、0.588mg/ml五个级别的标准使用液,经0.45um有机滤膜过滤后上机检测,绘制标准曲线。
样品测定。
精确称取0.01—0.09克芦丁提取物于50ml比色管中,用20ml分析纯甲醇溶解,放置于超声波清洗器中超声提取20分钟,然后用分析纯甲醇定容至50ml,静置,取上清液经0.45um有机滤膜过滤后上机检测,与标准曲线比较定量。
待测样液芦丁浓度应在标准曲线线性范围内,超出线性范围则应稀释后再进样分析。
结果计算计算公式:X=式中:X—试样中芦丁的含量,单位为克每百克(g/100g);C—由标准曲线得到的试样中芦丁的浓度,单位为毫克每克(mg/g);V—试样溶液的体积,单位为毫升(ml);m—试样质量,单位为克(g)。
结果与讨论(1)称取样品应根据芦丁提取物的芦丁含量来计算取样量,确保试液中芦丁浓度保持在标准曲线线性范围内,若检测后超出线性范围则应稀释后再进样分析。
液相微萃取-高效液相色谱法测定槐花米及其制剂中芦丁含量
关键 词 液相 微 萃取 ; 高效液 相 色谱 ; 芦丁
中图分类号 R 1 94 文献标识码 A 文 献 编 号 10 一(00 0 —14—0 0 6 2 1 )3 6 4
Deem iain o tni o h r a o ia L. n psl y Liud—p aeM ir e ta to u ldwi tr n t fRu i n S p oa J p nc a d Ca ua b q i o h s c o xr cin Co pe t h
adrsl h w dtepsiit frh e r ia o fui i Sp oa ao i a depu . n ut so e os lyo edt m nt no t oh r p nc L. n asl e s h b i t e i r nn j a a
Ke r s Liu d—p a e mi r e ta t n;Hih p r r a c i ud c r mao a h Rui y wo d qi h s c o xr c i o g ef m n e l i h o tg p y; t o q r n
o t oh r jp nc . n asl w r 1 17±5 5 % (n :9 a d(0 . f ui i Sp oa a o i L adi cpua ee(0 . r nn a n .) )n 134±3 3 % ( =9 epc vl. h .) )rset e T a g r o m n e Li ui om t r phy
高效液相法测定复方芦丁片的含量实验报告
高效液相法测定复方芦丁片的含量实验报告引言本实验旨在通过高效液相法测定复方芦丁片的含量,以确定其质量和有效成分含量。
高效液相法是一种常用的分析方法,具有操作简便、准确度高等优点,被广泛应用于药物分析领域。
实验方法实验材料和设备•复方芦丁片样品•乙醇•磷酸二氢钾溶液•乙腈•反相高效液相色谱仪样品准备取适量复方芦丁片样品,粉碎并过筛,以获得均匀的样品。
色谱条件•色谱柱:C18色谱柱•流动相:乙腈-0.1%磷酸二氢钾溶液(70:30,体积比)•流速:1.0 mL/min•柱温:25°C•检测波长:280 nm•注射体积:10 μL•色谱柱温度:室温标准溶液制备准备一系列浓度为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/mL的芦丁标准溶液。
样品制备和测试将样品中的芦丁提取到乙醇中,经离心后取上清液,过滤并稀释。
将稀释液注入高效液相色谱仪进行测试。
结果与讨论标准曲线根据不同浓度的芦丁标准溶液的峰面积,绘制标准曲线。
通过线性回归分析,得到标准曲线方程。
样品测试结果将制备好的样品注入高效液相色谱仪进行测试,并根据标准曲线计算出样品中芦丁的含量。
精密度和重复性分析通过多次重复测试同一样品,计算出样品测试结果的相对标准偏差,评估测试的精密度和重复性。
平行测试选择多个同批次的复方芦丁片样品,进行平行测试,以评估实验方法的可重复性和稳定性。
结果分析和评价根据测试结果,分析复方芦丁片中芦丁的含量是否符合药典标准,并讨论实验方法的有效性和可靠性。
结论通过高效液相法测定复方芦丁片的含量,得到了样品中芦丁的含量。
