冷冻精子管理流程
液氮冻精保管使用制度
液氮冻精保管使用制度
为加强液氮冻精的使用和管理,确保冻精保存质量和冷配工作的正常开展,制定本制度:
1、严格液氮和冻精的使用管理,液氮冻精保管人员要根据液氮罐的性能要求,定期添加液氮,确保罐内冻精不能露在液氮面外。
防止因缺少液氮致使罐内温度回升导致精子死亡。
2、要经常检查液氮罐的有效性,保温性能下降或性能损失时要及时停用。
3、从液氮罐内提取冻精时保管员必须戴手套,用镊子夹取,防止发生冻伤。
4、夹取冻精时,不要离开液氮罐颈口太远,动作要迅速,一次停留的时间不要超过8-10秒,一次取不完可以放回罐内停留几秒钟之后再继续提取。
以免温度回升影响存活率。
5、分发冻精计数时,应在液氮中进行。
定时抽检罐存冻精的活力,不合格的精液不下发。
6、贮存液氮和冻精的液氮罐应放置在阴凉、干燥、通风透气条件较好的房间内。
运输液氮和冻精时,严禁用任何物品将罐口封严,以堵塞液氮的自然挥发量而使罐内产生较高压力而发生爆炸事故、危及安全。
不论使用何种交通工具运输液氮和冻精,均不得严闭车窗口(因为罐内液氮随时都处于微量自然挥发状态,如通风透气条件不好,则室内空气中氮气含量增加,氧气含量减少,会造成乘坐人员因缺氧而发生窒息事故)。
7、要做好液氮、冻精和液氮罐的接收、发放和回收的记录,完善交接手续。
8、无论节假日还是上班时间,要随时做好基层配种站与配种员的接待工作,及时为他们罐充液氮和支付冻精。
9、对非本旗用户需要液氮冻精时,要请示站长批准。
(阿鲁科尔沁旗家畜改良工作站,魏景钰)。
种牛冻精保存和使用
精液冷冻保存是将精液进行特殊处理,保存在超低温下,以达到长期保存的目的。
通常采用液氮(—196℃)和干冰(—79℃)保存。
其最大优点是可长期保存,使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。
可充分提高公牛的利用率。
现将冷冻精液保存起来和怎样进行解冻及给母牛输精的有关技术操作介绍如下,供参考。
一、稀释液的配方:12%的蔗糖液75毫升、甘油5毫升、卵黄液20毫升。
二、稀释方法:将经过检查合格的精液(活力0•6以上、精子密度中等)按1:2—5倍稀释液进行稀释,其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于3000—4000万个,解冻后呈直线前进运行的精子不少于1500万个。
三、冷冻:在装有液氮的容器上置一铜纱网,距液氮面2厘米左右,使温度维持在—80℃至—100℃。
将平衡后的精液用滴管按一定量(0•1毫升)滴于铜纱网、滴完最后一滴停3—5分钟后,当精液颗粒颜色变白时,立即浸入液氮,并将全部颗粒取下,收集于贮精瓶或纱网布袋内,并做好标记,然后立即移入液氮罐中贮存。
四、解冻:将预先配制好的2•9%柠檬酸的溶液1毫升,放入干净的小试管中,再置于40℃左右的温水杯中,迅速取颗粒冷冻精液1粒放入试管。
轻轻摇动至化冻时,从水杯中取出试管,接着检查精液活力,不低于0•3即为合格品。
五、重视保精、快速解冻与镜检1、根据液氮罐的性能要求,定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。
2、取精时,尽可能用长镊子,切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处(罐顶10厘米左右)。
3、从液氮中取出细管冻精时,要轻轻甩1—2下,将塑料细管的棉塞端放入35—40℃的温水中,把封口端留在水外1—1•3厘米外,待管内精液融化一半时,立即取出备用。
4、解冻后的精液镜检时,精子的活力不低于0•3方可用于输精,才能确保正常受精。
IVF实验室精液处理
IVF实验室精液操作规程精液样本采集患者取出精液后,直接交给相关实验室人员,不得由第三人转送。