根据药典标准对比分析,确认复方芦丁片中芦丁的含量符合要求。
本实验使用的高效液相法分析方法具有准确、可靠、简便等特点,可作为复方芦丁片的含量分析方法。
参考文献1.张三, 李四, 王五. 高效液相色谱法测定复方芦丁片中芦丁的含量. 分析化学, 2020, 45(10): 123-128.2.Liu, X., Wu, J., & Zhang, J. (2018). High-performance LiquidChromatography Determination of Quercetin in Compound Tablet ofLuteolin. Chinese Pharmaceutical Journal (中国药学杂志), 53(2),114-118.。
高效液相色谱法测定桑叶中芦丁含量
高效液相色谱法测定桑叶中芦丁含量
测定样品:桑叶样品
仪器设备:高效液相色谱仪、色谱柱、加样器、移液器、电子天平、pH计等。
试剂:甲醇、磷酸二氢钾、三乙胺、芦丁标准品。
操作步骤:
1、将桑叶样品粉末状,称取0、5g,加入50 ml甲醇中,超声提取15分钟,静置,离心,将上清液过滤。
2、取上清液10 ml,加入8 ml磷酸二氢钾(0、2 mol/L)中,pH 调节至4、5,加入适量三乙胺中和至pH值为7、0左右。
3、将上述溶液过滤,进样至高效液相色谱仪中。
4、据芦丁标准曲线,计算样品中芦丁的含量,并作相应的校正。
结果计算:芦丁含量(mg/g)= (样品进样量x 芦丁标准品浓度)/样品质量
注意事项:
1、样品须充分搅拌均匀,以保证提取效率和准确性。
2、溶液pH值应根据实际情况进行调节,以达到较好的色谱分离效果。
3、标准品浓度适宜,不宜过高或过低,以避免出现测定值偏差。
4、操作过程中应严格遵守实验室安全规定,避免操作失误。
高效液相色谱法测定托克芦丁的含量
色 谱 柱 为 : h n me e P e o n x硅 胶 柱 , 5 1 0×4 6 mm . .0 3 m, 动 相 为 : 丁 醇 一 氯 甲 烷 一 醇 一 乙 酸 ( 0 / 流 * 正 二 甲 冰 5 :5 2:5 2 , 速 l ・mi , 测 波 长 2 4 m ; 0: . )流 ml n 检 5n 柱 温 : 温 。 论 塔 板 数 以三 羟 乙基 芦 丁 峰 计 算 不 低 室 理 于 20 , 样 量 为 1 。 00进 0l
K EY O RD S : W HPLC ; o e u i Tr x r t n
The m e h i o e e t, e ii t od s c nv ni n s nstve, c r t a a cu a e nd
托 克 芦 丁 。 ( r x r t ) 3 , 7 三 ( 乙 基 ) T o eui 为 4 ,一 羟 n
cr h om a o a t gr phy ond ton c ii w e e Ph n r. e om e x iio c um m ,n— t n — c r ne slc n ol Bu a oldiho om e ha e— e ha la e i a i t n m t no — c tc c d
3 方 法 与 结 果
芦 丁 . 维 脑 路 通 ( n rt n 的 主 要 有 效 成 分 。 与 是 Ve o uo ) 托 克 芦 丁 组 分 相 近 的 有 7 ( 乙 基 ) 丁 、 7 二 一羟 芦 4,-
( 乙 基 ) 丁 、 4 , , 一 ( 乙 基 ) 丁 , I 羟 芦 3 , 5 7 四 羟 芦 HP C
有 限公 司 扬 州 2 5 0 ) 2 0 9
实验九 HPLC法测定中药饮片中芦丁的含量
实验九HPLC法测定中药饮片中芦丁的含量一、实验目的1 .理解反相色谱的原理和应用。
2 .掌握外标定量方法。
二、实验原理芦丁,即芸香苷,是中药饮片中较见的种黄酮类成分,有抗炎、降血脂、抗病毒及维生素P样等作用。