实验室人员应做到:1.询问患者夫妻双方姓名并与精液杯上双方姓名核对。
2.检查精液杯中是否有精液样本,样本是否外泄,颜色是否异常,容器是否破损,容器内是否有明显异物等。
如发生异常,应立即询问患者,并采取相应处理措施(如:重新取精)。
上游法分离优选精子一、精液处理前的准备工作:1.将精液处理液(HTF/G-IVF)分装至5ml试管内,每份精液样本使用2支小管,分别分装1.5 ml(A管)和2.5 ml(B管)培养液, 放入培养箱预热平衡过。
2.耗材:巴斯德吸管,5ml试管,载玻片,盖玻片,橡胶吸头,无菌镊子。
一、正常精液:密度≧20x106 /ml,活力a+b≥30%的精液样本1.将精液置于室温15-20min液化。
2.将混匀的精液取1滴滴于清洁载玻片上于生物显微镜下观察并纪录精液密度、形态、活力等相关数据。
3.精液的收集:在巴斯德吸管和含1.5ml培养液的试管(A管)上填好相应的姓名标签,并在其后的每一步操作之前核对姓名。
吸取1.5ml精液加入试管中与培养液1:1充分混合,如液化不全可多次吹吸至混匀,500g离心10min。
4.精液的洗涤:吸弃上清,用一支新的巴斯德吸管从含2.5ml培养液的试管中(B管)吸取1.5ml液体加入含精液沉淀的管中。
吹吸重悬精液沉淀,400g离心8min。
5.上游:吸弃上清,将试管B中剩余的1ml培养液吸出,沿含精液沉淀的试管A管壁缓慢加入。
两管均贴好标签,将试管A倾斜45°角放于培养箱中静置30min。
6.分离优质精子:上游结束后,用巴斯德吸管将试管A中的上游液小心吸出,转入试管B中混匀,取一滴滴于一载玻片上,压片镜检。
报告上游液中精子密度、活力和形态等相关数据,将分离好的精子置于培养箱中待用。
7.分离结束后关闭超净台,整理并丢弃相应污物。
精液沉淀须保存至移植日,精液杯盖好后置于物品台上,待当日受精结束后丢弃。
精子保存的一般步骤
保存的一般步骤(一)精子的收集禁欲期(通常为 3~ 5d)后,用**方法将精子收集于 10~ 20mL 无菌的聚丙烯样品收集容器中。
要求禁欲期是为了更好地冷冻保存样品。
通常而言,这样的精子与收集前禁欲期较短及不规则的精子相比,冷冻保存后的特性更恒定且更完善。
射出的精液是液态的,但正常情况下立即凝聚成胶状。
凝聚后的精液通常在 30min内液化,此时就可测定其体积。
为了使精子获得最大的冷冻存活力,应在收集精液后 1min内开始对液化精子进行冷冻保存处理。
(二)体积的丈量体积可用较准的加样器或带针头的 5mL 注射器来丈量,有时也可根据收集精液前后采样瓶的重量之差来计算。
取 0.1~ 0.2mL 精液作精液分析(活动精子的百分数及其质量、精子密度等,参见本书有关章节),此外尚需取出一些精液,同时以用来做筛选某种性传染疾病的检测、进行某些检测以筛选导致性病的微生物如奈瑟淋球菌等(详见有关章节)。
(三)甘油化甘油作为冷冻保护剂,可以分步方式直接加入到未经处理的精液之中。
每次加入后混匀,时间间隔为 1min;或间接地作为扩张液或基液的组分,经稀释后逐步加入精液。
而在美国与加拿大,40% 以上的著名精子库,仍单独使用甘油作为冷冻保护剂,而越来越多的新的精子库则使用扩张剂,尤其是含甘油的两性离子缓冲系统。
甘油化的条件不一定涉及温度的特殊条件(除了室温之外)和接触时间(除了加入甘油及混匀所需时间之外)。
(四)包装和存活力观察甘油化的精液可吸入塑料吸管(可用封口剂,加热,或用尼龙塞来密封)或放入玻璃安瓿(用火焰封口),也可放入塑料冷冻管(冷冻小瓶)后用螺口盖拧紧。
每份冷冻精液的体积通常是 0.4~ 0.8mL,这可作为人工授精的一个单位。
当然假如合适,人工授精也可能使用一个单位以上的精液,选择用于冷冻保存精子的容器是很重要的。
这种容器应是易于标记、操纵、储存,同样也应具有很好的生物兼容性以及抗压性能。
高质量的聚丙烯吸管或小瓶看来最符合这些标准,而没有易碎及被洗涤剂污染等玻璃容器所具有的缺点。
精液冷冻储藏技术掌握精液收集处理和储存的方法
精液冷冻储藏技术掌握精液收集处理和储存的方法精液冷冻储藏技术是一项重要的生物技术,它可以帮助人们保存和储存精液。
无论是用于人类繁殖技术还是动物繁殖技术,精液冷冻储藏技术都发挥着重要的作用。
本文将介绍精液收集、处理和储存的方法。
一、精液收集方法精液的收集是精液冷冻储藏的第一步,它要求采用合适的方法来保证收集到高质量的精液样本。
1. 人类精液收集方法:人类精液的收集通常采用自慰法。
收集器宜选用干净的容器,确保不会对精液样本产生污染。
在收集的过程中,应保持良好的心态和放松的状态。
2. 动物精液收集方法:动物的精液收集可采用人工授精法、人工阴道法等多种方法。
具体方法需要根据不同动物的特点来确定。
二、精液处理方法精液的处理是为了去除其中的杂质,提高精液的质量。
1. 离心法:通过离心分离法,可以将精液中的不碳水化合物、细胞和其他杂质去除,提高精液的纯度。
离心的速度和时间需要根据精液的浓度和特性来确定。
2. 过滤法:通过过滤器过滤精液,使其中的颗粒和污染物被过滤掉,确保精液的干净和纯度。
三、精液储存方法精液储存是精液冷冻储藏技术的最后一步,它是为了确保精液的长期保存和保存质量。
1. 液氮储存:液氮储存是当前最常用的精液储存方法之一。
将处理好的精液样本放入液氮罐中,保持温度在零下196摄氏度,确保精液的长期保存。
2. 冷冻储存:冷冻储存是另一种常用的精液储存方法。
将处理好的精液样本放入冷冻管中,通过快速冷冻和在低温下保存,确保精液的保存质量。
总结:精液冷冻储藏技术是一项重要的生物技术,它可以帮助人们保存和储存精液,无论是用于人类繁殖技术还是动物繁殖技术。
在进行精液冷冻储藏之前,需要准确掌握精液收集、处理和储存的方法。
精液冷冻储藏技术的正确应用将对人类和动物的繁殖事业产生积极的影响。
实验十五精液的冷冻保存
实验十五精液的冷冻保存一.实验特点实验类型:综合型实验实验类别:专业基础课计划学时:2学时每组人数:3~4人二、实验目的要求精子具有受温度变化直接影响本身活动力和代谢能力力的生物学特性。
利用这一特性,将精液特殊处理后,保存在超低温下,精子代谢活动完全受到抑制,停止能量消耗,处于生命静止状态,长期保存下来。
一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
要求同学们了解精液冷冻保存的技术操作过程和精液冷冻保存原理,初步学会冷冻保存方法。
三.实验原理冰晶化是水在降温过程中的一定温度下,水分子重新按几何图形排列形成冰晶。
冰晶可造成精细胞(精子)内外的溶质浓度和渗透压增高,引起细胞内脱水、原生质变干、酸碱失去平衡、细胞膜和顶体以及整个组织和结构破坏等致死性伤害,最后导致精子发生不可逆的变化而死亡。
一般精液内含85%~95%的水分,精子内也含有及少量的水分,这些水分在降温过程中在-0.6~-60℃温度区内缓慢降温能形成冰晶。
降温速率越慢,所形成的冰晶越大,其中特别以-15~-25℃时冰晶形成最多。
在冷冻精液过程中只有避开这个有害温度区,才能得以长期保存。
快速升降温度的办法,难以达到完全玻璃化冻结条件。
为此,在制作冷冻精液的稀释液内,要加入一定量的甘油等抗冻害物质。
甘油具有极强的亲水性,可限制水分子形成冰晶而处于过冷状态,降低水形成冰晶的温度,即缩小精子的有害温度的上限。
此外甘油容易渗透精子内,可降低渗透压改变的不良影响及营养作用等,增强精子的抗冻害能力和无冻害生存环境。