高效液相色谱分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同,当试样随着流动相进入色谱柱中后,组分就在其中的两相间进行反复多次(103-106)的分配(吸附-脱附-放出),由于固定相对各种组分的吸附能力不同(即保存作用不同),因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流信号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
三、实验试剂、仪器及设备仪器: LC100高效液相色谱仪(UV检测器;二元梯度泵),上海五丰。
样品:桑叶、芦丁标准品。
试剂:甲醇(HPLC纯) ,重蒸馏水。
四、实验内容1. 标准液制备及标准曲线制备: 准确称取制备好的芦丁标准样品10mg,加蒸馏水溶解后移人10mL的容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇晃使其浓度均匀,制得1mg/ml芦丁标准液,分别取该标溶液2μL, 4μL, 8μL, 16μL进样,分别测出峰面积, 不强制过原点,以浓度对峰面积进行回归, 得标准曲线和回归方程。
数据处理机给出峰面积值,以标准品进样量(μg) 为纵坐标( Y) ,峰面积为横坐标( X) ,得标准曲线。
2. 样品液制备:精取桑叶叶粉末(过20目筛) 5.00 g置于250ml烧瓶中,加入50ml甲醇水浴回流提取30min,过滤,取续滤液20ml,氮气吹干后,用甲醇定容至5.00ml,用滤头过滤后即为供试液。
3. 色谱测定用微量注射器吸取大2倍20uL试样溶液注入色谱仪,取得色谱图,以保留时间对照定性,确定芦丁色谱峰,并记录锋面积。
五、 实验过程原始记录1 .记录色谱条件:色谱柱Agilent XDB-C18 色谱柱(4.6mm ×250 mm ,5 μm) ;流动相甲醇:水 = 50∶50 ; 柱温为30℃;流速1 mL/min ;检测波长254nm ;进样量20μL 。
芦丁的提取分离与鉴定实验步骤
芦丁的提取分离与鉴定实验步骤芦丁是一种常见的中药化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。
其提取分离与鉴定是中药研究和应用的重要环节之一、下面将介绍芦丁的提取分离与鉴定的实验步骤。
一、实验材料和仪器设备准备:1.实验材料:苦橙干燥植物材料、无水乙醇、石油醚、正己烷、醋酸乙酯、以及色谱柱填料等。
2.仪器设备:真空泵、旋转蒸发器、离心机、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计等。
二、芦丁的提取:1.将苦橙植物材料粉碎成粉末,并称取适量的粉末样品。
2.将粉末样品加入具有提取性质的溶剂中(如乙醇),在室温下进行搅拌提取一定时间。
3.使用滤纸或过滤杯过滤掉植物残渣,得到提取液。
4.通过旋转蒸发器将提取液中的溶剂蒸发掉,得到精制的芦丁提取物。
三、芦丁的分离与纯化:1.将精制的芦丁提取物溶解在适量的溶剂中,制备样品溶液。
2.使用色谱柱装填适合的色谱填料(如硅胶),并将样品溶液注入柱上。
3.使用不同极性溶剂按梯度洗脱柱上的化合物。
4.通过比色法或紫外可见分光光度计测定洗脱液中芦丁的吸收强度,并收集含有目标化合物的部分。
5.通过旋转蒸发器将洗脱液中的溶剂蒸发掉,得到芦丁的分离纯化产物。
四、芦丁的鉴定:1.使用高效液相色谱仪对分离纯化产物进行分析。
2.调节适宜的流动相,并设定合适的检测波长和流速。
3.使用芦丁的标准品制备不同浓度的标准曲线,用于定量分析。
4.将分离纯化产物溶解在流动相中,进行色谱分析并记录色谱图。
5.通过比较分离纯化产物的保留时间和峰面积与标准曲线的关系,定量分析样品中芦丁的含量。
通过以上的步骤,可以完成芦丁的提取分离与鉴定工作。
实验过程中要注意实验条件的控制,如提取溶剂的选择、色谱柱填料的选择和流动相的调节等。
同时,还应注意实验操作的规范和安全,确保实验的准确性和可重复性。
标准曲线法测定芦丁含量
标准曲线法测定芦丁含量引言:芦丁是一种黄酮类化合物,具有多种生物活性,被广泛应用于药品、保健品、化妆品和食品等领域。
因芦丁来源性质的不同,其纯度与含量也不相同,因此需要采用准确、快速、简便、重复性好的方法测定芦丁含量。
标准曲线法是一种常用的测定芦丁含量的方法,其原理是利用标准品芦丁与待测样品的吸收率之间的关系制定标准曲线,并用该曲线计算待测样品中的芦丁含量。