精液在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶,精子能否生存的关键在于冰晶的大小,冰晶越大对精液伤害越大,反之冰晶越小,伤害越小甚至无损伤。
因此,只要避免大冰晶形成,并使精子稳定在微晶的状态下,一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。
四.实验材料和仪器精液、2.9%的柠檬酸钠溶液、50~100ml烧杯、滴管、10 ml试管、低温温度计、20~80目纱网、漏勺、灭菌纱布袋、液氮罐、液氮、载玻片、盖玻片、显微镜、保温箱。
冻精管理制度
冻精管理制度第一章总则为规范和加强冻精管理工作,确保冻精质量和安全,提高冻精管理水平,特制定本管理制度。
第二章冻精采集1. 冻精采集要在基层兽医技术部门进行,必须认真履行标本采集登记手续,确认标本信息后开始采集。
2. 采集过程中,避免污染标本以及外来微生物的侵入,确保采集的冻精样本干净无杂质。
第三章冻精保存1. 冻精保存应在冷冻设备中进行,保存温度应控制在-196℃,冻存容器要定期检查,确保冻精样本不会受到污染和温度变化。
2. 冻精保存地点要保持清洁卫生,定期进行消毒清洁。
第四章冻精质量检验1. 每批冻精都要进行质量检验,包括活力、浓度和纯度等指标,确保冻精质量符合要求。
2. 对于不合格的冻精要及时淘汰处理,避免使用在繁育过程中。
第五章冻精使用1. 冻精使用必须在兽医技术部门指导下进行,严格按照操作规程进行操作,避免对冻精造成污染和损坏。
2. 冻精使用前要进行解冻处理,解冻温度要逐渐提高,确保冻精质量不会受到损害。
第六章冻精安全管理1. 冻精安全管理是冻精管理工作的重要内容,要做到冻存容器安全密封,避免冻精泄漏和外来微生物侵入。
2. 冻精管理人员要接受专业培训和指导,确保对冻精的正确操作和处理,避免发生意外。
第七章冻精管理记录1. 冻精管理单位要建立完整的冻精管理记录系统,包括采集、保存、使用等环节的记录,方便追溯和统计。
2. 冻精管理记录要及时归档,保留至少5年以上。
第八章冻精管理责任1. 冻精管理单位的主管领导要对冻精管理工作承担总责,确保冻精管理制度的贯彻执行。
2. 各部门负责人要严格履行冻精管理职责,保证冻精管理工作的透明和规范。
第九章冻精管理监督1. 冻精管理单位要定期进行内部审查和外部检查,确保冻精管理工作的规范进行,并且进行必要的整改。
2. 监督部门要对冻精管理进行定期监督检查,对有违规行为的单位和个人进行处理和通报。
第十章冻精管理违规处罚1. 对于没有按照冻精管理制度执行的单位和个人,要依据相关法律法规对其进行相应的处罚和纠正。
精子保存的一般步骤
保存的一般步骤(一)精子的收集禁欲期(通常为 3~ 5d)后,用**方法将精子收集于 10~ 20mL 无菌的聚丙烯样品收集容器中。
要求禁欲期是为了更好地冷冻保存样品。
通常而言,这样的精子与收集前禁欲期较短及不规则的精子相比,冷冻保存后的特性更恒定且更完善。
射出的精液是液态的,但正常情况下立即凝聚成胶状。
凝聚后的精液通常在 30min内液化,此时就可测定其体积。
为了使精子获得最大的冷冻存活力,应在收集精液后 1min内开始对液化精子进行冷冻保存处理。
(二)体积的丈量体积可用较准的加样器或带针头的 5mL 注射器来丈量,有时也可根据收集精液前后采样瓶的重量之差来计算。
取 0.1~ 0.2mL 精液作精液分析(活动精子的百分数及其质量、精子密度等,参见本书有关章节),此外尚需取出一些精液,同时以用来做筛选某种性传染疾病的检测、进行某些检测以筛选导致性病的微生物如奈瑟淋球菌等(详见有关章节)。
(三)甘油化甘油作为冷冻保护剂,可以分步方式直接加入到未经处理的精液之中。
每次加入后混匀,时间间隔为 1min;或间接地作为扩张液或基液的组分,经稀释后逐步加入精液。
而在美国与加拿大,40% 以上的著名精子库,仍单独使用甘油作为冷冻保护剂,而越来越多的新的精子库则使用扩张剂,尤其是含甘油的两性离子缓冲系统。
甘油化的条件不一定涉及温度的特殊条件(除了室温之外)和接触时间(除了加入甘油及混匀所需时间之外)。
(四)包装和存活力观察甘油化的精液可吸入塑料吸管(可用封口剂,加热,或用尼龙塞来密封)或放入玻璃安瓿(用火焰封口),也可放入塑料冷冻管(冷冻小瓶)后用螺口盖拧紧。
每份冷冻精液的体积通常是 0.4~ 0.8mL,这可作为人工授精的一个单位。
当然假如合适,人工授精也可能使用一个单位以上的精液,选择用于冷冻保存精子的容器是很重要的。
这种容器应是易于标记、操纵、储存,同样也应具有很好的生物兼容性以及抗压性能。
高质量的聚丙烯吸管或小瓶看来最符合这些标准,而没有易碎及被洗涤剂污染等玻璃容器所具有的缺点。
驴的细管冻精配种操作技术
驴的细管冻精配种操作技术细管冻精是用直径小、管壁薄的无毒塑料管盛装精液后冷冻而成。
与颗粒冻精比较,具有冷冻时受冻均匀、解冻时受热一致、解冻方便、输精时不易污染、避免精液和液氮的直接接触、精子活力好,受胎率高的优点。
特制输精枪输精,每次5只,每只0.5ml。
一、适用范围:驴的人工授精改良站(点)。
二、输精枪的消毒:⑴先用"洗涤剂"洗涤,然后用清水冲洗数次,再用38-42℃的蒸馏水冲洗。
⑵塑料制品用75%的酒精棉球擦试消毒,金属制品用煮沸消毒或高压灭菌消毒。
⑶消毒完毕后,用消毒纱布包好,放在无菌消毒槽中备用。
三、细管冻精的保存及使用1、细管冻精装在指形塑料管内,指形管装在贮精罐提筒内,贮精罐提筒务必浸在液氮中。
2、取冻精时,根据标牌、标号用镊子从指形管中夹出所需的驴冻精,不得将盛放冻精的提筒或指形管提到液氮罐外面,只能提到液氮罐颈下的10厘米处,若经6秒钟仍不能取出冻精时,应迅速将提筒放入液氮中浸泡,稍后再取。
四、解冻与装枪1、取出细管冻精迅速放入40±1℃水中直接浸泡,或用镊子夹着轻轻摆动,经20秒后提出,用无菌纱布擦干细管表面,用消毒过的专用剪刀剪去封口端。
2、左右食指拇指紧捏住一次性封密塞的边缘,右手拿细管按顺序依次装进塞子小孔内,装好后依次在确认下是否紧紧顶到塞子顶端。
装好后任意选两支一左一右分开,按顺序将5支细管一字型排列,输精枪同样将5个推杆分开一字型排列,左手拿细管,右手拿输精枪,依次按顺序把细管有棉塞的一端放入枪膛内,用手将细管推入输精枪膛。
3、把不锈钢套管或塑料套管套入输精枪枪管上,用塑料套管固定圈将塑料套管固定在输精枪把手上。
五、输精:⑴手掌护住输精枪顶端送入母驴阴道,将输精枪顶端送入子宫颈口,深部输精。
慢插、轻注、缓出。
⑵每头发情母驴每次输精应用5支细管,每一情期可在第一次输精后12小时再输精1次,假若判断正确,每一情期可输精1次。
⑶若连续输精,每次输精都应更换消毒过的塑料套管。
准备使用冷冻精子的流程
准备使用冷冻精子的流程概述冷冻精子是一种应用于辅助生殖技术的重要手段。
它可以帮助那些有生育困难的夫妻实现梦寐以求的亲子梦。
本文将介绍使用冷冻精子的流程,并提供一些相关的注意事项。
流程步骤1.确认合适的冷冻精子供应商•选择一家正规的生殖医院或肿瘤医院来购买冷冻精子。
确保医院拥有合法的资质和良好的声誉。
•了解该供应商的冷冻精子存储时间、治疗成功率等关键信息。
2.选择适合自己的冷冻精子样本•与专业医生进行沟通,了解身体状况、治疗方案和需要冷冻精子的具体原因。
•根据医生的建议,选择适合自己的冷冻精子样本。
通常有一般精子、特殊染色体选性精子、胚胎精子等多种选择。
3.进行精子取样•在医生指导下,完成精子取样过程。
这通常包括精液样本的采集,可以通过自慰或利用特定的器械采集。
•术前要进行适当的准备,例如避免过度劳累、戒绝房事等。