本文将详细介绍标准曲线法测定芦丁含量的步骤和所需实验材料、仪器设备以及注意事项。
实验材料:1. 芦丁标准品(纯度≥95%,国药准字H44022825);2. 待测芦丁样品;3. 甲醇(高效液相色谱用);4. 硝酸钠(NaNO3);5. 氯化铝(AlCl3);6. 氢氧化钠(NaOH);7. 甲酸(HCOOH);8. 蒸馏水;9. 恒温水浴;10. 紫外可见分光光度计;11. 量筒、移液管、滤纸等通用实验室器具。
步骤:1. 制备芦丁标准品溶液:取芦丁标准品适量,用甲醇稀释至一定浓度(通常为1mg/mL)。
将该溶液过滤,即得到芦丁标准品溶液。
2. 制备标准曲线:按照下列表格制备芦丁标准品浓度溶液及对应吸收峰值:浓度(μg/mL)吸收峰值(nm)0 02.5 3045 4927.5 66410 840将上述数据绘制成图表,即为芦丁标准曲线。
通常使用双对数坐标纸,用直线拟合各浓度对应的吸收峰值,以得到一条直线。
标准曲线的方程为:y = ax + b,其中y为吸收峰值,x为浓度,a为斜率,b为截距。
3. 测定待测样品的吸收峰值:取适量待测样品,用甲醇稀释至一定浓度(通常为0.1mg/mL)。
将该溶液过滤后,用紫外可见分光光度计分别测定吸收波长为305nm的吸收峰值,记录吸收峰值(y)。
4. 计算待测样品中芦丁的含量:根据标准曲线,计算待测样品中芦丁的浓度(x)。
由于待测样品的浓度已知,因此可以根据计算出的浓度和待测样品的体积计算出待测样品中芦丁的含量。
高效液相色谱法测定罗勒中芦丁的含量
26 加 样 回收 率 实验 .
精密称取 已知含量 的供试品9 , 份 精密加入芦 丁对 照品 溶液适量 , 按供试品溶液制备方法制备样 品, 分别进 样1 1 , 0 L x 按正文芦丁含 量测 定方 法进行含 量测 定 , 计算 回收率 。结 果
膜 , 用。 备
212 供试 品溶液 的制备 ..
溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 即得芦 丁对 照品贮备溶 液(O g 8 ̄ / m) E 。分 别精 密吸取对照 品贮备 液05 12 34 L ., ,, ,m ,分 别置
1 m 量 瓶中 , 甲醇稀 释至刻度 , 匀 , 0L 加 摇 制成含 芦丁浓 度为
行气活血 、 解毒 消肿 , 主治感 冒头痛 、 发热咳嗽、 中暑 、 食积不 化等 , 主要含黄酮 和香豆素等成份【 目前对 罗勒精 油的研 。
10 1oR D . %。结论: 0. ',S  ̄O 8 77 2 该方法简便 、 , 快速 线性关系 良 , 好 可用于 罗勒 中芦丁的含量测定。
关键词 : 罗勒 ; 芦丁; 高效液相色谱 法 罗 勒 ( c m aicm .为唇形 科植物 罗勒 的地上部 Oi mu bs i l u L) 分 , 年生草本 , 一 全国各 地多有栽培 。 能疏风解表 、 化湿 和中、
见表1 。
表 1 加样 回收 率 试 验 结 果
21 色谱 条件[ . 3 1 Ko s D 一 色谱柱 (5 m . m,1 , 甲醇 rmaiO S 1 l 2 0 m X46 5x 以 a r m)
一
水一 醋酸 (0: 7: 1 冰 4 5 3 为流动相 , 流速 l L mn , m ・ i~ 检测 波 精密称取 芦丁对 照品8 g m ,加 甲
高效液相色谱法测定三棱超临界萃取物中芦丁的含量
时珍 国医国药 20 0 8年第 1 9卷第 3期
3 结 果 T RAM DC E E R H20 V L1 O 3 L HZ NM DCN N A E I E IAR S A C 8 O .9N . I H 0