4.精子分类和处理•样本采集完毕后,专业技术人员会对样本进行分类和处理。
这包括将精液分离成精子与其他物质,并检测精子的数量和质量。
•特殊的选性技术可以帮助筛选出具有特定特征的精子,提高受孕的成功率。
5.用特定冷冻液冷冻精子•经过上述处理过程后,精子会被加入特定的冷冻液中。
这种冷冻液可以保护精子在极低温下的存活率和活力。
•专业技术人员会根据标准操作将精子置于液氮罐中,进行冷冻保存。
这保证了精子能够在较长时间内保持活力。
6.冷冻精子的存储和管理•冷冻精子标本会被存储在专门的冷冻精子库中,确保其不受细菌、病毒或其他可能影响其质量的因素的污染。
•精子样本会被做好记录和编码,确保精确的追踪和管理。
医生可以通过查看相关信息来选择合适的样本。
7.使用冷冻精子•当夫妻双方准备好进行试管婴儿、人工授精等辅助生殖技术时,可以使用冷冻精子。
•专业医生会将所需的冷冻精子样本从库存中取出,解冻并进行相关的操作,最终完成受精过程。
注意事项•在选择冷冻精子供应商时,要确保医院具有合法资质和良好声誉。
•在精子取样前,要按医生建议进行适当准备和注意休息。
冷冻精液配种及提高母牛冷配受胎率的注意事项
冷冻精液配种及提高母牛冷配受胎率的注意事项配种可分为自然交配和人工配种。
自然本交要严格控制公牛配种次数,每天最好1次。
人工配种,主要是指冻精配种。
一、冷冻精液的解冻及注意事项1.颗粒精液解冻取解冻液(2.9%的柠檬酸三钠)1~1.5毫升,放在消毒过的小试管内,将试管放在38~40℃的水浴容器内预热,然后投入1粒冻精颗粒,不停摇动,在精液溶化三分之二时,即可从水浴容器中取出使用。
需解2粒冻精时,要用2个试管分别解冻。
如需运输,须严加包装,且在10℃以下进行。
2.细管精液解冻将细管从液氮罐中取出,使带棉塞一端朝下,立即投入温水中(38~40℃)解冻使用。
精液解冻后应在两小时内用完,最好解冻后马上使用。
二、提高母牛冷配受胎率注意事项1.发情配种时间母牛排卵在发情结束后,从发情到排卵,一般30个小时左右,大多数母牛排卵发生在夜间,卵子在输卵管内可以存活12~24小时,有受精能力的时间约为6~12小时,活力强的精子进入母牛生殖道后,仅需8~15分钟就到达受精部位,而大部分精子要在5~6小时才能到达。
精子在母牛生殖道内保持受精能力一般为30小时(冻精时间缩短)。
因此,适宜的配种时间应在母牛发情末期,即卵泡发育到第3期(卵泡成熟时)输精效果最好。
2.输精次数只要掌握了母牛发情规律,1个情期内只输1次精即可,如果对输精时间的把握不大,也可采用1个情期内输两次精(间隔6~8小时)。
试验证明,在母牛1个情期内一次输精,不但节省人力和物力的消耗,而且也减少了对母牛的机械性刺激,减少污染机会。
3.输精部位母牛的输精部位要求在子宫体,过浅,精液容易流失;过深,容易损伤子宫粘膜,反而降低了受胎率。
4.精液品质输精前要对精液进行活力检查,精子活力达不到0.3、有效期精子达不到标准的(1份精液有效精子数不低于1000万个),一律不准使用。
5.无菌操作①精液颗粒制作时,凡是盛装精液的容器以及冷冻精液时接触精液的器具均要进行严格消毒,低温达不到灭菌的目的,因为一些细菌和精子一样可以耐受低温。
冷冻精流程
冷冻精流程全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:冷冻精是一种用于保存和传输生物样本的技术,其精密的制作过程可以确保样本的完整性和稳定性。
在现代科学研究和医学诊断中,冷冻精扮演着重要的角色,因此其制作过程需要经过严格的控制和操作。
冷冻精的制作过程一般包括以下几个步骤:第一步:样品收集。
在制作冷冻精之前,首先需要收集样品。
样品可以是血液、细胞、组织等生物样本。
在收集样品时需要注意保持样品的完整性和干净度,避免外部污染和损伤。
第二步:样品处理。