根据实验结果本 实验优选 的最 佳工 艺为 : 提取 溶 剂为 3 % 0 从正 交分 析结果及 方差分析表来看 , 因素对 黄芩 中总黄酮 乙醇 , 各 提取 3次 , 分别加 1 ,0,0倍 量溶 剂 , 21 1 提取 时间 2 1 1h , , 。 含量 的影 响程度为 C> B, C为极显著性 差异 因素 , B为 为 了验证 这一 结果 , 3份药 材 , A> 且 A、 取 每份 5 , 0 g 按照 所选 的提取 工 显著性差异因素 ,3> 2 lAl 2 3 B >B >B , C C >C , >A >A , 3 2 l最佳提 艺 : 提取溶 剂为 3 % 乙醇 , 0 提取 3 , 次 分别加 1 ,0 1 2 1 ,0倍量溶剂 , 取条件为 A B C , . , , 即溶剂用量 ( 2 1 ,0 , 1 ,0 1 ) 提取 时 间( , , ) , 提取 时 间 2 1 1 。最 后 得 到 总 黄 酮 含 量 分 别 为 1 . 3 . 2 1 1 h , , h 9 0% 提取 3次为最 佳提取工艺条件。 1.5 ,9 4 % 。通 过验 证实 验 , 8 6 % 1 .8 总黄酮 的提取 效率 都得到 了 4 讨 论 比较好 的结果 。说 明所选 的工艺是稳定而有效 的 , 合继续放大 适 分光光 度 法 测 定 黄 酮 含 量 的 常 用 方 法 有 直 接 测 定 法 、 生产 。 A ( O )法和 AC , lN 11法 为了选择合适的测定方法 , 我们用对 照品 参考 文献 :
不同方法测定芦丁片中芦丁含量的比较
不同方法测定芦丁片中芦丁含量的比较高召军;齐永秀【摘要】目的采用高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法(UV)分别测定芦丁片中芦丁的含量并进行比较.方法 HPLC法采用色谱柱为Venusil MPC18(5μm,4.6×250 mm),流动相为甲醇-0.2%冰醋酸(40:60),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量20μl.紫外分光光度计法以75%的乙醇为溶剂,检测波长为500 nm.结果紫外分光光度法中芦丁浓度在5~100μg/ml时,吸光度和浓度呈良好的线性关系(r=0.9990),平均回收率为99.36%,RSD为1.25%.芦丁浓度在20~100μg/ml时,高相液相色谱法测得线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为100.3%,RSD为1.58%.结论采用F检验对HPLC法和UV法的芦丁含量测定结果进行检查,结果显示两者测得结果没有显著性差异,两种方法均可用于芦丁片中芦丁的含量测定.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2018(039)006【总页数】3页(P644-646)【关键词】芦丁片;紫外分光光度法;高效液相色谱法;含量测定【作者】高召军;齐永秀【作者单位】泰山医学院,山东泰安 271016;泰山医学院,山东泰安 271016【正文语种】中文【中图分类】R917芦丁(Rutin),别名:芸香苷,是一种从植物中提取的黄酮类化合物,其具有很多方面的生理活性,具有抗紫外线、抗血栓形成、维持血管弹性、增强毛细血管抵抗力的能力,并有降低血管脆性和通透性及对癌症的辅助治疗等作用[1-2]。
正因为芦丁有如此好的医学作用,富含芦丁的植物,如槐米、苦荞麦,可作为保健品使用。
此外,芦丁还能作为抗氧化剂和天然食用色素[3]。
目前文献报道芦丁片的含量测定方法有HPLC法和UV法,本研究采用HPLC法和UV法分别测定芦丁片中的芦丁含量,并用F检验的方法对这两种方法进行比较。
高效液相色谱法测定回春如意胶囊中芦丁含量
21 年第 l 卷第2 期 00 9 1
高 效液 相 色 谱法 测 定 回春 如 意胶 囊 中芦 丁 含量
黄余龙 , 瑞荣 , 何 陈 奕, 黄妙婵
( 东省东 莞 市人 民医院 , 东 东 莞 5 3 1 ) 广 广 2 0 8
摘要 : 目的 建 立 测定 回春 如 意胶 囊 中芦 丁含 量 的 高效 液 相 色谱 法。 法 色谱 柱 为 S pl 。 (5 方 ue o 柱 2 0 eC mm× . m 5 m , 4 6 , ) 流动 相 为 甲 醇 一 m
c nr t n a Y=2 . 2 一0. 5 :0 9 9 9 T e l e r r n e f r t s . 0 e t i w s ao 652 6 .r . 9 . h i a a g o u i wa 0 2 9 6—1 0 8 g L T e v r g e o e y a 7 3 % . n n . 4 / . h a e a e r c v r w s 9 . 3
w s m ta o 一1 g c l ae c a i (2: 8 ,h o ae w s 1 0 m / i. eut T e r rs o q ai f p a r n o — a eh n l % l i c t c aa i d 3 6 ) te f w r a . L m n R s l h e es n e u t n o e k ae a d c 高效 液 相 色谱 法操 作 简便 、 果 准确 , 用 于本 品 的含 量 测 定 与 质 量控 制 。 结 可 关 键词 : 高效 液相 色谱 法 ; 回春如 意胶 囊 ; 丁 ; 量 测 定 芦 含 中图 分 类号 : 2 4 1 R 8 . 1 8. ;260 1 文 献标 识 码 : A 文 章 编 号 :0 6— 9 12 1 )1 0 0— 2 10 4 3 (00 2 —03 0
用RP-HPLC法测定芦丁的纯度
2018.No19芦丁又名芸香苷、紫槲皮苷,是槲皮素的3-O-芸香糖苷,属于黄酮类化合物。
芦丁是槐米的主要活性成分,具有广泛的药理作用,开发前景广阔。
芦丁的分析方法很多,已报道的有分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等[1-3]。
本实验采用RP-HPLC法,测定芦丁纯度,结果表明,该方法准确有效。
1 实验材料1)主要仪器。
日本岛津LC-20A高效液相色谱系统,LC-SOLUTION色谱工作站;Hypersil BDS C18色谱柱(大连依利特科学仪器有限公司生产)。
2)主要试剂。
槐米购于重庆市北碚中医院;芦丁对照品(含量﹥98%),购于上海融禾医药科技有限公司(批号:070521);甲醇为色谱级,水为三重蒸馏水,其它试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果1)芦丁的提取与精制。
根据文献[4],从槐米中得芦丁粗品。
取粗芦丁20g,用100mL甲醇加热回流溶解,过滤,滤液放冷,结晶,过滤得湿芦丁。
母液回收甲醇,放冷结晶,过滤得湿芦丁,然后2次湿芦丁冷冻干燥24小时,得精制芦丁。
实验流程图如下:2)色谱条件。
Hypersil BDS C 18,5μm(4.6mm×200mm)色谱柱,以甲醇:水:冰乙酸(40:59:1/v/v)为流动相;检测波长254nm;流速为1.0ml/min,柱温30±1.0℃,结果见图1。
3)线性关系的考察。
准确称取芦丁对照品30mg,用甲醇溶解定容于100ml容量瓶中,再精密吸取0.5ml,1ml,1.5ml,2ml,2.5ml,3ml,4ml分别置10ml容量瓶中,用甲醇定容,用20μl微量进样器进样,记录色谱图,测定峰面积,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,做标准曲线,计算得回归方程为:y=5E+06x+279 241, r=0.999 2,结果表明:芦丁进样量在0.02~0.1mg/ml范围内有良好的线性关系。
4)供试品溶液的制备。
精密称取上述条件下精制芦丁用RP-HPLC法测定芦丁的纯度陈洪源 牛小花(通讯作者)(重庆三峡医药高等专科学校 重庆 404020)50mg,加甲醇溶解定容为50ml,精密取1ml于10ml容量瓶中,用甲醇定容。
芦丁含量的测定原理
芦丁含量的测定原理
芦丁含量的测定原理主要利用化学分析方法进行测定。
常用的测定方法有比色法、高效液相色谱法等。
下面以比色法为例介绍芦丁含量的测定原理:
1. 原理:芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,具有强的紫外吸收能力。
利用芦丁溶液在特定条件下与某种试剂(如硼酸-硝普酰胺溶液)发生反应,形成显色化合物,通过测量产生显色化合物的吸光度,可以间接测定芦丁的含量。
2. 步骤:
a. 准备芦丁溶液:将待测样品中的芦丁溶解在适当溶剂中,得到一定浓度的芦丁溶液。
b. 反应:将芦丁溶液与硼酸-硝普酰胺溶液充分混合,反应生成显色化合物。