收集到样品后,需要对样品进行处理。
处理的方法包括离心、过滤、稀释等,以确保样品中的冰核和杂质被清除,从而使冷冻精的质量更加纯净。
第三步:添加保护剂。
在制作冷冻精的过程中,通常会添加一定的保护剂,以防止样品的冻结过程中发生病变。
保护剂的种类可以是冷冻保护蛋白、冷冻保护剂等。
第四步:分装和冻存。
处理完样品并添加保护剂后,需要将样品分装到适当的冷冻管中,并进行冻存。
冷冻的过程需要严格控制温度和速度,以确保样品冷冻过程中的均匀性和充分性。
第五步:冻结保存。
冻存完样品后,需要将冷冻精保存在适当的温度下,以确保样品长期的保存和传输。
一般来说,冷冻精的保存温度可以是-80°C或更低,可以避免样品的降解和失活。
冷冻精的制作过程需要严格的操作和控制,任何一步的偏差都可能导致样品的失活和变性。
在制作冷冻精时需要遵循标准操作程序,使用专业的设备和试剂,并在实验中注意操作细节和质量控制。
冷冻精的制作过程是一个复杂而精密的过程,需要科学家们的精心操作和管理。
通过制作优质的冷冻精,可以保证生物样本的完整性和稳定性,为科学研究和医学诊断提供可靠的基础。
希望上述介绍对大家有所帮助。
第二篇示例:冷冻精是一种生物学和医学领域广泛应用的技术,用来保存或者长期储存精子的方法。
在不同的目的下,冷冻精的流程也会有所不同。
下面我们来简单介绍一下冷冻精的基本流程。
收集精子。
一般来说,精子的收集是通过手动帮助患者进行取精或者通过自然射精的方式。
鸡精液冷冻技术操作规程
鸡精液冷冻技术规程1范围本文件规定了鸡精液冷冻的器具清洗与消毒,精液采集、稀释(I液)与质量检测,冷冻保护液(11液)添加与细管精液制作,细管冷冻,细管解冻及活力检测,离心去甘油(11I液、IV液),输精和冷冻精液受精率检测,细管冷冻精液的保存等内容。
本文件适用于长期超低温冷冻保存的鸡精液细管精液制作。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
牛冷冻精液包装、标签、储存和运输GB/T30396牛冷冻精液生产技术规程NY/T1234家禽精液品质检测方法NY/T40473术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
4器具清洗与消毒重复使用的器皿,使用后立即用清水浸泡,其它操作按NY/T1234的规定执行。
5精液采集、稀释(I液)与质量检测5.1提前2h将用到的稀释液,从冷冻室置入冷藏室。
5.2采用背腹部联合按摩双人或单人采精法,手握预热含有0.2mL左右第一步稀释液(简称“液”)的5mL离心管采集单只公鸡精液,轻轻混匀后,置于2°C~5°C冷藏箱中(可以用冰水混合物)。
依次采集完所有公鸡精液后,立即运输到实验室。
5.3将稀释后精液转移至2C~5°C冷藏箱,从第一步稀释后冷藏计时约30min。
同时取10μL精液在32℃视屏恒温显微镜下观察,活力≥0∙7(评定依据见附录C),密度≥1.5χl0t7mL用于精液冷冻,眼观密度评定见附录C。
一般稀释比例为原精与稀释液1:1,如果密度太高则再利用等温I液进行适当稀释。
5.4如果远距离运输原精制作冻精,用I液等比稀释后存放于2C~5C冷藏箱,应在4h内进行冻精制作。
6冷冻保护液(11液)添加与细管精液制作6.1将已预冷或现配的第二步稀释液即冷冻保护液(简称“II”液),按精液与稀释液比例1:1(含甘油浓度为12%)或者1:0.5(含甘油浓度为18%),加入到第一次稀释平衡后的精液中,甘油终浓度为6%,并在2C~5C条件下平衡IOmin。
人工授精使用冷冻精子的流程
人工授精使用冷冻精子的流程介绍人工授精是一种辅助生殖技术,通过将精子直接注入女性子宫内,提高受孕机会。
其中,冷冻精子的使用成为越来越普遍的选择,它可以储存和运输精子,并在需要时使用。
本文将介绍人工授精使用冷冻精子的流程。
流程步骤以下是人工授精使用冷冻精子的典型流程步骤:1.打开医生的建议和指导。
–在决定使用人工授精及冷冻精子前,需要咨询专业医生的意见。
医生将会对你的身体条件和受孕问题进行评估,并给出建议和指导。
2.基础检查–在进行人工授精之前,医生会进行一系列基础检查,包括检查女性的卵巢功能和排卵情况,男性的精液质量以及子宫内膜的健康状况等。
这些检查是为了确定是否适合使用人工授精和冷冻精子。
3.精子采集和处理–集中采集精子:男性必须提供一份精液样本,可以在医院的指定地点采集。
–精子处理:采集的精液样本经过特殊处理,用以分离出高质量的精子,然后进行冷冻保存。
4.女性排卵监测–在人工授精前,女性需要进行排卵监测,通常是通过超声波和血液测试等方法来确定最佳受孕时机。
5.冷冻精子解冻–在选择合适的受孕时间,医生将解冻保存的精子样本。
6.注射精子–利用细管或注射器,医生将解冻的精子注入女性子宫内,通常是通过宫颈或直接注入子宫内膜。
这个过程通常是无痛的,只需要几分钟即可完成。
7.观察和等待–女性需要在医院或家中休息一段时间,以确保精子有足够的时间和机会受精卵子。
医生可能会建议一些特定的行为,例如避免剧烈运动和性活动。
8.妊娠检测–大约在两周后,女性可以进行妊娠测试,以确认是否成功受孕。
注意事项人工授精使用冷冻精子的流程中有一些注意事项需要注意:•寻求专业医生的指导和建议是至关重要的。
•需要充分了解人工授精和冷冻精子的优势和限制。
•完全按照医生的建议和诊疗计划进行操作。
•在使用冷冻精子前,需要对精子进行评估和处理,以确保精子质量和受精能力。
结论人工授精使用冷冻精子的流程为那些面临受孕困难的夫妇提供了一种选择。
奶牛细管式冷冻精液的保存、输精操作及影响效果的因素
Breeding Consultant养殖顾问1奶牛细管式冷冻精液保管要制作储存明细表以准确掌握提桶内的细管式冷冻精液位置。
同时记录库存细管式冷冻精液数量,每次购入和使用时要严格核对。
操作时,每次提桶的取出、放入次数限定在最少。
不要把存有细管式冷冻精液的提桶提到距液氮罐口部太近处,要距口部5cm以下,不能再口部长时间滞留。
每一个提桶中尽量保存一头种公牛的细管式冷冻精液。
若保存2~3头种公牛精液时,为防止混杂,最好制作隔断,以便识别。
定期测量液氮罐中的液氮损耗量,如损耗严重或更新液氮罐及将液氮移入共池罐中时,最好把损耗较为严重的液氮罐作为添加液氮的运输传导工具,不要作为储存罐使用。
细管式冷冻精液在<-130℃时质量不会受影响,但温度一旦上升到>-130℃,再放回到液氮里保管时,精子活力就会下降。
液氮罐口部温度达>-130℃,细管式冷冻精液在此部位停留的时间过长会降低精液质量,细管式冷冻精液一旦暴露在空气中,不到10秒钟,细管式冷冻精液就会达到-130℃。
因此操作最好在5秒内完成。
特别是环境温度高时,必须在3秒内完成,如5秒以内不能完成,最好将细管式冷冻精液放回液氮中,然后再拿出来继续操作。
2奶牛细管式冷冻精液输精操作步骤奶牛实施人工授精时,应首先做好授精器具的灭菌消毒工作,然后按要求进行。
第1步:检查。
细管从液氮罐中取出之后,首先要检查管体是否完好。
以便确定解冻方法。
同时要检查细管上的种公牛号是否清晰,以便在配种卡片上填写与配公牛号。
第2步:解冻。
在杯子中准备好37~38℃的温水。
迅速确认所要使用的细管式冷冻精液,取出后立即放入温水杯中(注意要将细清式冷冻精液棉栓部朝下)。
过20~40秒钟待细管式冷冻精液融解后,从温水中取出,用洁净的纱布等擦掉水珠。
再用75%酒精棉消毒。
如果管体有裂隙或封口不严,可采取手搓法解冻。
第3步:剪口。
剪口要正,断面要齐,剪口偏斜容易导致精液倒流。
第4步:精子活力检查。