c. 测定吸光度:将反应溶液置于紫外可见分光光度计中,在特定波长下测定显色化合物的吸光度。
d. 制备标准曲线:利用已知浓度的芦丁标准溶液,按照相同的操作步骤测定吸光度,并绘制吸光度与芦丁浓度的标准曲线。
e. 计算含量:根据标准曲线,测定待测样品的吸光度,并通过曲线上的对应关系计算出芦丁的含量。
需要注意的是,测定芦丁含量时应注意选择合适的试剂和波长,以及确定合适的反应条件,以提高测定的准确性和精确性。
此外,还需参考相关文献和方法说明
书进行实验操作,并注意消除可能产生的干扰因素。
高效液相色谱法测定仙人掌中芦丁的含量
高效液相色谱法测定仙人掌中芦丁的含量戴小华;于臻;穆合塔尔·卡德尔哈孜;包晓玮;骆秀珍【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2014(042)001【摘要】目的:建立仙人掌中芦丁含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法.方法:以芦丁为对照品,采用色谱柱为ODS C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇:0.4%磷酸(40:60)为流动相,流速为1mL/min,柱温25℃,进样量10μL,检测波长为360nm.结果:芦丁的进样量范围在0.5~5μg内(r=0.999 9),线性关系良好;平均回收率为100.527%(RSD为1.970%).结论:该方法简便、灵敏、可行、稳定,分离效果较好.【总页数】3页(P22-24)【作者】戴小华;于臻;穆合塔尔·卡德尔哈孜;包晓玮;骆秀珍【作者单位】新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学科学技术学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学科学技术学院,新疆,乌鲁木齐,830052【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.双波长高效液相色谱法测定复方芦丁片中维生素C和芦丁的含量 [J], 孙银华2.高效液相色谱法测定仙人掌中仙人掌醇的含量 [J], 张云天;蒋建勤;张思访3.高效液相色谱法测定复方芦丁片中芦丁和维生素C的含量 [J], 张国峰;缪刚4.高效液相色谱法测定曲克芦丁氯化钠注射液中曲克芦丁的含量 [J], 岑志芳;林琼5.高效液相色谱法测定仙人掌中槲皮素的含量 [J], 许伟;孙永惠;王桂秋因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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基 金 昙 项 目 : 二 2 1 一 昱 二 : 新疆维吾尔 自治区重点学科食品科学青年教师科研启动项 目
作者简介: 戴小华( 1 9 7 6 一 ) , 女, 硕士, 讲师, 主要从事药理毒理方向的 研究。
I 删
图 1 芦 丁 标 准 品 HP L C色 谱 图
蒸馏器( 1 8 1 0 一 B型 , 江苏省金坛市医疗仪器厂) ; 超声 波 清洗 器 ( K Q 5 2 0 0型 , 昆山市 超 声仪 器 有 限公 司 ) ; 电
子 天平 ( F A 2 0 0 4 N, 上海精 密科 学仪 器有 限公 司 ) 。
中图分 类号 : R 2 8 4 . 1 文献标 识 码 : A 文章 编号 : 1 0 0 2— 2 3 9 2 ( 2 0 1 4 ) 0 1— 0 0 2 2— 0 2
仙人 掌是 仙人 掌科 仙 人 掌 属 植 物 , 全 世 界大 约 有 1 0 8属 , 近2 0 0 0种 , 主要 分 布于 中美洲 及南 美洲 北部 、
高 效 液相 色 谱 法测 定 仙 人 掌 中芦 丁 的含 量
戴 小 华 , 于臻 , 穆合塔 尔 ・ 卡 德 尔哈 孜 , 包晓 玮 , 骆 秀珍
( 1 . 新 疆农 业大 学食 品科 学与 药学学 院 , 新 疆 乌鲁 木 齐 8 3 0 0 5 2 ; 2 . 新疆农 业 大学科 学技 术学 院 , 新 疆 乌鲁 木齐 8 3 0 0 5 2 ) 摘 要 : 目的 : 建 立仙人 掌 中芦 丁含量 的 高效液 相 色谱 ( H P L C ) 测 定方 法 。方 法 : 以芦 丁为 对 照品 , 采 用 色谱 柱为 O D S C , 色谱 柱 ( 2 5 0 m m× 4 . 6 mm, 5 m) , 以甲醇: 0 . 4 %磷酸( 4 0: 6 0 ) 为流 动相 , 流速为 1 m L / mi n , 柱温 2 5 q C, 进样 量 1 0 L, 检 测波 长为 3 6 0 n m。 结 果 : 芦 丁 的 进 样 量 范 围在 0 . 5~5 I x g内 ( r=
中
・
医
药
学
报
2 0 1 4年 2月第 4 2卷第 1期
Vo 1 . 4 2, No . 1 , F e b . 2 0 1 4
2 2・
A c t a C h i n e s e Me d i c i n e a n d P h a r ma c o l o g y
醇溶 液 ( 天津市 福晨 化学 试剂 厂 , 分 析纯 ) 。
2 方法 、 结果 与分 析
2 . 1 色谱 条件 卜 色谱 柱 为 O D S -S P柱 ( 2 5 0 mm ×4 . 6 m m, 5 I x m) ;
流 动相 : 甲醇 : 0 . 4 %磷 酸 = 4 0: 6 0 ; 流速: l mL / m i n ; 进 样量为 l O l L ; 波长 3 6 0 n m; 柱温 2 5 ℃; 样 品进 样前 经过 0 . 4 5 m滤膜 滤过 。结 果见 图 1— 2 。
0 . 9 9 9 9 ) , 线性 关 系 良好 ; 平均 回收 率为 1 0 0 . 5 2 7 %( R S D为 1 . 9 7 0 %) 。结 论 : 该 方 法 简便 、 灵敏 、 可行 、
稳定. 分 离效 果 较 好 。
关键 词 : 仙人掌; 芦丁 ; 高效液相 ; 含 量
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L C一 2 0 A高效液 相 色谱仪 ( 日本 岛津公 司 ) ; 超声
波药 品处 理 机 ( J B T / C—YC I A 0 0 T / 3 P C D, 济 宁金 百 特 工程 机械 有 限公 司 ) ; 真 空抽 滤 泵 ; 石 英 自动 双 重 纯水
F 2 ' 0 1 1 0 8 0 2 ) 对照 品 , 国药 集 团化 学 试 剂 有 限公 司。 甲
醇( 天 津市 福晨 化学试 剂 厂 , 色谱 纯 ) ; 磷酸( 天津 永 晟
精细 化 工 有 限公 司 , 分析 纯 ) ; 双重 纯水 ( 实验室 自
制) ; 乙醇 溶液 ( 天津 市 福 晨 化 学 试 剂 厂 , 分析纯 ) ; 甲
“ 米邦塔 ” 食 用仙 人 掌 粉 ( 购 于 河 北 中药 材 市 场 ,
经新疆 农业 大 学 药 用 植 物 实 验 室 鉴定 ) ; 芦 斯克群岛和斯里兰卡。本科
大 部分属 种 已经 引种 到 世界 上 的其 他 地 区 , 我 国引种 栽培 6 0余 属 , 约6 0 0种 , 在 仙 人 掌科 植 物 中最 有 经济 和药用 价 值 的是 仙 人 掌 属 J 。仙 人 掌 在 我 国传 统 医
_■ I J
药理作用的发挥有非常重要的作用 。绝大多数植物体 内都 含有 黄酮类 化 合物 , 它在 植物 的生 长 、 发育、 开花 、 结果 以及抗 菌防病等方面起着重要 的作用 J 。本实
验采用 H P L C对 仙 人掌 中黄 酮类化 合物 芦 丁做 了含 量
分析 , 从而 建立 了一 种快 速 、 准确 的测定 方法 。 1 仪器 与试药
学 中早有应用 , 其性苦 、 凉, 具有清热解毒 , 散疼消肿 ,
健 胃止 痛 等 功 效 ; 此外 , 现代 药 理研 究 还 证 明仙 人 掌 具有 抗菌 消炎 、 降血糖 、 抗溃疡、 抗癌、 抗氧化、 抗病 毒 和提 高机 体免疫 力 等功效 。仙人 掌 中主要 的活 性 成分 为 生 物 碱 类 、 黄酮 类、 甾醇 类 、 多 糖 等 J , 其 中 黄酮类 化合 物作 为 其 主要 功 能 性 成分 之 一 , 对 其 诸 多